楊梅素對(duì)肝癌細(xì)胞Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制作用

李有富 李魏林

湖北文理學(xué)院附屬襄陽(yáng)市中心醫(yī)院藥學(xué)部，湖北襄陽(yáng) 441021

楊梅素對(duì)肝癌細(xì)胞Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制作用

李有富 李魏林▲

湖北文理學(xué)院附屬襄陽(yáng)市中心醫(yī)院藥學(xué)部，湖北襄陽(yáng) 441021

目的研究楊梅素（Myr）體內(nèi)外對(duì)人肝癌Bel-7402細(xì)胞增殖、凋亡及機(jī)制的影響。方法體外培養(yǎng)人肝癌Bel-7402細(xì)胞，MTT和SRB法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率；采用25只SPF級(jí)BALB/C-nu裸鼠建立Bel-7402細(xì)胞裸鼠異種移植瘤模型，分為5組，對(duì)照組，5-氟尿嘧啶（5-Fu，25 mg/kg）陽(yáng)性對(duì)照組以及Myr（20、40、80 mg/kg）三個(gè)劑量組。腹腔注射給藥3周后，處死裸鼠，剝瘤稱重并計(jì)算抑瘤率。TUNEL法檢測(cè)腫瘤組織細(xì)胞凋亡；FACS檢測(cè)腫瘤組織細(xì)胞周期；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Bax和Bcl-2含量。結(jié)果 MTT和SRB法檢測(cè)顯示，Myr可以抑制Bel-7402細(xì)胞體外增殖并呈劑量依賴。腹腔注射給藥3周后，Myr各劑量組瘤質(zhì)量與模型組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；Myr體各劑量組Bel-7402細(xì)胞凋亡率與對(duì)照組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），Myr將細(xì)胞周期阻滯在G2～M期。Myr可以促進(jìn)Bax蛋白表達(dá)（P＜0.05或P＜0.01），抑制Bcl-2蛋白表達(dá)（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論楊梅素可抑制Bel-7402細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)其凋亡，其凋亡機(jī)制涉及Bcl-2家族。

楊梅素；Bel-7402細(xì)胞；裸鼠；增殖；凋亡；Bax；Bcl-2

原發(fā)性肝癌是消化系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤，死亡率僅次于胃癌和食道癌，我國(guó)是肝癌的高發(fā)區(qū)。肝癌的發(fā)生發(fā)展是由多種因素多種途徑共同作用的結(jié)果，其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，且初期癥狀不明顯，晚期則出現(xiàn)肝痛、乏力、消瘦、黃疸、腹水等癥狀[1-2]。雖然目前對(duì)肝癌的手術(shù)、放化療、移植、介入、靶向治療等技術(shù)已大幅度提高，但效果仍不滿意，尚存在很多毒副作用[3-4]，因此研究開(kāi)發(fā)天然無(wú)毒的抗腫瘤中藥非常必要。楊梅素（Myricetin，Myr）是多羥基黃酮類化合物，主要存在于楊梅的樹(shù)皮中，研究表明其有廣泛的藥理作用，包括降血糖、護(hù)肝、抗氧化、抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、調(diào)節(jié)免疫以及抗腫瘤等活性[5-7]。而近年來(lái)其抗腫瘤的作用受到關(guān)注，但國(guó)內(nèi)對(duì)楊梅素抗腫瘤作用機(jī)制研究較少。本研究則主要從體外以及裸鼠移植瘤體內(nèi)兩個(gè)方面來(lái)探討楊梅素對(duì)人肝癌Bel-7402細(xì)胞增殖、凋亡及其機(jī)制的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)BALB/C-nu裸鼠，4～6周齡，體重18～20 g，購(gòu)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁殖中心，合格證號(hào)：SCXK（滬）2007-0005，飼養(yǎng)于本實(shí)驗(yàn)室，按SPF級(jí)要求管理。

1.2 主要試劑、藥物及儀器

人肝癌Bel-7402細(xì)胞由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院提供；楊梅素由湖北文理學(xué)院藥理實(shí)驗(yàn)室制備所得，批號(hào)20131201，純度為98.1%（HPLC）；MTT和胰蛋白酶（Sigma公司）；胎牛血清（杭州四季青生物工程材料公司）；RPMI 1640培養(yǎng)粉 （Gibco公司）；5-氟尿嘧啶（5-Fu，天津金耀氨基酸有限公司）；ELx800型酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀（BIO-TEK公司）；CO2孵箱（JOUAN公司）；TE2000-S型倒置顯微鏡 （Nikow公司）；TDL-5低速大容量離心機(jī) （上海安亭科學(xué)儀器廠）；TUNEL凋亡試劑盒（寶麗曼公司）；FACS Calibur（Becton Dickinson公司）；Bcl-2、Bax抗體（南京凱基公司）；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.3 方法

