馬大雜種相思組培快繁技術(shù)

施 瓊，胡 峰，黃烈健，陳應(yīng)彪

(1中國林業(yè)科學(xué)研究院熱帶林業(yè)研究所，廣東廣州510520;2廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所，廣東廣州510640; 3饒平縣林業(yè)科學(xué)研究所，廣東饒平515745)

馬大雜種相思組培快繁技術(shù)

施 瓊1，胡 峰2，黃烈健1，陳應(yīng)彪3

(1中國林業(yè)科學(xué)研究院熱帶林業(yè)研究所，廣東廣州510520;2廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所，廣東廣州510640; 3饒平縣林業(yè)科學(xué)研究所，廣東饒平515745)

【目的】提高馬大雜種相思Acacia mangium×A.auriculiformis良種的快速繁殖效率與推廣種植力度.【方法】以馬大雜種相思新生枝條帶腋芽莖段為外植體，研究馬大雜種相思組培快繁體系.【結(jié)果和結(jié)論】用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的升汞和體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇分別處理當(dāng)年新生枝條第3～5個(gè)腋芽莖段15 min和30 s，然后接種至MS培養(yǎng)基進(jìn)行初代培養(yǎng)，芽誘導(dǎo)率為95.68%;最佳增殖培養(yǎng)基為改良MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖30～40 g·L-1，35 d的有效增殖倍數(shù)為3.97;將增殖芽接入含IBA 600 mg·L-1的MS固體培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)4～8 h后轉(zhuǎn)接至無激素1/2 MS培養(yǎng)基上，15 d即可全部生根;或?qū)⒃鲋逞恐苯咏尤?/2 MS+IBA 1.0 mg·L-1+ NAA 0.5 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1生根培養(yǎng)基上，第15天時(shí)生根率為99.43%.將生根苗移栽至以黃心土為基質(zhì)的營養(yǎng)袋內(nèi)，存活率為94.67%.

馬大雜種相思;組織培養(yǎng);有效增殖倍數(shù)

馬大雜種相思Acacia mangium ×A.auriculiformis屬含羞草科Mimosaceae金合歡屬Acacia［1］，主要分布在氣溫12～35℃，年降水量1 200～1 850 mm和海拔50～350 m的地區(qū)［2］.馬大雜種相思具速生、固氮、涵養(yǎng)水源、極度抗瘠薄等優(yōu)點(diǎn)，且樹干通直、分枝細(xì)小，是城市綠化、營造高效生態(tài)混交林的優(yōu)良種植材料，近年來在我國南方逐漸受到重視.

目前，對(duì)馬大雜種相思離體快繁技術(shù)研究已有報(bào)道，但這些研究對(duì)選擇具有優(yōu)良性狀的母株作為外植體來源缺乏重視［3］;且有效增殖倍數(shù)低、芽苗質(zhì)量較差、增殖芽可用于生根誘導(dǎo)的數(shù)量極少［4］;移栽存活率僅80.4%［5］.本試驗(yàn)從馬大雜種相思多年生試驗(yàn)林中進(jìn)行單株選優(yōu)，對(duì)其離體快繁技術(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)研究，成功建立了高效、高質(zhì)的快繁體系，可應(yīng)用于工廠化育苗，為馬大雜種相思的良種選育及推廣種植奠定基礎(chǔ).

1 材料與方法

1.1 植株來源和試驗(yàn)材料

選取馬大雜種相思16年生抗風(fēng)直桿型優(yōu)良單株(AMA12001)，先通過扦插繁殖獲得較多的無性系材料，然后以其當(dāng)年新生枝條的帶腋芽莖段為外植體進(jìn)行研究.

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 外植體消毒和初代培養(yǎng) 最佳消毒時(shí)間的確定:于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的升汞溶液中分別處理外植體9、12、15 min，再分別用體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇處理5、15、30 s，無菌水沖洗4～6次.

最佳外植體部位的確定:分別將枝條的第1～2節(jié)嫩莖(上)、第3～5節(jié)嫩莖(中)、第7～8節(jié)嫩莖(下)剪成長1.0～2.0 cm帶腋芽莖段.

將消毒后的外植體接種在MS培養(yǎng)基上，每個(gè)處理接種60瓶，每瓶接種1株芽，重復(fù)3次，15 d后統(tǒng)計(jì)存活率和出芽率.

1.2.2 叢生芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng) 6-BA、NAA單因子對(duì)增殖的影響:6-BA選擇0.5、1.0、1.5、2.0 mg·L-14個(gè)質(zhì)量濃度，探討細(xì)胞分裂素對(duì)增殖的影響;NAA選擇0.05、0.10、0.50 mg·L-13個(gè)質(zhì)量濃度，附加6-BA 1.0 mg·L-1，探討生長素對(duì)增殖的影響.

