• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    蓮房多酚提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性研究

    2015-10-21 08:19:32鐘怡平夏道宗王思為方月娟
    食品工業(yè)科技 2015年6期
    關(guān)鍵詞:蓮房勻漿螯合

    鐘怡平,夏道宗,黃 嵐,王思為,方月娟

    (浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,浙江杭州310053)

    蓮房多酚提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性研究

    鐘怡平,夏道宗*,黃嵐,王思為,方月娟

    (浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,浙江杭州310053)

    在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了熱回流提取蓮房多酚的工藝,并通過(guò)測(cè)定其清除ABTS+自由基、DPPH自由基、OH自由基的能力,還原力,亞鐵離子螯合活性及對(duì)大鼠腦勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化的影響,對(duì)蓮房多酚的抗氧化活性進(jìn)行綜合研究。結(jié)果表明,熱回流提取蓮房多酚的最佳工藝參數(shù)為:乙醇濃度50%,料液比1∶25,提取溫度80℃,提取時(shí)間為2h,最優(yōu)條件下的得率是5.23%。蓮房多酚的體外抗氧化實(shí)驗(yàn)表明蓮房多酚對(duì)DPPH自由基、ABTS+自由基、OH自由基有很強(qiáng)的清除能力,對(duì)亞鐵離子的螯合活性和還原力均較強(qiáng),并能顯著抑制大鼠腦勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化。本研究表明在該優(yōu)化工藝下提取的蓮房多酚具有較強(qiáng)的抗氧化活性。

    蓮房,多酚,提取,抗氧化

    蓮為睡蓮科蓮屬多年生水生草本植物,是一種常見(jiàn)的藥食兩用經(jīng)濟(jì)作物[1]。蓮類(lèi)藥材(荷葉、蓮房、蓮子、蓮子心、藕節(jié)等)均可作為藥物用來(lái)治療多種疾?。?-3]。我國(guó)蓮資源充足,而作為蓮非可食部分的蓮房卻一直被視為廢棄物丟棄,利用價(jià)值不高。目前關(guān)于蓮房的研究還處于起步階段,開(kāi)發(fā)蓮房不僅具有一定的科學(xué)價(jià)值,還會(huì)帶來(lái)不錯(cuò)的經(jīng)濟(jì)效益。有報(bào)道稱,蓮房中富含多酚,對(duì)蓮房多酚的開(kāi)發(fā)研究空間很大,值得深入考察[4-6]。此外,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)在蓮源花青素領(lǐng)域的研究也成果頗豐。植物多酚可以通過(guò)減少自由基的產(chǎn)生而削弱自由基對(duì)機(jī)體的損傷,因此該類(lèi)化合物在醫(yī)藥和保健方面必將有廣泛的應(yīng)用[7-8]。本文采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了熱回流提取蓮房多酚的工藝,并通過(guò)測(cè)定其清除ABTS+自由基、DPPH自由基和OH自由基的能力,結(jié)合亞鐵離子螯合活性和還原力測(cè)定,以及對(duì)大鼠腦勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化的影響,從化學(xué)、生物學(xué)角度對(duì)蓮房多酚的抗氧化活性進(jìn)行綜合研究,為進(jìn)一步利用和研究蓮房提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1材料與儀器

    蓮房采自浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片有限公司,產(chǎn)地湖南;1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)、二銨鹽自由基(ABTS)、2,4,6-Tris(2-pyridyl)-s-triazine(TPTZ) 美國(guó)Sigma-A ldrich公司;乙醇、福林酚試劑、無(wú)水碳酸鈉、沒(méi)食子酸、抗壞血酸、無(wú)水乙酸鈉、冰乙酸、鹽酸、FeCl3、FeSO4、H2O2、KH2PO4、三氯乙酸、硫代巴比妥酸、Ferrozine、D-脫氧核糖、EDTA-2Na等。

    FA2004電子分析天平上海菁海儀器有限公司;R201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海申勝生物技術(shù)有限公司;低溫冷卻液循環(huán)泵鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司;UV-2600紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)上海尤尼柯儀器有限公司;GZX-9140 MBE恒溫干燥箱上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1多酚含量的測(cè)定沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:準(zhǔn)確吸取濃度為100μg/m L的沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8m L于10m L比色管中,加入5m L福林酚試劑、4m L 75g/L的Na2CO3溶液。旋渦混勻15s后,用蒸餾水定容至刻度,40℃放置30m in,顯色。用分光光度計(jì)測(cè)定775nm的吸光值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程。

    蓮房多酚含量測(cè)定:準(zhǔn)確稱取已過(guò)20目篩的蓮房粉末2g,加入一定量一定濃度乙醇,于一定溫度下提取,提取一定時(shí)間后進(jìn)行抽濾,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),蒸餾水定容至50m L,取1m L定容至100m L,取1m L待測(cè)液,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法測(cè)定總酚含量。

    蓮房多酚得率(%)=(樣液中多酚含量(mg/L)×樣液體積(L)×稀釋倍數(shù))÷蓮房質(zhì)量(mg)×100

    1.2.2單因素提取實(shí)驗(yàn)為研究乙醇濃度、料液比、提取時(shí)間、提取溫度四個(gè)因素對(duì)蓮房多酚得率的影響,分別進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)。

