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    生長分化因子6 研究進(jìn)展

    2015-12-16 05:04:36張長春
    安徽醫(yī)學(xué) 2015年12期
    關(guān)鍵詞:充質(zhì)椎間盤軟骨

    張 昊 張長春 朱 坤 許 剛

    生長分化因子6(growth differentiation factor 6,GDF6)是骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)的成員之一,亦稱為BMP13。BMP 與轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor β,TGF-β)相比,兩者含有20%~30%的同源氨基酸。在最初被發(fā)現(xiàn)的時候,BMP 被認(rèn)為是去礦化骨基質(zhì)的組件,當(dāng)發(fā)生異位植入或者骨折時,能刺激新骨組織的產(chǎn)生[1]。BMP 主要參與細(xì)胞的分化與增殖。在胚胎發(fā)育、維持及胚胎干細(xì)胞分化的過程中受很多GDF 控制,尤其是TGF-β 超家族成員如BMP及活化素[2]。BMP 的生物學(xué)功能近年來成為研究的熱點,由于BMP 的表達(dá)及其受體在眾多類型的細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),表明BMP具有比目前所認(rèn)知的更為復(fù)雜的功能。隨著重組DNA 技術(shù)的發(fā)展,一些BMP 亞型已被合成,并應(yīng)用于實驗室和醫(yī)學(xué)的許多學(xué)科,如骨移植[3]?,F(xiàn)將GDF6 的研究進(jìn)展綜述如下。

    1 BMP 家族的生物學(xué)性質(zhì)

    Mulloy 等[4]的研究表明當(dāng)細(xì)胞發(fā)生特定分化途徑時,BMP發(fā)揮著核心作用。這些蛋白通過Smad 信號途徑調(diào)解靶基因的表達(dá),其中Smad 蛋白是細(xì)胞內(nèi)的關(guān)鍵分子,發(fā)揮著從細(xì)胞膜到細(xì)胞核信號傳輸TGF-β 超家族成員的功能。TGF-β 配體通過結(jié)合I 型和II 型絲氨酸/蘇氨酸激酶受體四聚體啟動信號傳導(dǎo),這將使Smad 蛋白磷酸化[5]。從人的基因組中關(guān)于I 型絲氨酸/蘇氨酸激酶受體的研究結(jié)果表明,共有7 種Ⅰ型絲氨酸/蘇氨酸激酶受體被指定為活化素受體樣激酶(activin receptor-like kinases ALKS),這些I 型受體分別是TGF-β(ALK5 和ALK1),激活素(ALK4),BMP/GDF(ALK3、ALK6 和ALK2),和節(jié)點(ALK7)[6]。另一方面,同樣存在5 種Ⅱ型絲氨酸/蘇氨酸激酶受體,包括TGFRII 對于TGF-β,ActRIIA、ActRIIB 對于激活素類及一部分BMP、BMPRII 對于BMP,AMHRII 對于抗苗勒激素[5,7]。在BMPs 亞科中有一個類似的分子結(jié)構(gòu),它有可能使一些BMP 與數(shù)量有限的受體相互作用,例如BMP9、BMP10、BMP13 和BMP14 彼此共享51%氨基酸序列。雖然對于BMPs 來說Ⅰ型和Ⅱ型受體具有相似親合性,但這兩種類型的受體均需要傳導(dǎo)信號的誘導(dǎo)[5]。此外,雖然各BMP 與其相應(yīng)的受體相結(jié)合,但是在不同的BMP 及其受體之間也存在一些交互作用[8]。

    TGF-β 家族的Ⅰ型和Ⅱ型受體通過啟動兩種不同的下游Smad 信號途徑進(jìn)行傳導(dǎo):BMPs 通過Smad1/5 途徑,TGF-β 通過Smad2、3 途徑[5,9]。Smad 蛋白是細(xì)胞內(nèi)從細(xì)胞膜轉(zhuǎn)移TGFβ 超家族成員信號到細(xì)胞核的關(guān)鍵分子。在當(dāng)前,已經(jīng)有8 種Smad 蛋白被發(fā)現(xiàn),根據(jù)它們的功能可分為3 類:①受體相關(guān)的Smad 蛋白(receptor-associated Smad,R-Smad),其中包括Smad1、2、3、5 和8;②共同介導(dǎo)的Smad 蛋白(common-mediated Smad,co-Smad)即Smad4;③抑制的Smad 蛋白,包括Smad6 和7[5,10]。通常認(rèn)為Smad1、5 和8 調(diào)解BMP 的信號傳導(dǎo),而Smad2 和3 涉及對TGF-β 信號通路的作用,而這些途徑均通過Smad4 作為中介進(jìn)行傳導(dǎo)[8]。在與特殊的配體結(jié)合后,并和受到刺激的Ⅱ型受體結(jié)合形成二聚體,然后在Ⅰ型受體富含GC 的區(qū)域使其磷酸化,激活并形成絲氨酸/蘇氨酸激酶。這些受體在被激活后將會招募并磷酸化R-Smad,使其成為一種直接的基質(zhì),然后磷酸化后的R-Smad 將會從細(xì)胞膜分離并與共同介導(dǎo)的Smad(Smad4)結(jié)合,形成異三聚體。磷酸化后的R-Smad 和co-Smad復(fù)合物被轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核中特定的DNA 結(jié)合位點結(jié)合,并與一些其他的轉(zhuǎn)錄因子(如共活化劑和共抑制劑)相互作用以調(diào)解靶基因的表達(dá)[11]。

