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    新型微生態(tài)飼料添加劑的致畸試驗

    2015-08-20 02:59:06郝福星周澤偉鄭玲敏張雨梅
    江蘇農(nóng)業(yè)科學 2015年7期
    關(guān)鍵詞:微生態(tài)制劑

    郝福星 周澤偉 鄭玲敏 張雨梅

    摘要:微生態(tài)制劑是飼料及養(yǎng)殖業(yè)中應用比較廣泛的一類添加劑,通過大鼠傳統(tǒng)致畸試驗,評價某生物有限公司研制的新型微生態(tài)飼料添加劑的致畸作用。在Wistar大鼠受孕7~15 d期間,分別對其給予500、100、20 mg/kg劑量的微生態(tài)飼料添加劑進行灌胃,以生理鹽水作為陰性對照;用畸胎率、活胎仔平均畸形率、母體畸胎率等指標評價其致畸作用。結(jié)果表明,受試物各劑量組的孕鼠行為正常,無中毒或死亡情況;受試物各劑量組的吸收胎率、死胎率、畸胎率、活胎仔平均畸形率、母體畸胎率均不高于對照組,且無顯著差異。綜合試驗結(jié)果可知,該飼料添加劑傳統(tǒng)致畸試驗呈陰性,無明顯的致畸作用。

    關(guān)鍵詞:微生態(tài)制劑;飼料添加劑;糞腸球菌;致畸試驗;大鼠

    中圖分類號: S816.73 文獻標志碼: A 文章編號:1002-1302(2015)07-0218-02

    微生物飼料添加劑也稱微生態(tài)制劑,是當前飼料及養(yǎng)殖業(yè)中應用比較廣泛的一類添加劑,常作為藥物添加劑的有效替代品使用。動物微生態(tài)制劑是由正常菌群微生物制成的一類環(huán)保生物制品,它可通過調(diào)節(jié)機體微生態(tài)平衡來預防疾病、提高飼料轉(zhuǎn)化率、促進動物健康、保護生態(tài)環(huán)境,是無毒、無污染的飼料添加劑產(chǎn)品[1],在畜牧業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中有廣泛應用前景[2-3]。糞腸球菌別稱糞鏈球菌,是乳酸菌中的一種,該菌是一種兼性厭氧菌,是能產(chǎn)多種酶、維生素(主要是B族維生素)的有益菌,在動物體內(nèi)可產(chǎn)生大量乳酸、分解酶、多種促生長因子[4]。作為畜禽飼料添加劑,糞腸球菌可用于防治畜禽因腸道菌群失調(diào)引起的下痢,具有調(diào)節(jié)腸道菌群失調(diào)、減少病原菌侵襲、抑制有害菌生長的作用,并且能夠提高飼料轉(zhuǎn)化率、降低生產(chǎn)成本[5-6]。本研究通過大鼠的傳統(tǒng)致畸試驗,考察蛋白質(zhì)修飾糞腸球菌微生態(tài)新制劑作為飼料添加劑使用是否存在致畸作用,以期為該產(chǎn)品的應用提供參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗試劑

    試驗試劑為蛋白質(zhì)修飾糞腸球菌粉劑,活菌數(shù) 5×109 CFU/g,由江蘇省某生物有限公司研制。配制不同濃度的水溶液,以10 mL/kg的體積灌胃。

    1.2 試驗動物

    8周齡Wistar大鼠(清潔級),約100只,購自揚州大學比較醫(yī)學中心。動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(蘇)2012-0004,使用許可證號:SYXK(蘇)2012-0029。分籠飼養(yǎng),自由采食飲水,室溫(22±3) ℃,自然光照,相對濕度55%~75%。

    1.3 試驗方法

    1.3.1 孕鼠及劑量設置 雌鼠、雄鼠按1∶1同籠,次日早晨以檢查到陰道栓的為受孕鼠,記為受孕開始。在受孕7 ~15 d,每天經(jīng)口給予微生態(tài)制劑。試驗分3個受試物劑量組和陰性對照組,每組10只大鼠。添加劑劑量分別設為500、100、20 mg/kg,灌胃給藥;陰性對照組用生理鹽水代替。給藥期間隔天稱1次質(zhì)量,并根據(jù)體質(zhì)量調(diào)整添加劑劑量。

