尼莫地平對(duì)大鼠急性腦缺血再灌注損傷NF-κB和caspase-3蛋白表達(dá)的影響

王向慧,王迪

(遼寧醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，遼寧 錦州 121000)

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尼莫地平對(duì)大鼠急性腦缺血再灌注損傷NF-κB和caspase-3蛋白表達(dá)的影響

王向慧,王迪Δ

(遼寧醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，遼寧 錦州 121000)

目的 探討尼莫地平對(duì)大鼠急性腦缺血再灌注損傷中NF-κB和caspase-3蛋白表達(dá)的影響。方法 45只雄性SD大鼠隨機(jī)分為3組，即假手術(shù)組、模型組和尼莫地平注射液治療組，每組15只。參照Z(yǔ)ealonga等的改良線栓法制備大鼠腦缺血再灌注模型。腦缺血再灌注后，利用Bederson法評(píng)價(jià)各組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分，采用TUNEL法檢測(cè)大鼠海馬CAI區(qū)神經(jīng)元凋亡率，免疫組織化學(xué)和Western blot法檢測(cè)NF-κB和caspase-3蛋白表達(dá)情況。結(jié)果 腦缺血再灌注24h后，模型組NF-κB和caspase-3表達(dá)均高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與模型組相比較，尼莫地平治療組NF-κB和caspase-3的表達(dá)顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 尼莫地平可能通過(guò)抑制NF-κB和caspase-3的蛋白表達(dá)，對(duì)缺血再灌注損傷起到保護(hù)作用。

尼莫地平；腦缺血再灌注；NF-κB；caspase-3

當(dāng)前對(duì)腦組織缺血再灌注引起神經(jīng)細(xì)胞死亡的病理生理機(jī)制的研究日趨深入，其臨床應(yīng)用的最終目的就在于搶救可逆性損傷的腦組織，防止基本數(shù)量的腦細(xì)胞功能缺失或消失。要達(dá)到這一目的，單純的血管再通或神經(jīng)保護(hù)治療均難以勝任。因?yàn)閱渭兊难茉偻m有可能恢復(fù)缺血區(qū)的能量供應(yīng)，卻不能完全阻斷例如細(xì)胞內(nèi)鈣超載、自由基生成等復(fù)雜的病理生理過(guò)程，它們?nèi)詫⒋偈箍赡嫘匀毖獡p害發(fā)展為不可逆性損害，而且還可因?yàn)樵俟嘧⒓觿「鞣N神經(jīng)細(xì)胞死亡。而單純的神經(jīng)保護(hù)治療，雖有一定的療效，但由于梗塞區(qū)的血流未恢復(fù)，其病理?yè)p害亦將繼續(xù)。在有效的時(shí)間窗內(nèi)有步驟地將血管再通治療及神經(jīng)保護(hù)治療有機(jī)結(jié)合、聯(lián)合應(yīng)用，將是以后局灶性腦缺血再灌注損傷治療的理想方法和發(fā)展趨勢(shì)。目前公認(rèn)尼莫地平作為一種選擇性鈣通道拮抗劑，具有擴(kuò)張腦血管的作用，主要用于缺血性腦血管疾病，這無(wú)疑是血管再通的理想藥物，就目前一些研究表明，鈣離子紊亂是導(dǎo)致一系列病理生理現(xiàn)象的關(guān)鍵因子。因此，本文主要針對(duì)鈣通道拮抗劑尼莫地平是否對(duì)caspase-3和NF-κB的表達(dá)抑制作用進(jìn)行了初步研究。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)成年雄性SD大鼠45只，體質(zhì)量220～250 g，由遼寧醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(遼)2013-002。

1.2 主要實(shí)驗(yàn)藥品及試劑 尼莫地平注射液購(gòu)自拜耳先靈醫(yī)藥保健股份公司；TUNEL原位檢測(cè)試劑盒購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司，DAB顯色試劑盒購(gòu)自上海潤(rùn)成科技有限公司；Rabbit anti-NF-κB p65購(gòu)自武漢博士德公司；Rabbit anti-caspase-3單克隆抗體購(gòu)自SANTA CRUZ公司；辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔IgG二抗購(gòu)自上海合星生物科技有限公司，其余試劑均由遼寧醫(yī)學(xué)院科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與給藥 隨機(jī)分為3組，每組15只，分別為假手術(shù)組(sham組)、模型組(model組)以及尼莫地平治療組。治療組于再灌注前20 min，再灌注后6、12 h給予腹腔注射尼莫地平(1 mg/kg)，假手術(shù)組和模型組則給予相同劑量的等滲生理鹽水。24 h后對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。所有大鼠單籠飼養(yǎng)，自由飲水?dāng)z食。