    BMP 信號在細(xì)胞中被限制在多種水平,包括細(xì)胞內(nèi)抑制的Smad 蛋白[12]、miRNA 和甲基化作用,以及細(xì)胞外的偽受體如BMP 和活化膜結(jié)合抑制劑[13,14]。BMPs 的信號傳導(dǎo)異常會導(dǎo)致多種類型的疾病,包括癌癥和異位骨化,BMPs 的信號傳導(dǎo)也通過拮抗劑來調(diào)節(jié)[15]。BMPs 拮抗劑與BMPs 蛋白質(zhì)同源,擁有一個類似“半胱氨酸殘基”的結(jié)構(gòu),它們是TGF-β 超家族的一部分[16],可以有效地結(jié)合BMPs 受體以阻止BMPs 與其他受體相結(jié)合。BMP 拮抗劑控制BMP 各個方面的功能,包括影響對組織的重建。它們結(jié)合到BMP 的配位體,防止與細(xì)胞表面受體的相互作用,從而阻斷細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)[17]。BMPs 拮抗劑可作為BMPs 配體的開關(guān)發(fā)揮作用,由于一些BMP 的功能會過表達(dá),所以在特定的時間阻止某些BMP 是必要的[18]。

    2 GDF6 的生物學(xué)功能

    最初GDF6 是從牛的軟骨中分離、鑒定出的,并首次定義為軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白-2,它主要在關(guān)節(jié)及環(huán)狀軟骨中表達(dá),并且在其他組織如腸、骨骼肌和胎盤中也有少許表達(dá)[19]。

    2.1 GDF6 能抑制骨的形成BMP 在很大程度上與誘導(dǎo)骨的形成相關(guān)[8]。不過更多的證據(jù)表明GDF6 可以防止或延緩骨組織的形成。Shen 等[20]研究發(fā)現(xiàn)GDF6 具有能抑制人骨髓中的多能間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞在體外向成骨方向分化的作用。當(dāng)添加GDF6 時可下調(diào)重要的成骨標(biāo)記基因如Runx2,骨橋蛋白和堿性磷酸酶的表達(dá),特別是與添加BMP7 的對照組相比較時。而在成骨條件及含有GDF6 的刺激下,多能間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞能被誘導(dǎo)表達(dá)高水平的蛋白聚糖。Clendenning 等[21]在對GDF6-/-基因敲除的小鼠研究中發(fā)現(xiàn),在早期的顱骨發(fā)育過程中,GDF6 能阻止冠狀縫間質(zhì)的分化。他們發(fā)現(xiàn)顱骨的頂葉和額葉之間的邊界并未形成,而是形成連續(xù)性的骨組織,從而認(rèn)為是因為在它們之間產(chǎn)生了異位骨化。GDF6 基因缺陷的小鼠在顱骨骨縫結(jié)合區(qū)域表達(dá)出更高的成骨標(biāo)記基因堿性磷酸酶和轉(zhuǎn)錄因子Runx2,提示成骨組織的形成。Clendenning 的數(shù)據(jù)顯示,GDF6 可以自我調(diào)節(jié)表達(dá),在構(gòu)建顱縫處的細(xì)胞中減少骨特征性標(biāo)記基因堿性磷酸酶和Runx2 的表達(dá)。

