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    電子鼻檢測量化清熱藥四氣五味的研究

    2015-11-12 03:58:42盛良唐德才王光耀張亞王興華陳建偉徐陸周何敏張繼
    江蘇中醫(yī)藥 2015年11期
    關(guān)鍵詞:靛玉藥性電子鼻

    盛良 唐德才 王光耀 張亞 王興華 陳建偉 徐陸周 何敏 張繼

    (南京中醫(yī)藥大學,江蘇南京 210023)

    電子鼻檢測量化清熱藥四氣五味的研究

    盛良 唐德才 王光耀 張亞 王興華 陳建偉 徐陸周 何敏 張繼

    (南京中醫(yī)藥大學,江蘇南京 210023)

    目的:探討用電子鼻檢測量化中西藥物的四氣五味的方法與可行性。方法:用電子鼻檢測13味清熱中藥和2種西藥(氧化苦參堿、靛玉紅),觀察各藥主成分分析(PCA)和雷達圖的相似性和差異性,以此作為檢測量化依據(jù)。結(jié)果:本研究所檢測的清熱藥之間PCA、雷達圖有較高的相似性,與它們相近氣味相應。結(jié)論:電子鼻可以用于檢測量化中西藥的四氣五味。

    四氣五味 中藥檢測 電子鼻 清熱中藥

    中醫(yī)學認為,藥物都具有一定的性、味,通過了解中藥的四氣五味,分辨各種藥物的共性與個性,從而有針對性地運用于臨床。隨著中西醫(yī)結(jié)合的發(fā)展,學者們對現(xiàn)代醫(yī)學指標與中醫(yī)證型的關(guān)聯(lián)進行了深入研究并有了一定的發(fā)現(xiàn)。我們也開始研究使用現(xiàn)代醫(yī)學儀器檢測中藥的四氣五味?!端貑枴ち?jié)藏象論》曰:“五氣入鼻藏于心肺”,“五味入口藏于腸胃”,中藥的四氣五味肇始于鼻舌,口嘗鼻聞可謂是最古老的檢測中藥物質(zhì)能量的方法,后根據(jù)臨床發(fā)展成推理氣味。模擬鼻、舌的電子鼻舌已被廣泛運用于很多行業(yè)二十余年,技術(shù)十分成熟。由于電子鼻舌是在智能傳感器矩陣系統(tǒng)中配有不同類型的傳感器,能充分模擬復雜的鼻舌功能,因而能檢測鑒別氣味和味道。據(jù)此,我們試用電子鼻檢測量化中藥的四氣五味。本研究選擇了13味清熱中藥2種西藥(氧化苦參堿、靛玉紅),使用電子鼻檢測各藥物,分析主成分,繪制雷達圖,以觀察藥性近似的藥物經(jīng)電子鼻的檢測,結(jié)果有無相似性,現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

    1 實驗材料

    1.1 儀器電子鼻,Alpha M.O.S.,中國,αFOX 4000系統(tǒng)和αSOFTV9.1軟件,自動進樣器HS100。本儀器檢測靈敏度高,通??蛇_到PPb級。

    1.2 藥物13味中藥均為道地藥材,經(jīng)我校中藥鑒定專家王春根教授鑒定為正品;西藥根據(jù)筆者提出的假說選擇與本研究所檢測的中藥氣、味相近、相異者2種[1-3],均為中國藥品生物制品檢定所提供的化學對照品。藥物編號與性味見表1,中藥性味根據(jù)《中藥學》[4]。中藥均粉碎過80目篩,編號,備用。每味藥電子鼻檢測重復4次。

    表1 藥物編號與性味

    1.3 待測樣品中藥:稱取2g,加60mL蒸餾水,浸泡30min后煮30min,取1mL,裝入10mL樣品瓶中。西藥:稱10mg,加4mL水,超聲水浴20min,取1mL,裝入10mL樣品瓶中。

