掩味頭孢呋辛酯干混懸劑的制備及含量測定

鄧艷斌,余楚欽,林華慶,陳潔,張倫,孫英英

(廣東藥學(xué)院藥物研究所 廣東省藥物新劑型重點實驗室，廣東 廣州 510006)

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掩味頭孢呋辛酯干混懸劑的制備及含量測定

鄧艷斌,余楚欽,林華慶,陳潔,張倫,孫英英

(廣東藥學(xué)院藥物研究所 廣東省藥物新劑型重點實驗室，廣東 廣州 510006)

目的 制備掩味頭孢呋辛酯干混懸劑，并建立HPLC法對其含量進行測定。方法 采用熱熔噴霧冷凍技術(shù)制備掩味的頭孢呋辛酯微粒，并將微粒及輔料通過流化床制粒法制備干混懸劑。色譜條件為Diamonsil-C18(250×4.6 mm，5 μm)作色譜柱，流動相為0.2 mol/L磷酸二氫銨溶液-甲醇(58:42)，流速為1.0 mL/min，檢測波長為278 nm，柱溫為30 ℃，進樣量為20 μL。結(jié)果 所得制劑為類白色顆粒，氣味芳香，味甜。頭孢呋辛酯在25.00～750.0 μg/mL的范圍內(nèi)濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系(r=0.9995)，樣品平均回收率為99.88%，RSD為0.25%。結(jié)論 本方法可成功制得掩味的頭孢呋辛酯干混懸劑，檢測方法準確、可靠、專屬性強，適用于頭孢呋辛酯干混懸劑的含量測定。

頭孢呋辛酯；干混懸劑；制備；含量測定；高效液相色譜法

頭孢呋辛酯(cefurxime axetil，CFA)是葛蘭素史克(GlaxoSmithKline，GSK)公司為克服頭孢呋辛鈉劑型缺陷而研制的β-內(nèi)酰胺類口服抗生素，是第二代頭孢菌素的代表品種之一[1-2]。頭孢呋辛酯口服吸收后，被非特異性酯酶迅速水解生成頭孢呋辛而起抗菌作用[3]。目前國內(nèi)上市的口服頭孢呋辛酯劑型有片劑、膠囊劑、顆粒劑和干混懸劑。干混懸劑由于具有吸收良好、易于服用，適合嬰幼兒、兒童、老人等優(yōu)勢，在臨床應(yīng)用中起到不可或缺的重要地位。

然而頭孢呋辛酯味道極苦，采用普通工藝制備的干混懸劑嚴重影響患者服藥順應(yīng)性。對此，本實驗采用熱熔噴霧冷凍技術(shù)制備掩味的頭孢呋辛酯熱熔包衣組合物，然后將該組合物及其輔料通過流化床頂噴制粒制備干混懸劑。本方法制得的頭孢呋辛酯干混懸劑不僅可以有效掩蓋藥物苦味，并且在不同pH水性溶媒中均具有較高的溶出度(見專利申請?zhí)枺?01410097074.1)。本文在《中國藥典》及文獻的基礎(chǔ)上[4-8]，建立了高效液相色譜法測定頭孢呋辛酯干混懸劑含量，為下一步頭孢呋辛酯干混懸劑的質(zhì)量標準的制定打好基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 頭孢呋辛酯對照品(中國藥品生物檢定所，純度：80.8%，批號：130492-200402)；頭孢呋辛酯原料藥(廣州白云山天心制藥股份有限公司，純度：83.5%，批號：FZ41204071)；頭孢呋辛酯干混懸劑[自制，批號：2013101407、2013101408、2013101420，規(guī)格：125 mg(C16H16N4O8S)]。聚乙烯砒咯烷酮K30(美國ISP公司)；硬脂酸(湖南爾康制藥股份有限公司)；黃原膠(江蘇神華藥業(yè)有限公司)；蔗糖(湖南湘易康制藥有限公司)；黑加侖香精(美國Kerry公司)；磷酸二氫銨、甲醇均為色譜純，其他試劑均為分析純。

1.2 儀器 MS-220型熱熔噴霧制粒機(深圳市信宜特科技有限公司)；Mini Glatt 5流化床(德國Glatt公司)；Ultimate 3000 HPLC 儀 ，包 括 PDA-3000 型 檢 測 器 、Chromeleon 6.8 Version 工作站(美國戴安公司)；BS224S 型電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)；CP225D型電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)。

1.3 實驗方法

1.3.1 干混懸劑的制備：按照專利(申請?zhí)枮?01410097074.1)方法制備。

① 處方：頭孢呋辛酯(以頭孢呋辛計)125 g，硬脂酸 480 g，聚乙烯砒咯烷酮K30 18 g，黃原膠20 g，蔗糖2900 g，聚乙烯砒咯烷酮K30溶液適量，黑加侖香精20 g。