    1.2.2.1乙醇濃度對(duì)蓮房多酚提取效果的影響采用0、30%、40%、50%、60%、70%、80%、100%八個(gè)水平,料液比1∶20,在水浴溫度60℃條件下提取1h。

    1.2.2.2提取溫度對(duì)蓮房多酚提取效果的影響采用40、50、60、70、80、90℃六個(gè)水平。以60%乙醇溶液為溶劑,料液比1∶20提取1h。

    1.2.2.3提取時(shí)間對(duì)蓮房多酚提取效果的影響采用0.5、1、1.5、2、2.5、3h六個(gè)水平,以60%乙醇溶液為溶劑,料液比1∶20,在水浴溫度80℃條件下提取。

    1.2.2.4料液比對(duì)蓮房多酚提取效果的影響采用1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40七個(gè)水平,以60%乙醇溶液為溶劑,在水浴溫度80℃條件下提取1h。

    1.2.3正交實(shí)驗(yàn)根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,以乙醇濃度、料液比、提取時(shí)間、提取溫度作為正交實(shí)驗(yàn)的四個(gè)因素,每個(gè)因素取三個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化,因素水平表見(jiàn)表1。

    表1 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表Table 1 Factors and levels design of orthogonal experiment

    1.2.4體外抗氧化實(shí)驗(yàn)將蓮房多酚配制成八個(gè)濃度500、250、100、50、25、10、5、2.5μg/m L。配制陽(yáng)性對(duì)照抗壞血酸(1mg/m L):稱取10.0mg抗壞血酸,用蒸餾水定容至10m L。即1000μg/m L,然后稀釋成500、250、 100、50、25、10、5μg/m L系列濃度。

    1.2.4.1清除DPPH自由基能力的測(cè)定[9-10]準(zhǔn)確稱取20mg DPPH自由基,用無(wú)水乙醇溶解配制成2× 10-4mol/L的溶液(253.6m L)。取等體積(2m L)待測(cè)液及2×10-4mol/L DPPH溶液加入同一具塞試管中,搖勻。室溫下避光放置30m in后用無(wú)水乙醇做參比在517nm下測(cè)定其吸光度Ai,同時(shí)測(cè)定2×10-4mol/L DPPH溶液與等體積無(wú)水乙醇(2m L)混合液的吸光度Ac,以及待測(cè)液(2m L)與等體積無(wú)水乙醇混合液的吸光度Aj。根據(jù)式(1)計(jì)算樣品對(duì)DPPH自由基的清除率,求取試樣清除DPPH自由基的IC50。

    DPPH自由基清除率(%)=[1-(Ai-Aj)]/Ac×100

    1.2.4.2清除ABTS+自由基的能力測(cè)定[11]取0.4m L不同濃度的樣品溶液,加入3.6m L 0.0875mmol/L ABTS溶液,漩渦混合后于暗處?kù)o置10m in,測(cè)定734nm的吸光值。對(duì)照管以0.4m L 70%乙醇替代樣品。根據(jù)式(2)計(jì)算清除率,并求取試樣清除ABTS+自由基的IC50。

    1.2.4.3還原力的測(cè)定—鐵離子還原法[12]吸取系列濃度FeSO4溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。吸取100μL待測(cè)樣品,與3m L FRAP溶液混合,再加300μL體積蒸餾水,在37℃水浴中反應(yīng)4m in,于593nm波長(zhǎng)下讀取吸光值,并在標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得待測(cè)樣品相應(yīng)的FeSO4濃度,定義為當(dāng)量濃度(FRAP值)。結(jié)果表示為每mg樣品中相當(dāng)于的FeSO4的量。

    1.2.4.4清除OH自由基能力的測(cè)定[13]取0.1m L不同濃度的樣品水溶液,加入0.690m L 20mmol/L pH7.4的KH2PO4-KOH緩沖液(含2.5mmol/L 2-脫氧核糖),然后加入0.1m L預(yù)先混合的1.0mmol/L硫酸亞鐵和1.04mmol/L EDTA(1∶1體積混合)。(反應(yīng)液保持37℃溫浴,常溫放置)加入0.1m L 1.0mmol/L的抗壞血酸和0.01m L 0.1mol/L H2O2啟動(dòng)反應(yīng),37℃下溫浴30m in。取出后加入1%硫代巴比妥酸1m L和2.8%三氯乙酸1.0m L,95℃下反應(yīng)15m in以產(chǎn)生顏色。取出立即冷卻,532nm測(cè)吸光值。對(duì)照管以0.1m L蒸餾水代替樣品。

    1.2.4.5亞鐵離子螯合活性測(cè)定[12]0.2m L不同濃度的樣品溶液中加入0.2m L 50μmol/L FeSO4和1.4m L 0.15mol/L NaCl溶液,加入0.2m L 300μmol/L菲咯嗪?jiǎn)?dòng)反應(yīng),劇烈振搖后(漩渦混合5s),室溫下放置10m in。測(cè)定562nm的吸光值,若吸光值越低,表示對(duì)鐵離子的螯合能力越強(qiáng)??瞻坠苡?.2m L 0.15mol/LNaCl代替菲咯嗪。