    1.4 電子鼻參數(shù)載氣:合成干燥空氣;流速:150mL/min;樣品準備:1mL樣品置于10mL樣品瓶中;頂空產(chǎn)生參數(shù):產(chǎn)生時間300s,產(chǎn)生溫度50℃,攪動速度500r/min;頂空注射參數(shù):注射體積1200μL,注射速度1200μL/s,注射針總體積2.5mL,注射針溫度60℃;獲取參數(shù):獲取時間120s。

    2 研究方法

    2.1 主成分分析(PCA)PCA是一種包含了向量分析和相關(guān)矩陣的分類技術(shù),通過旋轉(zhuǎn)數(shù)軸使數(shù)據(jù)間的最大差異性得以顯現(xiàn),通過計算得到一組新的數(shù)軸來捕捉整個數(shù)據(jù)集間的最大差異,用于挖掘有用的信息,給出具有不同氣味區(qū)域和簇的描述性圖表。PCA是從多個數(shù)值變量(指標)之間的相互關(guān)系入手,利用降維思想,將多個變量(指標)化為少數(shù)幾個互不相關(guān)的綜合變量(指標)的統(tǒng)計方法,其基本思想方法與中藥的四氣五味相類似。中藥藥性從中西醫(yī)結(jié)合觀點看,就是將復雜的中藥化學成分降維為四氣五味,筆者稱之為四氣五味宏觀化學成分[2]。

    2.2 差異指數(shù)差異指數(shù)是一無量綱的值,用于表示樣品間的差異,差異指數(shù)越小,表示相似性越大,反之,越小。

    3 研究結(jié)果

    見圖1—圖5,表2—表4。

    圖1 樣品27—30雷達圖

    圖2 樣品27—30 PCA

    表2 樣品27—30差異指數(shù)

    圖3 樣品31—34、36—40雷達圖

    表3 樣品27—34、36—40雷達圖PA/2、P30/1、P40/2數(shù)據(jù)

    圖4 樣品31—34、36—40 PCA

    圖5 樣品27、43、44 PCA

    表4 31—34、36—40差異指數(shù)

    4 討論

    4.1 驗證目的

    4.1.1 驗證中藥四氣五味與其功效相應能否使用現(xiàn)代科學儀器電子鼻檢測量化中藥物質(zhì)能量結(jié)構(gòu)四氣五味與功效關(guān)系,是本驗證的首要目的。分四類如下:氣、味相同,功效相近;氣、味相同,功效相異;氣同而味異,比其功效;味同而氣異,比其功效。因本驗證均為寒藥,故無氣異項。

    27—30是清熱瀉火藥,31—34是清熱燥濕藥,38—40是清熱解毒藥,以上三類同屬清熱藥,一同檢測,看電子鼻能否檢測出它們同屬清熱藥的共性,以及測出它們?yōu)a火、燥濕、解毒的子類共性。43芒硝屬攻下藥,44膽礬屬涌吐藥,27石膏屬清熱瀉火藥,3藥部分氣味相同相近并且化學成分相似,故設計此3藥,看能否檢測出區(qū)別。

    4.1.2 驗證西藥四氣五味中西藥同治一病,在臨床上早就會通,通過電子鼻檢測,可以驗證西藥也有中藥四氣五味藥性。36、37為中藥有效成分,根據(jù)筆者提出的假說[1-3],按照它們的Pka、log P值,其氣味預測如表1所示,36氧化苦參堿為清熱燥濕對照藥,37靛玉紅為清熱解毒對照藥。

    4.1.3 驗證中藥有效成分是否反映中藥藥性中藥有效成分是以現(xiàn)代醫(yī)藥的理化檢測結(jié)果為標準而稱其有效的,同樣難以納入中醫(yī)藥理論體系,本研究選用中藥及其有效成分進行對照,二者以中藥四氣五味為標準進行檢測,看有效成分是否反映中藥藥性。36氧化苦參堿是34苦參的有效成分,37靛玉紅是38青黛的有效成分,以此驗證有效成分也有氣、味,并且只能一定程度反映中藥藥性。

