分析高效液相色譜法及在藥品檢驗中的應用

劉立 謝浩

【摘要】目的：探究分析高效液相色譜法及在藥品檢驗中的應用，并總結(jié)檢驗經(jīng)驗。方法：本研究選擇銀杏葉提取物中銀杏黃酮類藥物為研究對象，平均分為對照組和實驗組，樣品量均稱取0.2g，其中對照組采用薄層色譜（TLC）法進行檢測，實驗組組采用高效液相色譜法（HPLC）進行檢測，之后，比較兩組不同檢測方法下的分離率、純度、精密度和產(chǎn)品回收率。結(jié)果：實驗組采用高效液相色譜法（HPLC）進行檢測后，銀杏黃酮水解分離三種主要黃酮貳元，分別為黃酮貳元槲皮素、山萘素和異鼠李素純組分分離率分別為98.79%、98.77、98.89（P<0.05），純度分別為99.89%、99.99%、99.97%（P<0.05）；實驗組山萘素加樣后的產(chǎn)品回收率為99%，明顯高于對照組（P<0.05）；以上差異均具有統(tǒng)計學意義。結(jié)論：采用高效液相色譜法進行藥品檢驗，具有方法簡便、優(yōu)化、精密度高的優(yōu)點，能夠獲得比較好的分離效果和產(chǎn)品回收率，測定結(jié)果可靠且快速可行，值得推廣應用。

【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法；薄層色譜；銀杏黃酮；臨床應用

【中圖分類號】R562.21【文獻標識碼】B【文章編號】1005-0019（2015）01-0598-01

本研究選擇銀杏耶提取物中銀杏黃酮類藥物為研究對象，平均分為對照組和實驗組，樣品量均稱取0.2g，探究分析高效液相色譜法及在藥品檢驗中的應用，并總結(jié)檢驗經(jīng)驗?，F(xiàn)報告如下。

1.主要試劑與儀器

1.1主要試劑和藥品

銀杏葉提取物（EGb德國威瑪舒培博士藥廠，注冊證號H20090296）

重蒸水（超純水儀濾膜過濾）

甲醇（分析純AR，深圳市華昌化工有限公司）

磷酸（分析純，深圳市華昌化工有限公司）

黃酮貳元槲皮素對照品（上海亞培生物科技有限公司）

1.2儀器

美國光譜物理公司高效液相色譜儀SP8800泵，54400型積分儀，ChromDe脫氣機，Spheri一5RP一18（5um）色譜柱（22ommx4.6mm），進樣器配10uL定量管。WatersM490可編程序紫外檢測器。

2.實驗方法

本研究選擇銀杏葉提取物中銀杏黃酮類藥物為研究對象，平均分為對照組和實驗組，樣品量均稱取0.2g，其中對照組采用薄層色譜（TLC）法進行檢測，實驗組組采用高效液相色譜法（HPLC）進行檢測，之后，比較兩組不同檢測方法下的分離率、純度、精密度和山萘素產(chǎn)品回收率。

2.1樣品制備

稱取0.2g銀杏葉提取物，加入40ml甲醇，震蕩搖勻，使其完全溶解，然后加入1.5mol/L的鹽酸溶液40mL，混勻，置水浴鍋中37°C加熱120分鐘，待冷卻后，置于50ml容量瓶中，利用甲醇進行定容。室溫下放置備用。

2.2高效液相色譜法（HPLC）條件

流動相：甲醇一0.4%磷酸溶液（55：45）

流速：1.omL/mini

柱溫：25℃

進樣體積：10uL

檢測波長：360nm

3統(tǒng)計學方法

本研究中，所有的檢測統(tǒng)計學數(shù)據(jù)采均用SPSS18.0軟件進行處理，結(jié)果采用均數(shù)±標準差（X±s）進行表示，數(shù)據(jù)均經(jīng)由SPSS18.0軟件進行t檢驗。P<0.05表示數(shù)據(jù)具有差異性以及具有統(tǒng)計學意義。P<0.01表示數(shù)據(jù)具有顯著性差異以及具有統(tǒng)計學意義。

4.結(jié)果

4.1比較兩組不同檢測方法下的分離率、純度、精密度

比較兩組不同檢測方法下的分離率、純度、精密度。結(jié)果如表1所示。實驗組采用高效液相色譜法（HPLC）進行檢測后，銀杏黃酮水解分離三種主要黃酮貳元，分別為黃酮貳元槲皮素、山萘素和異鼠李素純組分、分離率分別為98.79%、98.77、98.89（P<0.05），純度分別為99.89%、99.99%、99.97%（P<0.05）；以上差異均具有統(tǒng)計學意義。

5.討論

色譜法最初僅僅是作為一種分離手段，是根據(jù)混合物中不同組分在流動相和固定相中具有不同的分配系數(shù)，當兩相作相對運動時，這些組分在兩相間進行反復多次的分配從而得到分，高效液相色譜法（HPLC）是近年來逐漸應用到藥品、食品等物質(zhì)的監(jiān)測工作當中，本實驗通過采用高效液相色譜法（HPLC）分析銀杏葉提取物中銀杏黃酮類藥物，研究發(fā)現(xiàn)，采用高效液相色譜法（HPLC）分析后，銀杏黃酮水解分離三種主要黃酮貳元，分別為黃酮貳元槲皮素、山萘素和異鼠李素純組分、分離率分別為98.79%、98.77、98.89（P<0.05），純度分別為99.89%、99.99%、99.97%，分離率和純度值都相對于薄層色譜均較高，另外通過外部加樣山萘素，檢測得知產(chǎn)品回收率為99%?？梢?，臨床上采用尿常規(guī)檢驗聯(lián)合C-反應蛋白診斷小兒急性闌尾炎，能夠有效提高診斷的準確率，降低誤診概率，具有一定的診斷價值，對于急性闌尾炎確診以及及時治療具有重要的意義。值得臨床推廣應用。

參考文獻

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