原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球的制備及理化特性研究

王大衛(wèi)，溫寶芳，商洪才，馮占芹，張維芬,Δ

(1.朐山醫(yī)院 中醫(yī)內(nèi)科，山東 臨朐 262600；2.濰坊醫(yī)學(xué)院 臨床學(xué)院，山東 濰坊 261053；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)內(nèi)科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/中醫(yī)內(nèi)科學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100000；4.濰坊醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，山東 濰坊 261053)

?

原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球的制備及理化特性研究

王大衛(wèi)1?，溫寶芳2?，商洪才3，馮占芹4，張維芬3,4Δ

(1.朐山醫(yī)院 中醫(yī)內(nèi)科，山東 臨朐 262600；2.濰坊醫(yī)學(xué)院 臨床學(xué)院，山東 濰坊 261053；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)內(nèi)科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/中醫(yī)內(nèi)科學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100000；4.濰坊醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，山東 濰坊 261053)

目的 制備原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球并對(duì)其理化特性進(jìn)行考察。方法 采用噴霧干燥法制備原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球，掃描電鏡觀察不同藥物載體比例微球的粒徑、外觀，并對(duì)其體外釋放、含水率、溶脹率、固密度等理化特性進(jìn)行考察。結(jié)果 噴霧干燥法成功構(gòu)建原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球A、B、C 3種微球，電鏡結(jié)果顯示原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球平均外觀圓整，表面有褶皺，粒徑在2～15 μm分布均勻；體外釋放結(jié)果表明，原花青素A、B、C 3種微球累計(jì)釋放分別為25.07%、38.83%和60.00%，無(wú)突釋現(xiàn)象；原花青素24 h時(shí)累計(jì)釋放分別為28.42%、41.82%和67.52%，48 h累計(jì)釋放分別為28.89%、43.17%和72.86%，微球具有緩釋作用。含水率、溶脹率、固密度結(jié)果分為15.35%～23.51%、46.50%～105.80 %、0.375～0.496。結(jié)論 噴霧干燥法成功構(gòu)建原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球，微球表面有褶皺，粒徑固密度、溶脹等特性良好，具有緩釋作用，有望成為肺吸入給藥的良好載體。

原花青素；白芨多糖；殼聚糖；噴霧干燥；微球；理化特性

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，大氣顆粒物嚴(yán)重影響人體健康，PM2.5每年造成80萬(wàn)人死亡，已經(jīng)成為致死的重要因素[1]。大氣顆粒物是懸浮于空氣中顆粒的總稱，按照其空氣動(dòng)力學(xué)粒徑分為總懸浮顆粒物(TSP， 空氣動(dòng)力學(xué)直徑小于 100 μm，下同)、可吸入顆粒物(PM10)、細(xì)顆粒物(PM2.5)和超細(xì)顆粒物(PM0.1)[2]。PM10通常沉積在上呼吸道、氣管和主支氣管；PM2.5主要沉積到細(xì)支氣管、肺泡[3]，其中更細(xì)的成分PM0.1還可以穿過(guò)肺泡進(jìn)入血液。短期暴露于PM2.5與呼吸系統(tǒng)疾病的入院率有關(guān)，PM2.5質(zhì)量濃度每升高10 μg/m3，呼吸系統(tǒng)疾病的病死率就會(huì)升高1.51%[4]。研究人員對(duì)北京市PM2.5暴露的急性健康損害風(fēng)險(xiǎn)和經(jīng)濟(jì)損失進(jìn)行了評(píng)估，結(jié)果顯示急性支氣管炎和哮喘是 PM2.5引發(fā)的主要疾病，占90%以上[5]。大氣粗顆粒物可誘導(dǎo)人肺 A549 上皮細(xì)胞產(chǎn)生大量超氧陰離子和過(guò)氧化氫(hydrogen peroxide, H2O2)等，引起細(xì)胞氧化應(yīng)激[6]。PM2.5進(jìn)入機(jī)體后，可促進(jìn)一氧化氮( nitric oxide，NO)、一氧化氮合成酶( nitric oxide synthase，NOS) 、丙二醛(malonaldehyde，MDA)等氧化產(chǎn)物增加，同時(shí)抑制谷胱甘肽過(guò)氧化物(glutathione peroxidase，GSH-Px) 、超氧化物歧化酶( superoxide dismutase，SOD) 、過(guò)氧化氫酶(catalase，CAT)等抗氧化產(chǎn)物的產(chǎn)生，最終導(dǎo)致機(jī)體總抗氧化能力(total antioxidant capacity，T-AOC)下降[7]。PM2.5容易吸附各種有毒的有機(jī)物和重金屬，引起氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致機(jī)體損傷，被認(rèn)為是影響健康的主要作用機(jī)制[8]。由此可見(jiàn)，空氣污染對(duì)健康的影響已成為我國(guó)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題，針對(duì)PM2.5造成的健康風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行有效的干預(yù)，已成為我國(guó)醫(yī)藥研究領(lǐng)域亟需解決的重大科學(xué)問(wèn)題，而目前尚無(wú)有效的預(yù)防及治療辦法，如何利用中醫(yī)藥特有的優(yōu)勢(shì)對(duì)相關(guān)疾病進(jìn)行科學(xué)、有效應(yīng)對(duì)也成為醫(yī)藥工作者重要的責(zé)任、契機(jī)和挑戰(zhàn)[6]。

