大豆磷脂對腦梗死患者炎性因子水平、調控因子活性和血液流變學的影響

趙　磊　李春霞　牟　麗　(濰坊市益都中心醫(yī)院神經(jīng)內二科，山東　濰坊　262500)

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大豆磷脂對腦梗死患者炎性因子水平、調控因子活性和血液流變學的影響

趙磊李春霞牟麗(濰坊市益都中心醫(yī)院神經(jīng)內二科，山東濰坊262500)

〔摘要〕目的探討大豆磷脂對腦梗死患者炎性因子水平、調控因子活性和血液流變學影響。方法選取該院神經(jīng)內科收治的腦梗死患者60例，隨機分為兩組，其中對照組30例，予常規(guī)尤瑞克林0. 15 PNA靜滴，1次/d，應用2 w，治療組30例，予大豆磷脂散15 g口服，1次/d沖服，4 w為1個療程，治療1個療程。正常組30例，選取健康成年人，不予任何治療手段。治療結束后，對比兩組患者調控因子核轉錄因子(NF)-κB、腫瘤壞死因子(TNF)-α、紅細胞黏附促進因子(RFER)、炎性因子高敏C-反應蛋白(hs-CRP)、白細胞介素(IL)-6、IL-8及血液流變學水平變化情況，并通過PCR逆轉錄聚合酶鏈反應檢測各組調控因子TNF-α及炎性因子hs-CRP基因表達水平。結果試驗后，治療組和對照組患者調控及炎性因子水平均不同程度降低，且治療組NF-κB、TNF-α、hs-CRP、IL-6水平較對照組明顯降低(P＜0. 05);兩組患者血流動力學水平均不同程度改善，治療組全血低切黏度、全血高切黏度、血漿黏稠度、纖維蛋白原較對照組明顯改善(P＜0. 05);兩組炎性及調控因子蛋白基因電泳結果均不同程度表達，治療組PCR、hs-CRP、TNF-α較對照組明顯改善。結論大豆磷脂能夠明顯改善患者機體血液流變學水平，降低纖維蛋白原含量，改善腦血流量供血，并降低炎性因子及調控因子對腦組織缺血缺氧造成的水腫于炎性病變，從根本改善腦梗死患者病灶血流灌注，減輕腦組織損傷，值得臨床推廣。

〔關鍵詞〕大豆磷脂;腦梗死;炎性因子;調控因子;血液流變學

目前臨床上治療腦梗死主要依靠抗血小板聚集聯(lián)合溶栓治療改善腦供血，但溶栓治療出血傾向極大，且臨床療效并不理想。臨床研究發(fā)現(xiàn)大豆磷脂能夠有效抑制血小板在血管內皮的聚集，并改善血流動力學水平、降低血黏稠度，降低機體炎性因子水平，改善調控因子活性，從而提高梗死病灶血液灌溉。本文旨在探究大豆磷脂對腦梗死患者的臨床療效。

1　資料與方法

1. 1一般資料選取2013年1月至2014年6月于我院以腦梗死為診斷收入院患者60例，采用隨機數(shù)字表分為治療組和對照組。治療組30例，其中男14例，女16例，平均年齡(53. 6±8. 5)歲;對照組30例，其中男15例，女15例，平均年齡(54. 1±7. 3)歲。兩組患者的一般資料無統(tǒng)計學差異(P＞0. 05)。

1. 2納入標準符合《1995年全國第四屆腦血管病學術會議診斷標準》〔1〕的腦梗死患者，起病突然，多數(shù)無前驅癥狀;短時間內可出現(xiàn)嚴重對側偏癱、偏側感覺麻木、偏盲、失語等;可有意識清晰或短暫性意識障礙，不同程度的眼球運動麻痹、共濟失調、交叉癱、四肢運動功能障礙、吞咽障礙等腦動脈閉塞導致的局灶性神經(jīng)功能障礙;腦CT及磁共振成像(MRI)檢查患者發(fā)病在72 h以內，并有偏癱肢體運動障礙;影像可見梗死病灶的位置、范圍及周圍腦水腫情況和腦出血征象等?；颊咦栽竻⑴c本實驗，并簽署知情同意書。方案獲得我院倫理委員會批準并全過程跟蹤。

