無(wú)蠟質(zhì)芥藍(lán)突變型葉表面蠟質(zhì)超微結(jié)構(gòu)觀察

張德雙趙學(xué)志孫 雷，2張鳳蘭何洪巨汪維紅蘇同兵盧桂香

于拴倉(cāng)1余陽(yáng)俊1趙岫云1

（1北京市農(nóng)林科學(xué)院蔬菜研究中心，北京 100097；2煙臺(tái)大學(xué)，山東煙臺(tái) 264005）

無(wú)蠟質(zhì)芥藍(lán)突變型葉表面蠟質(zhì)超微結(jié)構(gòu)觀察

張德雙1趙學(xué)志1孫 雷1，2張鳳蘭1何洪巨1汪維紅1蘇同兵1盧桂香1

于拴倉(cāng)1余陽(yáng)俊1趙岫云1

（1北京市農(nóng)林科學(xué)院蔬菜研究中心，北京 100097；2煙臺(tái)大學(xué)，山東煙臺(tái) 264005）

以亮葉無(wú)蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)野生型為試材，對(duì)芥藍(lán)葉片發(fā)育過(guò)程中最外層的表面蠟質(zhì)進(jìn)行系統(tǒng)地觀察，并對(duì)無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)、多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)和普通綠色芥藍(lán)（CK）的干物質(zhì)量、VC、可溶性糖、粗纖維、蛋白質(zhì)、花青苷等主要營(yíng)養(yǎng)成分含量進(jìn)行測(cè)定分析。結(jié)果表明：在葉片發(fā)育過(guò)程中，多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)的葉面蠟質(zhì)明顯多于無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)；野生型芥藍(lán)和紫.中花芥藍(lán)葉片背面的蠟質(zhì)均明顯多于葉片腹面；野生型芥藍(lán)葉片背面的蠟質(zhì)退化速度明顯慢于葉片腹面。無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)的VC含量高于野生型芥藍(lán)，而粗纖維（DW）含量低于野生型芥藍(lán)，說(shuō)明紫.中花芥藍(lán)有利于改良現(xiàn)有芥藍(lán)的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，有望育成高VC含量、高花青苷含量、以生食為主的芥藍(lán)品種。芥藍(lán)葉片的無(wú)蠟質(zhì)性狀對(duì)多蠟質(zhì)表現(xiàn)為隱性遺傳，紫色對(duì)綠色表現(xiàn)為顯性遺傳。

芥藍(lán)；無(wú)蠟質(zhì)突變體；超微結(jié)構(gòu)；花青苷

芥藍(lán)（Brassica alboglabra L. H. Bailey）是十字花科蕓薹屬甘藍(lán)種一年生或兩年生草本植物，原產(chǎn)于我國(guó)華南地區(qū)，為我國(guó)著名的特產(chǎn)蔬菜之一。芥藍(lán)栽培歷史悠久，不僅深受?chē)?guó)內(nèi)消費(fèi)者喜愛(ài)，還出口到日本及東南亞地區(qū)。芥藍(lán)多以幼嫩、肉質(zhì)的花薹和嫩葉為主要食用器官，肉質(zhì)脆嫩清甜，營(yíng)養(yǎng)豐富，富含硫代葡萄糖苷（Glucosinolate），尤其是4-甲基硫氧丁基硫苷（Zhang et al.，1994）。因此，芥藍(lán)在營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)、蘿卜硫素提取及食品加工業(yè)等領(lǐng)域有著重要的研究?jī)r(jià)值。

植物葉片表皮細(xì)胞外覆蓋表皮，表皮由3層明顯的結(jié)構(gòu)組成，最內(nèi)層為表皮層（Cuticular layer，CL），由角質(zhì)、角質(zhì)層內(nèi)蠟質(zhì)和多糖組成；中間層為角質(zhì)層本體（Cuticle proper，CP），由表面蠟質(zhì)、角質(zhì)層內(nèi)蠟質(zhì)和角質(zhì)組成；最外層為平滑、結(jié)晶的表面蠟質(zhì)（Epicuticular waxes，EW），具有很高的疏水性（圖1）。植物葉表面的蠟質(zhì)主要為特長(zhǎng)鏈飽和脂肪酸的衍生物，在表皮細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成，具有防止非氣孔的水分散失、病蟲(chóng)害的侵入和太陽(yáng)光輻射等生物學(xué)功能。

