追趕生長(zhǎng)大鼠SIRT1－PPAR－α相關(guān)肝臟胰島素抵抗的機(jī)制及飲食干預(yù)

谷成英 賀艷菊 王朝迅 曾藝鵬 周里鋼

（復(fù)旦大學(xué)附屬浦東醫(yī)院內(nèi)分泌科 上海 201399）

追趕生長(zhǎng)是指營(yíng)養(yǎng)缺乏導(dǎo)致的生長(zhǎng)抑制在營(yíng)養(yǎng)恢復(fù)后可出現(xiàn)代償性生長(zhǎng)，在發(fā)展中國(guó)家普遍存在。動(dòng)物研究表明，追趕生長(zhǎng)大鼠發(fā)生基因的表觀遺傳學(xué)改變，如肝細(xì)胞過(guò)氧化物酶體增殖活化受體γ共激活因子－1（peroxisome proliferator activated receptor gamma coactivator－1，PGC－1）和肉毒堿脂?；D(zhuǎn)移酶的基因組蛋白H3／K9乙?；皆黾?，可引起PGC－1α的增加及肉毒堿脂?；D(zhuǎn)移酶表達(dá)降低，可導(dǎo)致肝糖輸出增加及肝細(xì)胞脂肪酸B氧化障礙，引起肝臟糖脂代謝紊亂［1－2］及脂肪肝，后者是我國(guó)2型糖尿病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。因此，研究追趕生長(zhǎng)導(dǎo)致2型糖尿病的機(jī)制對(duì)于我國(guó)2型糖尿病的早期防治至關(guān)重要。SIRT1通過(guò)感受細(xì)胞內(nèi)NAD＋水平而活性受到調(diào)節(jié)，具有組蛋白去乙酰化和非組蛋白去乙?；饔茫墙M蛋白包括PGC－1α／過(guò)氧化物酶體增殖活化受體α（peroxisome proliferator activated receptorα，PPARα）、核因子－κB（nuclear factor－kappa B，NF－κB）等分子［3］。主要在肝細(xì)胞合成的糖脂代謝調(diào)節(jié)因子成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21（fibroblast growth factor 21，F(xiàn)GF21），通過(guò)作用于肝細(xì)胞 PPAR－α受體而受到調(diào)節(jié)［4－5］，調(diào)節(jié)FGF21可通過(guò)磷酸化的ERK1／2／GLUT1信號(hào)通路而改善肝細(xì)胞胰島素抵抗，可促進(jìn)胰腺胰島素的分 泌［6］。因此，SIRT1－PPARα／PGC－1α－FGF21 或SIRT1／NF－κB的作用環(huán)節(jié)可反應(yīng)肝細(xì)胞乙?；瘜?duì)肝臟糖脂代謝、免疫炎性反應(yīng)和胰島素分泌過(guò)程的影響。追趕生長(zhǎng)狀態(tài)下，SIRT1如何通過(guò)肝臟乙?；接绊懸葝u素抵抗及SIRT1在飲食干預(yù)中的作用如何，其機(jī)制不明。因此，本研究以普通飲食為對(duì)照組，通過(guò)觀察肝細(xì)胞 SIRT1－PPARα／PGC－1α及下游相關(guān)分子的變化，研究追趕生長(zhǎng)導(dǎo)致脂肪肝改變、胰島素抵抗和糖脂代謝紊亂的影響機(jī)制以及低熱卡飲食的干預(yù)機(jī)制，這對(duì)于防止2型糖尿病的發(fā)生有著重要意義。

材料和方法

動(dòng)物模型 6周齡SPF級(jí)雄性SD大鼠24只，體質(zhì)量140～160 g，飼養(yǎng)于同濟(jì)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，室溫控制在（22±1）℃，晝夜節(jié)律為12 h：12 h。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，分別單籠喂養(yǎng)，自由飲水。大鼠隨機(jī)分為3組，即對(duì)照組8只，高脂追趕生長(zhǎng)模型組（簡(jiǎn)稱(chēng)模型組）8只，飲食干預(yù)組8只。對(duì)照組一直以普通飼料喂養(yǎng)。追趕生長(zhǎng)模型在適應(yīng)性喂養(yǎng)結(jié)束以后，改喂以60%熱卡限制的普通飼料4周，普通飲食的熱能構(gòu)成比為：蛋白質(zhì)22．4%，脂肪11．8%，碳水化合物65．8%；之后給予高脂飼料，分為模型和飲食干預(yù)組，模型組隨后一直給予高脂飲食；飲食干預(yù)組在限食4周后給與高脂飲食喂養(yǎng)6周，然后恢復(fù)到普通飲食喂養(yǎng)，自由進(jìn)食6周。高脂飼料營(yíng)養(yǎng)成分中，粗蛋白、脂肪及碳水化合物含量（百分比）分別為21．3（19%）、21（42%）和43．8（39%）。普通飲食與高脂飼料由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司提供。

