陳玉米飼糧中添加茶多酚、維生素E和二丁基羥基甲苯對肉鴨生長性能和抗氧化功能的影響

張亞茹 王 忠 蔡少敏 張璐爽劉 洋 袁建敏 夏兆飛*

(1.中國農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，北京 100193;2.中國農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，北京 100193)

玉米是我國主要儲備糧品種之一，是飼料工業(yè)中使用最廣泛的谷物。研究表明隨著儲存時間的延長，玉米品質(zhì)以及營養(yǎng)發(fā)生退化［1-2］，尤其是由于玉米胚部不飽和脂肪酸含量高，而易發(fā)生氧化酸?。?］。動物使用長期儲存玉米會引發(fā)不良影響，本實驗室前期研究表明，肉雞飼糧中使用長期儲存的玉米后，肉雞抗氧化功能下降［4］;同時崔小燕等［5］研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中使用長期儲存玉米會降低肉雞的免疫功能。因此緩解長期儲存玉米的不良影響，對促進動物健康養(yǎng)殖意義重大。生產(chǎn)實踐中，通常加入抗氧化劑防止飼料的氧化變質(zhì)，以減緩對動物的氧化損傷。二丁基羥基甲苯(butylated hydroxytoluene，BHT)作為飼料工業(yè)中廣泛使用的抗氧化劑，能清除自由基，防止飼料中不飽和脂肪酸等營養(yǎng)物質(zhì)的氧化變質(zhì)［6］。維生素E作為天然的強效抗氧化劑，能清除自由基，阻斷脂質(zhì)過氧化反應，以應對氧化應激的不良影響［7］。而茶多酚(tea polyphenol，TP)是新興的抗氧化劑，具有抗氧化、清除自由基、增強免疫力等多種生物學功能［8］。

陳玉米對動物產(chǎn)生的不良影響是否能通過添加抗氧化劑來緩解，目前還不清楚。因此，本試驗選取糧庫中儲存3年的玉米，分別添加上述3種抗氧化劑進行全價飼糧的配制，旨在探究這3種抗氧化劑對肉鴨生長性能和抗氧化功能的影響，并確定出最適宜的抗氧化劑，為陳玉米的合理使用提供相應參考以及科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

儲存3年玉米來自于北京周邊糧庫，儲存條件符合GB/T 7415—2008標準(玉米的理化性質(zhì)見表1)。嘔吐毒素(GB/T 23503)、玉米赤霉烯酮(GB/T 23504)、黃曲霉毒素 B1(GB/T 5009.22)含量由譜尼測試(北京)公司檢測。煙曲霉素B1、煙曲霉素B2含量采用高效液相色譜熒光檢測法，由百奧明(上海)飼料添加劑公司檢測。霉菌毒素含量低于國家與歐盟委員會2006/576/EC的標準。

表1 儲存3年玉米的理化性質(zhì)Table 1 Physicochemical property of maize storied for 3 years

1.2 試驗方法

選取體重均勻、健康的1日齡雄性北京鴨(北京市南口北京鴨育種中心)192只，采用單因素完全隨機設計，分為4組，每組6個重復，每個重復8只。Ⅰ組(對照組)飼喂基礎飼糧(不添加飼料抗氧化劑)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別飼喂在基礎飼糧中添加120 mg/kg TP、維生素E和BHT的試驗飼糧。TP純度≥99%，杭州禾田生物技術(shù)有限公司提供;維生素E醋酸酯，有效含量≥50%，巴斯夫維生素有限公司提供;BHT純度≥99.5%，德國朗盛有限公司提供。試驗采用玉米-豆粕型飼糧(基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2，抗氧化劑從麥飯石的比例中扣除)，參照 NY/T 2122—2012《肉鴨飼養(yǎng)標準》，使用儲存3年玉米作為能量原料配制成顆粒狀全價飼糧。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗肉鴨采用網(wǎng)上飼養(yǎng)，乳頭式飲水器供水，自由飲水，自由采食。24 h光照，保持舍內(nèi)良好通風。試驗期42 d。按照北京商品鴨飼養(yǎng)管理程序進行飼養(yǎng)管理。試驗期間每天記錄舍內(nèi)溫度、濕度的變化以及肉鴨死亡和淘汰情況。

