5個(gè)不同廠家卡馬西平溶出度分析

王翼，李珊珊，詹長娟，王華，徐偉

(南京理工大學(xué)泰州科技學(xué)院化工學(xué)院，泰州 225300)

5個(gè)不同廠家卡馬西平溶出度分析

王翼，李珊珊，詹長娟，王華，徐偉

(南京理工大學(xué)泰州科技學(xué)院化工學(xué)院，泰州 225300)

目的 對(duì)國內(nèi)5個(gè)廠家(A、B、C、D、E)生產(chǎn)卡馬西平片的體外溶出度進(jìn)行分析。方法 采用紫外分光光度法測定，分別根據(jù)《中華人民共和國藥典》和日本《醫(yī)療用藥品品質(zhì)情報(bào)集》橙皮書對(duì)溶出度實(shí)驗(yàn)的要求，以稀鹽酸24 mL加水定容至1 000 mL(介質(zhì)Ⅰ)及水、pH1.2鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液900 mL為介質(zhì)，進(jìn)行體外溶出實(shí)驗(yàn)。并采用相似因子f2法與參比制劑(F廠家)進(jìn)行溶出曲線的相似性比較。結(jié)果 5廠家產(chǎn)品在介質(zhì)Ⅰ中，60 min時(shí)溶出度均>70%，滿足《中華人民共和國藥典》要求；在其余4種介質(zhì)中，5 min時(shí)溶出度均低于55%，但在30 min時(shí)A、B、C廠家產(chǎn)品不超過70%，且5廠家產(chǎn)品與參比制劑的溶出曲線相似因子f2均<50，所以5廠家產(chǎn)品均不滿足日本橙皮書要求。結(jié)論 卡馬西平片的仿制產(chǎn)品質(zhì)量有待提高，有必要對(duì)市售產(chǎn)品進(jìn)行整體內(nèi)在品質(zhì)再評(píng)價(jià)。

卡馬西平；溶出度；分光光度法，紫外

1 儀器與試劑

1.1 儀器 ZRS-8L智能溶出實(shí)驗(yàn)儀(天津市天大天發(fā)科技有限公司)，UV2450紫外分光光度計(jì)(日本島津公司)，MS105 分析天平[梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司，感量：0.01 mg]。

1.2 試劑 卡馬西平片(A、B、C、D、E 5個(gè)廠家，規(guī)格：0.1 g，批號(hào)：1301191，1304271，130401，120701，20130407；參比制劑廠家F，規(guī)格：0.2 g，批號(hào)：X0606)，卡馬西平對(duì)照品(武漢大華偉業(yè)醫(yī)藥化工有限公司，含量：99.71%，批號(hào)：DH131210)；鹽酸(無錫市佳妮化工有限公司，分析純，批號(hào)：20120215)，無水乙醇(無錫市佳妮化工有限公司，分析純，批號(hào)：20121210)，氯化鈉(無錫市佳妮化工有限公司，分析純，批號(hào)：20091108)、磷酸氫二鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，分析純，批號(hào)：F20081104)、磷酸二氫鉀(江蘇強(qiáng)盛功能化學(xué)股份有限公司，分析純，批號(hào)：20120910)、無水醋酸鈉(江蘇強(qiáng)盛功能化學(xué)股份有限公司，分析純，批號(hào)：20130301)、冰醋酸(無錫市佳妮化工有限公司，分析純，批號(hào)：20100702)。

2 方法與結(jié)果

2.1 紫外分光光度法的建立與評(píng)價(jià)

2.1.1 溶出介質(zhì)的選擇 根據(jù)我國現(xiàn)行卡馬西平片的溶出度標(biāo)準(zhǔn)[11]，配制介質(zhì)Ⅰ；根據(jù)日本《醫(yī)療用藥品品質(zhì)情報(bào)集》推薦的卡馬西平片溶出度標(biāo)準(zhǔn)配制介質(zhì)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。具體配制方法如下。介質(zhì)Ⅰ：以稀鹽酸(取鹽酸234 mL，加水稀釋至1 000 mL，即得)24 mL加水定容至1 000 mL。介質(zhì)Ⅱ：水。介質(zhì)Ⅲ(pH=1.2鹽酸溶液)：取氯化鈉2.0 g，加水適量使溶解，加鹽酸7 mL，再加水稀釋至1 000 mL，即得。介質(zhì)Ⅳ(pH=4.0醋酸鹽緩沖液)：稱取冰醋酸2.46 g、三水合醋酸鈉1.23 g加水稀釋至1 000 mL(16.4：3.6)搖勻，即得。介質(zhì)Ⅴ(pH=6.8磷酸鹽緩沖液)：取磷酸二氫鉀1.7 g和無水磷酸氫二鈉1.78 g，加水適量使溶解后，定容至1 000 mL。