    1.2.4.6對(duì)大鼠腦勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化的影響(丙二醛含量及抑制率的測(cè)定)[13]大鼠處死后,在冰臺(tái)上快速取腦,稱重,加10倍量生理鹽水勻漿,制備10%腦勻漿液。取10%新鮮腦勻漿0.6m L,加0.4m L生理鹽水,漩渦混勻,加入0.3m L不同濃度的樣品溶液,加入0.3m L 1mmol/L Fe2SO4,加入0.3m L 10mmol/L H2O2,在37℃下水浴1h后,加入1m L 15%三氯乙酸(TCA)終止反應(yīng),3000r/m in離心15m in,得上清液,取1.5m L上清液,加入1.0m L 1%的硫代巴比妥酸,100℃反應(yīng)15m in。冷卻(固定冷卻時(shí)間),用分光光度計(jì)測(cè)定532nm的吸光值。對(duì)照管以0.3m L蒸餾水代替樣品。根據(jù)TBA-MDA產(chǎn)物(TBARS)的摩爾消光系數(shù)1.56× 105(mol/L)-1·cm-1計(jì)算MDA的濃度。

    1.2.4.7數(shù)據(jù)處理所有數(shù)據(jù)均測(cè)定三次,取平均值;采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

    2 結(jié)果與分析

    2.1回歸方程確立

    以沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),以其吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算得沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:Y=0.0147X+0.0190(R2=0.9993)

    2.2單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

    2.2.1乙醇濃度對(duì)蓮房多酚提取效果的影響由圖1可見(jiàn),隨著乙醇濃度增大,蓮房多酚得率呈先上升后下降趨勢(shì),這可能是因?yàn)樯彿慷喾咏Y(jié)構(gòu)復(fù)雜,極性跨度范圍較大,溶劑極性過(guò)大或過(guò)小對(duì)總多酚提取均有一定的影響,從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,當(dāng)乙醇濃度為60%左右時(shí),提取率達(dá)最大值。

    圖1 不同乙醇濃度對(duì)蓮房多酚得率的影響Fig.1 Effect of ethanol concentration on extraction yield

    2.2.2溫度對(duì)蓮房多酚提取效果的影響由圖2可見(jiàn),隨著溫度升高,蓮房多酚得率升高,當(dāng)提取溫度為80℃時(shí),蓮房多酚得率最高,溫度升高加快分子運(yùn)動(dòng)速度,有利于細(xì)胞中多酚物質(zhì)的溶出。但當(dāng)溫度再度升高,得率反而下降,這可能是由于高溫導(dǎo)致了部分蓮房多酚的氧化。

    圖2 不同提取溫度對(duì)蓮房多酚得率的影響Fig.2 Effectof extraction temperature on extraction yield

    2.2.3提取時(shí)間對(duì)蓮房多酚提取效果的影響由圖3可見(jiàn),提取時(shí)間越長(zhǎng),蓮房多酚提取越充分,效率越高,但時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致多酚的氧化損耗,最佳提取時(shí)間在1h左右。

    圖3 不同提取時(shí)間對(duì)蓮房多酚得率的影響Fig.3 Effectof extraction time on extraction yield

    2.2.4料液比對(duì)蓮房多酚提取效果的影響由圖4可見(jiàn),多酚得率隨著料液比加大而增大,當(dāng)料液比達(dá)1∶25時(shí),趨勢(shì)不再顯著,趨于穩(wěn)定,這可能是因?yàn)榱弦罕冗_(dá)到1∶25時(shí),溶劑對(duì)多酚的溶解基本達(dá)到飽和,考慮到成本,可選1∶25為最佳料液比。

    圖4 不同料液比對(duì)蓮房多酚得率的影響Fig.4 Effectof solid-liquid ratio on extraction yield

    2.3正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,以乙醇濃度、液料比、提取時(shí)間、提取溫度四個(gè)因素,每個(gè)因素取三個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化。

    由表可知,四個(gè)因素對(duì)蓮房多酚物質(zhì)得率的影響順序?yàn)椋阂掖紳舛龋緶囟龋玖弦罕龋緯r(shí)間,由于因素B料液比的第2、3個(gè)水平的k值相等,考慮到經(jīng)濟(jì)性,故選擇B2作為其優(yōu)水平。因此,最佳提取工藝為A1B2C3D2,即用50%的乙醇,以1∶25的料液比于80℃提取2h,所得蓮房多酚的得率最高,為5.23%。

    表2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 2 Results of orthogonal experiment

    表3 方差分析表Table 3 Analysis of variance

    2.4驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    稱取2g蓮房多酚,按最佳工藝A1B2C3D2進(jìn)行提取,進(jìn)行3次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果分別為5.19%、5.21%、5.30%,其平均提取率為5.23%,比正交實(shí)驗(yàn)中含量最高的一組高出0.05%,表明通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)選擇出的最佳提取工藝科學(xué)合理,重現(xiàn)性好。

