58株致肺炎金黃色葡萄球菌耐藥性分布及耐藥菌體外誘導耐藥情況分析

許恒貴

泰州市姜堰中醫(yī)院檢驗科，江蘇泰州 225500

58株致肺炎金黃色葡萄球菌耐藥性分布及耐藥菌體外誘導耐藥情況分析

許恒貴

泰州市姜堰中醫(yī)院檢驗科，江蘇泰州 225500

目的 以58株金黃色葡萄球菌為例，分析其耐藥性分布，指導臨床抗生素的合理使用。通過體外誘導耐藥，初步探討其耐藥機制。方法 整群選取該院2013年3月—2014年3月臨床分離得到的58株金黃色葡萄球菌，進行藥敏實驗，分析其耐藥性分布。通過體外誘導法建立金黃色葡萄球菌的耐藥模型，初步探討其耐藥機制。 結(jié)果58株金黃色葡萄球菌中，分離出32株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA），占金黃色葡萄球菌的55.2%。金黃色葡萄球菌主要分布在ICU病房、呼吸內(nèi)科以及神經(jīng)外科。主要感染標本為痰液和分泌物。所分離到的58株菌對萬古霉素和利奈唑胺均敏感，青霉素耐藥率為98.3%。 結(jié)論 金黃色葡萄球菌主要分布在門診、ICU等科室，且耐藥菌株的數(shù)量已不容樂觀，應引起臨床上的足夠重視，加強抗生素合理使用的管理以及對金黃色葡萄球菌感染的監(jiān)測。

金黃色葡萄球菌；耐藥性；體外誘導耐藥

金黃色葡萄球菌（staphylococcus aureus）是近年來臨床常見的主要致病菌，屬于革蘭氏陽性菌。金黃色葡萄球菌可引起皮膚軟組織感染、重型肺炎、導管相關(guān)性感染、感染性心內(nèi)膜炎以及血液感染等疾病，且其極易形成生物膜（BBF）[1]，加大了治療難度。半個多世紀前，

抗生素的發(fā)現(xiàn)開辟了醫(yī)療革命的新時代，但隨著抗生素的廣泛使用，甚至是濫用，導致了耐藥菌的產(chǎn)生，且數(shù)量在逐年增加[2]。為了進一步了解金黃色葡萄球菌的分布和耐藥性，該研究整群選取該院2013年3月—2014年3月臨床分離得到的58株金黃色葡萄球菌進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 菌株來源 該院臨床分離得到的58株金黃色葡萄球菌，質(zhì)控菌株ATCC25923購自衛(wèi)生部臨檢中心。

選取的58株金黃色葡萄球菌主要分布在門診、ICU病房、呼吸內(nèi)科和神經(jīng)外科，見表1。感染標本主要來自痰液和分泌物，見表2。

表1 金黃色葡萄球菌在臨床科室的分布

表2 金黃色葡萄球菌感染標本的分布

1.1.2 藥敏紙片 萬古霉素、青霉素、利奈唑胺、環(huán)丙沙星、莫西沙星、苯唑西林、替加環(huán)素、四環(huán)素、紅霉素、慶大霉素均由英國Oxiod公司生產(chǎn)。

1.1.3 培養(yǎng)基 MH肉湯、MH瓊脂培養(yǎng)基和甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基均由自北京三藥科技開發(fā)公司生產(chǎn)。

1.2 方法

分離的菌株經(jīng)過微生物自動分析系統(tǒng)VITEK鑒定；藥物敏感性實驗采用K-B（Kirby-Bauer）紙片法進行測定。采用含藥甘露醇氯化鈉瓊脂平板對MRSA進行體外誘導，具體方法采用藥物濃度遞增方式進行。

1.3 觀察標準

參照CLSI標準，抑菌圈直徑20 mm以上為極敏感菌，15～20 mm為高度敏感菌，10～14 mm為中度敏感菌，10 mm以下為低敏感菌，無抑菌圈則不敏感。

2 結(jié)果

2.1 金黃色葡萄球菌的耐藥情況分析

分離到的58株菌中MRSA32株、MSSA26株，所有58株臨床致病菌對萬古霉素和利奈唑胺均敏感，但青霉素耐藥率為98.3%，其余7種抗菌藥對MRSA的耐藥率均高于MSSA（非耐甲氧西林金黃色葡萄球菌），見表3。

表3 金黃色葡萄球菌耐藥率(%)

2.2 利奈唑胺體外誘導6株MRSA耐藥情況分析

6株對臨床常用抗生素強耐藥的MRSA體外誘導耐藥顯示，經(jīng)20次體外耐藥誘導后，1、3、4號菌株的MIC升高2倍，2、5號菌株的MIC升高4倍。6號菌株的MIC升高8倍。說明抗生素的不合理使用，會導致耐藥菌株的產(chǎn)生，增加治療難度。