口服葡萄糖耐量和胰島素釋放功能實(shí)驗(yàn) 大鼠禁食15 h，按2 g／kg 50%葡萄糖灌胃做口服葡萄糖耐量測(cè)試（oral glucose tolerance test，OGTT）。用美國(guó)羅氏血糖儀檢測(cè)0、15、30、60、120 min時(shí)的血糖，并用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)其血清胰島素水平，計(jì)算葡萄糖曲線下面積、胰島素曲線下面積、胰島素抵抗指數(shù)（HOMA－IR）；殺鼠前1周同樣方法做OGTT、胰島素釋放功能實(shí)驗(yàn)（the insulin release test，IRT）。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中檢測(cè)肝功能、血脂、糖化血紅蛋白（glycosylated hemoglobin，HBA1C）?？偰懝檀迹╰otal cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白（low densith lipoprotein，LDL）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）及游離脂肪酸（free fatty acid，F(xiàn)FA）以酶法檢測(cè)，HBA1C以高壓液相法檢測(cè)。

動(dòng)物處理 每周稱(chēng)重1次，計(jì)算各組大鼠生長(zhǎng)中體質(zhì)量變化，描繪各組大鼠生長(zhǎng)曲線，觀察限食期間及開(kāi)放飲食期間，各組大鼠的生長(zhǎng)特點(diǎn)；處死前1周行OGTT（羅氏卓越血糖檢測(cè)儀）和IRT（ELISA方法）。處死前大鼠稱(chēng)重，禁食12h后，腹腔注射20%烏拉坦（5 mL／kg體質(zhì)量）麻醉動(dòng)物，固定，局部消毒后打開(kāi)腹腔，從腹主動(dòng)脈采血，室溫下放置約10 min后，2 000×g離心10 min，取上清至無(wú)菌EP管中，－20℃保存，留取血樣查谷丙轉(zhuǎn)氨酶、HBA1C、TG、TC、LDL、HDL、FFA；迅速分離肝臟、附睪脂肪和腎周脂肪，在無(wú)菌條件下稱(chēng)肝臟濕重，計(jì)算肝臟指數(shù)（肝臟重量與大鼠體質(zhì)量的比值），取附睪與腎周脂肪稱(chēng)重，計(jì)算內(nèi)臟體脂，即：（附睪脂肪＋腎周脂肪）與大鼠體質(zhì)量比值；取部分肝臟用4%的甲醛固定，留作石蠟包埋、切片后的肝臟HE染色；每組取兩只大鼠肝臟組織以戊二醛固定，留作透射電鏡觀察肝臟超微結(jié)構(gòu)；取另一部分肝臟放置－70℃保存。

肝細(xì)胞SIRT1、FGF21、NF－KB蛋白含量 以Western blot檢測(cè)；抗SIRT1抗體（批號(hào)：ab110304，英國(guó)Abcam公司）；抗FGF21抗體（批號(hào)LS－B5864，美國(guó)LifeSpan BioSciences公司）；抗NF－κB p65抗體（批號(hào)：sc－372，美國(guó)santa cruz biotechnology公司）。

real－time PCR檢測(cè)PPAR－α、PGC－1α基因 mRNA表達(dá)水平 大鼠肝細(xì)胞PPAR－α、PGC－1α分子引物序列 如 下：PGC－1α：5′－CGCACAACTCAGCAAGTCCTC－3′ （正向），5′－CCTTGCTGGCCTCCAAAGTCTC－3′（反向 ）。PPAR－α：5′－GTGGCTGCTATAATTTGCTGTG－3′（正 向 ），5′－GAAGGTGTCATCTGGATGGGT（反向）。real－time PCR實(shí)驗(yàn)用 T熒光定量PCR試劑盒（中國(guó)寶生物工程大連有限公司），按說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行。