原花青素(proanthocyanidins，PC)是葡萄籽中提取的多酚類物質(zhì)，是由兒茶素、表兒茶素及其沒(méi)食子酸酯組成的多聚體[9]，具有抗腫瘤、抗氧化、清除自由基、保護(hù)心血管等藥理作用[10-11]。馬玉紅等[13]研究H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激損傷作用及原花青素對(duì)其預(yù)防作用發(fā)現(xiàn)，原花青素可以顯著減少細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)生成，結(jié)果表明原花青素可減輕H2O2引起PC12細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激損傷。趙艷萌等[12]研究發(fā)現(xiàn)葡萄籽原花青素對(duì)順鉑所致大鼠腎臟氧化損傷和線粒體損傷具有防護(hù)作用。原花青素是一種很好的氧自由基清除劑和脂質(zhì)過(guò)氧化抑制劑[13]，但原花青素體外穩(wěn)定性差，隨聚合度增加，口服吸收降低[14-15]，臨床應(yīng)用受到限制。因此，利用原花青素具有抗氧化損傷的優(yōu)勢(shì)，通過(guò)新劑型和給藥途徑研究，提高原花青素的生物利用度，促進(jìn)藥物吸收。

肺吸入微球給藥系統(tǒng)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的新劑型，微球沉積于肺部可以延緩藥物的釋放，且可保護(hù)藥物不受酶的水解，可以通過(guò)工藝的優(yōu)化，得到大小、形狀和孔隙率符合要求的微球，這些特性決定了微球是較好的肺部給藥制劑，生物可降解微球作為肺部控釋給藥載體受到廣泛關(guān)注。

采用生物降解材料制備的微粒載藥系統(tǒng)被廣泛用于干粉吸入給藥[16-17]，作為天然可降解的高分子載體材料，殼聚糖微球具有的獨(dú)特的物理化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)，使其尤其適用于肺部給藥系統(tǒng)[18-20]。白芨多糖是從白芨藥材中經(jīng)一定工藝提取所得的多糖 ，具有抗炎 、 促凝血 、 抗病毒 、 抗腫瘤 ，抗氧化等生物學(xué)活性[21]， 作為天然高分子材料 ， 有功能緩釋性、局部滯留性、自身降解性、無(wú)刺激性、無(wú)不良反應(yīng)等特性，用白芨膠制備的混懸型洗劑、搽劑，穩(wěn)定性好[22]。

本研究以白芨多糖/殼聚糖作為藥物載體，原花青素為模型藥物，采用噴霧干燥法制備原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球，并對(duì)微球形態(tài)、粒徑、含水率、溶脹率、固密度、體外釋放等理化特性進(jìn)行評(píng)價(jià)，為開(kāi)發(fā)防治PM2.5引起肺氧化損傷的吸入給藥系統(tǒng)提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 殼聚糖(CTS，脫乙酰度≥85%，山東萊州市海力生物制品有限公司)；冰乙酸(青島海濱試劑，AR)；白芨多糖(北京華清美恒天然產(chǎn)物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司)；磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉(上?；瘜W(xué)試劑公司，AR)。

