順氣通腑合劑對胃腸動力障礙大鼠血漿胃動素、乙酰膽堿和生長抑素的影響*

周紹榮，焦蘭農(nóng)，姚建根，何國華，袁成業(yè)，包卿兵，毛 躍

（南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬泰州醫(yī)院普外科，江蘇 泰州226001）

胃腸動力障礙性疾病是臨床常見病，大多與胃腸蠕動功能減弱有關(guān)，而在調(diào)節(jié)胃腸運動中，胃腸激素是重要介質(zhì)[1]。順氣通腑合劑為我院外科經(jīng)驗方，具有順氣通腑、益氣健脾之功效。本實驗選取SD 大鼠構(gòu)建食積動物模型，研究順氣通腑合劑對胃腸激素MTL、Ach 和SS 的影響，探討其促進(jìn)胃腸動力的作用機(jī)制，現(xiàn)報告如下。

1 實驗材料

1.1 實驗藥品

順氣通腑合劑由南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬泰州醫(yī)院制劑室提供，批準(zhǔn)文號：藥制字Z1620030009。枸櫞酸莫沙比利片：江蘇豪森制藥業(yè)股份有限公司，批號：140306。乙酰膽堿（Ach）Elisa 試劑盒：上海源葉生物科技有限公司，批號：14082601。胃動素（MTL）Elisa 試劑盒：上海源葉生物科技有限公司，批號：14082602。生長抑素（SS）Elisa 試劑盒：上海源葉生物科技有限公司，批號：14082603。特制高蛋白、高熱量飼料：由魚松、豆粉、面粉、牛奶粉按1∶2∶1∶1 的比例配成，攪拌均勻后，加水做成餅干，用電熱恒溫干燥箱烘干備用。

1.2 實驗動物

SD 大鼠，40 只，SPF 級，雄性，180～210g，由浙江省實驗動物中心供給。合格證：SCXK（浙）2014-0001。

1.3 實驗條件

給藥前后，SD 大鼠分籠飼養(yǎng)，每籠5 只，喂以全價顆粒鼠飼料（南京協(xié)同生物工程有限公司），自由飲水飲食，室溫20～25℃，每天人工光照12h，室內(nèi)通風(fēng)良好，實驗室相對濕度：65%～70%.

2 實驗方法

2.1 模型制備

40 只SD 大鼠隨機(jī)分成4 組：正常對照組、陰性對照組、莫沙比利組、順氣通腑合劑組，各組動物均為10 只。實驗時，正常對照組喂常規(guī)飼料；其余3組參考李中南等[2]食積動物模型方法制備胃腸動力障礙模型，喂特制的高蛋白、高熱量飼料，自由攝食和飲水，第2 日起加喂25%濃度的牛乳，每次5mL，1 日2 次，連喂5 d。

2.2 樣本采集及檢測

第7 日起，均給予常規(guī)飼料，并給予相應(yīng)藥物灌胃（20mL/kg，2 次/日）：正常對照組、陰性對照組給予生理鹽水，順氣通腑合劑組給予順氣通腑合劑（34.67g/kg），莫沙比利組給予莫沙比利（0.006g/kg）。

連續(xù)給藥7 d 后，各組SD 大鼠以1%戊巴比妥鈉腹腔麻醉，腹主動脈采血，置于抗凝管中，混勻后立即在4℃以下，以3 000 轉(zhuǎn)/min 離心10min，分離血漿于-70℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆?，測定血漿乙酰膽堿（Ach）、胃動素（MTL）和生長抑素（SS）的表達(dá)水平。具體檢測步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行。

3 統(tǒng)計方法

采用SPSS 18.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)以x±s 表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD 法，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

4 實驗結(jié)果

4.1 順氣通腑合劑對食積大鼠體重的影響

造模前，正常對照組和造模組大鼠進(jìn)食飲水正常，體質(zhì)量無明顯差異性，造模后，造模組大鼠體質(zhì)量增長較少，與正常對照組比較有顯著性差異（P＜0.05），造模成功，見表1。治療后，陰性對照組大鼠體質(zhì)量增長緩慢，與正常組比較有顯著性差異（P＜0.01）；順氣通腑合劑組、莫沙比利組大鼠體質(zhì)量與正常組比較無顯著性差異（P>0.05），與陰性對照組比較有顯著性差異（P＜0.05），見表2。

表1 造模前后大鼠體質(zhì)量變化（x±s）

表2 順氣通腑合劑對食積大鼠體質(zhì)量的影響（x±s）

4.2 順氣通腑合劑對食積大鼠血漿Ach、MTL 和SS 的影響

模型組大鼠血漿Ach、MTL 含量降低，SS 含量升高，與正常組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。治療后，順氣通腑合劑組、莫沙比利組可以升高大鼠血清Ach、MTL 含量，降低SS 含量，與陰性對照比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；順氣通腑合劑組與莫沙比利組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。順氣通腑合劑組、莫沙比利組升高血漿Ach 含量，與正常對照組比較有顯著性差異（P＜0.05），升高血漿MTL 含量，降低SS，與正常對照組比較無差異性（P>0.05）。見表3。