圖1 植物葉表皮橫斷面示意圖（Bernard & Joubès，2013）

自然界中已發(fā)現(xiàn)的植物葉表無(wú)蠟質(zhì)突變體較多，研究者普遍關(guān)注控制蠟質(zhì)合成的相關(guān)基因，但有關(guān)無(wú)蠟質(zhì)突變體葉表面蠟質(zhì)超顯微結(jié)構(gòu)的報(bào)道較少，尤其研究無(wú)蠟質(zhì)芥藍(lán)突變體的報(bào)道更少。普通芥藍(lán)的葉表面均覆有不同程度的蠟質(zhì)，當(dāng)用手涂抹葉片表面后，蠟質(zhì)便可部分減少。無(wú)蠟質(zhì)亮葉型芥藍(lán)最早由初蓮香等（1998）報(bào)道，來(lái)源于無(wú)蠟質(zhì)亮葉結(jié)球甘藍(lán)，采用香港白花普通芥藍(lán)為母本與無(wú)蠟質(zhì)亮葉結(jié)球甘藍(lán)父本雜交，F(xiàn)1與香港白花回交、再自交，經(jīng)連續(xù)轉(zhuǎn)育5代，并通過(guò)反復(fù)選擇而育成。無(wú)蠟質(zhì)亮葉型芥藍(lán)豐富了芥藍(lán)種質(zhì)資源，在增加芥藍(lán)產(chǎn)量等方面具有十分重要的意義。同時(shí)，無(wú)蠟質(zhì)亮葉結(jié)球甘藍(lán)突變體也具有一定的抗蟲(chóng)性（Lin et al.，1984；Stoner，1990）。

對(duì)蠟質(zhì)突變體的葉表面超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究，有助于了解突變型蠟質(zhì)的發(fā)生機(jī)制以及蠟質(zhì)的發(fā)育過(guò)程。本試驗(yàn)以亮葉無(wú)蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)野生型為試驗(yàn)材料，對(duì)芥藍(lán)葉片最外層表面蠟質(zhì)的發(fā)育過(guò)程及變化情況進(jìn)行系統(tǒng)地觀察和比較，以期在超顯微水平上解析無(wú)蠟粉芥藍(lán)突變體的葉表面結(jié)構(gòu)；同時(shí)，測(cè)定了無(wú)蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)突變型紫.中花芥藍(lán)、多蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)野生型和普通綠色芥藍(lán)葉片的水分、干物質(zhì)量、VC、可滴定酸、可溶性糖、粗纖維、蛋白質(zhì)、花青苷等主要營(yíng)養(yǎng)成分的含量，旨在為亮葉無(wú)蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)在芥藍(lán)育種中的應(yīng)用及盡快選育出亮葉無(wú)蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)一代雜種提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

亮葉無(wú)蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)突變型紫.中花芥藍(lán)來(lái)源于多蠟質(zhì)臺(tái)選中花芥藍(lán)×紫甘藍(lán)的F1與臺(tái)選中花芥藍(lán)（為父本）連續(xù)回交5代（每代均進(jìn)行綜合性狀篩選）的回交群體中發(fā)現(xiàn)的突變型個(gè)體，自交后性狀穩(wěn)定遺傳，主要表現(xiàn)為：植株葉表面光亮，有光澤，無(wú)蠟質(zhì)覆蓋，葉片薄而質(zhì)地脆嫩，葉片、葉脈、菜薹均為紫色，且營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)優(yōu)良，又具有一定的抗性；多蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)野生型是臺(tái)選中花芥藍(lán)×紫甘藍(lán)的F1與臺(tái)選中花芥藍(lán)（為父本）連續(xù)回交5代（每代均進(jìn)行綜合性狀篩選）獲得的自交系，主要表現(xiàn)為：葉片多蠟粉覆蓋，灰綠色，葉脈、菜薹均為紫色；普通綠色芥藍(lán)（CK）為臺(tái)選中花芥藍(lán)人工自交授粉5代的自交系。上述材料均來(lái)源于北京市農(nóng)林科學(xué)院蔬菜研究中心大白菜課題組。