3 討論

金黃色葡萄球菌在革蘭氏陽性菌感染中居首位，是院內(nèi)感染和社區(qū)內(nèi)感染的主要致病菌之一[3]。該研究表明，金黃色葡萄球菌尤其是MRSA引起的感染已經(jīng)日益嚴重，且有報道稱MRSA具有多重耐藥性[4]。隨著抗生素的使用，細菌在繁殖過程中，后天性地獲得了更多的耐藥基因，從而對越來越多的抗生素產(chǎn)生了耐藥性[5]。金黃色葡萄球菌在各科室的分布受多種因素的影

響，例如醫(yī)院環(huán)境、患者體質(zhì)等，但主要取決于細菌本身的致病性和患者本身的免疫力[9]，該文研究結(jié)果顯示，金黃色葡萄球菌在門診和ICU檢出率較高。有報道顯示，MRSA的爆發(fā)已發(fā)生在ICU[10]。這可能是由于ICU病房重癥患者相對集中，且長期臥床等原因[11]，因此，減少機械性操作的使用很有必要，保持室內(nèi)空氣流通，創(chuàng)面嚴格消毒，減小感染幾率。金黃色葡萄球菌易形成生物膜（bacterialbiofilm,BBF），BBF會加大細菌的致病性和耐藥性，給治療增加了新的挑戰(zhàn)[12]。因此，在治療金葡菌感染，尤其是MRSA感染時，應合理選擇抗生素。

該研究從58株金黃色葡萄球菌中分離得到32株MRSA，檢出率高達55.17%，說明耐藥菌株的數(shù)量已不容小覷，且有不斷增加的趨勢，需引起足夠的重視，這與文獻報道基本一致。治療MRSA感染主要依賴糖肽類抗菌藥，萬古霉素就是其代表藥物[6-7]。該研究選取的58株金黃色葡萄球菌均對萬古霉素敏感，因此，萬古霉素仍是治療MRSA的有效藥。

此外，該研究還用利奈唑胺對6株MRSA進行了體外誘導耐藥實驗。利奈唑胺是一種新型噁唑烷酮類藥物，口服利用度好，藥效與萬古霉素相當甚至更高[8]，其體外誘導試驗結(jié)果顯示，在經(jīng)20次體外誘導后，所有被誘導的菌株其MIC均有所上升，升高倍數(shù)2～8倍不等，說明即使利奈唑胺是一種新型的抗菌藥物，但其在臨床上也需合理使用，否則將導致耐藥菌株的產(chǎn)生，增加治療難度。

綜上所述，金黃色葡萄球菌導致的感染已經(jīng)遍布了門診、ICU等科室，且MRSA占了臨床感染金葡菌的很大比例，并呈現(xiàn)像各科室擴散的趨勢，應該引起臨床的足夠重視，加強抗生素合理使用、開發(fā)新型抗生素以及增強對金黃色葡萄球菌感染的監(jiān)測力度。

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Drug Resistance Distribution of 58 Strains of Staphylococcus Aureus Leading to Pneumonia and Situation Analysis of Drug-fast Bacteria in Vitro Induction of Resistance

XU Heng-gui
Clinical Laboratory,Jiangyan Hospital of Traditional Chinese Medicine,Taizhou,Jiangsu Province,225500 China

Objective To analyze the drug resistance distribution by taking 58 strains of staphylococcus aureus for example in order to guide the rational use of clinical antibiotics and preliminarily discuss the drug resistance mechanism by in vitro induction of resistance.Methods 58 strains of Staphylococcus aureus obtained by clinical isolates from March 2013 to March 2014 were selected and the drug resistance distribution of them were analyzed by drug sensitivity test,the drug resistance model of staphylococcus aureus was built by in vitro induction method and its drug resistance mechanism was preliminarily discussed.Results 32 strains of staphylococcus aureus(MRSA)were separated from 58 strains of staphylococcus aureus,accounting for 55.2%of staphylococcus aureus,staphylococcus aureus was mainly distributed in the ICU ward,respiratory department of internal medicine and department of neurosurgery,the main infection specimens were sputum and secretion,the isolated 58 strains were sensitive to vancomycin and linezolid,the drug resistance rate of penicillin was 98.3%. Conclusion Staphylococcus aureus is mainly distributed in the clinic,ICU and other departments and the number of resistant strains is not optimistic,and we should pay enough attention to it in clinic by strengthening the management of antibiotics and monitoring of staphylococcus aureus infection.

Staphylococcus aureus;Drug resistance;In vitro induction of resistance

R563.1

A

1674-0742（2015）12（a）－0040-03

10.16662/j.cnki.1674-0742.2015.34.040

2015-08-24）

許恒貴(1974-)，男，江蘇省泰州人，本科，主管技師，研究方向：臨床檢驗方向。