1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)

人肝癌Bel-7402細(xì)胞于含10%胎牛血清、100U/mL青霉素和100 μg/mL鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)液中，制成單細(xì)胞懸液，于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，隔3 d傳代，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)研究。

1.3.2 體外抗腫瘤作用

1.3.2.1 MTT法檢測(cè)對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖的影響 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期Bel-7402細(xì)胞調(diào)整濃度為1×106/mL接種于96孔板，每孔100 μL，培養(yǎng)24 h后，加入不同濃度的Myr（用1640培養(yǎng)液溶解，最終每組含Myr濃度分別為：10、20、40、80、160、320 μg/mL），每個(gè)濃度6個(gè)復(fù)孔，同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組，于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)24 h后，每孔吸出100 μL上清棄去，加入MTT 20 μL后，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，再加入DMSO 100 μL，微量振蕩器振蕩使充分溶解，于酶標(biāo)儀510 nm處檢測(cè)各孔OD值，Myr的體外生長(zhǎng)抑制率 =（1-藥物孔OD值/對(duì)照孔OD值）×100%。

1.3.2.2 SRB法檢測(cè)對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖的影響 按“1.3.2.1”項(xiàng)方法將Bel-7402細(xì)胞接種于96孔板培養(yǎng)，24 h后加入Myr，培養(yǎng)24 h后，進(jìn)行SRB法檢測(cè)：每孔加入預(yù)冷的50%三氯乙酸50 μL固定 （終濃度為10%），靜置5 min，將96孔板移至4℃放置1 h；倒掉固定液，去離子水洗5遍，干燥后每孔加SRB液100 μL，室溫避光放置10 min；1%醋酸洗5遍，空氣干燥，加150 μL的10 mmol/L非緩沖Tris堿液 （pH 10.5）溶解，510 nm處測(cè)各孔OD值。楊梅素的體外生長(zhǎng)抑制率=（1-藥物孔OD值/對(duì)照孔OD值）×100%。

1.3.3 制備模型、分組及給藥

將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Bel-7402細(xì)胞制成濃度為1×107/mL的單細(xì)胞懸液，取裸鼠，將調(diào)整好濃度的細(xì)胞于無(wú)菌條件下接種于左側(cè)背部皮下，每只0.2 mL。7 d左右裸鼠左側(cè)背部觸及結(jié)節(jié)，10 d后成瘤，瘤徑約6 mm，將荷瘤裸鼠隨機(jī)分為5組，每組5只。對(duì)照組腹腔注射生理鹽水，5-Fu陽(yáng)性對(duì)照組腹腔注射5-Fu 25 mg/kg、Myr 3個(gè)劑量組分別按20、40、80 mg/kg腹腔注射，每天給藥1次，連續(xù)給藥3周。

1.3.4 抑瘤率的檢測(cè)

末次給藥24 h后脫頸椎處死裸鼠，剝?nèi)×鰤K，用分析天平稱重。計(jì)算各組平均瘤塊重量及抑瘤率。腫瘤抑制率（%）=[1-（治療組平均瘤重/陰性對(duì)照組平均瘤重）]×100%。

1.3.5 TUNEL法檢測(cè)腫瘤組織細(xì)胞凋亡

應(yīng)用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP切口末端標(biāo)記法，按照試劑盒說(shuō)明書要求操作，BCIP顯色，核快紅復(fù)染，脫水、透明、封片。陽(yáng)性凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核出現(xiàn)棕黑色顆粒。每張切片至少觀察3個(gè)以上高倍視野，超過(guò)500個(gè)完整癌細(xì)胞，計(jì)數(shù)每100個(gè)癌細(xì)胞內(nèi)的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，計(jì)算凋亡指數(shù)（AI，%）=（凋亡陽(yáng)性細(xì)胞核數(shù)/總計(jì)數(shù)的細(xì)胞核數(shù)）×100%。

1.3.6 FACS法檢測(cè)腫瘤組織細(xì)胞周期

將腫瘤組織用剪刀剪碎至勻漿狀，200 r/s離心將細(xì)胞碎片去除，加PBS充分洗滌后經(jīng)300目濾網(wǎng)過(guò)濾，制備成單細(xì)胞懸液，參照文獻(xiàn)[8]方法固定染色上機(jī)測(cè)試，BD公司的MuhiCycle軟件進(jìn)行分析細(xì)胞周期。