1. 3排除標準肝、膽嚴重疾病;嚴重的血小板減少癥、凝血機能異常、冠心病、嚴重肝腎功能不全的肝膽疾病患者;惡性腫瘤、白血病等;腦炎、腦出血;神志異常等患者。

1. 4治療方法對照組參照臨床用藥指南，予常規(guī)注射用尤瑞克林(廣東天普生化醫(yī)藥股份有限公司，國藥準字H20052065，商品名凱力康，0. 15 PNA單位/瓶)0. 15 PNA靜滴，1次/d，應用2 w，治療組予大豆磷脂散(上海金伴藥業(yè)有限公司，國藥準字H19999594，7 g/袋)15 g口服，1次/d沖服，4 w 為1個療程，治療1個療程。正常組30例，選取健康成年人，不予任何治療手段。治療結束后，對比兩組患者調控因子核轉錄因子(NF)-κB、腫瘤壞死因子(TNF)-α、紅細胞黏附促進因子(RFER)、炎性因子高敏C反應蛋白(hs-CRP)、白細胞介素(IL)-6、IL-8及血液流變學水平變化情況，并通過PCR逆轉錄聚合酶鏈反應檢測各組調控因子TNF-α及炎性因子hs-CRP基因表達水平。

1. 5試驗試劑CRP、血流動力學化驗、IL化驗試劑(批號EIA05849河北博海生物工程有限公司分裝，美國R＆D Systems公司生產(chǎn))。0. 01 mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS)，四甲基聯(lián)苯胺(TMB)顯色液，TMB、1型前膠原羧基端肽(PICP)、Ⅰ型膠原C端肽(ICTP)、P16終止液及免疫組化試劑盒(武漢博士德生物有限公司);染色試劑盒(美國貝克曼-庫爾特公司); RT-PCR逆轉錄聚合酶鏈反應試劑(北京中杉生物公司); PCR引物(上海生工); HIMAS-1000病理圖文分析系統(tǒng)(美國Media Cybernetics公司)，雙螺旋CT儀(飛利浦醫(yī)學影像學公司)。

1. 6觀察指標及檢測方法試驗結束后，采取各組患者血5 ml，通過臨床血液檢測化驗系統(tǒng)，檢測機體NF-κB、TNF-α、hs-CRP、IL-6水平;通過臨床血液檢測化驗系統(tǒng)，檢測機體血流動力學水平，測量全血低切黏度、全血高切黏度、血漿黏稠度、纖維蛋白原水平，采用PCR方法檢測各組中調控因子TNF-α及炎性因子hs-CRP蛋白基因表達情況。PCR試驗檢測所用比對引物序列為，hs-CRP:正義-GTCTTGGGTTGCTGGTGTCG;反義-CTTGGGTCTGGGTTGCTGTCGGCCTT; TNF-α:正義-CCCATCATGTCTTCGGTAGCAAG;反義-GTTCAGTCTTCGGTGCATCTAG。并應用甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)管家基因作為內參，驗證燈亮可證明各因子蛋白基因段參與PCR反應，GAPDH管家基因引物序列為:正義-ACCACGTCTTCGGCGGGTTGCTGGCAC，反義-TCCACGTCTTCGGGTTGCTGTA。取各組患者靜脈血3 ml，離心機5 000 r/min離心15 min，提取血清。加入PICP免疫組化劑，通過冰浴方法對勻漿凍融3次，5 000 r/min離心30 min，取上清液，放置于離心管中以15 000 r/min二次離心2 h，沉淀物通過50 μl ICTP、P16試劑，進行懸浮試驗，100℃沸水浴10 min，最后1 000 r/min離心5 min，取上清液3 μl放入PCR儀器中檢測調控因子TNF-α及炎性因子hs-CRP蛋白基因表達情況，做凝膠電泳及攝影分析。用HIMAS-1000病理圖文分析系統(tǒng)對PCR電泳結果進行光密度掃描，測得hs-CRP及TNF-α條帶與GAPDH條帶的峰面積積分。記錄并對比結果。

1. 7統(tǒng)計學方法采用SPSS19. 0軟件進行t檢驗。

2　結果

2. 1調控因子及炎性因子水平比較試驗后各組機體調控因子及炎性因子水平均不同程度變化，與對照組比較，治療組NF-κB、TNF-α、hs-CRP、IL-6水平明顯改善(P＜0. 05)。見表1。

表1　三組NF-κB、TNF-α、hs-CRP、IL-6水平比較(x ±s，n=30)

2. 2血流動力學水平比較試驗后各組患者血流動力學均不同程度改善，與對照組比較，治療組全血低切黏度、全血高切黏度、血漿黏稠度、纖維蛋白原水平明顯降低(P＜0. 05)。見表2。

表2　血流動力學水平比較(x ±s，n=30)