2014年1月5日，在日光溫室中播種芥藍(lán)材料，3月15日定植到日光溫室，開(kāi)花后采用人工授粉方式獲得自交種子。同時(shí)，以紫.中花芥藍(lán)為母本，以普通多蠟質(zhì)綠色芥藍(lán)為父本進(jìn)行雜交，獲得F1種子。8月20日，在大棚中繼續(xù)播種芥藍(lán)材料，9月10日定植到四季青農(nóng)場(chǎng)（露地），采用噴灌澆水，保持土壤濕潤(rùn)，9月30日追1次復(fù)合肥；10月20日調(diào)查紫.中花芥藍(lán)突變型和野生型芥藍(lán)、普通綠色芥藍(lán)的葉片和菜薹顏色、蠟質(zhì)有無(wú)等性狀，初步研究芥藍(lán)紫色和蠟質(zhì)的遺傳規(guī)律。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 超微結(jié)構(gòu)觀察 2014年4月，在日光溫室中播種無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)，待芥藍(lán)齊口期，分別選取無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)自交系4個(gè)發(fā)育階段的葉片，即新葉、初生葉、次生葉和老葉。分別在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所和北京生物技術(shù)研究中心電鏡室進(jìn)行觀測(cè)，掃描電鏡樣品制作方法參考牟香麗等（2013）的方法并加以改進(jìn)：用流水多次沖洗芥藍(lán)新鮮葉片，再用ddH2O水清洗，以保證葉片表面干凈；避開(kāi)葉脈部分，用剪刀將葉片切成長(zhǎng)方形小塊，并用鑷子擺放在覆有濾紙的干燥器中（濾紙上記有編號(hào)），將貯有四氧化鋨的小瓶放在干燥器內(nèi)，密閉熏蒸樣品72 h，晾干；最后，采用E-1010（HITACHI）型離子濺射鍍膜儀鍍金膜，利用S-3400N和S-450（HITACHI）型掃描電子顯微鏡對(duì)樣品葉片腹面、背面的蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。

為了加強(qiáng)四氧化鋨熏蒸效果，四氧化鋨需要裝在開(kāi)口的小容器內(nèi)，并同樣品一起放于密閉的干燥器中（圖2）；樣品應(yīng)該盡量小，這樣不僅保證了樣品熏蒸和干燥充分，而且樣品也不容易卷曲，不會(huì)影響觀測(cè)結(jié)果。

圖2 四氧化鋨熏蒸樣品

1.2.2 營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)測(cè)定 2013年10月，選取在露地種植的無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)、多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)和普通綠色芥藍(lán)（CK），每份材料3株，混合取樣，送交農(nóng)業(yè)部蔬菜種子質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心，測(cè)定水分、干物質(zhì)量、VC、可滴定酸、可溶性糖、粗纖維、蛋白質(zhì)和花青苷等營(yíng)養(yǎng)成分含量，樣品的全部成分測(cè)定結(jié)果于2014年完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 無(wú)蠟質(zhì)突變型與多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)植物學(xué)性狀比較

無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)自交系的植株性狀見(jiàn)圖3。紫.中花芥藍(lán)植株葉表面光亮，有光澤，無(wú)蠟質(zhì)，葉片、葉脈、菜薹均表現(xiàn)為紫色，葉片薄而質(zhì)地脆嫩；野生型芥藍(lán)葉片灰綠色，有蠟質(zhì)，葉脈、菜薹均表現(xiàn)為紫色。而紫.中花芥藍(lán)×普通多蠟質(zhì)綠色芥藍(lán)的F1表現(xiàn)為葉片紫色、葉面有蠟質(zhì)。說(shuō)明，芥藍(lán)葉片無(wú)蠟質(zhì)性狀對(duì)多蠟質(zhì)為隱性遺傳、紫色性狀對(duì)綠色為顯性遺傳。

圖3 無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)與多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)自交系植株