1.3.7 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)凋亡相關(guān)基因Bax和Bcl-2的蛋白表達(dá)變化

取腫瘤組織塊，于10%的中性緩沖甲醛液中固定，無(wú)水酒精脫水，二甲苯透明化處理，65℃下浸蠟及包埋，切片，脫蠟至水，加入3%H2O2滅活內(nèi)源性酶；0.01 mol/L枸櫞酸鹽緩沖液（pH 6.0）熱修復(fù)抗原；5% BSA封閉液；分別加入Bax和Bcl-2抗體，PBS（pH 7.4）洗3次，每次2 min；滴加IgG，PBS（pH 7.4）洗3次，每次2 min，；再滴加SABC，PBS（pH 7.4）洗4次，每次5 min，室溫顯色，HE染色，脫水透明，封片，于顯微鏡下觀察。采用Image Pro Plus 6.0分析圖像，計(jì)算OD值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 14.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，正態(tài)分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)Bel-7402細(xì)胞增殖的影響

同時(shí)采用MTT和SRB兩種方法檢測(cè)Myr對(duì)Bel-7402細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，結(jié)果顯示：兩種方法檢測(cè)結(jié)果一致；Myr各劑量組的OD值與空白對(duì)照組比較，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。說(shuō)明Myr體外可抑制Bel-7402細(xì)胞的生長(zhǎng)，并呈劑量依賴。見(jiàn)表1。

表1 Myr對(duì)Bel-7402細(xì)胞增殖的抑制作用（n=6，）

表1 Myr對(duì)Bel-7402細(xì)胞增殖的抑制作用（n=6，）

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.01；Myr：楊梅素；“-”表示無(wú)數(shù)據(jù)

組別MTT法OD值 抑制率（%）SRB法OD值 抑制率（%）空白對(duì)照組Myr 10 μg/mL組Myr 20 μg/mL組Myr 40 μg/mL組Myr 80 μg/mL組Myr 160 μg/mL組Myr 320 μg/mL組0.798±0.045 0.654±0.033*0.585±0.050*0.541±0.061*0.525±0.075*0.467±0.035*0.434±0.020*--18.07 26.65 32.23 34.25 41.42 45.66 0.797±0.047 0.653±0.032*0.582±0.054*0.537±0.063*0.523±0.073*0.466±0.034*0.431±0.021*18.05 26.98 32.58 34.36 41.56 45.94

2.2 Myr對(duì)荷瘤裸鼠瘤質(zhì)量和的抑瘤率影響

Myr 20、40、80 mg/kg組腹腔注射藥物3周后瘤質(zhì)量與模型組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說(shuō)明Myr各劑量均能抑制荷瘤裸鼠腫瘤的生長(zhǎng)。見(jiàn)表2。

表2 Myr對(duì)荷瘤裸鼠瘤質(zhì)量和抑瘤率的影響（n=5，）

表2 Myr對(duì)荷瘤裸鼠瘤質(zhì)量和抑瘤率的影響（n=5，）

注：與模型組相比，*P＜0.01；5-Fu：5-氟尿嘧啶；Myr：楊梅素；“-”表示無(wú)數(shù)據(jù)

組別 瘤質(zhì)量（g） 抑瘤率（%）對(duì)照組5-Fu陽(yáng)性對(duì)照組Myr 20 mg/kg組Myr 40 mg/kg組Myr 80 mg/kg組1.823±0.130 0.787±0.105*1.197±0.155*1.097±0.091*0.859±0.114*-56.87 34.40 39.85 52.94

2.3 Myr對(duì)Bel-7402細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響

Myr給藥3周后，Myr 20、40、80 μg/mL組的細(xì)胞凋亡率明顯高于對(duì)照組，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說(shuō)明各劑量Myr均能誘導(dǎo)Bel-7402細(xì)胞凋亡，且呈劑量依賴。Myr各劑量組細(xì)胞周期均受到一定的影響，與對(duì)照組比較，G0～G1期和S期細(xì)胞比例略有減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而G2～M期比例則顯著增加（P＜0.05），且該作用呈劑量依賴。見(jiàn)表3。由此可見(jiàn)Myr通過(guò)將細(xì)胞周期阻滯于G2～M期從而抑制Bel-7402細(xì)胞的生長(zhǎng)。

表3 Myr對(duì)Bel-7402細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響（n=5，%，）