胰島素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、血脂的檢測(cè) 采用ELISA方法檢測(cè)胰島素，批內(nèi)及批間變異系數(shù)均小于10%；谷丙轉(zhuǎn)氨酶以IFCC法檢測(cè)胰島素，TG、TC及FFA以酶法檢測(cè)，HBA1C采用高壓液相法檢測(cè)，均由德國(guó)羅氏診斷公司提供；LDL及HDL以免疫分離法檢測(cè)，由日本第一化學(xué)藥品株式會(huì)社提供試劑盒。

電鏡技術(shù) 取肝臟切成1 mm3小塊固定于2%戊二醛固定液，反復(fù)洗滌后用1%鋨酸溶液作用后固定，酒精系列脫水，環(huán)氧樹(shù)脂包埋，LKB超薄切片機(jī)切片，醋酸鈾與檸檬酸鉛染色，H－600型電子顯微鏡觀察與照相。切片制作及顯微鏡觀察和照相均在上海中醫(yī)藥大學(xué)病理科完成。

葡萄糖、胰島素曲線面積及HOMA－IR的計(jì)算葡萄糖曲線下面積和胰島素曲線下面積的計(jì)算依據(jù)不規(guī)則梯形公式。HOMA－IR＝空腹胰島素（uIU／mL）×空腹血漿血糖（mmol／L）÷22．5。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 利用SPSS 18軟件分析檢驗(yàn)資料的正態(tài)性和方差齊性，非正態(tài)分布的資料進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換使其符合正態(tài)分布，數(shù)據(jù)以±s表示，兩兩比較采用LSD法，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。統(tǒng)計(jì)圖表的制作在Graphpad Prism5上完成。

結(jié) 果

大鼠能量吸收及生長(zhǎng)情況 按照每周稱(chēng)重得到的生長(zhǎng)曲線顯示，追趕生長(zhǎng)大鼠組在60%限食期間生長(zhǎng)停滯，開(kāi)放高脂飲食后1周出現(xiàn)快速增長(zhǎng)，干預(yù)前模型組體質(zhì)量增長(zhǎng)仍不及對(duì)照組，但此后持續(xù)增長(zhǎng)，明顯大于其他組（動(dòng)物處理前3周模型組與對(duì)照組比較P值分別為0．038，0．05，0．031）?；謴?fù)正常飲食的追趕生長(zhǎng)大鼠，即飲食干預(yù)組，體質(zhì)量明顯低于模型組（動(dòng)物處理前4周P值分別為0．034，0．001 6，0．003，0．002 7，圖1）。

圖1 大鼠生長(zhǎng)曲線Fig 1 Growth curve of rats

OGTT及IRT結(jié)果 大鼠追趕生長(zhǎng)早期OGTT及IRT實(shí)驗(yàn)顯示，追趕生長(zhǎng)組大鼠60 min血糖明顯高于對(duì)照組（P＝0．011），120 min仍未回到餐前狀態(tài)；其胰島素水平低平，胰島素曲線下面積明顯降低（P＝0．012，表1）；干預(yù)結(jié)束時(shí)模型組空腹胰島素明顯增高，胰島素曲線下面積明顯增高（P均值為0．006）。各組葡萄糖曲線下面積差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表2）；模型組HOMA－IR明顯高于對(duì)照組（P＝0．026），飲食干預(yù)明顯改善空腹胰島素、胰島素曲線下面積及HOMA－IR（P值分別為0．033，0．037，0．039，表2）。

表1 大鼠追趕生長(zhǎng)早期葡萄糖耐量試驗(yàn)及胰島素釋放功能特點(diǎn)分析Tab 1 The analysis of glucose tolerance test and insulin release function in the earlier period of catch－up growth in rats

表2 飲食干預(yù)對(duì)追趕生長(zhǎng)大鼠糖脂代謝、胰島素抵抗、肝功能及內(nèi)臟脂肪、肝臟指數(shù)的影響Tab 2 Effect of dietary intervention on glucose and lipid metabolism，insulin resistance，liver function，visceral fat and liver index in rats with catch－up growth （±s）

表2 飲食干預(yù)對(duì)追趕生長(zhǎng)大鼠糖脂代謝、胰島素抵抗、肝功能及內(nèi)臟脂肪、肝臟指數(shù)的影響Tab 2 Effect of dietary intervention on glucose and lipid metabolism，insulin resistance，liver function，visceral fat and liver index in rats with catch－up growth （±s）