1.4 樣品采集和指標測定

1.4.1 肉鴨生長性能的測定

在試驗開始及肉鴨21和42日齡時，分別以重復為單位，對試驗肉鴨進行空腹稱重，記錄初生重及21和42日齡體重，并統(tǒng)計前期和后期的耗料量，對死亡肉鴨以及淘汰肉鴨的耗料量進行校正，計算平均日采食量(average daily feed intake，ADFI)、平均日增重(average daily gain，ADG)以及料重比(feed/gain，F(xiàn)/G)。

1.4.2 肉鴨血清抗氧化指標的檢測

肉鴨21和42日齡時，從每個重復隨機選取1只，每組6只，通過頸靜脈采血，置于一次性真空采血管中。室溫放置1 h至全部凝集，3 000 r/min離心10 min，制備血清，置于-20℃保存。按照試劑盒(南京建成生物工程研究所)的方法，使用752紫外可見分光光度計(上海菁華儀器有限公司)檢測總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)等抗氧化指標。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 20.0進行單因子方差分析(oneway ANOVA)，并且使用Duncan氏法多重比較檢驗，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標準，結(jié)果以 平均值±標準差表示。

表2 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)Table 2 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis) %

2 結(jié)果

2.1 TP、維生素E、BHT對肉鴨生長性能的影響

由表3可知，與對照組相比，1～21日齡時，添加抗氧化劑后，ADFI以及ADG提高，維生素E能顯著提高 ADFI、ADG(P ＜0.05)，而 TP 和 BHT對 ADFI、ADG 影響不顯著(P＞0.05);22～42日齡時，TP和維生素E都能顯著提高ADG(P＜0.05)，分別提高了 6.39% 、6.90%，對 ADFI無顯著影響(P＞0.05);無論1～21日齡還是22～42日齡，TP、維生素E和BHT對F/G都沒有顯著影響(P ＞0.05)。

2.2 TP、維生素E、BHT對肉鴨血清抗氧化功能的影響

由表4可知，與對照組相比，TP能顯著提高21和42日齡肉鴨血清的T-AOC(P＜0.05)，顯著提高42日齡血清CAT活性(P＜0.05);維生素E能顯著提高42日齡血清CAT活性(P＜0.05)，對血清T-AOC的影響不顯著(P＞0.05);BHT能顯著提高21日齡血清T-AOC以及21和42日齡血清CAT活性(P＜0.05);3種抗氧化劑對21日齡血清MDA含量影響均不顯著(P＞0.05)，有降低42日齡血清MDA含量的趨勢(P=0.079);3種抗氧化劑對血清GSH-Px、T-SOD活性的影響均不顯著(P ＞0.05)。

表3 TP、維生素E、BHT對肉鴨生長性能的影響Table 3 Effects of tea polyphenol，vitamin E and butylated hydroxytoluene on growth performance of meat ducks

表4 TP、維生素E、BHT對肉鴨血清抗氧化功能的影響Table 4 Effects of tea polyphenol，vitamin E and butylated hydroxytoluene on serum antioxidant function of meat ducks

3 討論

玉米陳化、品質(zhì)劣變的主要原因是脂肪酸積累、過氧化物酶(POD)活性的降低［9］等，同時脂肪酸價是目前評價玉米儲存品質(zhì)的重要指標。由表1可知本試驗中選取的玉米為輕度不宜存(參照GB/T 20570—2006《玉米儲存品質(zhì)判定規(guī)則》)，并且儲存3年玉米POD活性低于文獻［10］中儲存0年的玉米。由此可知，本試驗選取的玉米屬于陳玉米。由于其來自于糧庫，儲存條件適宜，霉菌毒素的含量并不超標，因此本試驗中肉鴨抗氧化功能改變顯然是玉米自身營養(yǎng)成分的改變?nèi)缰舅嵫趸人鸬摹?/p>