    2.5體外抗氧化實(shí)驗(yàn)

    2.5.1清除DPPH自由基能力如圖5所示,蓮房多酚(TPNU)可以顯著抑制DPPH自由基的產(chǎn)生,且在一定范圍內(nèi)具有量效關(guān)系,其IC50=9.03μg/m L,而陽(yáng)性對(duì)照VC的IC50=12.44μg/m L。TPNU清除DPPH自由基能力略大于VC。鄭麗鋆等[14]研究了蓮房不同溶劑提取物對(duì)DPPH自由基的清除作用,其中乙醇提取物的IC50值為12.94μg/m L,分析其造成差異的主要原因可能與不同品種和不同產(chǎn)地的蓮房總多酚含量不同有關(guān)。

    圖5 蓮房多酚對(duì)DPPH自由基的清除能力Fig.5 Capacity of DPPH free radical scavenging by TPNU

    2.5.2清除ABTS+自由基的能力如圖6所示,TPNU可有效抑制ABTS+自由基的產(chǎn)生,且在一定范圍內(nèi)具有量效關(guān)系,其IC50=26.38μg/m L,而陽(yáng)性對(duì)照VC的IC50=17.29μg/m L。TPNU清除ABTS+自由基能力比VC略小,但仍有較強(qiáng)的清除ABTS+自由基的能力。

    圖6 蓮房多酚對(duì)ABTS+自由基的清除能力Fig.6 Capacity of ABTS+free radical scavenging by TPNU

    2.5.3還原力由圖7可知,TPNU具有一定的還原力,但比陽(yáng)性對(duì)照VC較小,分別為5.27、9.33μmol/mg。

    圖7 蓮房多酚的還原力Fig.7 Reducing power of TPNU

    2.5.4清除OH自由基能力OH自由基是已知的最活潑的活性氧自由基,也是毒性最大的氧自由基,會(huì)引起脂質(zhì)過(guò)氧化作用及造成生物損傷[15-16]。由圖8可知,蓮房多酚濃度為100μg/m L時(shí),清除率達(dá)到了50%,稍低于VC。

    2.5.5亞鐵離子螯合活性鐵被認(rèn)為是脂質(zhì)氧化的重要促進(jìn)劑。對(duì)亞鐵離子的螯合,可以保護(hù)鐵誘導(dǎo)的氧化損傷[17]。由圖9可知,蓮房多酚對(duì)亞鐵離子的螯合小于EDTA,但仍具有較強(qiáng)螯合性,濃度為50mg/L時(shí),螯合率達(dá)43.2%。

    2.5.6對(duì)大鼠腦勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化的影響由圖10可知,蓮房多酚對(duì)大鼠腦勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化抵抗能力與VC相當(dāng)(最高清除率相等),具有很強(qiáng)的抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用。

    圖8 蓮房多酚對(duì)OH自由基的清除能力Fig.8 Capacity of hydroxy free radical scavenging by TPNU

    圖9 蓮房多酚對(duì)亞鐵離子螯合活性Fig.9 Ferrous ion-chelating capacity by TPNU

    圖10 蓮房多酚對(duì)大鼠腦勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化的影響Fig.10 Influence on lipid peroxidation in rats of TPNU

    3 結(jié)論

    在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用正交實(shí)驗(yàn)對(duì)蓮房多酚提取工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化,水浴回流提取蓮房多酚的最佳工藝參數(shù)為:乙醇濃度50%,料液比1∶25,提取溫度80℃,提取時(shí)間為2h,得率最高為5.23%。蓮房多酚的體外抗氧化實(shí)驗(yàn)表明蓮房多酚對(duì)DPPH自由基、ABTS+自由基和OH自由基均具有良好清除作用,清除DPPH自由基能力略大于VC,具有很強(qiáng)的抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用且具有一定的還原力和亞鐵離子螯合活性。表明蓮房多酚是一種良好的天然抗氧化劑。本研究為工業(yè)化利用豐富的蓮房資源提取蓮房多酚提供了依據(jù)。

    [1]廖立,舒展,李笑然,等.蓮類(lèi)藥材的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].上海中醫(yī)藥雜志,2010,44(12):82-84.

    [2]Ling ZQ,Xie BJ,Yang EL.Isolation,characterization,and determination of antioxidative activity of oligomeric procyanidins from the seedpod of Nelumbo nucifera Gaertn[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2005,53(7):2441-2445.

    [3]曹楊,徐虹,王靜,等.蓮天然產(chǎn)物及其生物活性研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2012,33(8):402-405.

    [4]段玉清,閆永勝,張海暉,等.蓮房多酚的微波輔助提取技術(shù)[J].江蘇大學(xué)學(xué)報(bào),2009,30(5):437-440.

    [5]黃素英.蓮子多酚提取及其抗氧化抑菌活性研究[D].福州:福建農(nóng)林大學(xué),2010.

    [6]嚴(yán)守雷,王清章,彭光華.蓮藕多酚抗氧化作用研究[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2005,20(4):77-81.

    [7]鄭麗鋆,吳巖斌,王亞賢,等.蓮房多酚的超聲提取工藝研究[J].福建中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2011,21(3):39-41.

