多臺(tái)不同品牌血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)與比對(duì)分析

劉媛，但剛，江忠勇，胡莉娜，謝靜，熊杰

·臨床論著·

多臺(tái)不同品牌血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)與比對(duì)分析

劉媛，但剛，江忠勇，胡莉娜，謝靜，熊杰

目的對(duì)多臺(tái)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)和比對(duì)，以確保本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同品牌血細(xì)胞分析儀對(duì)同一標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果具有可比性。方法以Sysmex2100血細(xì)胞分析儀對(duì)新鮮血定值，然后對(duì)另外3臺(tái)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，按照美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）的要求，每日隨機(jī)選取高、中、低值臨床標(biāo)本8份，分別用以上3臺(tái)血細(xì)胞分析儀測(cè)定WBC、RBC、HGB、PLT、MCV、HCT，各儀器均采用手動(dòng)模式對(duì)每份標(biāo)本連續(xù)測(cè)定2次，連續(xù)測(cè)定5 d，共40份樣本，進(jìn)行偏差評(píng)估，并作散點(diǎn)圖、建立回歸方程和計(jì)算相關(guān)系數(shù)。結(jié)果Sysmex XE-2100、2臺(tái)HORIBA ABX-DX120、邁瑞B(yǎng)C-5800測(cè)定結(jié)果偏差均在可接受范圍內(nèi)，相關(guān)性好（r2≥0.95）。結(jié)論通過校準(zhǔn)和比對(duì)，本實(shí)驗(yàn)室4臺(tái)不同品牌的血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果具有可比性，均可為臨床提供準(zhǔn)確可靠的結(jié)果。

血細(xì)胞分析儀；校準(zhǔn)；偏差；品牌

血細(xì)胞分析儀操作簡(jiǎn)便、快速，準(zhǔn)確度、精密度高，是現(xiàn)代臨床檢驗(yàn)最常用的儀器之一，是血常規(guī)檢查的主要儀器。我院檢驗(yàn)科為滿足大量臨床血常規(guī)標(biāo)本檢測(cè)需要，已購(gòu)置多臺(tái)不同廠家或不同型號(hào)、系列的血細(xì)胞分析儀，因各儀器的檢測(cè)系統(tǒng)和原理有所不同，所以同一份標(biāo)本在不同儀器上的檢測(cè)結(jié)果可能會(huì)有一定的偏差。ISO15189[1]對(duì)檢測(cè)結(jié)果的可比性提出了明確要求，實(shí)現(xiàn)同一實(shí)驗(yàn)指標(biāo)不同檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果的可比性是質(zhì)量管理的基本目標(biāo)。本研究以Sysmex XE-2100為基準(zhǔn)儀器，按照美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）批準(zhǔn)的《用患者樣本進(jìn)行方法比對(duì)及偏倚評(píng)估-批準(zhǔn)指南（EP9-A2）》文件的要求[2]，通過對(duì)Sysmex XE-2100、HORIBA ABX-DX120、BC-58003三類儀器進(jìn)行比對(duì)實(shí)驗(yàn)和分析，探討檢測(cè)結(jié)果是否具有可比性及偏差是否在允許范圍內(nèi)，評(píng)估不同儀器間檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性，為質(zhì)量控制提供依據(jù)，為臨床提供準(zhǔn)確的診斷和療效評(píng)價(jià)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本選自本院門診患者EDTA-K2抗凝靜脈全血標(biāo)本，采集時(shí)間在2 h內(nèi)。每日隨機(jī)選取8份標(biāo)本（含高、中、低值），每份標(biāo)本連續(xù)測(cè)定2次，連續(xù)測(cè)定5 d，共40份標(biāo)本（考慮待測(cè)物的異常情況，分析物濃度應(yīng)盡可能在測(cè)定范圍內(nèi)均勻分布）。

1.2 儀器與試劑日本Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀，法國(guó)HORIBA ABX-DX120（2臺(tái)）血細(xì)胞分析儀，中國(guó)邁瑞B(yǎng)C-5800血細(xì)胞分析儀，均使用各公司原裝配套試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品。

1.3 校準(zhǔn)