    4.2 驗證中藥四氣五味能量結(jié)構(gòu)與其功效相應

    4.2.1 清熱藥共性檢測27—30、31—34、38—40均為寒性藥,本類藥統(tǒng)稱清熱藥,屬藥性相同,功效相近。圖1、圖3雷達圖極為相似,從數(shù)據(jù)上看,各計數(shù)點幾乎重疊,僅在P40/2、P30/1、PA/2處有所差異,相差0.10~0.25,顯示其共性,詳見表3。從差異指數(shù)看,表2、表4顯示,樣品差異都不大,差異指數(shù)越小,表示相似性越大。本結(jié)果體現(xiàn)了同屬清熱藥為其共性,但其又可分為以下三個子類:

    清熱瀉火藥。27—30是清熱瀉火藥,本類藥多甘(苦)寒,清熱力較強,治火熱較盛證[5]172。本實驗所選此類藥27—30樣品相似度很高,尤其是樣品27、28、29,各個傳感器的響應值非常一致,基本上可以認為是同類物質(zhì)。從圖2可見,三者相距很近;表2可見差異指數(shù)很小,而30差異指數(shù)稍大。30與前三者不同的原因是:前三者(石膏、知母、天花粉)味甘辛苦,甘辛為陽主升,清氣分之火,主歸肺、胃經(jīng);30(梔子)味苦為陰主降,兼入血分,瀉血熱之火,涼血利濕,主歸心、肺、三焦經(jīng)。如果進一步分析,圖2中28、29相距更近,表2顯示它們差異指數(shù)小至0.0249,這是由于二藥(知母、天花粉)同為苦、甘,寒,如果說二藥之間的不同只是氣味程度不同;27與28、29差異指數(shù)稍大為0.0966、0.0725的原因是:27(石膏)甘、辛,大寒,較28(知母)、29(天花粉)多辛味,而后者較前者多苦味。所有異同,均因氣同味異,而導致功效不同,其檢測量化精確反映了傳統(tǒng)認識的正確性,連子類中的個體差異也能區(qū)別。

    清熱燥濕藥。31—34是清熱燥濕藥,本類藥多苦寒,清熱之中,燥濕力強[5]187。31黃芩、32黃連、33黃柏三藥性皆苦寒,體現(xiàn)氣、味相同,功效相似。但黃芩偏瀉上焦之火,歸肺、膽、脾、胃、大腸、小腸經(jīng);黃連偏瀉中焦之火,歸心、脾、胃、膽、大腸經(jīng);黃柏偏瀉下焦之火,歸腎、膀胱、大腸經(jīng)[7]。這是典型的氣味相同而功效不同,電子鼻亦檢測出其差異。表4顯示差異指數(shù):因31、32藥物差異指數(shù)小至0.0103,而圖4亦相近,可看成一組;同樣33與34藥物差異指數(shù)為0.0816,圖4相近,可看成另一組。這樣清熱燥濕藥可分成二組,體現(xiàn)氣、味相同,功效相異,同中有異。為何分成二組?由于濕熱所侵肌體部位不同,因而必須用相應歸經(jīng)的藥物予以治療。31、32歸經(jīng)偏上中焦,同歸膽、脾、胃、大腸經(jīng),與檢測結(jié)果一致;33、34歸經(jīng)偏下焦,當同歸腎、膀胱、大腸經(jīng),34苦參在教材中雖未見歸腎經(jīng),但《本草求真》記苦參:“專入腎”[6]。若再細分之,31、32差異指數(shù)小至0.0103,33與34差異指數(shù)為0.0816,二組相比,前者小于后者,故圖4見前者相近,后者相遠。