2.1.2 測定波長的選擇 卡馬西平對(duì)照品貯備液的配制：準(zhǔn)確稱取卡馬西平對(duì)照品20.7 mg，置100 mL量瓶中，加無水乙醇40 mL，溶解，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為207 μg·mL-1的貯備液。準(zhǔn)確移取0.5 mL貯備液于10 mL量瓶中，分別用上述5種介質(zhì)稀釋至刻度，進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果顯示，在285 nm處均有最大吸收，故確定285 nm為測定波長。

2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別準(zhǔn)確移取卡馬西平貯備液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 mL置10 mL量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，在285 nm下測定吸光度，以吸光度對(duì)濃度進(jìn)行線性回歸，得卡馬西平在上述5種介質(zhì)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程分別為：A=0.050 7C+0.033 2(r=0.999 8)、A=0.050 9C+0.031 6(r=0.999 9)、A=0.050 4C+0.037 3(r=0.999 8)、A=0.050 7C+0.030 4(r=0.999 8)、A=0.050 5C+0.039 3(r=0.999 7)。顯示卡馬西平在濃度2.07～12.42 μg·mL-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.1.4 含量測定 卡馬西平供試品溶液的配制：取卡馬西平片20片，精密稱定，研細(xì)。精密稱取適量(相當(dāng)于卡馬西平10 mg)，置50 mL量瓶中，加甲醇振搖，并稀釋至刻度，濾過，得供試品溶液。準(zhǔn)確移取供試品溶液1 mL，用水稀釋至50 mL量瓶中，在285 nm處測得吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算各廠家的標(biāo)示量的百分含量分別為：A廠家(99.7±0.73)%； B廠家(99.2±1.08)%；C廠家(99.6±0.96)%；D廠家(99.9±1.36)%；E廠家(100.4±1.28)%；F廠家(99.9±0.68)%(n=3)。

2.1.5 回收率實(shí)驗(yàn) 準(zhǔn)確移取已知含量的供試品溶液1 mL置100 mL量瓶中，按含量的80%，100%，120%加入卡馬西平貯備液，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，在285 nm波長處測定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算相應(yīng)的平均回收率(n=9)。結(jié)果顯示，卡馬西平在上述5種介質(zhì)中的平均回收率分別為(98.1±1.1)%，(99.0±1.2)%，(99.2±1.4)%，(99.2±1.5)%，(98.4±1.3)%。RSD分別為1.09%，1.17%，1.39%，1.47%，1.30%。

2.1.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 準(zhǔn)確移取卡馬西平貯備液5.0 mL置100 mL量瓶中，分別用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，37 ℃水浴保存，每2 h測定吸收度，結(jié)果顯示8 h內(nèi)，卡馬西平在上述5種介質(zhì)中的吸收度的RSD分別為0.59%，0.29%，0.23%，1.01%，1.15%。

2.2 溶出度實(shí)驗(yàn) 取本品，照溶出度測定法(《中華人民共和國藥典》二部附錄ⅩC第二法)，分別按2010版《中華人民共和國藥典》第一增補(bǔ)版標(biāo)準(zhǔn)，即以1 000 mL介質(zhì)Ⅰ為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為75 r·min-1(規(guī)格為0.1 g)或150 r·min-1(規(guī)格為0.2 g)；及日本《醫(yī)療用藥品品質(zhì)情報(bào)集》的溶出度標(biāo)準(zhǔn)，即介質(zhì)為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ，體積均為900 mL，轉(zhuǎn)速為75 r·min-1。依法操作，在5，10，15，20，30，45，60，80 min時(shí)，分別取10 mL(同時(shí)補(bǔ)充等量等溫介質(zhì))，經(jīng)孔徑0.45 μm微孔濾膜濾過，再精密移取續(xù)濾液1 mL，至10 mL量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，在285 nm波長處測定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算各溶出度，繪制溶出曲線，結(jié)果見圖1。