    [8]邵芳芳,尹衛(wèi)平,梁菊.重要的植物多酚及其抗氧化性能的研究概況[J].西北藥學(xué)雜志,2010,25(1):66-68.

    [9]劉瓊,夏道宗,葉曉萍,等.安吉白茶含片的制作及其抗氧化活性評(píng)價(jià)[J].食品工業(yè)科技,2012,33(18):245-252.

    [10]夏道宗,陳佳,鄒莊丹,等.馬齒莧、車(chē)前草復(fù)合保健飲料的研制及其抗氧化活性評(píng)價(jià)[J].食品科學(xué),2009,30(4):118-122.

    [11]鄭小薇,夏道宗,張英,等.梅花總黃酮對(duì)黃嘌呤氧化鎂的抑制作用及其抗氧化活性評(píng)價(jià)[J].食品工業(yè)科技,2011,32(11):168-170,173.

    [12]Xia DZ,Yu XH,Zhu ZY,et al.Antioxidantand antibacterial activity of six edible wild plant(Sonchus spp.)in China[J]. Natural Product Research,2011,25(20):1893-1901.

    [13]夏道宗,勵(lì)建榮,劉杰爾,等.高良姜總黃酮的超聲萃取及其體外抗氧化作用研究[J].中國(guó)食品學(xué)報(bào),2009,9(3):63-68.

    [14]鄭麗鑾,吳巖斌,吳建國(guó),等.蓮房不同溶劑提取物對(duì)DPPH自由基的清除作用[J].福建中醫(yī)藥,2012,43(1):54-56.

    [15]Sasaki S,Ohta T,Decker EA.Antioxidant activity of watersoluble fractions of salmon spermary tissue[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,1996,44(7):1682-1686.

    [16]Aurand LW,Boone NH,Giddings GG.Superoxide and singlet oxygen in milk lipid peroxidation[J].Journal of Dairy Science,1977,60(3):363-369.

    [17]Kehrer JP.The Haber-Weiss reaction and mechanisms of toxicity[J].Toxicology,2000,149(1):43-50.

    Study on the extraction and antioxidant activity of total phenolic com pounds from the seedpod of Nelumbo Nucifera Gaertn

    ZHONG Yi-ping,XIA Dao-zong*,HUANG Lan,WANG Si-wei,F(xiàn)ANG Yue-juan
    (College of Pharmaceutical Sciences,Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou 310053,China)

    The extraction technology of total phenolic com pounds from the seedpod of Nelumbo nucifera Gaertn(TPNU)was studied by sing le-fac tor experiments and orthogonal test design.Furthermore,the antioxidant activities of TPNU were evaluated,using various antioxidant assays inc luded the scavenging on DPPH,ABTS+,OH free rad icals,reducing power determ ination,ferrous ion-chelating capacity and influence on lip id peroxidation in rats.The results showed that the op timum extrac tion cond itions were determ ined by orthogonal experiment as follows:ethanol concentration 50%,solid-liquid ratio 1∶25,extraction tem perature 80℃ and extraction time 2h,and the extrac tion yield was 5.23%in these conditions.TPNU had strong scavenging activity on DPPH,ABTS+and OH free rad icals,also had strong reducing power and ferrous ion-chelating capacity.In addition,TPNU could significantly inhibit the b rain lipid peroxidation in rats.These findings showed that TPNU had strong antioxidantactivity under the op timalextraction technology.

    seedpod of Nelumbo nucifera Gaertn;totalphenolic com pounds;extraction;antioxidantactivity

    TS201.1

    B

    1002-0306(2015)06-0235-05

    10.13386/j.issn1002-0306.2015.06.044

    2014-07-07

    鐘怡平(1992-),女,本科,研究方向:功能性食品。

    夏道宗(1978-),男,博士,副教授,研究方向:天然產(chǎn)物與功能性食品。

    國(guó)家自然科學(xué)基金(81374048,81102861);國(guó)家級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目暨浙江省新苗人才計(jì)劃(2013R410018,2014R410003)。