6-BA、NAA不同質(zhì)量濃度組合對(duì)增殖的影響:設(shè)置培養(yǎng)基中的6-BA與NAA質(zhì)量比例為40∶1、30∶1、20∶1、15∶1、10∶1、5∶1、3∶1、2∶1，探討細(xì)胞分裂素與生長素不同質(zhì)量濃度比例組合對(duì)增殖的影響.

基本培養(yǎng)基、活性炭質(zhì)量濃度、糖濃度單因子對(duì)增殖的影響:基本培養(yǎng)基類型選擇MS、1/2MS、改良MS;糖質(zhì)量濃度選擇20、30和40 g·L-1;活性炭選擇0.1、0.5和1.0 mg·L-1.以上培養(yǎng)基均附加上一步驟篩選出的最佳激素濃度配比.

每處理均接種20瓶，每瓶接種3株芽，重復(fù)3次，35 d后調(diào)查增殖倍數(shù).

1.2.3 最佳生根方法篩選 高質(zhì)量濃度激素浸泡法:將長2～3 cm的增殖芽在添加 IBA 200、400、600、800和1 000 mg·L-15個(gè)質(zhì)量濃度的固體培養(yǎng)基上分別預(yù)培養(yǎng)4和8 h后，轉(zhuǎn)接入1/2MS培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng).

低質(zhì)量濃度激素誘導(dǎo)法:將長2～3 cm的增殖芽接入含不同類型基本培養(yǎng)基、不同質(zhì)量濃度活性炭及蔗糖、不同低質(zhì)量濃度激素的培養(yǎng)基中進(jìn)行不定根的誘導(dǎo).

每個(gè)處理均接種20瓶，每瓶接種3株芽，重復(fù)3次，培養(yǎng)15 d后統(tǒng)計(jì)生根率、生根條數(shù).

1.2.4 移栽和馴化 生根培養(yǎng)10～15 d后，煉苗5～10 d，洗凈根部的培養(yǎng)基后移栽到經(jīng)消毒過的營養(yǎng)袋中，移栽基質(zhì)選擇黃心土.

1.3 培養(yǎng)條件

以上試驗(yàn)除特殊說明外，增殖培養(yǎng)以MS為基本培養(yǎng)基，生根培養(yǎng)以1/2MS為基本培養(yǎng)基，均添加瓊脂7 g·L-1、蔗糖30 g·L-1，控制pH為5.5～6.5，培養(yǎng)基均在121℃高壓滅菌15 min，培養(yǎng)溫度為(25±2)℃，每日光照12 h，光照度2 500 lx.

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

使用Excel、SPSS18.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和方差分析，以最小顯著差數(shù)法(LSD)評(píng)價(jià)差異的顯著性.

2 結(jié)果與分析

2.1 外植體消毒對(duì)初代培養(yǎng)的影響

2.1.1 不同處理時(shí)間對(duì)初代培養(yǎng)的影響 帶腋芽莖段是最理想的組培外植體材料，其誘導(dǎo)的芽遺傳變異小，能保持親本的優(yōu)良性狀［6］.本試驗(yàn)以帶腋芽莖段為外植體，消毒效果見表1.處理1至處理3(升汞消毒9 min)的消毒時(shí)間偏短，導(dǎo)致污染率偏高，存活率偏低;隨著升汞消毒時(shí)間的增加，污染率逐漸降低，存活率逐漸上升，當(dāng)選用15min升汞配合30 s乙醇(處理9)消毒時(shí)，其褐化率雖然較高，但污染率僅6.67%，存活率達(dá)78.33%，是最適宜的消毒方案.

表1 升汞及乙醇不同處理時(shí)間對(duì)初代培養(yǎng)的影響1)Tab.1 Effects of sterilization time on initial culture

2.1.2 不同部位的外植體對(duì)初代培養(yǎng)的影響 外植體污染率、褐化率和芽誘導(dǎo)率受枝條的木質(zhì)化程度影響較大.木質(zhì)化程度越高，污染率越高，新生頂芽內(nèi)生菌含量少，但材質(zhì)嬌嫩，容易被消毒劑殺死.枝條中上部半木質(zhì)化的莖段出芽率高［7］，且污染率低［8］，本試驗(yàn)(表2)也發(fā)現(xiàn)中段(第3～5個(gè)腋芽)半木質(zhì)化莖段污染率和褐化率都較低，且出芽率較高，因而當(dāng)年生新枝第3～5個(gè)腋芽莖段是理想的外植體材料.