卡馬西平片的現(xiàn)行溶出度標(biāo)準(zhǔn)為“1 000 mL介質(zhì)Ⅰ為溶出介質(zhì)，60 min時(shí)溶出度不低于70%”，根據(jù)這一標(biāo)準(zhǔn)，所有廠家均符合要求；而日本《醫(yī)療用藥品品質(zhì)情報(bào)集》溶出度標(biāo)準(zhǔn)為“分別以900 mL的溶液Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ為溶出介質(zhì)，采用兩點(diǎn)法對(duì)溶出限度進(jìn)行控制，5 min時(shí)溶出度不得超過55%，30 min時(shí)(100 mg規(guī)格)或45 min時(shí)(200 mg規(guī)格)為70%以上”。根據(jù)這一標(biāo)準(zhǔn)，A廠家產(chǎn)品在介質(zhì)Ⅱ、Ⅲ中，溶出度不合格(30 min時(shí)的溶出度分別為59.5%和65.6%)；B廠家產(chǎn)品在介質(zhì)Ⅱ中，溶出度不合格(30 min時(shí)溶出度為65.8%)；C廠家產(chǎn)品在介質(zhì)Ⅱ、Ⅴ中，溶出度不合格(30 min時(shí)的溶出度分別為65.3%和60.9%)；D、E、F廠家產(chǎn)品均合格。

圖1 不同廠家卡馬西平片在5種介質(zhì)中的溶出曲線

2.3 溶出曲線相似性評(píng)價(jià) 根據(jù)日本《醫(yī)療用藥品品質(zhì)情報(bào)集》中卡馬西平片溶出度藥品再評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，不僅要求在4種介質(zhì)中的溶出限度符合要求，且4條溶出曲線應(yīng)與參比制劑相似。溶出曲線的相似性評(píng)價(jià)，采用相似因子f2法，其具體計(jì)算方法為：

式中Rt和Tt分別代表受試制劑和參比制劑溶出曲線上不同取樣時(shí)間點(diǎn)的溶出度，n表示取樣次數(shù)。

根據(jù)日本“含量不同的口服固體制劑生物等效性實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)原則(2012年版)”，設(shè)參比制劑F平均溶出率達(dá)85%的時(shí)間點(diǎn)為Ta，則溶出曲線相似性比較的時(shí)間點(diǎn)為Ta/4、2Ta/4、3Ta/4和Ta4個(gè)時(shí)間點(diǎn)；當(dāng)f2>50，“在最終比較時(shí)間點(diǎn)，受試制劑的溶出度實(shí)驗(yàn)單位個(gè)體中，超出平均溶出率±15%范圍的不多于1個(gè)，同時(shí)不存在超出平均溶出率±25%的個(gè)體”，同時(shí)滿足以上兩個(gè)條件，則兩條溶出曲線相似。A、B、C、D、E 5個(gè)廠家產(chǎn)品與參比制劑F(原研制劑)的溶出曲線相似性比較，結(jié)果顯示，所考察的5個(gè)廠家產(chǎn)品在所要求的4種介質(zhì)中的溶出曲線均不能與參比制劑完全相似，所以，均為不合格產(chǎn)品。A廠家有1條曲線不相似，B、D廠家有2條不相似，C廠家有3條不相似，E廠家4條曲線均不相似。見表1。

3 討論

卡馬西平片溶出度的標(biāo)準(zhǔn)差異：我國現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)與日本“藥品品質(zhì)再評(píng)價(jià)”標(biāo)準(zhǔn)相比，二者除均采用槳法之外，在轉(zhuǎn)速、介質(zhì)體積、介質(zhì)種類的選擇、溶出限度、溶出曲線要求方面均有較大差異。從模擬人體胃腸道pH環(huán)境方面來講，同時(shí)采用4種不同pH介質(zhì)評(píng)價(jià)藥物的體外溶出比采用單一介質(zhì)更能保證藥品在體內(nèi)的良好吸收。另一方面，卡馬西平藥物本身治療窗狹窄(4～10 mg·L-1)[3]，既要防止藥物在早期“突釋”引起不良反應(yīng)，又要保證藥物在后期的較好療效，溶出限度上采用兩點(diǎn)法控制更為合理。