    猜你喜歡
    蓮房勻漿螯合
    玉米低聚肽螯合鐵(II)的制備和結(jié)構(gòu)表征
    蓮房原花青素的超聲波輔助提取及其穩(wěn)定性研究
    不同結(jié)構(gòu)的烏鱧螯合肽對(duì)抗氧化活性的影響
    勻漿法提取沙棗果總黃酮工藝研究
    植物研究(2018年4期)2018-07-24 00:52:26
    不同誘導(dǎo)方式制備的大鼠肝勻漿代謝酶活性及凍儲(chǔ)方式的比較
    螯合型洗滌助劑檸檬酸一氫鈉與Ca2+離子螯合機(jī)理的理論研究
    前列安丸對(duì)瓊脂所致慢性前列腺炎模型大鼠前列腺勻漿中IgG和血清Zn的影響
    蓮房黃酮微波輔助提取工藝優(yōu)化及其抗氧化性能
    折流帶壓成形器的雙勻漿輥技術(shù)創(chuàng)新改進(jìn)
    湖南造紙(2013年1期)2013-07-10 01:06:40
    亚洲五月天丁香| 亚洲午夜理论影院| 最新在线观看一区二区三区| 老鸭窝网址在线观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲,欧美,日韩| 一级av片app| 哪里可以看免费的av片| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲熟妇熟女久久| 欧美成人免费av一区二区三区| 午夜亚洲福利在线播放| 麻豆国产av国片精品| 少妇人妻一区二区三区视频| a级一级毛片免费在线观看| av女优亚洲男人天堂| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产精品乱码一区二三区的特点| 男人狂女人下面高潮的视频| 超碰av人人做人人爽久久| 国产 一区 欧美 日韩| 中国美女看黄片| 欧美日韩黄片免| 真人一进一出gif抽搐免费| 美女黄网站色视频| 一级黄色大片毛片| 特级一级黄色大片| 别揉我奶头 嗯啊视频| 色视频www国产| 毛片一级片免费看久久久久 | 久久草成人影院| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲国产精品合色在线| 欧美一区二区亚洲| 99久久99久久久精品蜜桃| 久9热在线精品视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产免费男女视频| 99精品久久久久人妻精品| 久久亚洲精品不卡| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲国产色片| 床上黄色一级片| 看黄色毛片网站| 久久久国产成人免费| 天堂√8在线中文| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 亚洲专区中文字幕在线| 在线观看舔阴道视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 一本一本综合久久| 两个人视频免费观看高清| 十八禁网站免费在线| 久久国产乱子免费精品| 午夜两性在线视频| 网址你懂的国产日韩在线| av福利片在线观看| 特级一级黄色大片| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 久久人人爽人人爽人人片va | 蜜桃久久精品国产亚洲av| 露出奶头的视频| 亚洲真实伦在线观看| 少妇的逼水好多| x7x7x7水蜜桃| 亚洲七黄色美女视频| 好男人电影高清在线观看| 国产熟女xx| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 给我免费播放毛片高清在线观看| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 在线播放无遮挡| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲最大成人av| 日韩精品青青久久久久久| 麻豆一二三区av精品| 午夜精品久久久久久毛片777| 毛片一级片免费看久久久久 | 五月玫瑰六月丁香| 搡老岳熟女国产| 国产精品久久久久久久电影| 国内精品久久久久精免费| 国产视频内射| 色播亚洲综合网| 五月伊人婷婷丁香| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲一区二区三区色噜噜| 在线天堂最新版资源| 国产高清三级在线| 97超视频在线观看视频| 久久久久久九九精品二区国产| 在线国产一区二区在线| 久久久久九九精品影院| 午夜福利免费观看在线| 身体一侧抽搐| 欧美高清性xxxxhd video| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 久久国产乱子伦精品免费另类| 日韩精品中文字幕看吧| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 日韩欧美免费精品| 亚洲欧美日韩东京热| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲av第一区精品v没综合| av国产免费在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 色视频www国产| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产精品久久久久久精品电影| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久久久免费精品人妻一区二区| 可以在线观看的亚洲视频| 12—13女人毛片做爰片一| 久久草成人影院| 在线免费观看的www视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 少妇的逼好多水| 12—13女人毛片做爰片一| 在线播放无遮挡| 又爽又黄a免费视频| 日本免费a在线| 又紧又爽又黄一区二区| 国产精品野战在线观看| 午夜老司机福利剧场| 国产精品免费一区二区三区在线| 成人精品一区二区免费| 天天躁日日操中文字幕| 欧美成人性av电影在线观看| 美女大奶头视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 熟女人妻精品中文字幕| 欧美成人性av电影在线观看| a级毛片免费高清观看在线播放| 悠悠久久av| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产精华一区二区三区| 婷婷色综合大香蕉| 女同久久另类99精品国产91| 久久久精品大字幕| 精品午夜福利视频在线观看一区| 最近最新免费中文字幕在线| 又粗又爽又猛毛片免费看| 日本三级黄在线观看| 能在线免费观看的黄片| 成年免费大片在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 一区二区三区免费毛片| 51午夜福利影视在线观看| 国产高清有码在线观看视频| 久久人人爽人人爽人人片va | 91在线观看av| 精品人妻熟女av久视频| 免费大片18禁| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 久久国产乱子伦精品免费另类| 不卡一级毛片| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 少妇的逼水好多| 一个人看视频在线观看www免费| 天堂网av新在线| 国产人妻一区二区三区在| 国产视频内射| 青草久久国产| 久久久精品欧美日韩精品| 又紧又爽又黄一区二区| 看免费av毛片| 亚洲欧美日韩高清专用| 一区二区三区四区激情视频 | 午夜福利18| 动漫黄色视频在线观看| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 亚洲真实伦在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 麻豆一二三区av精品| 国产精品久久电影中文字幕| 简卡轻食公司| 久久久久九九精品影院| 国产精品精品国产色婷婷| 最新中文字幕久久久久| 中文字幕av成人在线电影| 国产一区二区三区视频了| 老司机深夜福利视频在线观看| 少妇的逼水好多| 国产成人a区在线观看| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲成人久久爱视频| 欧美成人一区二区免费高清观看| 麻豆av噜噜一区二区三区| 成人性生交大片免费视频hd| 在现免费观看毛片| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲无线在线观看| 