    清熱解毒藥。38—40是清熱解毒藥,本類藥性多苦寒,清熱之中更長于解毒[5]187。從圖4及表4差異指數(shù)可以看出,38青黛、39板藍根、40穿心蓮樣品相似度很高,三藥相距不遠,其差異指數(shù)不大,故為同類。但細分之,37靛玉紅與38在表4中差異指數(shù)小至0.0322,而在圖4中相近,可看成一組;39與40在表4中差異指數(shù)小至0.0260,而在圖4中相近,可看成另一組。這樣清熱解毒藥就和清熱燥濕藥一樣,也分成二組,體現(xiàn)同中有異。其原因是熱毒所侵肌體部位不同,因而必須用相應歸經(jīng)的藥物予以治療。39、40藥性同為苦寒,而38藥性咸寒,其味一苦一咸不同,味不同導致歸經(jīng)不同。39板藍根可用治外感風熱,發(fā)熱頭痛咽痛[7],當歸肺經(jīng),古醫(yī)書無入肺經(jīng)之說,新加后39、40同歸心、肺經(jīng)相似度大;37靛玉紅為38青黛的有效成分,歸經(jīng)、功效相似,故分別分成二組。同上例還可再細分之:37、38差異指數(shù)小至0.0322,39與40差異指數(shù)小為0.0260,兩組相比,前者大于后者,故在圖4中前者相遠,后者相近。

    4.2.2 清熱藥子類區(qū)分從圖4清熱燥濕藥與清熱解毒藥的圖形看,二者相互雜居,具有交叉性。(1)從圖4可見,31、32燥濕藥夾在37、38與39、40清熱解毒藥之中,從表4看,31與這四味中藥差異指數(shù)依次為0.0817、0.0566、0.0741、0.0982,32與這四味中藥差異指數(shù)依次為0.0906、0.0650、0.0651、0.0893,都較小,具有共性。對這六藥進行比較,我們發(fā)現(xiàn)其確有共性。如除均性寒清熱外,它們都能治呼吸系統(tǒng)疾病,從中醫(yī)歸經(jīng)來看,都可歸肺經(jīng)、大腸經(jīng),這是六藥共有藥性。32黃連、39板藍根例外,醫(yī)籍未載此二藥歸肺經(jīng),但黃連現(xiàn)代臨床用于治療肺結(jié)核、肺膿舯、呼吸道感染、百日咳等,板藍根可治感冒,可推測此二藥入肺經(jīng)[7]。由本例可見,電子鼻不僅能夠證明傳統(tǒng)中藥四氣五味上的正確與否,同時能夠補充古醫(yī)藥認識上的遺漏不足。(2)從圖4可見,34苦參燥濕藥與39、40清熱解毒藥相近,從表4可見,34與39、40差異指數(shù)小至0.0666、0.0448,而圖4中三藥相近,具有共性。34苦參雖列燥濕藥,但其歸經(jīng)與39、40有相似之處,如其功效殺蟲可謂清熱解毒。此七藥既反映了中藥氣、味相同,功效相近;也反映了氣、味相同,功效相異。

    可見,電子鼻既檢測區(qū)分這些藥物同屬清熱藥為其共性,又檢測出可分為三子類的差異性,同時也分別檢測出三子類中的同中有異,直至子類層次的個體差異等三個層次。可見,中藥的四氣五味可通過現(xiàn)代儀器進行檢測量化。