② 取處方量的硬脂酸作為包衣材料和聚乙烯砒咯烷酮K30作為溶出調(diào)節(jié)劑混合均勻，加熱熔融，隨后加入處方量的頭孢呋辛酯，分散均勻后，噴霧冷凍制粒，霧化壓力為0.5 bar，進風溫度為0 ℃。得到掩味的頭孢呋辛酯微粒。

③ 將步驟①所得組合物與黃原膠、蔗糖混合均勻，以聚乙烯砒咯烷酮K30溶液為粘合劑，流化床制粒，干燥，加黑加侖香精，混合均勻，即得干混懸劑產(chǎn)品。

1.3.2 含量測定

① 色譜條件 色譜柱：Diamonsil-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：0.2 mol/L磷酸二氫銨溶液-甲醇= 58:42；流速：1.0 mL/min；檢測波長：278 nm；柱溫：30 ℃；進樣量：20 μL。

② 對照品溶液制備 精密稱取頭孢呋辛酯對照品適量，置于20 mL容量瓶中，加甲醇溶解制成每1 mL中含頭孢呋辛酯2.500 mg的對照品貯備液。精密量取1 mL貯備液，置于10 mL量瓶中，加流動相定容至刻度，制成每1 mL中約含0.2500 mg的對照品溶液。

③ 供試品溶液制備取頭孢呋辛酯干混懸劑20袋，研細，精密稱取適量(約相當于頭孢呋辛125 mg)，置于100 mL容量瓶中，加甲醇適量，振搖使溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻；精密量取5 mL，置于25 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，制成每1 mL中約含0.2500 mg的供試品溶液。

④ Δ3-異構(gòu)體溶液精密稱取頭孢呋辛酯對照品適量，置于50 mL容量瓶中，加甲醇適量，振搖使溶解，加流動相稀釋至刻度，制成濃度為0.2490 mg/mL的Δ3-異構(gòu)體溶液。置于60 ℃水浴中加熱至少1 h，冷卻。

⑤ E-異構(gòu)體溶液精密稱取頭孢呋辛酯對照品適量，置于50 mL容量瓶中，加甲醇適量，振搖使溶解，加流動相稀釋至刻度，制成濃度為0.2510 mg/mL的E-異構(gòu)體溶液。經(jīng)紫外光照射24 h，得含頭孢呋辛酯兩個E-異構(gòu)體的溶液。

⑥ 陰性對照溶液按處方比例稱取輔料制成干混懸劑(不含頭孢呋辛)，精密稱取適量(約相當于含頭孢呋辛125 mg的輔料量)，其余同“1.3.2”項下③方法操作即得。

1.3.3 專屬性：分別取對照品溶液、供試品溶液、Δ3-異構(gòu)體溶液、E-異構(gòu)體溶液和陰性對照溶液，按色譜條件進樣檢測，記錄色譜圖。

1.3.4 線性關(guān)系：精密量取上述對照品貯備液適量，用流動相分別制備成含頭孢呋辛酯0.02500、0.05000、0.1250、0.2500、0.3750、0.5000、0.7500 mg/mL的系列標準溶液，進樣測定。

1.3.5 精密度試驗：取對照品溶液連續(xù)進樣6次，按“供試品溶液制備”項下同法制備溶液，測定峰面積。

1.3.6 重復(fù)性試驗：取同一批樣品(2013101420批)6份，按“供試品溶液制備”項下同法制備溶液，依法測定。

1.3.7 穩(wěn)定性試驗：取重復(fù)性試驗樣品溶液一份，分別在0、1、2、4、6、8、12 h進樣，測定峰面積。

1.3.8 回收率試驗：精密稱取頭孢呋辛酯對照品約100、125、150 mg各3份，分別置于100 mL容量瓶中，按處方比例分別加入空白輔料的各組分，加甲醇適量，振搖使溶解，加流動相稀釋至刻度，精密量取5 mL，置于25 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

1.3.9 樣品含量測定：分別取3批樣品，照“1.3.2”項下③方法制備供試品溶液，依法進樣測定，記錄峰面積，計算含量。

2 結(jié)果

2.1 干混懸劑的制備 所制得的干混懸劑為類白色顆粒，氣味芳香，味甜。

2.2 含量測定 含量測定結(jié)果表明在上述色譜條件下，供試品中的其他成分對頭孢呋辛酯的測定無干擾。

2.3 專屬性 專屬性試驗結(jié)果見圖1。頭孢呋辛酯A、B異構(gòu)體峰之間，頭孢呋辛酯A異構(gòu)體峰與Δ3-異構(gòu)體峰之間的分離度均符合要求。