97超视频在线观看视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲国产精品合色在线| 人人妻人人看人人澡| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 国产精品久久电影中文字幕| 51国产日韩欧美| 毛片一级片免费看久久久久 | 身体一侧抽搐| 国产视频一区二区在线看| 国内精品一区二区在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 十八禁国产超污无遮挡网站| 欧美另类亚洲清纯唯美| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 九色成人免费人妻av| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲专区国产一区二区| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产69精品久久久久777片| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 日韩av在线大香蕉| 免费大片18禁| 国产极品精品免费视频能看的| 免费看光身美女| 99热6这里只有精品| 国产成人av教育| 午夜激情福利司机影院| 国产麻豆成人av免费视频| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 久久精品国产自在天天线| 国产伦一二天堂av在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲人成网站在线播| 欧美极品一区二区三区四区| 在线播放国产精品三级| 99久国产av精品| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲一区高清亚洲精品| 成年免费大片在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久99热6这里只有精品| 欧美中文日本在线观看视频| 色视频www国产| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 桃色一区二区三区在线观看| 精品无人区乱码1区二区| 少妇人妻精品综合一区二区 | 在线a可以看的网站| 又黄又爽又免费观看的视频| 特级一级黄色大片| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲人成网站高清观看| 国产亚洲欧美98| 两人在一起打扑克的视频| 99久国产av精品| 成年免费大片在线观看| 午夜激情欧美在线| 俺也久久电影网| 黄色视频,在线免费观看| 听说在线观看完整版免费高清| 99国产综合亚洲精品| av视频在线观看入口| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | .国产精品久久| 国产乱人伦免费视频| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产毛片a区久久久久| 少妇高潮的动态图| 看十八女毛片水多多多| 久久性视频一级片| 欧美在线一区亚洲| 俺也久久电影网| 麻豆国产av国片精品| 亚洲国产色片| 色视频www国产| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 午夜久久久久精精品| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲av不卡在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲av成人精品一区久久| 免费一级毛片在线播放高清视频| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 午夜福利高清视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 丰满的人妻完整版| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲精品成人久久久久久| 成人特级黄色片久久久久久久| 欧美三级亚洲精品| 亚洲中文字幕日韩| 神马国产精品三级电影在线观看| 伦理电影大哥的女人| 国产黄片美女视频| 99视频精品全部免费 在线| 国产三级在线视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 精品人妻1区二区| 欧美日韩福利视频一区二区| 在线免费观看不下载黄p国产 | 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产精品亚洲一级av第二区| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产高清视频在线观看网站| 老鸭窝网址在线观看| 极品教师在线免费播放| 美女cb高潮喷水在线观看| 日韩高清综合在线| 桃色一区二区三区在线观看| 久99久视频精品免费| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 一本精品99久久精品77| 亚洲国产精品合色在线| 国产真实伦视频高清在线观看 | 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 一个人看的www免费观看视频| 国产探花极品一区二区| 天堂影院成人在线观看| av在线老鸭窝| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产69精品久久久久777片| 最近中文字幕高清免费大全6 | 嫩草影视91久久| 亚洲精品一区av在线观看| 日韩欧美国产一区二区入口| 波多野结衣高清无吗| 久久精品国产清高在天天线| 国产伦人伦偷精品视频| 国产成人av教育| 日韩免费av在线播放| 一区福利在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| 成人性生交大片免费视频hd| 免费在线观看日本一区| 成年女人看的毛片在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 91在线精品国自产拍蜜月| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 最近最新中文字幕大全电影3| 网址你懂的国产日韩在线| 搡老岳熟女国产| 欧美性感艳星| 色视频www国产| 国产熟女xx| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 久久精品影院6| 给我免费播放毛片高清在线观看| 中文字幕久久专区| 免费一级毛片在线播放高清视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 麻豆成人av在线观看| 永久网站在线| 五月伊人婷婷丁香| 麻豆国产97在线/欧美| 久久精品影院6| 日本a在线网址| 欧美乱妇无乱码| 欧美丝袜亚洲另类 | 久久国产乱子免费精品| 变态另类丝袜制服| 岛国在线免费视频观看| 免费观看的影片在线观看| 久久草成人影院| 午夜久久久久精精品| 亚洲无线观看免费| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 精品人妻偷拍中文字幕| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 一个人免费在线观看电影| 欧美日韩福利视频一区二区| 人妻久久中文字幕网| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产亚洲av嫩草精品影院| 色综合欧美亚洲国产小说| 日韩欧美在线乱码| 欧美日韩黄片免| 成年女人看的毛片在线观看| 精华霜和精华液先用哪个| 九色成人免费人妻av| 性色avwww在线观看| 老司机福利观看| 免费在线观看日本一区| 精品福利观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 欧美一区二区国产精品久久精品| 97热精品久久久久久| 极品教师在线视频| 欧美高清成人免费视频www| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 久久精品影院6| 午夜老司机福利剧场| 亚洲精品456在线播放app | 露出奶头的视频| 免费观看的影片在线观看| av黄色大香蕉| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 在线观看av片永久免费下载| 深夜精品福利| 色精品久久人妻99蜜桃| 