2.2 葉片超微結(jié)構(gòu)觀察

2.2.1 葉片腹面蠟質(zhì)的比較 多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)的新葉、初生葉、次生葉和老葉無(wú)蠟質(zhì)突變型腹面的蠟質(zhì)均明顯多于無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)。新葉時(shí)，野生型芥藍(lán)葉片腹面的蠟質(zhì)為不規(guī)則顆粒和針狀，紫.中花芥藍(lán)為不規(guī)則顆粒（圖4）；初生葉時(shí)，野生型芥藍(lán)葉片腹面的蠟質(zhì)為圓柱狀、片狀晶體，具有規(guī)則的三維結(jié)構(gòu)，紫.中花芥藍(lán)為不規(guī)則顆粒和針狀，聚集成團(tuán)（圖5）；次生葉時(shí)，野生型芥藍(lán)葉片腹面的蠟質(zhì)為片狀晶體，具有規(guī)則的三維結(jié)構(gòu)，紫.中花芥藍(lán)為不規(guī)則顆粒和針狀，聚集成團(tuán)，個(gè)體增大（圖6）；老葉時(shí)，野生型芥藍(lán)葉片腹面的蠟質(zhì)為顆粒狀，聚集成團(tuán)，形狀不規(guī)則，紫.中花芥藍(lán)為瘤狀突起（圖7），此時(shí)野生型芥藍(lán)和紫.中花芥藍(lán)葉片腹面的蠟質(zhì)均退化，這與葉片衰老、功能喪失有關(guān)。由此可見(jiàn)，隨著葉片的發(fā)育，野生型芥藍(lán)和紫.中花芥藍(lán)葉片腹面的蠟質(zhì)逐漸增多、三維結(jié)構(gòu)增強(qiáng)；至老葉時(shí)，因葉片老化，蠟質(zhì)隨之退化。

圖4 無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)新葉腹面超微結(jié)構(gòu)

圖5 無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)初生葉腹面超微結(jié)構(gòu)

圖6 無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)次生葉腹面超微結(jié)構(gòu)

圖7 無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)老葉腹面超微結(jié)構(gòu)

2.2.2 葉片背面蠟質(zhì)的比較 多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)的新葉、初生葉、次生葉和老葉無(wú)蠟質(zhì)突變型背面的蠟質(zhì)均明顯多于無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)。新葉時(shí)，野生型芥藍(lán)葉片背面的蠟質(zhì)為管狀、針狀晶體，紫.中花芥藍(lán)為片狀、針狀晶體，個(gè)體大，三維結(jié)構(gòu)明顯（圖8）；初生葉時(shí)，野生型芥藍(lán)葉片背面的蠟質(zhì)為片狀、針狀，三維結(jié)構(gòu)增強(qiáng)，紫.中花芥藍(lán)為片狀、針狀（圖9）；次生葉時(shí)，野生型芥藍(lán)葉片背面的蠟質(zhì)為片狀、針狀，三維結(jié)構(gòu)進(jìn)一步增強(qiáng)，紫.中花芥藍(lán)為片狀，聚集成團(tuán)，開(kāi)始退化（圖10）；老葉時(shí)，野生型芥藍(lán)葉片背面的蠟質(zhì)為密集的片狀、針狀，三維結(jié)構(gòu)最強(qiáng)，紫.中花芥藍(lán)為瘤狀，退化嚴(yán)重。由此可見(jiàn)，隨著葉片的發(fā)育，野生型芥藍(lán)和紫.中花芥藍(lán)葉片背面的蠟質(zhì)逐漸增多，但紫.中花芥藍(lán)的蠟質(zhì)退化速度比野生型芥藍(lán)更快。

2.2.3 葉片腹面、背面蠟質(zhì)的比較 由圖4～11可見(jiàn)，野生型芥藍(lán)和紫.中花芥藍(lán)葉片背面的蠟質(zhì)多于腹面，背面蠟質(zhì)退化的速度慢于腹面。野生型芥藍(lán)葉片背面與腹面相比，背面蠟質(zhì)退化速度極顯著地慢于腹面，4個(gè)時(shí)期葉片背面的蠟質(zhì)一直在增多、發(fā)育，在老葉時(shí)發(fā)育最好，而腹面的蠟質(zhì)在老葉時(shí)開(kāi)始退化；紫.中花芥藍(lán)葉片背面與腹面相比，新葉背面的蠟質(zhì)發(fā)育最好，隨后開(kāi)始退化，而腹面的蠟質(zhì)在4個(gè)時(shí)期發(fā)育都比較差，老葉時(shí)完全退化。