2. 3各組TNF-α、hs-CRP基因表達情況及PCR試驗擴增結果

實驗結束后，各組均有不同程度的TNF-α、hs-CRP基因表達，治療組表達水平〔(0. 16±0. 07)ng/L，(0. 14±0. 09)mg/L〕明顯低于對照組〔(0. 69±0. 19)ng/L，(0. 53±0. 04)mg/L〕(P＜0. 05)。正常組hs-CRP、TNF-α含量分別為(0. 07±0. 06)ng/L、(0. 09±0. 01)ng/L。

3　討論

心腦血管疾病中腦梗死是一種臨床常見且高發(fā)的疾病，其較高的致殘率及致死率與患者血液流變學水平及體內炎性因子、調控因子密切相關〔2，3〕。經(jīng)統(tǒng)計，中老年腦梗死患者中85. 23%均有不同程度的高血壓、糖尿病、冠心病等，其導致血小板在血管內皮粥樣斑塊處凝聚力增強，極大提高了血栓形成概率〔4～6〕。全世界因腦梗死致殘患者約占35. 71%，其致死率更高達21. 33%。因繼發(fā)高血脂、高血壓等疾病的腦梗死患者，其腦血管內皮斑塊形成概率可增高26. 21%，并且其脫落率可提高11. 91%，嚴重危害了患者生命安全〔7〕。因腦組織中的神經(jīng)元細胞均為高度分化細胞，其自我修復能力極低，在梗死病灶形成后，短時間內可造成腦組織局部病灶的大面積缺血性壞死表現(xiàn)，且溶栓后再灌注有效率平均只有62. 11%，臨床療效往往不理想〔6〕。經(jīng)過大量臨床研究表明，大豆磷脂中復合氨基酸可明顯改善局部組織缺血壞死而產(chǎn)生的炎性因子水平，從而降低腦水腫程度。腦組織病灶梗死可激活機體調控基因，使其大量表達，抑制了局部再灌注修復的有效率〔8〕。大豆磷脂可調節(jié)機體血小板的聚集水平，從而改善血液流變學，降低纖維蛋白原在體內的含量，為后續(xù)溶栓治療提供良好基礎。

本實驗提示大豆磷脂可有效降低炎性因子如CRP等水平，改善腦組織因缺血缺氧造成的水腫狀態(tài)，抑制機體中腫瘤因子等調控因子的表達，從而抑制多種損傷因子對缺血腦組織造成的損害，提高溶栓后恢復率。大豆磷脂中氨基酸及含磷有機物可明顯降低機體纖維蛋白原水平，從而降低血小板及斑塊在腦血管內皮凝聚能力，并減輕斑塊及栓子的脫落水平，通過提高血管內血流速，來維持局部腦組織血液灌溉，減輕腦組織的損傷情況。

4參考文獻

1吳遜．全國第四屆腦血管病學術會議紀要〔J〕．卒中與神經(jīng)疾病，1997; 4(2): 105-9．

2溫慧軍，楊金鎖，張建軍．急性腦梗死患者頸動脈粥樣硬化斑塊與血液炎癥因子水平的關系〔J〕．臨床神經(jīng)病學雜志，2012; 25(1): 54-6．

3何奕濤，郭毅．腦梗死后認知功能障礙與血清超敏C反應蛋白的相關性〔J〕．廣東醫(yī)學，2013; 34(10): 1534-5．

4鄧愛玲，陳琦玲，馬濟順，等．高血壓患者頸動脈粥樣硬化病變與腦梗死關系的初步探討〔J〕．中華老年醫(yī)學雜志，2001; 20(2): 96-9．

5魏莉，潘光成．腦梗死與頸動脈粥樣硬化及血脂等因素的關系〔J〕．臨床神經(jīng)病學雜志，2000; 13(5): 297-8．

6陽慶德．老年高血壓患者血清尿酸水平與頸動脈粥樣硬化的關系〔J〕．實用臨床醫(yī)藥雜志，2014; 18(11): 153-4．

7 Rodrigue KM，Haacke EM，Raz N．Differential effects of age and history of hypertension on regional brain volumes and iron〔J〕．Neuro Image，2011; 54(2): 750-9．

8么曉軼，于紀珠，李穎．大豆異黃酮對去勢雌大鼠缺血再灌注腦組織細胞凋亡及calpain表達的影響〔J〕．中國病理生理雜志，2011; 27(12): 2333-7．

〔2014-12-25修回〕

(編輯滕欣航)

〔文章編號〕1005-9202(2015)20-5776-03;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 043

〔文獻標識碼〕A

〔中圖分類號〕R742

第一作者:趙磊(1982-)，男，住院醫(yī)師，主要從事神經(jīng)內科疾病研究。