1.4 模型的制備 采用Zealonga改良線栓法制備大鼠右側(cè)MCAO模型。動(dòng)物用10%水合氯醛(35 mg/kg)腹腔注射麻醉。仰臥位固定，頸正中線切口，沿胸鎖乳突肌內(nèi)緣分離肌肉和筋膜，分離左側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)，在CCA遠(yuǎn)心端和近心端及ECA處掛線備用。用微動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉ICA，然后近心端結(jié)扎CCA、ECA，然后在距CCA分叉部4 mm剪一小口，將栓線插入到ICA，這時(shí)用繞在CCA遠(yuǎn)心端的細(xì)線輕輕系牢栓線。用眼科鑷輕推栓線，從血管分叉處開始算距離，在插入深度在18 mm時(shí)，緊緊系牢CCA遠(yuǎn)心端的細(xì)線。阻斷血流2 h后，抽出栓線，實(shí)現(xiàn)再灌注。假手術(shù)組除不插栓線外其余步驟同上。再灌注時(shí)間為24 h。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)

1.5.1 神經(jīng)學(xué)功能評(píng)分：各組大鼠均在術(shù)后24 h大鼠清醒后，參照Z(yǔ)ealonga評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)各組大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能體征評(píng)分，1～3分的大鼠為造模成功，對(duì)于不符合條件的大鼠預(yù)以剔除。0分：正常，無(wú)神經(jīng)功能損傷癥狀；1分：不能完全伸展對(duì)側(cè)前爪，輕度神經(jīng)功能缺損；2分：行走時(shí)，大鼠向左側(cè)(癱瘓側(cè))轉(zhuǎn)圈，中度神經(jīng)功能缺損；3分：行走時(shí)，大鼠身體向左側(cè)(癱瘓側(cè))傾倒，重度神經(jīng)功能缺損；4分：不能自發(fā)行走，意識(shí)喪失。對(duì)于實(shí)驗(yàn)中剔除及死亡的大鼠均按照嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)條件統(tǒng)一進(jìn)行補(bǔ)充、分組。評(píng)分越高，說(shuō)明神經(jīng)損傷障礙越嚴(yán)重。

1.5.2 TUNEL法對(duì)腦組織凋亡細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)：腦缺血2 h再灌注24 h后，10%水合氯醛(3 mg/kg)進(jìn)行腹腔麻醉，開胸，心尖插入灌注針頭，剪開右心耳，開放靜脈血。夾閉腹主動(dòng)脈，只灌注上肢及頭腦。先灌注生理鹽水約100 mL，見到大鼠兩前肢及兩肺變白，可改灌注4%多聚甲醛固定，前肢及頸部僵硬表示灌注成功。斷頭取腦，4%多聚甲醛固定24 h，梯度乙醇脫水，定向石蠟包埋，5 μM冠狀位切片。將腦組織切片采用TUNEL法檢測(cè)海馬CAI區(qū)的凋亡陽(yáng)性細(xì)胞，具體操作步驟按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，細(xì)胞核呈棕黃色著色為凋亡陽(yáng)性細(xì)胞。在40×10倍高倍鏡下取互不重疊的5個(gè)視野，計(jì)數(shù)其陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)。

1.5.3 免疫組化染色：石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，用3%過(guò)氧化氫溶液孵育15 min，分別滴加一抗(1:100)在4 ℃下孵育過(guò)夜，PBS緩沖液沖洗3次，每次5 min，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔IgG二抗(1:2000)于37 ℃下孵育30 min，PBS緩沖液洗3次，每次5 min，DAB顯色。顯微鏡下觀察，在40×10倍高倍鏡下取互不重疊的5個(gè)視野，計(jì)數(shù)NF-κB和caspase-3的陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)。

