煙蒂水浸泡液對家兔離體小腸運動的影響

孔希錦 江春雨

摘要 [目的] 研究香煙煙蒂水浸泡液對家兔離體小腸收縮運動的影響。[方法]采用常規(guī)離體灌注小腸平滑肌標本活動的試驗方法，應用3種不同劑量（0.2、0.4、0.8 ml）的煙蒂水浸泡液作用于離體腸段，觀察用藥前后的離體腸段收縮幅度和收縮頻率的變化。[結(jié)果]對離體腸段的收縮幅度，低劑量組有顯著性差異（P<0.05）：中、高劑量組均有高度顯著性差異（P<0.01）：對離體腸段的收縮頻率，低劑量組差異顯著（P<0.05）中、高劑量組差異極顯著（P<0.01）。[結(jié)論]香煙煙蒂水浸泡液能增大家兔離體小腸的收縮幅度，減弱收縮頻率，作用機理可能與鈉離子和鈣離子的轉(zhuǎn)運有關(guān)。

關(guān)鍵詞 香煙：離體小腸：收縮活動

中圖分類號 S572 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2015）05-129-02

基金項目 國家大學生創(chuàng)新訓練計劃項目（201410757025）。

作者簡介 孔希錦（1994- ），女，山東濟南人，本科生，專業(yè)：動植物檢疫。*通訊作者，講師，碩士，從事基礎獸醫(yī)研究。

收稿日期 20141229

吸煙危害健康已是公認的事實，大量的毒理學實驗和流行病學觀測結(jié)果支持這一結(jié)論。過度吸煙會抑制人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)[1，2]，還可誘發(fā)人體心血管疾病和肺氣腫、肺癌等疾病[3]。研究表明，香煙中至少有300種化合物對人體有害，許多已被證明具有致癌、致畸和致突變作用。目前的研究認為，其中對人體產(chǎn)生主要危害的物質(zhì)是煙堿（一種水溶性、激動N膽堿受體的化學物質(zhì)）。煙堿又稱為尼古丁，由粘膜和皮膚以及呼吸道和消化道吸收，據(jù)報道1支香煙中的煙堿可毒死10只小白鼠[4]。筆者用已吸過的香煙煙蒂蒸餾水浸泡液為試驗材料，作用于家兔離體腸段，觀察不同劑量的浸泡液對家兔離體腸段運動的影響，以揭示吸煙對消化系統(tǒng)的影響和危害，同時也為進一步的研究提供有價值的參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 實驗動物和受試物。

選用體重2～3 kg的健康家兔10只，雌雄不限，由塔里木大學動物科學學院動物實驗站提供。試驗香煙為雙喜牌84 mm烤煙型香煙（廣東中煙工業(yè)有限責任公司出品，煙氣煙堿量1.2 mg，焦油量13 mg，煙氣CO量15 mg）。

1.1.2 器材。

MedlabU/4C501H型生物信號采集處理系統(tǒng)（南京美易科技有限公司）；JZ101型張力換能器（北京新航興業(yè)科貿(mào)有限公司）；HW400E恒溫平滑肌槽（成都泰盟科技有限公司）；電子天平（上海民橋精密科學儀器有限公司）；精密電子天平（上海精科天平）；哺乳動物手術(shù)器械1套；萬能支架；螺旋夾；長滴管；棉線；量筒；燒杯；紗布；洗瓶；注射器。

1.1.3 試劑。

樂氏液（自制，NaCl 9 g，KCl 0.42 g，CaCl2 024 g，NaHCO3 0.2 g，葡萄糖1.0 g，蒸餾水1 000 ml，所用試劑均為國產(chǎn)分析純）。

1.2 試驗方法

1.2.1 香煙煙蒂浸泡液的制備。

100支已吸過的香煙煙蒂去除殘留的煙絲及包裝紙后，置于60 ml蒸餾水中浸泡24 h后過濾，所得的濾液即為香煙煙蒂水溶液，濾液中富含煙堿。

1.2.2 恒溫平滑肌浴槽裝置。

向恒溫平滑肌浴槽的中央標本槽內(nèi)加入臺氏液至浴槽高度的2/3處。外部容器為水浴鍋加自來水。開啟電源，恒溫工作點定在38 ℃。

1.2.3 離體小腸標本的制備。

家兔先禁食24 h，于試驗前1 h喂食，用頸椎脫臼法處死家兔，將兔背位固定于手術(shù)臺上，腹部剪毛后，迅速沿正中線切開皮膚和腹壁，找到胃，以胃幽門與十二指腸交界處為起點，快速沿腸緣剪去腸系膜，然后再剪取25 cm的腸管，置于4 ℃臺氏液中備用，試驗時用注射器沖洗剪成1.5 cm長的小腸段，用棉線結(jié)扎腸段兩端。