TG：Triglyceride；TC：Total cholesterol；FFA：Free fatty acid；ALT：The natural logarithm of alanine amiotransferase；HBA1C：Glycosylated hemoglobin；FPG：Fasting plasma glucose；FIN：The natural logarithm of fasting insulin；HOMA－IR：Insulin resistance index；AUCG：The area under glucose curve；AUCIN：The area under insulin curve；Liver weight：Wet liver weight；P1：Pvalue of CUGFR group vs．NC group；P2：P value of Diet－G group vs．CUGFR group．

Item（unit）NC CUGFR Diet－G P1 P2 TG（mmol／L）0．768±0．13 0．815±0．27 0．972±0．10 0．710 0．250±0．29 1．766±0．66 0．690 0．470 TC（mmol／L）1．464±0．411．545 LDL－C （mmol／L） 0．193±0．12 0．538±0．20 0．22±0．16 0．006 0．020 HDL－C （mmol／L） 1．133±0．40 0．925±0．10 1．558±0．48 0．198 0．011 FFA （mmol／L） 0．466±0．11 0．345±0．08 0．612±0．19 0．031 0．011 ALT （IU／L） 3．49±0．07 4．10±0．38 3．74±0．14 0．004 0．083 HBA1c／% 3．85±0．11 3．86±0．10 3．83±0．09 0．850 0．550 FPG （mmol／L） 6．58±1．19 6．0±0．37 6．73±0．69 0．280 0．059 FIN （ng／mL） 1．575±0．340 2．429±0．387 1．401±0．803 0．006 0．033 HOMA－IR 1．75±0．98 3．22±1．30 1．59±0．69 0．026 0．039 AUCG （mmol／L） 1171．42±83．93 1163．5±46．81 1284．13±150．14 0．875 0．096 AUCIN （ng／mL） 80．39±44．04 185．48±46．68 104．17±55．34 0．006 0．037 Weight（g） 774．5±39．2 786±48．3 674．6±33．1 0．101 0．002 Liver weight（g） 17．14±1．78 31．67±2．47 17．96±1．9 0．000 0．000 Liver index 2．31±0．25 4．03±0．17 2．66±0．22 0．000 0．000 Visceral fat（g） 31．94±6．41 42．55±10．62 25．4±7．57 0．038 0．015 Visceral fat index 4．29±0．82 5．40±1．24 3．75±1．07 0．018 0．015

飲食干預(yù)對(duì)糖脂代謝及肝功能的影響 高脂飲食喂養(yǎng)的模型組，LDL－C明顯增高（P＝0．006），游離脂肪酸明顯降低（P＝0．031）。低熱卡的飲食干預(yù)組，LDL－C明顯降低（P＝0．02），HDL、游離脂肪酸較模型組明顯增高（P＝0．011）。追趕生長(zhǎng)后期模型組糖化血紅蛋白較對(duì)照組無(wú)明顯異常（P＝0．85）。追趕生長(zhǎng)后期有輕度肝功能不良，模型組谷丙轉(zhuǎn)氨酶較對(duì)照組差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0．004），飲食干預(yù)組有減輕肝功能異常的趨勢(shì)（P＝0．083），但較對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表2）。

追趕生長(zhǎng)對(duì)內(nèi)臟脂肪及肝臟指數(shù)的影響及飲食的干預(yù)作用：與正常對(duì)照組比較，追趕生長(zhǎng)大鼠肝臟濕重、肝臟指數(shù)、內(nèi)臟脂肪、內(nèi)臟脂肪指數(shù)均明顯增加（P 分別為0．000，0．000，0．038，0．018），而在飲食干預(yù)下上述指標(biāo)可明顯減少（P分別為0．000，0．000，0．015，0．015，表2）。

飲食干預(yù)對(duì)追趕生長(zhǎng)大鼠肝臟病理及超微結(jié)構(gòu)的影響 肝臟HE染色顯示：模型組大鼠肝組織內(nèi)大量的脂滴沉積，有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，飲食干預(yù)組大鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)明顯恢復(fù)，仍有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，未見(jiàn)明顯脂滴（圖2）。

肝臟透射電鏡顯示：模型組大鼠脂滴多，可融合，線粒體脊多消失，線粒體膜消失；核膜不完整，可見(jiàn)核膜孔，飲食干預(yù)組脂滴很少，線粒體嵴可見(jiàn)，但排列紊亂，內(nèi)可見(jiàn)脂質(zhì)包涵體及空泡，核膜較厚但完整，核居邊（圖2）。