1.5.4 Western-blot法檢測(cè)NF-κB和caspase-3的蛋白表達(dá)：腦缺血再灌注24h后，每組各取大鼠5只，迅速斷頭，取出右側(cè)大腦皮層，置于液氮中冷凍，-80 ℃冰箱保存，取出冷凍的腦組織，然后加入RIPA裂解液，用剪刀將其剪碎，并置于超聲波中超聲粉碎20 s后靜置30 min，4 ℃離心20 min，轉(zhuǎn)速為12000 r/min，留取上清液。按照實(shí)驗(yàn)室常規(guī)上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜后，然后用5%脫脂奶粉對(duì)其封閉1～2 h，分別加入一抗(1:100)于搖床上平緩搖動(dòng)，4 ℃下封閉過(guò)夜，TBST緩沖液沖洗3次，每次10 min，然后加入二抗(1:2000)于搖床上緩慢搖動(dòng)，室溫下孵育1～2 h，TBST緩沖液洗脫3次，每次10 min。采用HRP-ECL發(fā)光法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)?shù)灼耆ㄓ昂?，清水沖凈晾干，標(biāo)定Marker，進(jìn)行分析與掃描。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分 術(shù)后，大鼠清醒后，對(duì)其進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示與sham組相比，model組和尼莫地平治療組均有明顯的神經(jīng)功能缺失，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；尼莫地平治療組與模型組比較，神經(jīng)缺損功能較輕，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組大鼠神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分±s)

*P<0.05，與sham組相比，compared with sham group；#P<0.05，與model組相比，compared with model group

2.2 TUNEL檢測(cè)大鼠腦細(xì)胞凋亡情況 TUNEL法檢測(cè)大鼠腦細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示，sham假手術(shù)組可見極少數(shù)陽(yáng)性凋亡細(xì)胞，model模型組可見大量陽(yáng)性凋亡細(xì)胞，與假手術(shù)比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。尼莫地平治療組陽(yáng)性凋亡細(xì)胞較模型組明顯減少，2組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖1和表2。

圖1 各組大鼠海馬區(qū)TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞(×400)Fig.1 Positive cells in the hippocampus CAI region by TUNEL assay(×400)

組別只數(shù)凋亡陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)sham組54.25±2.15model組553.40±12.15*尼莫地平治療組521.20±5.60#

*P<0.05，與sham組相比，compared with sham group；#P<0.05, 與model組相比，compared with model group

2.3 各組大鼠NF-κB和caspase-3表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞情況 通過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，sham組僅有少量的NF-κB和caspase-3表達(dá)，模型組出現(xiàn)大量的NF-κB和caspase-3表達(dá)，尼莫地平治療組NF-κB和caspase-3的表達(dá)相對(duì)模型組有所減少，但與假手術(shù)組比較明顯增多，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖2、表3。

圖2 免疫組化染色檢測(cè)各組大鼠海馬區(qū)NF-κB表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞和caspase-3表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞(×400) Fig.2 NF-κB positive cells and caspase-3 positive cells in the hippocampus CAI region by immunohistochemistry staining(×400)

組別只數(shù)NF-κB陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)caspase-3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)sham組53.75±2.156.35±2.35model組519.08±2.45*56.62±13.18*尼莫地平治療組538.40±3.25#31.15±7.65#

*P<0.05，與sham組相比，compared with sham group；#P<0.05, 與model組相比，compared with model group

2.4 Western blot法檢測(cè)大鼠腦組織NF-κB和caspase-3蛋白表達(dá)情況 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明模型組NF-κB和caspase-3蛋白表達(dá)均較假手術(shù)組顯著增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；尼莫地平治療組NF-κB和caspase-3蛋白表達(dá)均較模型組顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖3、表4。

圖3 NF-κB和caspase-3蛋白的表達(dá)情況Fig.3 Expression of NF-κB and caspase-3 protein detected by Western blot

組別只數(shù)NF-κBcaspase-3sham組528.46±3.2226.58±5.00model組5100.00±0.00*100.00±0.00*尼莫地平治療組545.87±4.66#36.77±3.82#

*P<0.05，與sham組相比，compared with sham group；#P<0.05，與model組相比，compared with model group