圖1 專屬性高效液相色譜圖1.陰性對照；2.對照品；3.供試品；4.E-異構(gòu)體；5.Δ3-異構(gòu)體Fig.1 The specialization of the HPLC1.Placebo; 2.Standard solution; 3.Sample solution; 4.CFA E-isomer; 5.CFAΔ3- isomers

圖2 線性關(guān)系標準曲線Fig.2 Standard curve of CFA

2.4 線性關(guān)系 線性關(guān)系結(jié)果見圖2。以主峰B與主峰A峰面積之和(Y)對濃度(X)進行線性回歸，得回歸方程Y=776.07X+4.252 (r=0.9995)。結(jié)果表明，頭孢呋辛酯在25.00～750.0 μg/mL范圍內(nèi)，濃度與峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗 頭孢呋辛酯峰面積的RSD為0.43%。精密度試驗結(jié)果表明儀器的精密度良好。

2.6 重復(fù)性試驗 重復(fù)性試驗所測樣品含量為99.70%，RSD為0.36%，表明重復(fù)性良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗 頭孢呋辛酯峰面積的RSD為0.96%。穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明，供試品溶液在12 h具有良好的穩(wěn)定性。

2.8 回收率試驗 回收率試驗結(jié)果見表1。按上述色譜條件測定，所得的平均回收率為99.88%，RSD為0.25%。結(jié)果表明本方法的回收率試驗良好。

表1 回收率試驗結(jié)果

2.9 樣品含量測定 3批樣品的含量測定結(jié)果分別為100.15%、99.64%、100.06%。

3 討論

常用的掩味技術(shù)有添加矯味劑、固體分散體法、包合法、藥物微球/微囊化法、離子交換法等[9-10]。而頭孢呋辛酯具有味道極苦、服用劑量較大，對濕熱不穩(wěn)定等特點[11]，因此上述的掩味方法并不適用。熱熔噴霧冷凍技術(shù)是在噴霧干燥基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一門制劑技術(shù)，它可將藥物活性成分分散在熔融的材料中，隨后利用霧化器將其噴灑在冷卻塔中，與冷卻塔的空氣進行熱交換后固化得到半成品或成品[12]。Yajima等[13]采用噴霧制粒法掩蓋了甲基紅霉素的不良氣味。Chacornac等[14]采用該技術(shù)制得的泰利霉素微粒掩味效果良好，且不影響藥物體內(nèi)吸收。本實驗將頭孢呋辛酯均勻分散在熔融的硬脂酸中，采用噴霧制粒來達到掩蓋苦味的目的，同時加入聚乙烯砒咯烷酮K30作為溶出調(diào)節(jié)劑，使掩味層具有水滲透性，利于藥物的釋放。本文采用高效液相色譜法測定頭孢呋辛酯干混懸劑的含量，該方法專屬性強、重現(xiàn)性好、穩(wěn)定性高，操作簡便，可用頭孢呋辛酯干混懸劑的質(zhì)量控制。

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(編校：王冬梅)

Preparation and content determination of taste-masked cefuroxime axetil for dry suspension

DENG Yan-bin,YU Chu-qin,LIN Hua-qingΔ,CHEN Jie,ZHANG Lun,SUN Ying-ying

(Institute of Materia Medica, Guangdong Pharmaceutical University, Guangdong Provincial Key Laboratory of Advanced Drug Delivery, Guangzhou 510006, China)

ObjectiveTo prepare taste-masked cefurxime axetil dry suspension and determine the content by HPLC.MethodsUsing the hot-melt spray technology to produce cefuroxime axetil particles for taste masking,then mixing the particles and other materials through the fluidized bed to produce dry suspension.HPLC was used to determine the content of cefurxime axetil with Diamonsil-C18column (250×4.6 mm,5 μm).The mobile phase consisted of 0.2 mol/L ammonium dihydrogen phosphate solution and methanol(58:42),at a flow rate of 1.0 mL/min,at detection wavelength 278 nm.The column temperature was 30 ℃,and the sample volume was 20 μL.ResultsThe preparation was off-white granule with cheerful fragrance and sweet taste.The linear range of cefurxime axetil was 25.00～750.0 μg/mL(r=0.9995) with an average recovery of 99.88%,RSD=0.25%. ConclusionThe taste-masked cefurxime axetil dry suspension is successfully prepared by this method.The analytical method is accurate,reliable and specific and can be used to the content of cefuroxime axetil dry suspension.

cefurxime axetil; dry suspension; preparation; content determination; HPLC

藥物制劑關(guān)鍵技術(shù)研發(fā)及產(chǎn)業(yè)化示范項目(2008A1-E4101)

鄧艷斌，女，碩士，研究方向：緩控釋制劑的研究，E-mail：kb7301125yoyo@sina.com；林華慶，通訊作者，男，學(xué)士，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：緩控釋制劑和中藥新劑型的研究，E-mail：huaqing@vip.tom.com。

R914.5

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1005-1678(2015)01-0160-03