1.3.1 Sysmex XE-2100的校準(zhǔn)和樣品定值使用原裝配套校準(zhǔn)品SCS-1000，批號(hào)50610525，取校準(zhǔn)品在Sysmex XE-2100上采用手動(dòng)進(jìn)樣模式連續(xù)測(cè)定6次，取2~6次結(jié)果計(jì)算均值，計(jì)算測(cè)定均值與靶值間的偏差，偏差=（均值-靶值）×100/靶值。按照校準(zhǔn)手冊(cè)上列的CV%判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷，決定是否進(jìn)行校準(zhǔn)系數(shù)修改。

然后取正常成人新鮮靜脈血，在校準(zhǔn)后的Sysmex XE-2100上，采用手動(dòng)進(jìn)樣模式連續(xù)重復(fù)測(cè)定11次，計(jì)算2~11次結(jié)果的均值、變異系數(shù)（CV）、標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD），所測(cè)得的均值為靶值。

1.3.2 用已定值得新鮮血校準(zhǔn)另外3臺(tái)血細(xì)胞分析儀各儀器均嚴(yán)格定期維護(hù)、保養(yǎng)，每日用高、中值室內(nèi)質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)控測(cè)定，保證3臺(tái)儀器均在控。用已賦值的新鮮血采用手動(dòng)進(jìn)樣模式，分別在另外3臺(tái)血球儀上連續(xù)測(cè)定6次，取2-6次結(jié)果計(jì)算均值，計(jì)算測(cè)定均值與靶值間的偏差，判斷標(biāo)準(zhǔn)與校準(zhǔn)Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀相同。

1.4 比對(duì)以Sysmex XE-2100為基準(zhǔn)儀器，HORIBA ABX-DX120、邁瑞B(yǎng)C-5800為比對(duì)儀器。各儀器對(duì)當(dāng)日選取的8份標(biāo)本（保證每份標(biāo)本有足夠量：能夠用基準(zhǔn)儀器作2次測(cè)定；能夠用比對(duì)儀器作2次測(cè)定；如果需要應(yīng)能繼續(xù)進(jìn)行追蹤實(shí)驗(yàn)）分別開始檢測(cè)，測(cè)定各項(xiàng)參數(shù)，儀器均采用手動(dòng)模式對(duì)每份標(biāo)本連續(xù)測(cè)定2次。兩次測(cè)定中，樣本排列順序?yàn)?、2、3、4、5、6、7、8和8、7、6、5、4、3、2、1，順序中的分析物濃度應(yīng)盡可能隨機(jī)排列，以減少交叉污染及漂移對(duì)重復(fù)測(cè)定標(biāo)本平均值的影響。連續(xù)測(cè)定5 d，共40份樣本。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析設(shè)基準(zhǔn)儀器測(cè)定結(jié)果為靶值x，比對(duì)儀器測(cè)定結(jié)果為測(cè)定值y。用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算各儀器40份樣本6個(gè)項(xiàng)目?jī)纱螠y(cè)定的平均值，求基準(zhǔn)儀器與比對(duì)儀器的相對(duì)偏差進(jìn)行偏差分析，相對(duì)偏差=（測(cè)定值-靶值）/靶值×100%。

相關(guān)性分析：以Yi對(duì)Xi作Yi散點(diǎn)圖（Yi，比對(duì)儀器雙份測(cè)定的均值；Xi，基準(zhǔn)儀器雙份測(cè)定的均值；i,樣本數(shù)），求得其相關(guān)系數(shù)r和回歸方程Y= b X+a，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.6 判斷標(biāo)準(zhǔn)相對(duì)偏差判斷標(biāo)準(zhǔn)：以1988年美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案(CLIA'88)允許誤差范圍（TEa）的1/2作為偏倚界限：白細(xì)胞(WBC)為7.5%，紅細(xì)胞(RBC)為3%，血紅蛋白(HGB)為3.5%，血小板(PLT)為12.5%，紅細(xì)胞平均體積(MCV)為3.5%，紅細(xì)胞比容（HCT）為3%[3]。醫(yī)學(xué)決定水平（X c）范圍內(nèi)儀器間相對(duì)偏差（SE%）＜1/2TEa，80%標(biāo)本數(shù)結(jié)果滿足上述條件，則認(rèn)為偏差在可接受范圍內(nèi)。

相關(guān)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：r2≥0.95則分析物濃度范圍合適，方法間具有可比性，比對(duì)通過。