陳玉米飼喂肉鴨后，機體攝入外源性自由基增多，血清抗氧化功能降低［4］。研究表明飼糧中添加玉米油能顯著提高肉雞血清和肝臟的脂質(zhì)過氧化水平，提高組織對于氧化損傷的易感性［11］。由此肉鴨采食陳玉米飼糧后更易產(chǎn)生氧化損傷，這種損傷可能會引起采食量降低，體重降低，降低生長性能［12］。本試驗發(fā)現(xiàn)TP能顯著提高22～42日齡肉鴨的ADG，維生素E能顯著提高1～21日齡肉鴨ADFI、ADG以及22～42日齡ADG。這與很多研究結(jié)果相同，王妍琪等［13］認為茶多酚和維生素E對1～3周熱應激肉仔雞的生長性能有一定促進作用，對試驗全期生長性能影響不顯著。Lu等［14］將維生素E添加到含有3%氧化豆油以及3%不飽和脂肪酸的飼糧中，發(fā)現(xiàn)維生素E能提高1～42日齡肉雞ADG，降低F/G，提高肉雞的生長性能。這表明TP和維生素E作為強效的抗氧化劑能提高生長性能，它們可能是通過增強機體的抗氧化功能，緩解陳玉米對機體產(chǎn)生的氧化損傷。

T-AOC反映機體酶類以及非酶類的抗氧化防御系統(tǒng)對于外界刺激的代償性作用，以及自由基的代謝狀態(tài)，是評估機體抗氧化功能的綜合性指標［15］，比單一抗氧化指標更為重要。CAT能特異性分解體內(nèi)過多的過氧化氫(H2O2)，以減少過氧化損傷，保護細胞膜的完整性。本試驗發(fā)現(xiàn)TP能顯著提高肉鴨血清的T-AOC以及CAT活性，維生素E能顯著提高肉鴨血清CAT活性，BHT能顯著提高肉鴨血清的 T-AOC以及CAT活性。同時Hongqin［16］發(fā)現(xiàn)添加TP和維生素E能使肉雞的血清T-AOC顯著升高，血清MDA含量降低，與本試驗結(jié)果基本一致。這可能是由于維生素E和TP能提高血清 CAT活性，有效地清除氧自由基［17-18］。TP、維生素E以及BHT都是酚類抗氧化劑，經(jīng)常用于油脂的抗氧化，茶多酚對油脂的抗氧化活性高于維生素E以及BHT［19-20］。本試驗也發(fā)現(xiàn)TP表現(xiàn)為較好的抗氧化活性，這可能是因為TP與過氧化自由基作用后所生成的惰性自由基比BHT、維生素E穩(wěn)定。

GSH-Px以及SOD是酶類抗氧化劑中重要組成部分，能清除體內(nèi)產(chǎn)生的自由基，減少機體損傷。MDA是脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，其含量反映機體脂質(zhì)過氧化以及細胞損傷的程度。本試驗發(fā)現(xiàn)3種抗氧化劑對血清GSH-Px、T-SOD活性及MDA含量無顯著影響，只是在42日齡時對血清MDA含量有降低趨勢。A?lkg?z等［21］在輕微氧化油脂中加入維生素E后，發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)過氧化指標得到了改善，但是對血清GSH-Px活性無顯著影響，維生素E對血清GSH-Px活性的影響和本試驗結(jié)果一致。這可能是由于本試驗中選取儲存3年的玉米脂肪酸價稍高，屬于輕度不宜存，脂質(zhì)過氧化的程度不高，不足以對血清GSH-Px、T-SOD活性以及MDA含量產(chǎn)生顯著的影響。

4 結(jié)論

①陳玉米飼糧中添加TP和維生素E對肉鴨生長性能以及抗氧化功能均有不同程度的改善，BHT只改善了肉鴨的抗氧化功能。

②陳玉米飼糧中添加TP效果最好。

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