1.2 儀器 EL204型電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)；Büchi?290小型噴霧干燥儀(瑞士步琦有限公司，噴嘴直徑0.7 mm)；JCM-6000 NeoScope 臺(tái)式掃描電鏡(Scanning Electron Microscope，怡星公司)；UV-8000/8000A/8000S雙光束紫外分光光度計(jì)(Ultraviolet Spectrophotometric， 上海元析儀器有限公司)；GWJ-4型智能粒徑檢測(cè)儀(天津天大天發(fā)科技有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球的制備：精密稱取室溫下真空干燥至恒重的白芨多糖及原花青素各適量，溶于1000 mL 0.5%的殼聚糖乙酸溶液中，0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，續(xù)濾液經(jīng)蠕動(dòng)泵導(dǎo)入Büchi290小型噴霧干燥器的雙流向螺旋式噴嘴，噴霧干燥條件為進(jìn)口溫度：110 ℃、出口溫度：55 ℃～75 ℃，進(jìn)料速度：3 mL/min、空氣流量：400 L/h，噴霧干燥“一步”制得微球粉末A、B、C、D，收集微球粉末于干燥器中，備用條件見(jiàn)表1。

表1 噴霧干燥微球的處方組成(%，W/V)Tab.1 Composition of formulations used for aqueous solution to be spry dried(%，W/V)

1.3.2 微球粒徑：取適量干燥后的載藥微球加至超純水中，磁力攪拌器使其分散均勻后，放入激光粒度分析儀中測(cè)定微球的直徑及粒徑分布。

1.3.3 微球形態(tài)：取少許粉末樣品撒于樣品蓋上，噴金，然后在高壓條件下成像，用掃描電鏡觀察。

1.4 含水率 取數(shù)個(gè)規(guī)格相同且干燥恒重的稱量瓶，分別稱其重量記為Wn，分別加入適量的微球后稱其重量，記為W(其中藥物重為W-Wn)，移至105 ℃烘箱中干燥4 h，取出，置干燥器中冷卻30 min，迅速稱定重量(W′)，再置105 ℃烘箱中干燥0.5 h，取出，置干燥器中冷卻30 min，迅速稱定重量(W′)，2次恒重之差不超過(guò)0.3 mg，計(jì)算微球的含水率。則含水率的計(jì)算公式為(1)：

(1)

1.5 溶脹率 精密稱取干燥的原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球適量(Wd)分散于5 mL試管中，加入4 mL 磷酸鹽緩沖溶液(0.2 M，pH 6.8)溶解，漩渦振蕩5 min，置于室溫12 h以上直至達(dá)到溶脹平衡，離心，棄去上清液，用濾紙將微球表面的水分吸干，精密稱重溶脹后的微球 (Wn)，按下式計(jì)算溶脹率(SR%)(2)：

(2)

1.6 固密度 參考USP24附錄(616)的方法測(cè)定粉末固密度，將各處方的粉末填充于小塑料瓶(5 mL)中，從一定高度(約14 mm)按規(guī)定次數(shù)(20次)落下，利用落下的撞擊力使粉末裝緊，并不斷加入粉末，直至填滿且溢出瓶口，刮去多余粉末，準(zhǔn)確測(cè)定粉末重量及塑料瓶?jī)?nèi)容積，將粉重和容積相比即得粉末的固密度。

1.7 體外釋放 精密稱取不同比列微球置于扎緊一端的透析袋內(nèi)(MWCO：3500)，加釋放介質(zhì)0.2 M pH 6.8磷酸鹽緩沖液2 mL封口，置于裝有50 mL釋放介質(zhì)的具塞錐形瓶中于37 ℃條件下，恒溫振蕩器(100 r/min)定時(shí)取樣2 mL釋放介質(zhì)，并隨時(shí)補(bǔ)充同溫等量新鮮介質(zhì)，以空白微球?yàn)閷?duì)照，在286 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(A)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程，計(jì)算原花青素在溶液中的累計(jì)釋放量(cumulative release， CR)(3)：

(3)

式中：Mt是微球在PBS溶液中t時(shí)間時(shí)茶堿的釋放量，M0為微球中的藥物含量。

2 結(jié)果

2.1 微球的電鏡掃描結(jié)果 微球表面呈光滑球形、半褶皺或全褶皺的3種不同形態(tài)微粒，隨著白芨多糖含量的升高，噴霧干燥微粒表面褶皺程度逐漸不明顯,白芨多糖/殼聚糖空白微球D表面呈光滑球形。微球A均有褶皺，大小均勻，無(wú)粘連；微球B具有褶皺，粒徑較不均勻；微球C有的具有半褶皺，部分表面光滑，有粘連；白芨多糖/殼聚糖空白微球D大部分表面光滑，分布均勻，無(wú)明顯粘連。見(jiàn)圖1。