1.2.4 儀器的連接。

將離體小腸的一端結(jié)扎線連于浴槽內(nèi)的標本固定鉤上，另一端連于張力換能器的懸梁臂上，適當調(diào)節(jié)換能器的高度，使其與標本之間松緊度合適[5]。標本槽中加入臺氏液，使家兔離體腸段全部浸入臺氏液中，并勻速通入空氣，保持每秒1～2個氣泡。張力換能器與生物信號采集處理系統(tǒng)的輸入CH1（1通道）相連接，選擇，選擇“張力”信號，設置控制參數(shù)。

1.2.5 結(jié)果記錄。

觀察并記錄38 ℃臺氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線，待腸段收縮曲線穩(wěn)定后，滴加0.2 ml香煙煙蒂水溶液，在觀察到明顯的作用后，用預先準備好的新鮮38 ℃臺氏液沖洗3次。待腸段活動恢復正常后，同樣的方法分別滴加0.4和0.8 ml香煙煙蒂水溶液，觀察腸段收縮曲線的變化。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，以平均值±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同劑量煙蒂水溶物后小腸平滑肌的運動曲線

正常情況下，在恒溫、通氣充足的條件下小腸段頻率、幅度、張力、時間及間隔均較穩(wěn)定，收縮波形無明顯變化，表現(xiàn)為具有自動節(jié)律收縮、伸展性、緊張性等生理特性（圖1A）。分別用低、中、高劑量的煙蒂水溶物作用于離體腸段，小腸段收縮曲線的變化見圖1B～D。

由表1可知，與給藥前相比，各組煙蒂水浸泡液對家兔離體小腸平滑肌收縮頻率均具有抑制作用。其中，低劑量組差異顯著（P<0.05），而中、高劑量組差異均極顯著（P<0.01）。

2.2 煙蒂水溶液對離體小腸收縮幅度的影響

由表2可知，與給藥前相比，煙蒂水浸泡液均能增大家兔離體小腸平滑肌收縮的幅度。其中低劑量組差異顯著（P<0.05）。中、高劑量組差異均極顯著（P<0.01）。

3 討論

胃腸道功能紊亂是引起消化系統(tǒng)異常的重要原因之一，消化道的運動又是消化道生理功能的重要組成部分。離體腸段置于模擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中，在一定的時間內(nèi)仍能保持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作用。筆者從生理學角度出發(fā)，研究煙蒂水溶物對離體小腸運動的影響，結(jié)果表明香煙煙蒂水浸泡液對家兔離體小腸平滑肌收縮頻率有抑制作用，并隨著劑量的增大抑制作用增強，香煙煙蒂水浸泡液均能增大家兔離體小腸平滑肌收縮幅度，并隨劑量增大而作用增強。這說明香煙煙蒂水浸泡液對小腸平滑肌具有一定的影響，可能導致動物機體胃腸功能紊亂，會不同程度地損傷消化系統(tǒng)，危害身體健康。平滑肌的收縮是由動作電位引發(fā)的，而動作電位是在慢波電位的基礎上產(chǎn)生的，慢波電位是平滑肌收縮節(jié)律的控制波，慢波電位是肌源性的，不依賴于神經(jīng)的存在，可能與胃腸道平滑肌細胞膜上鈉泵活動有關(guān)，慢波電位一旦達到閾電位就會引發(fā)動作電位，動作電位的產(chǎn)生主要依賴Ca2+內(nèi)流，動作電位的頻率越高，平滑肌的收縮幅度也越大[6]。香煙煙蒂水浸泡液對小腸平滑肌的影響可能與其影響Na+和Ca2+轉(zhuǎn)運有關(guān)，其作用機理有待于今后的進一步深入研究。

參考文獻

[1] 薛小平，陳懿，王茂勝.煙堿的研究現(xiàn)狀[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2008，36（10）：4121-4122.

[2] 冀元棠，朱偉，張磊，等.用水螅再生試驗評價香煙煙霧的致畸性[J].中國公共衛(wèi)生學報，2002，14 （1）： 432-441.

[3] 張洲穎，周冀衡，趙百東，等.煙堿致病性和藥用研究進展[J].中國藥物濫用防治雜志，2009，15（5）：278-283.

[4] 沈維干，陳彥，李朝軍，等.香煙煙霧水溶物對小鼠卵母細胞成熟和IVF的影響[J].中國公共衛(wèi)生學報，2000，16（5）： 4062-4081.

[5] 楊秀平.動物生理學實驗[M].北京：高等教育出版社，2004：147-148.

[6] 歐陽五慶.動物生理學[M].2版.北京：科學出版社，2012：132-132.

責任編輯 陳玉敏 責任校對 李巖