    2.2 GDF6 促進(jìn)軟骨的表達(dá)在胚胎發(fā)育、生長及骨的愈合過程中,軟骨的形成是生成骨組織的必要中介[22]。GDF6 在最初因其序列同源性被認(rèn)為是BMPs 家族成員之一,不過其活性在軟骨中更突出[23]。而且GDF6 已被證明在體外[24]和體內(nèi)[25]均能刺激軟骨細(xì)胞相關(guān)蛋白的表達(dá)。在體外通過對軟骨細(xì)胞分離、培養(yǎng),并予以重組GDF6 刺激,經(jīng)阿爾新藍(lán)染色及組織濕重變化的檢測發(fā)現(xiàn)聚集蛋白聚糖的表達(dá)增加[24]。Heckmann等[26]將人的間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞接種在含聚-L 乳酸的三維立體系統(tǒng)中,并添加GDF6 刺激因子,在培養(yǎng)14 d 后,通過RT-PCR、免疫組化和明膠酶譜檢測發(fā)現(xiàn),GDF6 能促進(jìn)間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞的膠原蛋白的表達(dá)。

    2.3 GDF6 在肌腱及韌帶中的作用將GDF6 轉(zhuǎn)基因?qū)腴g充質(zhì)干細(xì)胞和十字韌帶成纖維細(xì)胞中來誘導(dǎo)韌帶組織的分化,研究發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了一種韌帶樣基質(zhì),富含膠原蛋白、波形蛋白、纖連蛋白、核心蛋白聚糖、彈性蛋白腱生蛋白等,從而認(rèn)為含有GDF6 基因的間充質(zhì)干細(xì)胞及成纖維細(xì)胞能夠分化為韌帶樣組織[27]。組織移植實驗研究發(fā)現(xiàn)在體內(nèi)異位注射GDF6 能刺激肌腱[28]和韌帶[29]的生成。此外,將GDF6 轉(zhuǎn)導(dǎo)的成纖維細(xì)胞植入家兔體內(nèi)人工誘導(dǎo)的動脈瘤中發(fā)現(xiàn)能促進(jìn)局部膠原蛋白的產(chǎn)生[30]。但在不同物種和不同組織中GDF6 的效果是不同的。與對照組的小鼠相比,GDF6 基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的干細(xì)胞并未能改善肩袖損傷的情況[31]。但是通過加入外源性GDF6 基因?qū)ρ颍?2]和小鼠[31]跟腱損傷的愈合情況的研究發(fā)現(xiàn),受損跟腱的愈合效果較為顯著。在雙敲除GDF6 基因的小鼠中,不同的肌腱受到了不同的影響,對于尾腱生長的影響較跟腱更明顯,小鼠尾腱的生長是受抑制的[33]。Mikic 等[34]研究發(fā)現(xiàn)GDF6 缺乏對肌腱的影響跟性別相關(guān),但是對于其中雌性GDF6 基因雙敲除小鼠來說,肌腱成分或材料性質(zhì)的差異未檢測出。而且相較于跟腱,尾腱中顯示出更大的影響,這與GDF5 缺乏的對照組的結(jié)果是相反的。

    2.4 其他相關(guān)影響GDF6 同樣在其他組織中表達(dá)及產(chǎn)生相關(guān)作用,Chen 等[35]對經(jīng)GDF6 誘導(dǎo)的C3H10T1/2 細(xì)胞體外培養(yǎng)28 d 后,通過RT-PCR、免疫印跡和熒光免疫檢驗法檢測心肌特異性基因、肌鈣蛋白T 和連接蛋白43 的表達(dá)發(fā)現(xiàn),GDF6 能促進(jìn)C3H10T1/2 分化為心肌樣細(xì)胞。Asai-Coakwell 等[36]的數(shù)據(jù)表明GDF6 基因突變導(dǎo)致雷伯氏先天性黑蒙,此外GDF6 的缺乏可能與光感受器的變性相關(guān)。同時Asai-Coakwell 等[36]通過對小鼠和斑馬魚的突變型模型觀察后發(fā)現(xiàn)它們的視網(wǎng)膜細(xì)胞在逐漸凋亡,而這是人類視網(wǎng)膜營養(yǎng)不良的一個特征,從而認(rèn)為GDF6 有助于早發(fā)性視網(wǎng)膜營養(yǎng)不良的治療。Zhang 等[37]認(rèn)為GDF6 參與了外胚層的構(gòu)成及眼的發(fā)育,GDF6 基因突變可能與眼睛發(fā)育異常相關(guān)聯(lián)如小眼畸形或無眼畸形;且GDF6是年齡相關(guān)性黃斑變性的一種新的致病基因。而GDF6 在椎間盤退變中也產(chǎn)生相應(yīng)的影響,Wei 等[25]在對綿羊椎間盤損傷的模型的研究中發(fā)現(xiàn),將GDF6 注入受損的椎間盤中,GDF6 能阻止甚至逆轉(zhuǎn)相關(guān)組織學(xué)變化如細(xì)胞外基質(zhì)的損失,保留更強(qiáng)的水合作用以及在髓核組織中含有更多的細(xì)胞等,從而認(rèn)為GDF6 可以作為一種促進(jìn)椎間盤恢復(fù)的治療因子。Clarke 等[38]將人間充質(zhì)干細(xì)胞接種于Ⅰ型膠原凝膠并在添加GDF6 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)14 d,然后通過聚合酶鏈反應(yīng)檢測軟骨和髓核的標(biāo)記基因的表達(dá)以及硫酸化糖胺聚糖含量的變化,實驗顯示間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)GDF6 誘導(dǎo)后被分化為一個髓核細(xì)胞樣表型及富含更多的蛋白聚糖的基質(zhì)。因此,這種間充質(zhì)干細(xì)胞和GDF6 的組合可以是一種治療椎間盤退變的理想選擇。