圖1 微球的電子顯微鏡掃描圖A.原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球(1︰1 ︰1)；B.原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球(1︰2 ︰1)；C.原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球(1︰4 ︰1)；D. 白芨多糖/殼聚糖空白微球(1︰1)Fig.1 Scanning electron micrograph images of chitosan and amino-chitosanA. PC/ BSP/CTS microspheres (1:1:1); B.PC/ BSP/CTS microspheres(1:2:1);C.PC/BSP/CTS microspheres (1:4:1); D.Blank BSP/CTS microspheres(1︰1)

2.2 不同藥物載體比例原花青素微球的粒徑 用粒度分析儀測(cè)得所制備的原花青素/白芨多糖/殼聚糖4種微球粒徑的分布范圍分別是10～20、2～15、10～25、2～15 μm，粒徑分布在2～15 μm范圍內(nèi)的微球占總數(shù)的87.9%，各組微球粒徑分布較均勻。見(jiàn)圖2。

圖2 不同藥物載體比例原花青素微球的粒徑A.原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球(1︰1 ︰1)；B.原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球(1︰2 ︰1)；C.原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球(1︰4 ︰1)；D.白芨多糖/殼聚糖空白微球(1︰1)Fig.2 The PC microspheres particle size of the proportion of different drug carriers(n=3)A.PC/ BSP/CTS microspheres (1:1:1); B.PC/ BSP/CTS microspheres(1:2:1);C.PC/BSP/CTS microspheres (1:4:1); D.Blank BSP/CTS microspheres(1:1)

2.3 不同藥物載體比例原花青素微球的含水率、溶脹率和固密度 在相同的相對(duì)濕度和時(shí)間條件下，微球A，B，C，D的含水率分別為19.20%，26.51%，15.35%，16.80%，見(jiàn)圖3(A)。由此圖可以知，在相同的相對(duì)濕度和時(shí)間時(shí)，微球C含水率低于其他3種微球，這會(huì)使顆粒間易于粘連，影響微球的性能。

圖3 不同藥物載體比例原花青素微球的(A)含水量、(B)溶脹率、(C)固密度(n=3)Fig.3 The moisture content , swelling rate, and tapped density of microspheres(n=3)(A)Moisture content,(B): Swelling rate,(C)Tapped density

在pH 6.8的溶液中微球12 h以上直至達(dá)到溶脹平衡，原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球(pH 6.8)的溶脹結(jié)果表明，微球A，B，C，D的溶脹率分別為105.80%，46.50%，73.62%，95.71%，見(jiàn)圖3B。

原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球A、B、C、D的固密度值分別是0.38、0.49、0.42、0.40 g/cm3，見(jiàn)圖3(C)。

2.4 體外釋放 藥物/載體比例是影響微球釋放的重要因素，由圖4可知，微球A、B、C在最初2 h內(nèi)原花青素累計(jì)釋放分別為25.07%、38.83%和60.00%，沒(méi)有突釋現(xiàn)象。原花青素的釋放隨白芨多糖含量的增加，藥物釋放速度加快。微球C在2 h內(nèi)達(dá)到60.00%，而微球A僅釋放25.07%。微球C在24 h時(shí)原花青素累計(jì)釋放67.52%，微球A、B在同一時(shí)間段內(nèi)僅為28.42%、41.82%，微球C釋放比微球A、B快，這一結(jié)果表明，載體白芨多糖比例繼續(xù)增加，緩釋作用增強(qiáng)。微球A、B、C在48 h原花青素累計(jì)釋放量分別為28.89%、43.17%和72.86%，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，微球中原花青素釋放速率降低。微球中原花青素釋放速率Microspheres A

圖4 不同藥物載體比例原花青素微球的體外釋放(PBS, pH 6.8，n=3)Fig.4 Release profile of PC microspheres of the proportion of different drug carriers at PBS (pH 6.8, n=3)