表3 Myr對(duì)Bel-7402細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響（n=5，%，）

注：與對(duì)照組比較，△P＜0.05，*P＜0.01；5-Fu：5-氟尿嘧啶；Myr：楊梅素

組別 凋亡率 G0～G1期 S期 G2～M期對(duì)照組5-Fu陽(yáng)性對(duì)照組Myr 20 mg/kg組Myr 40 mg/kg組Myr 80 mg/kg組6.55±1.28 23.17±2.93*22.00±3.81*28.08±4.52*34.60±5.58*55.41±1.16 57.60±0.77△53.19±2.08 52.63±2.01 52.42±2.02 21.75±1.57 23.11±1.50 20.73±1.89 19.43±0.95 19.03±1.00 22.50±1.12 19.25±0.41*26.08±0.88*27.77±1.43*28.40±0.69*

2.4 Myr對(duì)凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2的蛋白含量的影響

Myr 40、80 μg/mL組、5-Fu陽(yáng)性對(duì)照組Bax蛋白表達(dá)較對(duì)照組均顯著增高，而B(niǎo)cl-2蛋白表達(dá)則明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）。見(jiàn)表4。說(shuō)明Myr對(duì)Bax、Bcl-2蛋白含量的影響同劑量有關(guān)。

表4 Myr對(duì)Bax堯Bcl-2蛋白表達(dá)的影響（n=5，）

表4 Myr對(duì)Bax堯Bcl-2蛋白表達(dá)的影響（n=5，）

注：與對(duì)照組比較，△P＜0.05，*P＜0.01；5-Fu：5-氟尿嘧啶；Myr：楊梅素

組別 Bax Bcl-2對(duì)照組5-Fu陽(yáng)性對(duì)照組Myr 20 mg/kg組Myr 40 mg/kg組Myr 80 mg/kg組0.326±0.011 0.364±0.009△0.335±0.012 0.362±0.014△0.374±0.010*0.381±0.013 0.298±0.030△0.353±0.017 0.342±0.012△0.329±0.015*

3 討論

現(xiàn)在臨床常用的藥敏實(shí)驗(yàn)有MTT比色法、SRB比色法、放射性同位素標(biāo)志物摻入法、三磷酸腺苷生物發(fā)光法等，各有不同的優(yōu)缺點(diǎn)，MTT法測(cè)定速度快，不易引起誤差，SRB法藥物敏感實(shí)驗(yàn)成本相對(duì)三磷酸腺苷生物發(fā)光法低，結(jié)果能保存較長(zhǎng)時(shí)間[9-10]。本研究同時(shí)采用MTT和SRB兩種方法觀察Myr對(duì)Bel-7402細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果均表明，Myr能夠明顯抑制Bel-7402細(xì)胞的生長(zhǎng)，并且呈良好的劑量依賴，兩種方法互相印證，Myr具有體外抗腫瘤作用，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

人肝癌的基礎(chǔ)和臨床實(shí)驗(yàn)研究多采用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。而將人肝癌細(xì)胞接種于裸鼠體內(nèi)建立的動(dòng)物模型是最接近人類肝癌的整體實(shí)驗(yàn)和最理想的動(dòng)物模型。以裸鼠為載體的人肝癌動(dòng)物模型包括：皮下移植瘤、腹水移植瘤和原位移植瘤等，其中皮下移植瘤模型主要是腫瘤細(xì)胞的增生，表現(xiàn)為瘤細(xì)胞數(shù)目的增多和腫瘤質(zhì)量的增加，藥物實(shí)驗(yàn)易于觀察，成瘤率高，操作簡(jiǎn)單，應(yīng)用較多[11-12]?；跒楦伟?shí)驗(yàn)和臨床研究以及藥物篩選提供體內(nèi)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的目的，本研究建立了人肝癌組織裸鼠移植瘤模型，對(duì)其體內(nèi)抑瘤、誘導(dǎo)凋亡及其凋亡機(jī)制進(jìn)行研究。

本研究將2×106/mL的Bel-7402細(xì)胞接種于裸鼠左側(cè)背部皮下，結(jié)果發(fā)現(xiàn)10 d后可在裸鼠左側(cè)背部皮下觸及腫瘤結(jié)節(jié)，瘤徑約6 mm，成瘤率100%，分別每日腹腔注射給予20、40、80 mg/kg的Myr，3周后剝?nèi)×鰤K發(fā)現(xiàn)，Myr組裸鼠腫瘤的生長(zhǎng)明顯受到抑制，隨著給藥劑量的增加，瘤塊體積逐漸減小，瘤質(zhì)量也減少，提示Myr體內(nèi)可明顯抑制Bel-7402的生長(zhǎng)，作用與劑量有關(guān)。

