梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)假陽(yáng)性1例報(bào)告

曾建濤 李泉 楊丹

（1.重慶市長(zhǎng)壽區(qū)人民醫(yī)院；2.重慶市長(zhǎng)壽區(qū)中醫(yī)院，重慶 401220）

梅毒螺旋體是一種密螺旋體，感染人體可引起梅毒。檢測(cè)梅毒螺旋體的方法很多，血清學(xué)實(shí)驗(yàn)仍然是最主要的方法［1］。其中梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）特異性和敏感性較高［2］。但TPPA試驗(yàn)也存在一定的假陽(yáng)性率，筆者于2014年7月收治1例TPPA 試驗(yàn)假陽(yáng)性的病例，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 患者，男，44歲，主訴：梅毒復(fù)診?；颊?年前在外院診斷為梅毒。

1.2 儀器與試劑（1）TPPA 試劑由富士瑞比歐株式會(huì)社生產(chǎn)，自身抗體譜試劑由歐蒙公司提供。（2）IgG、IgA、IgM、補(bǔ)體C3，C4、RF、ASO 和CRP 應(yīng)用羅氏全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 TPPA 試驗(yàn)和自身抗體譜檢測(cè)嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)操作。吸收試驗(yàn)方法為：取未致敏粒子0.95mL至小試管中，加入患者血清50μL混勻，室溫放置30min。離心5min后，吸取上清液進(jìn)行對(duì)倍稀釋。最后在第3 孔加入未致敏粒子25μL，第4孔加入致敏粒子25μL，振蕩混勻，室溫靜置2h后觀察結(jié)果。

2 結(jié)果

TPPA 試驗(yàn)未致敏孔顯示為陽(yáng)性，致敏孔顯示為弱陽(yáng)性（圖1），此結(jié)果表明TPPA 試驗(yàn)受到干擾，結(jié)果為假陽(yáng)性。吸收試驗(yàn)結(jié)果顯示未致敏孔和致敏孔均為陰性（圖1），確定該患者TPPA 試驗(yàn)為陰性。

圖1 TPPA 試驗(yàn)結(jié)果

為研究TPPA 假陽(yáng)性的原因，筆者對(duì)常見(jiàn)的干擾因素進(jìn)行了分析?；颊哐錓gG 10.57g／L，IgA 2.08g／L、IgM 3.23g／L、補(bǔ)體C3 1.13g／L和補(bǔ)體C4 0.45g／L；RF 14.00IU／mL，ASO 41IU／mL，CRP 1.00mg／L；其中除IgM 升高外，其他結(jié)果均正常。檢測(cè)吸收試驗(yàn)后的血清，換算后IgM 為3.19g／L，無(wú)明顯變化，表明干擾并非由IgM 引起。為排除自身免疫抗體的干擾，應(yīng)用免疫印跡法對(duì)患者血清進(jìn)行自身抗體譜的檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。

3 討論

梅毒是由梅毒螺旋體引起的一種性傳播疾病，TPPA 是針對(duì)梅毒特異性抗體的試驗(yàn)，其原理為梅毒特異性抗體與包被在明膠顆粒上純化的梅毒螺旋體Nichols株發(fā)生凝集反應(yīng)。

明膠顆粒是直徑3 μm 左右的球體。相比TPHA 試驗(yàn)中用紅細(xì)胞做載體，明膠顆粒穩(wěn)定性更好，免疫原性較弱，可減少非特異性反應(yīng)的發(fā)生。

目前對(duì)引起明膠顆粒非特異性反應(yīng)的物質(zhì)并不十分清楚［3］，文獻(xiàn)［4－5］報(bào)道的常見(jiàn)干擾因素有RF、Ds－DNA 和免疫球蛋白制劑等。本文檢測(cè)了常見(jiàn)的干擾因素，仍未找到真正原因。未找到干擾因素時(shí)可通過(guò)未致敏粒子提供的抗原表位對(duì)干擾物質(zhì)進(jìn)行吸收試驗(yàn)，從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

在明膠粒子凝集反應(yīng)的其他試驗(yàn)，包括肺炎支原體抗體、HIV 抗體等的檢測(cè)中，也存在類(lèi)似的干擾。在臨床試驗(yàn)中必須重視未致敏孔結(jié)果的觀察，才可避免錯(cuò)誤報(bào)告的發(fā)生。

［1］Morshed MG.Current trend on syphilis diagnosis：issues and challenges［J］.Adv Exp Med Biol，2014，808：51－64.

［2］顧友祥，姜俊.多種梅毒抗體檢測(cè)方法的比較［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（4）：391－392.

［3］隆維東，劉萬(wàn)彬，李堅(jiān).血清不明抗體干擾TPPA 試驗(yàn)一例［J］.海南醫(yī)學(xué)，2013，24（1）：142－143.

［4］Serwin AB，Chodynicka B.Serological diagnosis of syphiliscurrent problems and controversies［J］.Przegl Epidemiol，2009，63（4）：519－523.

［5］Lautenschlager S.Diagnosis of syphilis：clinical and labo－ratory problems［J］.Dtsch Dermatol Ges，2006，4（12）：1058－1075.