追趕生長(zhǎng)大鼠NF－κB、SIRT1、FGF21、PPAR－α、PGC－1α相關(guān)分子異常及飲食干預(yù) 追趕生長(zhǎng)大鼠NF－κB明顯增高（P＝0．036），而SIRT1、FGF21蛋白及PPAR－α基因表達(dá)明顯降低（P分別為0．041，0．048，0．035），PGC－1α表達(dá)增加（P＝0．129），但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。飲食干預(yù)可明顯增加SIRT1水平（P＝0．034），對(duì)FGF21、NF－κB、PPAR－α、PGC－1α的影響則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖3、4）。

討 論

中國(guó)等發(fā)展中國(guó)家在經(jīng)歷嚴(yán)重饑荒40～50年后出現(xiàn)2型糖尿病患病率的大幅增長(zhǎng)［7－8］，提示飲食缺乏因素可能會(huì)對(duì)整個(gè)國(guó)家人群的基因產(chǎn)生影響。因而在此背景下存在著大量飲食缺乏生長(zhǎng)抑制后的快速生長(zhǎng)，即追趕生長(zhǎng)現(xiàn)象。近年來(lái)，越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)為，肝臟是2型糖尿病發(fā)病的源頭，脂肪肝是2型糖尿病的危險(xiǎn)因素，但追趕生長(zhǎng)導(dǎo)致肝臟糖脂代謝紊亂及脂肪肝的機(jī)制至今未明。

圖2 肝細(xì)胞透射電鏡與肝臟HE染色Fig 2 Transmission electron microscopy of liver cells and liver HE staining

肝臟胰島素抵抗是非酒精性脂肪肝發(fā)病的中心環(huán)節(jié)，免疫炎癥、氧化應(yīng)激是重要的發(fā)病因素［9－10］，本研究顯示，追趕生長(zhǎng)大鼠存在明顯的糖脂代謝異常、炎性因子的增高及胰島素抵抗，這與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致［11］。本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ头从车氖墙?jīng)過(guò)限食階段后開(kāi)放高脂飲食的追趕生長(zhǎng)狀況及機(jī)制。不同于生理情況的是，經(jīng)歷限食階段后，在高脂飲食狀況下SIRT1及相關(guān)肝細(xì)胞代謝分子PPARa、FGF21明顯降低，經(jīng)歷CR階段后，高脂飲食明顯降低SIRT1及相關(guān)肝細(xì)胞代謝分子PPARα、FGF21，PGC－1α變化并不明顯。分析可能是下面原因綜合作用的結(jié)果：（1）隨著SIRT1降低，PGC－1α與之形成的復(fù)合物減少，PGC－1α下降；（2）SIRT1降低時(shí)肝細(xì)胞PGC－1基因組蛋白乙?；皆黾?，PGC－1α表達(dá)增加。追趕生長(zhǎng)大鼠肝細(xì)胞降低的SIRT1、PPARα與FGF21對(duì)于胰島素分泌的影響是，出現(xiàn)明顯的高胰島素血癥及胰島素抵抗，脂肪肝進(jìn)行性加重，表現(xiàn)明顯的脂肪肝病理特征、輕度肝功能異常。追趕生長(zhǎng)所導(dǎo)致的SIRT1－PPAR－α相關(guān)的肝臟胰島素抵抗信號(hào)通路病理機(jī)制，以及SIRT1對(duì)胰腺胰島素分泌的影響途徑，還需進(jìn)一步研究。

飲食干預(yù)是2型糖尿病防治的基礎(chǔ)環(huán)節(jié)?；谏鲜霭l(fā)病機(jī)制，對(duì)于普遍存在著追趕生長(zhǎng)的發(fā)展中國(guó)家，飲食干預(yù)尤其重要。文獻(xiàn)顯示，SIRT1可增加肝細(xì)胞PPAR－α表達(dá)［12］，食用含糖指數(shù)低的糙米，可增加肝細(xì)胞SIRT1的表達(dá)而改善糖尿病前期患者代謝參數(shù)，如內(nèi)臟脂肪含量，降低炎癥標(biāo)志物［13－14］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，低熱卡飲食能明顯提高肝細(xì)胞SIRT1蛋白水平，明顯降低體質(zhì)量、內(nèi)臟脂肪及肝臟指數(shù)，脂肪肝病理結(jié)構(gòu)明顯好轉(zhuǎn)，胰島素抵抗及肝功能有明顯改善，此與文獻(xiàn)報(bào)道一致；推測(cè)低熱卡飲食可能通過(guò)增強(qiáng)體內(nèi)SIRT1介導(dǎo)的去乙?；饔茫?jīng)SIRT1－PPAR－α－FGF21路徑調(diào)節(jié)肝臟糖脂代謝及脂肪肝，從而影響胰島素抵抗程度及胰島分泌功能。