3 討論

粒子形態(tài)影響沉積性能，藥物粒子間若接觸緊密，會(huì)導(dǎo)致難以分離，因此要減小粒子之間的相互接觸面積，降低粒子的表面自由能[23]。Adi等[24]用不同的噴霧干燥參數(shù)制備了不同表面皺褶度的牛血清白蛋白藥物粒子，結(jié)果顯示，當(dāng)皺褶度增大時(shí)，粒子之間的黏附力減小，藥物的可吸入細(xì)粉組分值增大。He等[25]已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，微球表面的皺折可能是噴霧干燥過(guò)程中的條件、處方組成等多種因素造成的。Chew等[26]報(bào)道表面帶有皺折的實(shí)體圓形微球要比光滑微球具有更高的呼吸分?jǐn)?shù)。褶皺性粒子提高藥物微?？晌胄缘年P(guān)鍵，在于微粒的褶皺性降低了微粒與載體的相互作用力，從而減小微粒間的聚集[27]，以提高微粒的分散性和可吸入性。本實(shí)驗(yàn)制備的原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球A、B、C，在噴霧干燥過(guò)程中產(chǎn)生的微球表面褶皺結(jié)構(gòu)，一方面減少了微球之間的接觸，與表面較光滑的微球相比其粘附力降低，降低了粒子的表面自由能，另一方面具有褶皺結(jié)構(gòu)的微球分散性較少依賴于吸入裝置和吸入氣流[28]。因此本實(shí)驗(yàn)制作的具有表面褶皺結(jié)構(gòu)的原花青素/白芨多糖/殼聚糖具有較好的沉積性能，可以考慮作為肺吸入用藥。

載體的作用多為吸附藥物粒子，提高粉霧劑的流動(dòng)性。載體的粒徑、載體流動(dòng)性、載體與藥物的比例對(duì)于干粉吸入劑都有重要影響。原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球的制備過(guò)程中，白芨多糖的劑量對(duì)微球特性的影響通過(guò)含水率表達(dá)。含水率又稱吸濕性，通常，吸濕增重可直接反映適度條件對(duì)粉體的影響。濕度的增加會(huì)影響離子的大小，使粉末聚集，破壞其分散性，影響藥物效果[29]，也會(huì)影響微球的霧化性能。吸濕性強(qiáng)的藥物以粉末形式給藥，粒子粒徑因聚集或吸收水分而增大，易于在呼吸道截留。由于白芨多糖具有一定的吸濕性，當(dāng)白芨多糖載體的含量增加時(shí)，微球的吸濕性增加，所以得到的微球的吸濕率隨著白芨多糖載體的比例增加而增加。原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球C的含水率與白芨多糖/空白D微球相似，說(shuō)明白芨多糖/殼聚糖微球載藥原花青素以后不影響其吸濕特性。 藥物的溶解性是影響釋放的一個(gè)重要因素，難溶的藥物釋放較慢[30]。微球A在pH6.8易于溶脹，溶脹能力的差異很可能是由于4種微球的處方組成、時(shí)間等多種因素造成，4種微球的組成處方中，微球A，B，C 3種處方白芨多糖含量不同，可能是造成這3種微球溶脹率不同的主要因素。粒子的固密度是指密實(shí)狀態(tài)下單位體積粉末的質(zhì)量，也稱為粉末真密度，它表征的是粉末離子本身由于其形態(tài)特征所體現(xiàn)出的密度差異?？諝鈩?dòng)力學(xué)徑是指相同沉降速度的單位密度球體的粒徑。影響粒子在呼吸道沉積的因素很多，包括沉降、擴(kuò)散、慣性撞擊、截留，靜電等作用[31]，而其中沉降對(duì)粒子在肺部的沉積起主要作用。 文獻(xiàn)報(bào)道[32]，粒子的密度可以通過(guò)固密度估算，約為固密度的1.26倍，通過(guò)固密度以及平均粒徑的測(cè)定結(jié)果可以得出粉體的單個(gè)粒子所具有的空氣動(dòng)力學(xué)徑，進(jìn)而評(píng)價(jià)微球是否符合肺部粒子吸入的要求。 藥物顆粒固密度愈低，其可呼吸比例越高。結(jié)果見(jiàn)圖2(C)，載體比例不同，固密度值也不同(0.375～0.496)，本實(shí)驗(yàn)制的微球從含水率、溶脹率、固密度3個(gè)性能來(lái)看，微球B結(jié)果最符合肺粒子吸入的要求，適合肺部吸入給藥，但還存在一些問(wèn)題有待進(jìn)一步解決，尤其是在處方設(shè)計(jì)和給藥裝置、體外評(píng)價(jià)方法以及長(zhǎng)期安全性評(píng)價(jià)。