2 結(jié)果

2.1 線性測(cè)定以Sysmex XE-2100檢測(cè)結(jié)果為x軸，以HORIBA ABX-DX120和邁瑞B(yǎng)C-5800檢測(cè)結(jié)果為y軸，對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)40個(gè)樣本均值分別作x、y散點(diǎn)圖(圖1)，目測(cè)無離群點(diǎn)，散點(diǎn)圖分布初步確定各指標(biāo)在HORIBA ABX-DX120、邁瑞B(yǎng)C-5800上檢測(cè)結(jié)果與Sysmex XE-2100檢測(cè)結(jié)果呈直線正相關(guān)。

圖1 ABX-DX120A、ABX-DX120B和BC-5800與XE-2100各檢測(cè)指標(biāo)均值散點(diǎn)圖

2.2 相對(duì)偏差分析比對(duì)儀器HORIBA ABXDX120、邁瑞B(yǎng)C-5800與基準(zhǔn)儀器Sysmex XE-2100間各指標(biāo)的相對(duì)偏差，滿足SE%＜CLIA'88 1/2TEa的樣本數(shù)已超過40份樣本的4/5（表1），各指標(biāo)均達(dá)到偏差可接受要求。

2.3 線性相關(guān)性分析WBC、RBC、HGB、PLT、MCV和HCT 6項(xiàng)指標(biāo)r2值均＞0.95，直線斜率b值均接近1，截距a值除PLT、MCV外，均接近0，見表2。

表2 ABX -DX120A、ABX-DX120B和BC-5800與XE-2100檢測(cè)項(xiàng)目的相關(guān)性分析

3 討論

隨著醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)的發(fā)展，同一檢驗(yàn)項(xiàng)目不同檢測(cè)系統(tǒng)的儀器多種多樣，現(xiàn)代血液分析儀主要應(yīng)用電學(xué)和光學(xué)兩大原理，電學(xué)原理有阻抗法和射頻電導(dǎo)法，光學(xué)原理包括光散射法和分光光度法。各種類型血液分析儀檢測(cè)各種參數(shù)的原理不盡相同[4-5]，各儀器都有獨(dú)立的質(zhì)控系統(tǒng)和試劑系統(tǒng)。我院檢驗(yàn)科有3種不同品牌的血細(xì)胞分析儀，既擔(dān)負(fù)著大量急診和門診、住院標(biāo)本的檢測(cè)，又根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室設(shè)定的復(fù)檢規(guī)則及時(shí)對(duì)異常結(jié)果做儀器復(fù)檢，其中Sysmex XE-2100參加衛(wèi)計(jì)委室間質(zhì)評(píng)并取得優(yōu)秀成績(jī)。因此，我們?cè)趯?duì)HORIBA ABX-DX120、邁瑞B(yǎng)C-5800進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控、定期校準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，又與Sysmex XE-2100進(jìn)行比對(duì)，來判斷不同儀器檢測(cè)結(jié)果是否具有良好可比性，偏差是否在允許范圍內(nèi)，以確保各儀器間結(jié)果一致，從而為臨床提供準(zhǔn)確和穩(wěn)定的報(bào)告結(jié)果。

表1 ABX-DX120A、ABX-DX120B和BC-5800與XE-2100各檢測(cè)項(xiàng)目的相對(duì)偏差分析

通過比對(duì)HORIBA ABX-DX120和邁瑞B(yǎng)C-5800與基準(zhǔn)儀器Sysmex XE-2100間6項(xiàng)指標(biāo)的比較，r2﹥0.95，可認(rèn)為WBC、RBC、HGB、PLT、MCV、HCT這6項(xiàng)指標(biāo)在這3類設(shè)備的檢測(cè)結(jié)果一致性很好；而比對(duì)儀器HORIBA ABX-DX120的MCV參數(shù)r2=0.9621，BC-5800的MCV參數(shù)r2= 0.9562，說明這兩種儀器MCV分析結(jié)果與Sysmex XE-2100的一致性欠佳，但仍然合格。從各儀器的檢測(cè)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，PLT檢測(cè)值不夠穩(wěn)定，主要是因影響PLT自動(dòng)分析的因素比較多，建議在臨床應(yīng)用中，同一臺(tái)血細(xì)胞分析儀室內(nèi)質(zhì)控PLT的CV值控制在4%左右。為保證檢測(cè)結(jié)果有更嚴(yán)格的準(zhǔn)確性和一致性，應(yīng)更全面規(guī)范地實(shí)現(xiàn)質(zhì)量保證、儀器校準(zhǔn)和性能評(píng)價(jià)，除偏差和比對(duì)分析外，實(shí)施對(duì)精密度、攜帶污染率、準(zhǔn)確性、標(biāo)本老化、儀器對(duì)異常標(biāo)本和干擾物的靈敏度、空白讀數(shù)、試劑穩(wěn)定性等的性能驗(yàn)證[6-7]。