3 討論

尼莫地平是二氫吡啶類鈣通道拮抗劑，是選擇性作用于顱內(nèi)血管極強(qiáng)的鈣通道阻滯劑，可特異性與鈣通道有關(guān)受體可逆性結(jié)合，調(diào)節(jié)鈣離子流入血管平滑肌內(nèi)，逆轉(zhuǎn)血管痙攣，改善腦血流[1]。有研究表明尼莫地平能防止和改善血管痙攣及繼發(fā)性缺血，明顯減輕腦水腫的形成及加快水腫的吸收[2]。血腫的吸收速度主要與血腫周圍新生毛細(xì)血管的增多及吞噬細(xì)胞的聚集有關(guān)[3]。張國(guó)臣等[4]通過(guò)尼莫地平對(duì)兔早期脊髓缺血再灌注損傷的保護(hù)作用的研究中發(fā)現(xiàn)，尼莫地平可以在神經(jīng)行為學(xué)和組織病理學(xué)方面有效的降低脊髓缺血再灌注所帶來(lái)的一系列序貫性損傷，有一定的保護(hù)作用，但其臨床療效仍需在嚴(yán)密設(shè)計(jì)下進(jìn)行臨床研究予以證實(shí)。有相關(guān)研究表明鈣通道阻滯劑硝苯地平具有多巴胺神經(jīng)元中的離子毒性作用和保護(hù)神經(jīng)退行性疾病的作用[5]。細(xì)胞凋亡較早發(fā)生改變的生化指標(biāo)之一是細(xì)胞內(nèi)快速而持續(xù)的鈣離子濃度升高，以無(wú)鈣離子培養(yǎng)基培養(yǎng)或其他方法抑制細(xì)胞內(nèi)鈣離子的升高，均可抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生，另一特征性生化改變是DNA核小體間降解，這種降解過(guò)程發(fā)生在凋亡早期，是由內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶基因的活化和表達(dá)所造成，降解片段及長(zhǎng)度均為180～200 bp的整數(shù)倍數(shù)的DNA片段，可用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，表現(xiàn)為特征性的梯形條帶，染色質(zhì)DNA斷裂的位置，大部分位于核小體間的連接部位，因此易造成核小體間單鏈切口，也可以用原位切口翻譯技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)或定量。

細(xì)胞凋亡是由死亡信號(hào)誘發(fā)的受調(diào)節(jié)的細(xì)胞死亡過(guò)程，是一種主動(dòng)性細(xì)胞死亡，是腦缺血后神經(jīng)元死亡的一種重要形式。在腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ椭?，缺血中心區(qū)以壞死為主，而缺血半暗帶則以神經(jīng)元凋亡為主。蛋白酶系統(tǒng)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)和各種死亡基因及其產(chǎn)物的調(diào)節(jié)作用成為近年來(lái)凋亡發(fā)展研究的中心問題。在受到凋亡刺激時(shí)，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族(caspase)被激活，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，特異性caspase凋亡抑制劑可阻止凋亡進(jìn)展，有研究認(rèn)為caspase對(duì)神經(jīng)元凋亡起關(guān)鍵作用，凋亡的最后實(shí)施是通過(guò)caspase激活而實(shí)現(xiàn)的。

Ghost A等[6]在納米膠囊中槲皮素對(duì)缺血再灌注損傷的成年鼠和幼鼠的神經(jīng)損傷的對(duì)抗治療中發(fā)現(xiàn)，通過(guò)納米膠囊槲皮素的口服治療導(dǎo)致iNOS和caspase-3的活性下調(diào)，使海馬區(qū)神經(jīng)元計(jì)數(shù)降低，有助于理解腦缺血神經(jīng)元損傷的病理生理機(jī)制。Christoph M.Zehendner等[7]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，急性腦缺血中大腦內(nèi)皮細(xì)胞DNA被切成片段之前，caspase-3被快速激活。caspase-3是許多細(xì)胞程序性凋亡不可缺少的部分，在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起著關(guān)鍵作用[8]。線粒體損傷已被證明是細(xì)胞色素C釋放進(jìn)入胞漿中，激活caspase-9，接著引發(fā)caspase-3的激活[9]。Daniel Hernandez-Baltazar等[10]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)在紋狀體注射6-羥基多巴胺，會(huì)使細(xì)胞骨架喪失完整性，在這個(gè)過(guò)程中caspase-3和GSK-3β在神經(jīng)元中的活性被激活，細(xì)胞在注射6-羥基多巴胺后發(fā)生的病變表明，caspase-3的激活可能是細(xì)胞凋亡的內(nèi)在途徑的激活。NF-κB是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元中十分重要的轉(zhuǎn)錄因子，由p50和RelA 2個(gè)亞單位組成的異源二聚體，與它的抑制物IκB結(jié)合成為一種復(fù)合體，平時(shí)以靜止形式存在于細(xì)胞漿中。當(dāng)細(xì)胞受到缺血等各種刺激時(shí)IκB被一種未知的蛋白酶磷酸化后降價(jià)，從NF-κB二聚體上脫落。這種與IκB脫離后的NF-κB能夠移位到細(xì)胞核內(nèi)，在它的靶基因的同源序列位點(diǎn)與其結(jié)合，使這些基因的表達(dá)增加。NF-κB被激活后繼而引起各種基因的表達(dá)，它們之中的大多數(shù)被認(rèn)為是參與了腦的炎癥和免疫過(guò)程。此外腦組織中病毒的復(fù)制也受NF-κB的調(diào)控[11]。缺氧刺激可激活NF-κB，從而使p53表達(dá)上調(diào)，Bcl-2表達(dá)下調(diào)，此現(xiàn)象可被普羅布考和二氫吡咯二硫卡所抑制[12]。對(duì)局灶性腦缺血再灌注模型的研究中，Stepenson發(fā)現(xiàn)缺血持續(xù)2 h，再灌注2、6、12 h后，缺血后的皮質(zhì)區(qū)及基底節(jié)區(qū)NF-κB向細(xì)胞核遷移，而正常細(xì)胞核內(nèi)沒有發(fā)現(xiàn)NF-κB的免疫活性。Schnaider等[13]發(fā)現(xiàn)p50基因敲除大鼠與野生型大鼠相比，p50基因敲除大鼠缺血損傷明顯減輕，提示NF-κB損傷缺血腦組織。NF-κB的激活受其細(xì)胞質(zhì)中抑制蛋白IκB的調(diào)節(jié)。IκB結(jié)合NF-κB掩蓋其核定位信號(hào)，從而滯留NF-κB于細(xì)胞質(zhì)中。為評(píng)價(jià)腦缺血后核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB對(duì)MMP-9基因表達(dá)的潛在機(jī)制，采用差速離心結(jié)合免疫組化技術(shù)，觀察了不同亞細(xì)胞組分NF-κB及β-actin蛋白水平變化。提示前腦缺血誘導(dǎo)NF-κB核異位增加功能上調(diào)，可能參加了缺血后腦組織基因表達(dá)調(diào)節(jié)[14]。研究表明，NF-κB激活可導(dǎo)致腦缺血再灌注神經(jīng)元凋亡，其機(jī)制并不明確，可能是NF-κB激活后可誘導(dǎo)多種細(xì)胞因子、粘附因子和趨附因子高表達(dá)，加重腦缺血再灌注損傷。因此抑制NF-κB激活成為治療腦缺血再灌注損傷的新方法[15]。