    GDF6 已經(jīng)在不同的物種、組織中被發(fā)現(xiàn)相關(guān)的表達(dá)及功能,但相較于其他家族成員來說,對其的研究相對較少。從目前來看,對GDF6 的研究在肌腱、韌帶、軟骨組織及抑制骨形成中成果較多。近年來,隨著對椎間盤退變的研究逐漸增多,GDF6 在椎間盤中的表達(dá)及相連的功能已有相關(guān)報道[23,25,38],GDF6 可以作為一種相關(guān)治療因子,通過對它的深入研究,相信在不久的將來可以對椎間盤退變的治療有積極作用。

    [1] Urist MR.Bone:formation by autoinduction[J].Science,1965,150(3698):893-899.

    [2] Itoh F,Watabe T,Miyazono K.Roles of TGF-β family signals in the fate determination of pluripotent stem cells[J].Semin Cell Dev Biol,2014,32:98-106.

    [3] Li Y,Shen H,Burczynski FJ,et al.Prospect of bone morphogenetic protein 13 in liver diseases[J].Zhong Nan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban,2012,37(1):1-5.

    [4] Mulloy B,Rider CC.The bone morphogenetic proteins and their antagonists[J].Vitam Horm,2015,99:63-90.

    [5] Macias MJ,Martin-Malpartida P,Massagué J.Structural determinants of Smad function in TGF-β signaling[J].Trends Biochem Sci,2015,40(6):296-308.

    [6] Watanabe R.Activin receptor-like kinase and the insulin gene[J].Vitam Horm,2011,85(1):1-27.

    [7] Manning G,Whyte DB,Martinez R,et al.The protein kinase complement of the human genome[J].Science,2002,298(5600):1912-1934.

    [8] Brazil DP,Church RH,Surae S,et al.BMP signalling:agony and antagony in the family[J].Trends Cell Biol,2015,25(5):249-264.

    [9] Massague J.TGFbeta signalling in context[J].Nat Rev Mol Cell Biol,2012,13(13):616-630.

    [10]肖后生.骨形成蛋白在脊柱關(guān)節(jié)病中研究進(jìn)展[J].安徽醫(yī)學(xué),2011,32(2):226-228.

    [11]Blahna MT,Hata A.Smad-mediated regulation of microRNA biosynthesis[J].FEBS Lett,2012,586(14):1906-1912.

    [12]張燕,吳永貴.雷公藤多苷對糖尿病腎病患者血清TGFβ1BMP-7Gremlin 的影響[J].安徽醫(yī)學(xué),2012,33(12):1616-1619.

    [13]Rider CC,Mulloy B.Bone morphogenetic protein and growth differentiation factor cytokine families and their protein antagonists[J].Biochem J,2010,429(1):1-12.

    [14]Walsh DW,Godson C,Brazil DP,et al.Extracellular BMPantagonist regulation in development and disease:tied up in knots[J].Trends Cell Biol,2010,20(5):244-256.

    [15]Alsamarah A,Lacuran AE,Oelschlaeger P,et al.Uncovering Molecular Bases Underlying Bone Morphogenetic Protein Receptor Inhibitor Selectivity[J].PLoS One,2015,10(7):e0132221.

    [16]Dudaric L,Cvek SZ,Cvijanovic O,et al.Expression of the BMP-2,-4 and-7 and their antagonists gremlin,chordin,noggin and follistatin during ectopic osteogenesis[J].Coll Antropol,2013,37(4):1291-1298.

    [17]Abe E.Function of BMPs and BMP antagonists in adult bone[J].Ann N Y Acad Sci,2006,1068(1):41-53.

    [18]Nolan K,Kattamuri C,Luedeke DM,et al.Structure of neuroblastoma suppressor of tumorigenicity 1(NBL1):insights for the functional variability across bone morphogenetic protein(BMP)antagonists[J].J Biol Chem,2015,290(8):4759-4771.