    4.3 驗證可從中藥四氣五味能量結(jié)構(gòu)與化學成分結(jié)構(gòu)的關(guān)系上會通中西藥現(xiàn)代藥物的化學成分是現(xiàn)代藥物實體結(jié)構(gòu)的載體,目前的藥物理化檢測就是以此為物質(zhì)基礎(chǔ)。中藥的化學成分復雜,目前只能從有效成分上說明功能狀態(tài),并且因兩種醫(yī)學體系而不能與西藥會通,能否找到一種現(xiàn)代儀器,既能從化學成分空間結(jié)構(gòu)上又能從物質(zhì)能量四氣五味結(jié)構(gòu)上統(tǒng)一檢測呢?本實驗證明可以用電子鼻檢測量化。27石膏主含CaSO4·2H2O、43芒硝主含Na2SO4·10H2O、44膽礬主含CuSO4·5H2O,三者化學成分、結(jié)構(gòu)相似,故其中藥藥性相似,雖不完全相同,但有其共性。電子鼻檢測數(shù)據(jù)顯示,43與44幾乎一致,27與43、44數(shù)據(jù)絕大部分相同,其總體相同性占86.1%,相異性占13.9%,這和它們的化學成分結(jié)構(gòu)有較大相似性是一致的,詳見圖5?;瘜W成分同中有異,導致氣味同中有異,根據(jù)筆者假說,金屬元素給出電子而吸收能量為寒[7],以上三中藥的正離子均屬金屬元素,故其氣同為寒性,功效清熱瀉火。由于三者給出電子的能力有大小不同,其氣寒程度也有不同,與氣平衡的味的大小也相應不同,在化學成分上就表現(xiàn)為所含H2O數(shù)多少不同。本類屬氣同而味異,致其功效同中有異:27石膏,甘辛寒,清熱瀉火,治胃火牙痛、頭痛、實熱消渴等,火煅有斂瘡生肌、收濕、止血等作用;43芒硝,咸苦辛寒,寒清熱瀉火,咸苦辛潤燥,攻下通便,可治積滯便秘、咽痛、口瘡、目赤、癰瘡腫痛等;44膽礬,酸澀辛寒,酸澀辛味,收斂上行,寒清火熱,故“能涌風熱痰涎,發(fā)散風木相火”,“治咽喉口齒瘡毒有奇功”。與其化學成分、結(jié)構(gòu)相似相應,三者功效有相似之處,尤其是43芒硝、44膽礬。

    4.4 驗證中藥有效成分只能一定程度反映中藥藥性34苦參的有效成分是36氧化苦參堿,二者有一定相似度,差異指數(shù)是0.119。38青黛的有效成分是37靛玉紅,二者差異指數(shù)是0.0322,相似度很大,由此可將37靛玉紅列為清熱解毒藥,這也是與38形成一組的原因,圖4所示也可為證。34與36相距較遠,而37與38差異較小,故36氧化苦參堿代表苦參的有效程度遠遠低于37靛玉紅代表青黛的有效程度。此二例極能說明有效成分有一定合理性,但代表程度差異很大,不能全部有效代表原中藥藥性,即使37靛玉紅代表青黛的有效程度很高,卻不如39、40二種不同的藥相似度高。

    [1]盛良.論中藥四氣五味與電子得失吸推偏移能級升降說.上海中醫(yī)藥雜志,2008,42(2):4

    [2]盛良.論中藥四氣五味的宏觀化學成分說.上海中醫(yī)藥雜志,2008,42(7):63

    [3]盛良.中藥四氣五味的量化.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2004,13(22):2943

    [4]高學敏.中藥學.北京:中國中醫(yī)藥出版社,2002:93,95,97,101,106,108,110,114,126,124,122,183,591

    [5]高曉山.中藥藥性論.北京:人民衛(wèi)生出版社,1992

    [6]國家中醫(yī)藥管理局.中華本草(精選本).上海:上??茖W技術(shù)出版社,1998:912

    [7]盛良.論化學元素具有寒熱溫涼四性:一論中藥四性與現(xiàn)代化學的統(tǒng)一.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學雜志2003,9(1):14,29

    R285.1

    A

    1672-397X(2015)11-0059-04

    盛良(1945—),男,教授,碩士研究生導師,主要研究中西醫(yī)藥結(jié)合基礎(chǔ)理論會通。shengliang295@163.com

    2015-03-15

    編輯:吳寧

    江蘇省科學技術(shù)廳基礎(chǔ)研究計劃(自然科學基金)資助項目(BK2012857)

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