我國目前溶出度標(biāo)準(zhǔn)中，對(duì)溶出曲線的“形狀”沒有要求，只要在規(guī)定時(shí)間點(diǎn)溶出限度符合要求即為合格。顯然這一標(biāo)準(zhǔn)存在缺陷，它忽略了藥物前期的釋放行為對(duì)療效的影響，特別對(duì)于治療窗狹窄的藥物，這也很可能導(dǎo)致患者用不同廠家產(chǎn)品療效存在差異，盡管其檢驗(yàn)合格。

表1 5個(gè)廠家產(chǎn)品與參比制劑溶出曲線相似性比較

生產(chǎn)廠家溶出介質(zhì)f2結(jié)果A介質(zhì)Ⅱ46.00 不相似介質(zhì)Ⅲ59.00 相似介質(zhì)Ⅳ70.00 相似介質(zhì)Ⅴ69.00 相似B介質(zhì)Ⅱ64.00 相似介質(zhì)Ⅲ43.00 不相似介質(zhì)Ⅳ39.00 不相似介質(zhì)Ⅴ64.00 相似C介質(zhì)Ⅱ51.00 不相似[最終時(shí)間取樣點(diǎn)時(shí)溶 出度超出(85±15)%范圍]介質(zhì)Ⅲ55.00 相似介質(zhì)Ⅳ48.00 不相似介質(zhì)Ⅴ47.00 不相似D介質(zhì)Ⅱ53.00 相似介質(zhì)Ⅲ47.00 不相似介質(zhì)Ⅳ48.00 不相似介質(zhì)Ⅴ55.00 相似E介質(zhì)Ⅱ45.00 不相似介質(zhì)Ⅲ48.00 不相似介質(zhì)Ⅳ36.00 不相似介質(zhì)Ⅴ47.00 不相似

根據(jù)藥品品質(zhì)再評(píng)價(jià)的原理，對(duì)仿制產(chǎn)品的溶出度標(biāo)準(zhǔn)提出更高要求，不僅在溶出限度上要符合要求，溶出曲線也應(yīng)與參比制劑保持相似，這樣能更好地保持藥品質(zhì)量的一致性。如D、E兩廠家產(chǎn)品，溶出限度符合要求，但溶出曲線與參比制劑有較大差異，也是不合格產(chǎn)品，主要原因是其前期(前30 min內(nèi))釋放的太早且太快。所以，普通口服仿制固體制劑，不能簡單地認(rèn)為“釋放的越快越好，釋放的越早越好”，而應(yīng)該“仿”得與原研制劑一致。

對(duì)于參比制劑的選擇，筆者選取F廠家產(chǎn)品為參比，其為卡馬西平片的原研制劑(1968年上市)。筆者認(rèn)為，參比制劑的選擇至關(guān)重要，不能隨意選擇，否則會(huì)出現(xiàn)“A廠與B廠相似，B廠與C廠相似，C廠與D廠相似，隨著誤差的傳遞，很有可能A廠與D廠產(chǎn)品間質(zhì)量出現(xiàn)較大差異”的現(xiàn)象。所以，國家應(yīng)盡快建立參比制劑目錄，提供溶出曲線一致性評(píng)價(jià)方法，便于生產(chǎn)廠家參考，以保證不同廠家產(chǎn)品質(zhì)量的一致性，減少患者“選藥”的困擾。

筆者所考察的A、B、C、D、E 5個(gè)廠家產(chǎn)品，在溶出度和(或)與參比制劑溶出曲線的相似性上均存在差異，究其原因，可能與卡馬西平的晶型(卡馬西平至少有4種晶形，不同晶形溶解度也有所不同)、輔料及制劑工藝有較大關(guān)系，建議廠家從這幾方面著手，改善產(chǎn)品的體外溶出行為，提高產(chǎn)品質(zhì)量。

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DOI 10.3870/yydb.2015.08.028

2014-04-25

2014-07-30

王翼(1980-)，男，山西臨汾人，講師，碩士，研究方向：藥物新劑型的開發(fā)。電話：0523-86150675，E-mail：lywy226@163.com。

R971.6； R927.1

B

1004-0781(2015)08-1090-04