表3 順氣通腑合劑對食積大鼠血漿Ach、MTL和SS 的影響（x±s）

5 討論

胃腸動力障礙性疾病屬中醫(yī)學(xué)“腹?jié)M、痞證”等范疇，以腹部脹氣、惡心、嘔吐、噯氣、納差等為主要表現(xiàn)，多因脾胃失調(diào)、升降失司所致。《景岳全書·雜證謨·脾胃》篇云：“凡欲察病者，必先察胃氣；凡欲治病者，必須常顧胃氣，胃氣無損，諸可無慮”，說明胃腸消化功能在疾病的發(fā)生和轉(zhuǎn)歸中起重要的作用。治宜瀉胃腸積滯，通胃腸腑氣，恢復(fù)脾胃升降協(xié)調(diào)功能。順氣通腑合劑（黨參、白術(shù)、生大黃、土茯苓、木香、火麻仁、杏仁、厚樸等組成），以生大黃為君藥，取其祛瘀導(dǎo)滯，清腸通便；以黨參、白術(shù)益氣健脾而補中；佐以木香、厚樸行氣止痛；土茯苓利濕健脾；配以火麻仁、杏仁潤腸通便；諸藥相伍，增強(qiáng)消化道的推進(jìn)性蠕動[3]，全方共奏順氣通腑、益氣健脾之功效。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，胃腸運動功能是受體液調(diào)節(jié)和神經(jīng)調(diào)節(jié)的復(fù)雜生理過程，其中腸神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性和抑制性神經(jīng)元控制著胃腸道的協(xié)調(diào)運動[4]。胃腸激素作為一種調(diào)節(jié)肽在人體內(nèi)廣泛分布，對胃腸動力起重要的調(diào)節(jié)作用，成為胃腸動力藥發(fā)揮藥理作用的生理學(xué)基礎(chǔ)[5]。MTL 作為胃腸激素，在消化期，呈周期性釋放，誘發(fā)胃強(qiáng)烈收縮和小腸明顯的分節(jié)運動。據(jù)報道，MTL 作用于消化道平滑肌上的受體引起平滑肌內(nèi)環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）濃度增加，使細(xì)胞內(nèi)Ca2+從微粒體釋放，Ca2+濃度增加后可引起平滑肌收縮[6]，促進(jìn)胃腸運動。李穎等[7]研究表明，大黃與枳殼、芒硝、厚樸配伍可調(diào)節(jié)實驗動物MTL等胃腸激素的分泌，促進(jìn)胃腸運動，減輕腸黏膜炎性反應(yīng)，促進(jìn)排便。Ach 是目前已知胃腸道最主要的一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)[8]，作用于平滑肌M 受體，通過cAMP 作為第二信使的細(xì)胞膜信號傳導(dǎo)[4]，開放質(zhì)膜上L 型Ca2+通道，Ca2+內(nèi)流使胃腸平滑肌收縮[9]。SS是一種抑制性腦腸肽，廣泛存在于胃腸道粘膜的D細(xì)胞中，以胃竇和胃體最高，在腸內(nèi)越往下含量越低，有抑制胃腸道及胰腺的外分泌的作用，可明顯減少胃液分泌量，并可降低胃液的酸度[10]，抑制胃腸道平滑肌運動，減少小腸對水、電解質(zhì)及營養(yǎng)物質(zhì)的吸收[11]。而且能與胃泌素（GAS）組成GAS-SS-胃酸分泌軸維持胃腸的正常生理功能[12]。大黃可通過促進(jìn)胃黏膜GAS 的分泌，抑制SS 的分泌，進(jìn)而增加胃黏膜的營養(yǎng)性反應(yīng)，減少胃黏膜的細(xì)胞凋亡，實現(xiàn)其對胃腸黏膜的防護(hù)作用[13]。

本實驗結(jié)果顯示，造模大鼠與正常對照組比較，體質(zhì)量增長緩慢，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），且用藥后順氣通腑合劑組大鼠體質(zhì)量與陰性對照組比較有顯著性差異（P＜0.05），說明順氣通腑合劑有促進(jìn)胃腸動力恢復(fù)和營養(yǎng)吸收的作用。模型對照組MTL、Ach 含量均顯著降低，SS 含量升高，與正常對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），用藥后，順氣通腑合劑血漿MTL、Ach 水平顯著升高，SS 含量顯著降低，與模型對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），提示順氣通腑合劑可調(diào)節(jié)血漿中胃腸激素整體水平平衡，以促進(jìn)胃腸動力的作用。武玉清等[14]報道大黃提取物番瀉苷在增強(qiáng)小鼠瀉下功能時，能使腸道MTL 釋放增加，而SS 的釋放降低。順氣通腑合劑促進(jìn)胃腸動力的作用機(jī)制可能是：①通過升高血漿MTL 和Ach 含量，使胃腸平滑機(jī)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加，從而促進(jìn)胃腸平滑肌收縮；②通過抑制SS 分泌，促進(jìn)胃腸道及胰腺外分泌，并激活對胃腸粘膜及機(jī)體的保護(hù)作用，維持胃腸道正常生理功能。本研究為順氣通腑合劑的臨床推廣應(yīng)用提供了理論依據(jù)，并為開發(fā)療效好、副作用少的促胃腸動力的中藥新藥提供了思路。

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