圖8 無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)新葉背面超微結(jié)構(gòu)

圖9 無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)初生葉背面超微結(jié)構(gòu)

圖10 無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)次生葉背面超微結(jié)構(gòu)

圖11 無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)老葉背面超微結(jié)構(gòu)

2.3 營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)

由表1可見(jiàn)，無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)和多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)的VC、花青苷含量均高于對(duì)照普通綠色芥藍(lán)（CK），而紫.中花芥藍(lán)和野生型芥藍(lán)的花青苷含量相近；紫.中花芥藍(lán)的VC含量、干物質(zhì)量高于野生型芥藍(lán)，可滴定酸、可溶性糖、粗纖維（DW）含量低于野生型芥藍(lán)。由此可見(jiàn)，亮葉無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)不僅增加了VC含量，而且降低了粗纖維（DW）含量；與對(duì)照相比，尤其是增加了花青苷含量。

表1 3種芥藍(lán)主要營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)

3 結(jié)論與討論

3.1 野生型芥藍(lán)的葉面蠟質(zhì)多于無(wú)蠟質(zhì)突變型紫.中花芥藍(lán)

紫.中花芥藍(lán)的葉片不僅具有蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)，而且背面的蠟質(zhì)尤為明顯，因此紫.中花芥藍(lán)葉片無(wú)蠟質(zhì)是相對(duì)的。多蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)野生型的新葉、初生葉、次生葉和老葉腹面、背面的蠟質(zhì)均明顯多于紫.中花芥藍(lán)4個(gè)時(shí)期的葉面蠟質(zhì)。位于葉片背面的蠟質(zhì)，無(wú)論是多蠟質(zhì)野生型芥藍(lán)還是紫.中花芥藍(lán)均多于腹面，這一結(jié)果與周小云（2006）、曾愛(ài)松等（2009）和牟香麗等（2013）報(bào)道的甘藍(lán)葉片腹面的蠟質(zhì)多于背面的結(jié)論不同，這可能與試驗(yàn)的材料及取材部位有關(guān)。芥藍(lán)不包球，以幼嫩、肉質(zhì)的花薹和嫩葉為主要食用器官（除老葉外，均可食用），且芥藍(lán)葉片與莖形成的角度接近45°；而甘藍(lán)包球，以葉球?yàn)槭秤闷鞴伲ㄇ蛉~以外的葉片，一般不可食用）。牟香麗等（2013）是在甘藍(lán)的結(jié)球期和成熟期選取最內(nèi)層外葉為試材，此時(shí)甘藍(lán)的葉片為彎曲、抱合的球葉，不同于接近45°的芥藍(lán)葉片。今后，應(yīng)將亮葉無(wú)蠟質(zhì)甘藍(lán)、無(wú)蠟質(zhì)亮葉芥藍(lán)（初蓮香 等，1998）和紫.中花芥藍(lán)種植在同一條件下，再進(jìn)一步比較三者葉片腹面、背面蠟質(zhì)的異同。

3.2 紫.中花芥藍(lán)有利于提高芥藍(lán)品質(zhì)

紫.中花芥藍(lán)不僅提高了VC含量、降低了粗纖維（DW）含量，而且與普通綠色芥藍(lán)相比，含有花青苷成分等優(yōu)點(diǎn)更為突出，因此亮葉無(wú)蠟質(zhì)紫色芥藍(lán)突變型紫.中花芥藍(lán)有利于改良現(xiàn)有芥藍(lán)的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。由于花青苷具有水溶性，VC遇高溫容易降解等特點(diǎn)，建議育成的高營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)紫色芥藍(lán)新品種以生食為主，如涼拌、配菜等。