腫瘤的發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞過(guò)度增殖以及細(xì)胞死亡速度減慢有關(guān)，其發(fā)生的過(guò)程必定伴有細(xì)胞凋亡（apoptosis）這一程序性死亡過(guò)程[13-14]。細(xì)胞凋亡是在多因素觸發(fā)、多基因嚴(yán)格控制下進(jìn)行的[15]，不僅參與機(jī)體組織的正常發(fā)育、分化與死亡等，在腫瘤治療中也發(fā)揮極大的作用[16-17]。細(xì)胞周期（cell cycle）是指連續(xù)分裂的細(xì)胞從一次分裂結(jié)束到下一次有絲分裂完成所經(jīng)歷的整個(gè)連續(xù)過(guò)程，可分為S期、G2期、M期和G1期。誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的機(jī)制很多，涉及多種抗凋亡基因和促凋亡基因的參與，Bcl-2和Bax被認(rèn)為是目前研究凋亡調(diào)節(jié)機(jī)制中最重要的基因之一，其中Bcl-2是重要的凋亡抑制基因，可通過(guò)阻止線粒體細(xì)胞色素C的釋放發(fā)揮抗凋亡作用[18-20]，因此其表達(dá)升高，細(xì)胞趨向成活；Bax是Bcl-2家族成員之一，但作用與其相反，屬促凋亡基因，Bax表達(dá)升高，細(xì)胞趨向凋亡。

本研究采用TUNEL凋亡試劑盒研究Myr對(duì)Bel-7402細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果表明，Myr干預(yù)Bel-7402細(xì)胞48 h后，能夠有效誘導(dǎo)Bel-7402細(xì)胞凋亡。各劑量組在G2～M期比例明顯高于同期對(duì)照組，而S期和G2～M期比例僅是略有減少，與對(duì)照組無(wú)顯著差異，同時(shí)Myr能夠促進(jìn)Bax蛋白的表達(dá)，抑制Bcl-2蛋白的表達(dá)。由此提示Myr可通過(guò)作用于Bcl-2家族誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并將細(xì)胞周期阻滯在G2～M期，從而使腫瘤細(xì)胞的增殖能力降低。由于抗腫瘤作用機(jī)制極其復(fù)雜，尚有其他機(jī)制，還需進(jìn)一步研究。

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Inhibition of Myricetin on tmnsPlantation tumor of nude mice with human hePatoma cell

LI Youfu LI Weilin▲
Department of Pharmacy,Xiangyang Central Hospital Affiliated to Hubei University of Arts and Science,Hubei Province,Xiangyang 441021,China

Objective To study the influence of Myricetin (Myr)on human hepatoma Bel-7402 cell multiplication, apoptosis and its mechanism in vivo and in vitro.Methods Bel-7402 cells were cultured in vitro,MTT and SRB were performed to observe the proliferation.The 25 BALB/C-nu nude mice of SPF lever were made Bel-7402 cell xenografts model,and they were divided into five groups,control group,5-Fu(25 mg/kg)positive control group,Myr(20,40,80 mg/kg) three doses groups.After 3 weeks drug abdominal injection,killed mice,the tumor was weighed and tumor-inhibition rate was counted.TUNEL was used for measuring the apoptosis,FACS was used for measuring the cell cycle;Immunohistochemistry was used for detecting Bax and Bcl-2 content.Results By MTT and SRB detection,Myr could inhibit Bel-7402 cell proliferation in vitro,and it showed dosage dependent.After 3 weeks drug abdominal injection,tumor mass of Myr(20,40,80 mg/kg)three doses groups were compared with control group,the differences were statistically significant(P＜0.01);apoptosis rate of Bel-7402 cell of Myr(20,40,80 mg/kg)three doses groups were compared with control group,the differences were statistically significant(P＜0.01),Myr arrested cell cycle in G2-M phase.Myr promoted Bax expression(P＜0.05 or P＜0.01),and inhibited Bcl-2 expression(P＜0.05 or P＜0.01).Conclusion Myr can inhibit the proliferation of Bel-7402 cells and induce apoptosis,the mechanism involves Bcl-2 family.

Myricetin;Bel-7402;Proliferation;Apoptosis;Nude mice;Bax;Bcl-2

R285.5

A

1673-7210（2015）11（a）-0044-04

2015-07-02本文編輯：蘇 暢）

▲通訊作者