    [19]Chang SC,Hoang B,Thomas JT,et al.Cartilage-derived morphogenetic proteins.New members of the transforming growth factor-beta superfamily predominantly expressed in long bones during human embryonic development[J].J Biol Chem,1994,269(45):28227-28234.

    [20]Shen B,Bhargav D,Wei A,et al.BMP-13 emerges as a potential inhibitor of bone formation[J].Int J Biol Sci,2009,5(2):192-200.

    [21]Clendenning DE,Mortlock DP.The BMP ligand GDF6 prevents differentiation of coronal suture mesenchyme in early cranial development[J].PLoS One,2012,7(5):e36789.

    [22]Berendsen AD,Olsen BR.Bone development[J].Bone,2015,80:14-18.

    [23]Williams LA,Wei A,Bhargav D,et al.Cartilage derived morphogenetic protein 2-a potential therapy for intervertebral disc regeneration[J].Biologicals,2014,42(2):65-73.

    [24]Williams LA,Bhargav D,Diwan AD.Unveiling the bmp13 enigma:redundant morphogen or crucial regulator[J].Int J Biol Sci,2008,4(5):318-329.

    [25]Wei A,Williams LA,Bhargav D,et al. BMP13 prevents the effects of annular injury in an ovine model[J].Int J Biol Sci,2009,5(5):388-396.

    [26]Heckmann L,F(xiàn)iedler J,Mattes T,et al.Interactive effects of growth factors and three-dimensional scaffolds on multipotent mesenchymal stromal cells[J].Biotechnol Appl Biochem,2008,49(Pt 3):185-194.

    [27]Haddad-Weber M,Prager P,Kunz M,et al.BMP12 and BMP13 gene transfer induce ligamentogenic differentiation in mesenchymal progenitor and anterior cruciate ligament cells[J].Cytotherapy,2010,12(4):505-513.

    [28]Chai W,Ni M,Rui YF,et al.Effect of growth and differentiation factor 6 on the tenogenic differentiation of bone marrowderived mesenchymal stem cells[J].Chin Med J(Engl),2013,126(8):1509-1516.

    [29]Wolfman NM,Hattersley G,Cox K,et al.Ectopic induction of tendon and ligament in rats by growth and differentiation factors 5,6,and 7,members of the TGF-beta gene family[J].J Clin Invest,1997,100(2):321-330.

    [30]Dai D,Ding YH,Danielson MA,et al.Endovascular treatment of experimental aneurysms with use of fibroblast transfected with replication-deficient adenovirus containing bone morphogenetic protein-13 gene[J].AJNR Am J Neuroradiol,2008,29(4):739-744.

    [31]Gulotta LV,Kovacevic D,Packer JD,et al.Adenoviral-mediated gene transfer of human bone morphogenetic protein-13 does not improve rotator cuff healing in a rat model[J].Am J Sports Med,2010,39(1):180-187.

    [32]Virchenko O,F(xiàn)ahlgren A,Rundgren M,et al.Early achilles tendon healing in sheep[J].Arch Orthop Trauma Surg,2008,128(9):1001-1006.

    [33]Mikic B,Rossmeier K,Bierwert L.Identification of a tendon phenotype in GDF6 deficient mice[J].Anat Rec(Hoboken),2009,292(3):396-400.

    [34]Mikic B,Rossmeier K,Bierwert L.Sexual dimorphism in the effect of GDF-6 deficiency on murine tendon[J].J Orthop Res,2009,27(12):1603-1611.

    [35]Chen L,Wei H,Tan J,et al.Bone morphogenetic protein 9 and 13 induce c3h10t1/2 cell differentiation to cardiomyocyte-like cells in vitro[J].Cell Transplant,2015,24(5):909-920.

    [36]Asai-Coakwell M,March L,Dai XH,et al.Contribution of growth differentiation factor 6-dependent cell survival to early-onset retinal dystrophies[J].Hum Mol Genet,2013,22(7):1432-1442.

    [37]Zhang L,Lim SL,Du H,et al.High temperature requirement factor A1(HTRA1)gene regulates angiogenesis through transforming growth factor-beta family member growth differentiation factor 6[J].J Biol Chem,2012,287(2):1520-1526.

    [38]Clarke LE,McConnell JC,Sherratt MJ,et al.Growth differentiation factor 6 and transforming growth factor-beta differentially mediate mesenchymal stem cell differentiation,composition,and micromechanical properties of nucleus pulposus constructs[J].Arthritis Res Ther,2014,16(2):R67.

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