女人被狂操c到高潮| 校园春色视频在线观看| 丁香六月欧美| 午夜免费成人在线视频| 超碰av人人做人人爽久久| 欧美日韩福利视频一区二区| 观看免费一级毛片| 午夜久久久久精精品| 黄色一级大片看看| 少妇人妻一区二区三区视频| 舔av片在线| 国产中年淑女户外野战色| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 欧美+日韩+精品| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产三级黄色录像| 午夜精品在线福利| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲在线观看片| 亚洲电影在线观看av| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲av一区综合| 99久久精品国产亚洲精品| 国产色婷婷99| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产成年人精品一区二区| 日本 欧美在线| 99热6这里只有精品| 日韩欧美国产在线观看| 欧美精品啪啪一区二区三区| 丁香欧美五月| 久久久久久久精品吃奶| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲av五月六月丁香网| 少妇丰满av| 天美传媒精品一区二区| 国产精品女同一区二区软件 | 男人舔女人下体高潮全视频| 久久精品影院6| 亚洲人成电影免费在线| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 中文字幕av成人在线电影| av视频在线观看入口| 男女那种视频在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 好男人电影高清在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产日本99.免费观看| 91狼人影院| 少妇被粗大猛烈的视频| а√天堂www在线а√下载| 女人被狂操c到高潮| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 好男人电影高清在线观看| 久久国产乱子免费精品| 有码 亚洲区| 精品免费久久久久久久清纯| 成年女人毛片免费观看观看9| 日韩精品中文字幕看吧| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产淫片久久久久久久久 | 久久草成人影院| 在线播放无遮挡| 精品国产三级普通话版| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 中文资源天堂在线| 色吧在线观看| 国产精品伦人一区二区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 成人午夜高清在线视频| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产一区二区在线观看日韩| 欧美xxxx性猛交bbbb| 日本成人三级电影网站| 在线观看美女被高潮喷水网站 | .国产精品久久| 欧美一区二区亚洲| 亚洲人成网站高清观看| 国产一区二区在线观看日韩| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 观看美女的网站| 国产激情偷乱视频一区二区| 午夜福利欧美成人| x7x7x7水蜜桃| 不卡一级毛片| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久久久久久久大av| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 日韩欧美国产一区二区入口| 久久九九热精品免费| 特级一级黄色大片| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 在线观看一区二区三区| 午夜激情福利司机影院| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 午夜日韩欧美国产| 亚洲av美国av| 国产精品永久免费网站| 久久国产乱子伦精品免费另类| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美日韩综合久久久久久 | 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 男人的好看免费观看在线视频| 99久久九九国产精品国产免费| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 美女高潮的动态| 又黄又爽又免费观看的视频| 一进一出好大好爽视频| 最近在线观看免费完整版| netflix在线观看网站| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 99国产精品一区二区蜜桃av| 99久久成人亚洲精品观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 波多野结衣高清作品| 国产真实乱freesex| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲精品在线观看二区| 精品免费久久久久久久清纯| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 白带黄色成豆腐渣| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲国产色片| 韩国av一区二区三区四区| 欧美在线黄色| 中亚洲国语对白在线视频| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲中文字幕日韩| 五月玫瑰六月丁香| 99热6这里只有精品| 内射极品少妇av片p| 热99在线观看视频| 午夜免费激情av| 精品国内亚洲2022精品成人| 精品人妻偷拍中文字幕| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 婷婷丁香在线五月| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 在线免费观看的www视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 搡老熟女国产l中国老女人| 色噜噜av男人的天堂激情| 三级毛片av免费| 精品一区二区三区人妻视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产熟女xx| 午夜福利免费观看在线| 成人一区二区视频在线观看| 88av欧美| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 一区福利在线观看| av在线蜜桃| 丝袜美腿在线中文| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 又爽又黄a免费视频| 午夜福利18| 最新在线观看一区二区三区| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲精品在线美女| 99riav亚洲国产免费| 婷婷精品国产亚洲av| 免费搜索国产男女视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲av一区综合| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 天美传媒精品一区二区| 欧美日韩国产亚洲二区| 偷拍熟女少妇极品色| 国产精品人妻久久久久久| 国产精品日韩av在线免费观看| 中文字幕久久专区| 变态另类丝袜制服| 真人做人爱边吃奶动态| 99国产综合亚洲精品| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 最近最新免费中文字幕在线| 日韩中文字幕欧美一区二区| 十八禁人妻一区二区| 国产视频一区二区在线看| 日本 欧美在线| 一级黄色大片毛片| 最近最新免费中文字幕在线| av福利片在线观看| 久久久久九九精品影院| 国产一级毛片七仙女欲春2| 1024手机看黄色片| 欧美日韩黄片免| 国产淫片久久久久久久久 | 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲国产精品久久男人天堂| 少妇丰满av| www.熟女人妻精品国产| 欧美午夜高清在线| 国产 一区 欧美 日韩| 日本精品一区二区三区蜜桃| 夜夜躁狠狠躁天天躁|