緩釋制劑是指用藥后能在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)持續(xù)釋放藥物以達(dá)到延緩藥效目的的制劑。Pandey等[33]制備了利福平、異煙肼和吡嗪酰胺的聚乳酸-乙醇酸(PLGA)納米粒，給藥后釋放時(shí)間長(zhǎng)達(dá)11 d，消除半衰期和平均滯留時(shí)間顯著延長(zhǎng)。圖3結(jié)果所示微球C藥物的釋放加快，這可能是由于隨著藥物載體含量的提高，微球膜內(nèi)外的濃度差加大，導(dǎo)致初始速率加快。張珠[34]用加熱固化法制備利福平殼聚糖蛋白微球時(shí)發(fā)現(xiàn)，藥物/載體比例高或低皆可導(dǎo)致藥物釋放加快，要有藥物/載體比例適當(dāng)，才能獲得緩釋效果。圖3結(jié)果所示，微球C同其他3種微球比較，藥物/載體比例適當(dāng)，具有較好的緩釋作用，有望成為緩釋制劑進(jìn)一步研究。

綜上所述，噴霧干燥法能成功地制備原花青素/白芨多糖/殼聚糖微球，得到的微球粒徑均勻、外觀圓整表面有褶皺，通過(guò)含水率、溶脹率、固密度及體外釋放等特性的分析，結(jié)果表明微球A、B、C具有較好的含水率、溶脹率、固密度，微球B結(jié)果符合肺粒子吸入的要求，但還需進(jìn)一步改進(jìn)，微球C具有良好的緩釋效果，原花青素/白芨多糖/殼聚糖有望研制成為肺吸入干粉制劑。

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(編校：王冬梅)

Preparation and characterization of proanthocyanidins/ bletilla striata polysaccharide/chitosan microsphere

WANG Da-wei1?, WEN Bao-fang2?, SHANG Hong-Cai3, FENG Zhan-qin4, ZHANG Wei-fen3,4Δ

(1.Department of Traditional Chinese Internal Medicine, Qushan Hospital, Linqu 262600, China; 2.Clinical College, Weifang Medical University, Weifang 261053, China; 3.Beijing Chinese Medicine University, Key Laboratory of Ministry of Education of Chinese Internal Medicine, Beijing Key Laboratory of Chinese Internal Medicine,Beijing 100000, China; 4.College of Pharmacy, Weifang Medical University, Weifang 261053, China)

ObjectiveTo prepare proanthocyanidins/bletilla striata polysaccharide/chitosan microspheres (PC/BSP/CTS)and the physic-chemical characterizations were investigated.MethodsThe PC/BSP/CTS microspheres were prepared by spray drying method.The morphology of PC/BSP/CTS microspheres was observed by Scanning Electron Microscopy(SEM), and its physic-chemical characteristics such as diameters, release in vitro, moisture content, swelling ratio, solid density were studied.ResultsThe PC/BSP/CTS microspheres were successfully prepared by spray drying method, SEM showed that PC/BSP/CTS microspheres had the spherical shape with smooth surfaces.The diameters of microsphere A, B and C were 10～20, 2～15, 10～25 μm.The in-vitro release showed that the cumulative release of three kinds of microspheres A, B, C was 25.07 %, 38.83 % and 60.00 % in 24 h, which had no burst release, while with time prolonged to 48 h, the cumulative release was 28.89%, 43.17% and 72.86%, respectively.The results of moisture content, swelling ratio, solid density were 15.35%～23.51%, 46.50%～105.80%, 0.375～0.496.ConclusionThe PC/BSP/CTS microspheres are successfully prepared by spray drying method which possess good characteristics and sustained-release effect, which would be as a good pulmonary drug delivery system.

proanthocyanidins; bletilla striata polysaccharide; chitosan; spray drying; microshpere; physiochemical properties

國(guó)家科技部科技計(jì)劃項(xiàng)目(2013GA740103)；山東省自然科學(xué)基金(ZR2012CM025)；山東省科技攻關(guān)項(xiàng)目(2012YD 18063)；山東省濰坊市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014WS045)

王大衛(wèi)，男，本科，主治醫(yī)師，研究方向：中醫(yī)內(nèi)科研究，E-mail：shl20100413@sin.cn ；溫寶芳，共同第一作者，女，碩士在讀，研究方向：藥物新劑型與新技術(shù)， E-mail:wenbaofang_521@163.com；張維芬，通訊作者，女，博士，碩士生導(dǎo)師，教授，研究方向：藥物新劑型與新技術(shù)研究， E-mail：zwf2024@126.com。

R735.7

A

1005-1678(2015)07-0133-05