上述分析表明，肝細(xì)胞乙?；皆龈咚鶎?dǎo)致的糖脂代謝相關(guān)分子表達(dá)異常，可能是導(dǎo)致追趕生長(zhǎng)后肝臟胰島素抵抗及胰島素釋放功能異常的重要機(jī)制，低熱卡飲食干預(yù)有可能通過(guò)改變體內(nèi)乙?；椒乐?型糖尿病的發(fā)生。

圖3 SIRT1、FGF21、NF－κB蛋白水平及PPAR-α、PGC－1α基因表達(dá)Fig 3 Protein levels of SIRT1，F(xiàn)GF21，NF－κB and the gene expression of PPAR－α，PGC－1α

圖4 SIR1、FGF21和NF－κB蛋白電泳結(jié)果Fig 4 Protein electrophoresis results of SIRT1，F(xiàn)GF21and NF－κB

［1］ Simmons RA．Developmental origins of diabetes：the role of epigenetic mechanisms［J］．Curr Opin endocrinol，2007，1（14）：13－16．

［2］ Feil R．Environmental and nutritional effects on the epigenetic regulation of genes［J］．Mutat Res，2006，600（1－2）：46－57．

［3］ Yeung F，Hoberg JE，Ramsey CS，et al．Modulation of NF－kappaB－dependent transcription and cell survival by the SIRT1 deacetylase［J］．EMBO J，2004，23（12）：2369－2380．

［4］ Dushay J，Chui PC，Gopalakrishnan GS，et al．Increased fibroblast growth factor 21 in obesity and nonalcoholic fatty liver disease［J］．Gastroenterology，2010，139（2）：456－463．

［5］ Li H，F(xiàn)ang Q，Gao F，et al．Fibroblast growth factor 21 levels are increased in nonalcoholic fatty liver disease patients and are correlated with hepatic triglyceride［J］．J Hepatol，2010，53（5）：934－940．

［6］ 李婷婷，高麗昌，唐祿，等．成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子－21改善胰島素抵抗肝細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收及機(jī)制［J］．中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2012，28（3）：366－371．

［7］ van Abeelen AF，Elias SG，Bossuyt PM，et al．Famine Exposure in the Young and the Risk of Type 2 Diabetes in Adulthood［J］．Diabetes，2012，9（61）：2255－2260．

［8］ Li Y，He Y，Qi L，et al．Exposure to the Chinese Famine in Early Life and the Risk of Hyperglycemia and Type 2 Diabetes in Adulthood［J］．Diabetes，2010，10（59）：2400－2406．

［9］ Li L，Hai J，Li Z，et al．Resveratrol modulates autophagy and NF－κB activity in a murine model for treating nonalcoholic fatty liver disease［J］．Food Chem Toxicol，2014，63：166－173．

［10］ Gariani K，Philippe J，Jornayvaz FR．Non－alcoholic fatty liver disease and insulin resistance：from bench to bedside［J］．Diabetes Metab，2013，39（1）：16－26．

［11］ Hu X，Chen LL，Zheng J，et al．Increases in systemic and local stress：aprobable mechanism of visceral fat accumulation and insulin resistance in adult catch－up growth rats？［J］．Exp Biol Med，2013，238（1）：57－65．

［12］ Caton PW，Holness，MJ，Bishop－Bailey D，et al．PPAR alpha－LXR as a novel metabolostatic signalling axis in skeletal muscle that acts to optimize substrate selection in response to nutrient status［J］．Biochem J，2011，437（3）：521－530．

［13］ Martínez I，Lattimer JM，Hubach KL，et al．Gut microbiome composition is linked to whole grain－induced immunological improvements［J］．ISME J，2013，7（2）：269－280．

［14］ Wang B，Raj M，Xu J，et al．Effects of a whole rice diet on in prediabetes［J］．e－SPEN ，2013，8（1）：15－20．