3.3 有關(guān)紫.中花芥藍(lán)的選育工作

筆者已經(jīng)獲得了紫.中花芥藍(lán)×普通多蠟質(zhì)綠色芥藍(lán)的6個(gè)世代種子。2015年秋季將在露地種植這6個(gè)世代，調(diào)查每個(gè)群體各單株紫色和蠟質(zhì)的有無(wú)等分離情況，進(jìn)一步開(kāi)展蠟質(zhì)、紫色等遺傳規(guī)律研究；同時(shí)，利用紫.中花芥藍(lán)×普通多蠟質(zhì)綠色芥藍(lán)配制的BC1回交群體，采用分離群體分組分析法（bulked segregant analysis，BSA），開(kāi)展與紫色、蠟質(zhì)相關(guān)基因的初步定位研究，并建立分子輔助育種技術(shù)體系，在苗期能夠區(qū)分純合、雜合蠟質(zhì)和紫色基因型，為快速育成亮葉無(wú)蠟質(zhì)且葉片、葉脈和菜薹均為紫色的芥藍(lán)一代雜種提供依據(jù)。

初蓮香，王秋艷，王英明，王永昌．1998．無(wú)蠟粉亮葉芥藍(lán)的選育及利用．中國(guó)蔬菜，（4）：30-31．

牟香麗，王超，王帥．2013．甘藍(lán)無(wú)蠟粉突變體葉表皮蠟質(zhì)超微結(jié)構(gòu)觀察．中國(guó)蔬菜，（4）：32-37．

曾愛(ài)松，劉玉梅，方智遠(yuǎn)．2009．甘藍(lán)耐裂球性與葉表面微形態(tài)及細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)的關(guān)系研究．華北農(nóng)學(xué)報(bào)，（2）：41-45．

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Zhang Y，Kensler T W，Cho C G，Posner G H，Talalay P．1994．Anticarcinogenic activities of sulforaphane and structurally related synthetic norbornyl isothiocyanates．Proc Natl Acad Sci，91（8）：3147-3150．

Ultra-microstructure of Epicuticular Wax on Waxless Mutant of Chinese Kale（Brassica alboglabra L. H. Bailey）

ZHANG De-shuang1，SUN Lei1，2，ZHANG Feng-lan1，HE Hong-ju1，YU Shuan-cang1，YU Yang-jun1，ZHAO Xiu-yun1，ZHAO Xue-zhi1，WANG Wei-hong1，SU Tong-bing1，LU Gui-xiang1
（1Beijing Vegetable Research Center，Beijing Academy of Agricultural and Forestry Sciences，Beijing 100097，China；2Yantai University，Yantai 264005，Shandong，China）

Epicuticular waxes of leaves at 4 developing stages in Chinese kale（Brassica alboglabra L. H. Bailey）waxless mutant named‘Zi.zhonghuajielan’and wild type（WT）were observed by scanning electron microscope（SEM）．Meanwhile，crude weight，VC，soluble sugar，crude fiber，protein and anthocyanins were measured. The results showed that epicuticular waxes at 4 growth periods of wild type were apparently higher than those of mutant. Epicuticular waxes at leaf abaxial of mutant and WT were higher than those of leaf adaxial．Epicuticular waxes at leaf abaxial of WT degenerated slowly than those of leaf adaxial. VC in waxless mutant was higher than that of WT，and dry weight of crude weight in waxless mutant was lower than that of WT．Thus，waxless mutant in Chinese kale can supply higher nutrition of VC and anthocyanins．Gene controlled wax biosynthesis in Chinese kale waxless mutant was recessive，while gene or genes controlled anthocyanins biosynthesis were dominant，compared to WT．Furthermore brilliant green，waxless and purple Chinese kale uncooked is more suitable for eating．

Chinese kale（Brassica alboglabra L. H. Bailey）；Waxless mutant；Ultra-microstructure；Anthocyanins

張德雙，男，博士，研究員，專(zhuān)業(yè)方向：蔬菜遺傳育種及分子生物學(xué)，E-mail：zhangdeshuang@nercv.org

2015-07-14；接受日期：2015-10-08

北京市農(nóng)林科學(xué)院科技創(chuàng)新能力建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)（KJCX20140111-3），大宗蔬菜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專(zhuān)項(xiàng)（CARS-25-A-11），北京市葉類(lèi)蔬菜創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資助項(xiàng)目（blvt-01）