目前同一實(shí)驗(yàn)室擁有多臺(tái)血液分析儀已屬普遍現(xiàn)象，如何加強(qiáng)同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)多臺(tái)血液分析儀間全血細(xì)胞計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性和可比性是質(zhì)量控制工作的重點(diǎn)。當(dāng)前“檢驗(yàn)結(jié)果互認(rèn)”已成為社會(huì)關(guān)注的焦點(diǎn)問題之一,而互認(rèn)的前提是檢驗(yàn)結(jié)果必須有可比性。最好的方法是用配套校準(zhǔn)品定期對(duì)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，但配套校準(zhǔn)品不但價(jià)格昂貴，而且有效期較短，基層醫(yī)院難以對(duì)每臺(tái)儀器購(gòu)置配套的校準(zhǔn)品。而新鮮血作為校準(zhǔn)品的替代物校準(zhǔn)血細(xì)胞分析儀不但結(jié)果準(zhǔn)確、可比性好,而且來源方便、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。通過此次比對(duì)試驗(yàn)不難看出，比對(duì)儀器和基準(zhǔn)儀器的線性相關(guān)性良好，偏差小，在工作中可配合相互使用。

[1]中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì).醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床血液學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明[S].CNAS-CL43,2012: 2-4.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].4版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:62.

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[4]張志強(qiáng)，王新鋒.兩種血細(xì)胞分析儀的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)比對(duì)結(jié)果分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2014，24(19):2818-2820.

[5]何平.同一品牌相同類型血液分析儀檢測(cè)結(jié)果的可比性研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2013，17(2):337-338.

[6]陳麗芳，林淑儀，姚淑雯，等.多臺(tái)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果可比性分析[J].廣東醫(yī)藥，2013，44(1):39-40.

[7]熊立凡,劉成玉.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].4版.北京:人民衛(wèi)生出版社, 2009:127-128.

Calibration of differentbrands of blood cell analyzers and comparative analysis

Liu Yuan,Dan Gang,Jiang Zhongyong,Hu Lina,Xie Jing,Xiong Jie Department of Laboratory,Center of Laboratory Medicine/PLA Key Laboratory of High Humidity Medicine,General Hospital of Chengdu Military Command,Chengdu,Sichuan,610083,China

Objective To calibrate a number of blood cell analyzers and make comparison among them in order to ensure the comparability of the testing results for the same sample detected by the different brands of analyzers.Methods Sysmex2100 blood cell analyzer was used to evaluate the fresh blood.The other three blood cell analyzerswere calibrated.According to the requirements of the USCommittee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS),8 sampleswith high,medium,and low value were random ly selected daily to detect WBC,RBC,HGB,PLT,MCV,and HCT by the three blood cell analyzers.Those machines were manipulated in manual mode to test every sample twice for continuous 5 days.Totally 40 samples were tested

the deviation evaluation. Scatterplotwas drawn,and regression equation was established.Correlation coefficientwas calculated.Results The deviation of the testing results by Sysmex XE-2100,two HORIBA ABX-DX120,and Mindray BC-5800 was within the tolerance interval,and the correlation was good(r2≥0.95).Conclusion Through the calibration and comparison,there is certain comparability of the testing results by the four analyzers of differentbrands.All provide accurate and reliable results for the clinic.

blood cell analyzer;calibration;deviation;brand

R 446

A

1004-0188（2015）08-0873-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2015.08.021

2015-07-13）

四川省衛(wèi)計(jì)委科研課題（140007）

610083成都，成都軍區(qū)總醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心檢驗(yàn)科、高濕醫(yī)學(xué)全軍重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

熊杰，電話：028-86570452