本研究將為進(jìn)一步探討尼莫地平保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的分子機(jī)制及將尼莫地平更好地應(yīng)用于臨床治療提供有意義的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。結(jié)果顯示，尼莫地平能夠顯著抑制caspase-3、NF-κB因子的表達(dá)，但其是否直接作用于神經(jīng)細(xì)胞鈣通道，還是間接抑制caspase-3、NF-κB致病因子的表達(dá)，需要進(jìn)一步研究。

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(編校：吳茜)

Effects of nimotop on NF-κB and caspase-3 expression in rat brain tissue after cerebral ischemic reperfusion

WANG Xiang-hui,WANG DiΔ

(Basic Medical College，Liaoning Medical University,Jinzhou 121000, China)

ObjectiveTo investigate the effect of nimotop on the expression of NF-κB and caspase-3 in the hippocampus CAI regions of rats with cerebral ischemic reperfusion.Methods45 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham-operated group, model group and nimotop treatment group,each had 15 rats.The rat model of middle cerebral artery occlussion(MCAO) were established according to Zealonga method.After 24h cerebral ischemia reperfusion, Bederson method was used to evaluate nerve function score, TUNEL method to detect the rat hippocampal CAI area neuronal apoptosis rate, immunohistochemistry and Western blot to detect NF-κB and caspase-3 protein expression.ResultsAfter 24 h cerebral ischemia reperfusion, compared with control group, NF-κB and caspase-3 protein expression in model group were increased, the difference between two group was significant(P<0.05); compared with model group, NF-κB and caspase-3 protein expression in nimotop treatment group were significantly reduced, and the difference was significant(P<0.05). ConclusionNimotop has protective effect to ischemia-reperfusion injury rats, its mechanism may be related to inhibit the NF-κB and caspase-3 protein expression.

nimotop; ischemic reperfusion; NF-κB; caspase-3

錦州市科學(xué)技術(shù)計(jì)劃項(xiàng)目(11A1E32)；國(guó)家人力資源社會(huì)保障部留學(xué)人員科技活動(dòng)項(xiàng)目(2011LX007)

王向慧，女，碩士，研究方向：腦缺血再灌注損傷及其機(jī)制，E-mail：wangxianghui_2009@163.com；王迪，通訊作者，女，博士，教授，研究方向：腦卒中基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究，E-mail：tulip_wang@yahoo.com。

R972.4

A

1005-1678(2015)01-0010-04