    1.3.2 畸形檢查 于孕20 d稱質(zhì)量后處死孕鼠,剖開腹腔,取出子宮。分別檢查并記錄左、右側(cè)的黃體數(shù)、窩質(zhì)量(子宮連胎鼠)、子宮質(zhì)量,計數(shù)活產(chǎn)幼仔數(shù)、死胎、吸收胎數(shù)。根據(jù)農(nóng)業(yè)部1247號公告中《獸藥大鼠傳統(tǒng)致畸試驗指導原則》中的相應方法進行胎鼠外觀畸形、內(nèi)臟畸形、骨骼畸形的檢查,記錄畸胎總數(shù)和畸形總數(shù)[3],計算死胎率、吸收胎率、畸胎率、活胎仔平均畸形率、母體畸胎率。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

    用SPSS 12.0軟件進行數(shù)據(jù)處理,數(shù)據(jù)用“平均值±標準差(x±s)”表示;顯著性分析采用t檢驗或χ2檢驗。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 對孕鼠體質(zhì)量的影響

    給藥期間孕鼠的一般狀況良好,飲食正常,未出現(xiàn)異常癥狀。試驗期間各劑量組孕鼠體質(zhì)量與陰性對照組比較無顯著性差異,受孕20 d孕鼠體質(zhì)量見表1。

    2.2 對大鼠生殖機能的影響

    受孕20 d后統(tǒng)計微生態(tài)制劑處理及正常對照組孕鼠的黃體數(shù)、著床數(shù)、活胎數(shù)、吸收胎數(shù)、死胎數(shù)。由表2可見,各處理組吸收胎率、死胎率均低于對照組;黃體數(shù)、著床數(shù)、總仔數(shù)、活胎數(shù)、吸收胎數(shù)、死胎數(shù)與對照組比較差異不明顯。

    2.3 對胎鼠發(fā)育的影響

    受孕20 d對各試驗組孕鼠進行剖檢,由表3可見,各處理組平均窩仔數(shù)、尾長與對照組無顯著差異;受試物處理組胎鼠體質(zhì)量、體長顯著低于陰性對照組(P<0.05);100、500 mg/kg 劑量胎盤質(zhì)量顯著低于陰性對照組(P<0.05)。

    2.4 對胎鼠畸形的影響

    畸形檢查中發(fā)現(xiàn)500 mg/kg劑量處理組有1只胎鼠一側(cè)眼球缺失,20 mg/kg劑量處理組、陰性對照組各有1只一側(cè)腎臟缺失,未發(fā)現(xiàn)骨骼畸形;各劑量組在常見各畸形指標上,與正常對照組無明顯差異,詳見表4。

    3 結(jié)論與討論

    試驗結(jié)果表明,本新型微生態(tài)飼料添加劑對Wistar大鼠無明顯的致畸作用。本試驗中受試物對大鼠的生殖機能指標如懷孕率、黃體數(shù)、著床數(shù)、窩仔數(shù)、吸收胎率、死胎率等無明顯影響,對胎鼠也無明顯的致畸作用。但受試物處理組胎鼠的體質(zhì)量及體長均低于對照組,是受試物的胚胎毒性還是由于飼料攝入不足導致母體營養(yǎng)水平不夠引起的,還須進一步的試驗研究。受試物組懷孕母鼠體質(zhì)量均稍低于對照組數(shù)據(jù),可能與受試物添加后飼料適口性不夠好引起攝入減少有關(guān)。如果進行繁殖試驗,特別是多代的繁殖試驗,可以進一步評估對胎兒生長的影響。

    參考文獻:

    [1]滕 穎,陳先國. 動物微生態(tài)制劑的研究進展[J]. 中國獸藥雜志,2005,39(11):47-50.

    [2]王金合. 微生態(tài)飼料添加劑及其在畜禽生產(chǎn)中的應用研究現(xiàn)狀[J]. 畜牧與飼料科學,2009,30(2):36-38.

    [3]丁昕穎,韓永勝,丁得利,等. 飼用微生態(tài)制劑在畜牧生產(chǎn)中的應用及問題[J]. 中國畜禽種業(yè),2014(2):25-27.

    [4]王 紅,許玉軍. 動物微生態(tài)制劑的分類與應用條件[J]. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問,2012(11):56.

    [5]李笑櫻,范 彧,馬秋剛,等. 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期蛋雞飼料營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響[J]. 中國飼料,2011(20):20-23.

    [6]潘寶海,孫冬巖,孫笑非,等. 不同微生物飼料添加劑對斷奶仔豬生長性能的影響[J]. 飼料研究,2014(5):46-47.

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