綜上所述，剪取枝條的中部(第3～5個(gè)腋芽)作為外植體，用體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的升汞分別消毒30 s、15 min，是獲得馬大雜種相思無菌材料的最佳途徑.將無菌莖段接入MS基本培養(yǎng)基初代培養(yǎng)10 d后，腋芽開始萌動(dòng)，30 d調(diào)查時(shí)新芽長約為2～4 cm(圖1A)，可用于增殖培養(yǎng).

表2 不同外植體來源及部位對(duì)初代培養(yǎng)的影響1)Tab.2 Effects of different sam pling positions on initial culture

圖1 馬大雜種相思快繁體系Fig.1 Processes of in vitro propagation of Acacia mangium×A.auriculiformis

2.2 叢生芽誘導(dǎo)與增殖培養(yǎng)基篩選

2.2.1 6-BA、NAA單因子對(duì)增殖的影響 增殖培養(yǎng)10 d左右從基部腋芽處開始冒出新芽，且莖段基部逐漸變粗.第35天時(shí)調(diào)查可知(表3)，增殖倍數(shù)隨6-BA濃度的增加而增加，當(dāng)6-BA質(zhì)量濃度為1.0～1.5 mg·L-1時(shí)，增值倍數(shù)均達(dá)到3以上，且6-BA質(zhì)量濃度為1.5 mg·L-1時(shí)，增殖倍數(shù)較高，芽長勢(shì)較好;但當(dāng)質(zhì)量濃度達(dá)到2.0 mg·L-1時(shí)，芽玻璃化現(xiàn)象嚴(yán)重，有效芽減少.而NAA對(duì)芽生長起主要作用，隨著NAA質(zhì)量濃度的升高，芽體長勢(shì)變好，當(dāng)NAA質(zhì)量濃度為0.5 mg·L-1時(shí)，芽生長健壯，生長速度快，但增值倍數(shù)低;而NAA質(zhì)量濃度為0.1 mg·L-1時(shí)的增殖倍數(shù)最高，芽的長勢(shì)也較好.

表3 不同比例的6-BA、NAA對(duì)增殖的影響Tab.3 Effects of various concentrations of 6-BA and NAA on proliferation

2.2.2 6-BA、NAA不同濃度組合對(duì)增殖的影響 腋芽的增殖不只受6-BA和NAA的絕對(duì)值影響，還受二者的比值影響［9］，試驗(yàn)結(jié)果經(jīng)方差分析表明，6-BA與NAA的質(zhì)量比對(duì)馬大雜種相思增殖倍數(shù)的影響達(dá)到極顯著水平，增殖倍數(shù)隨著二者比值的增加呈先上升后下降的趨勢(shì)，m(6-BA)∶m(NAA)在2∶1至10∶1范圍時(shí)，增殖倍數(shù)普遍較低，但芽的長勢(shì)健壯，生長速度快.m(6-BA)∶m(NAA)為20∶1至40∶1時(shí)，腋芽處萌發(fā)出大量的叢生芽，但芽叢矮小，玻璃化現(xiàn)象嚴(yán)重，有效芽數(shù)目隨比值的增加而減少，因此，在此質(zhì)量比范圍時(shí)，增殖倍數(shù)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，且芽品質(zhì)變差.而當(dāng)m(6-BA)∶m(NAA)為15∶1時(shí)(即6-BA為1.5 mg·L-1、NAA為0.10 mg·L-1)，誘導(dǎo)的增殖芽一方面具有長勢(shì)健壯的特點(diǎn)，又具有較高增殖倍數(shù)的優(yōu)勢(shì)，是試驗(yàn)篩選出較適宜的激素濃度比例.

表4 6-BA與NAA不同質(zhì)量濃度組合對(duì)增殖的影響Tab.4 Effects of different combinations of 6-BA and NAA on proliferation

2.2.3 基本培養(yǎng)基、活性炭濃度、糖濃度單因子對(duì)增殖的影響 由表5可知，活性炭、蔗糖質(zhì)量濃度對(duì)增殖的影響達(dá)極顯著水平，而培養(yǎng)基類型對(duì)增殖的影響不顯著.隨著活性炭質(zhì)量濃度的增加，增殖倍數(shù)明顯下降，但芽生長情況越來越好，甚至有部分芽開始生根，因此，當(dāng)發(fā)現(xiàn)增殖芽出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象時(shí)，可將芽轉(zhuǎn)移至添加有較低質(zhì)量濃度活性炭(0.04 g·L-1)的培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，從而改善增殖芽質(zhì)量;隨著蔗糖質(zhì)量濃度的增加，玻璃化現(xiàn)象也會(huì)得到緩解，有效芽數(shù)增多，芽的健壯程度也提升，當(dāng)蔗糖質(zhì)量濃度為30和40 g·L-1時(shí)顯著優(yōu)于蔗糖為20 g·L-1時(shí)的增殖效果，不僅增殖倍數(shù)較高，芽長勢(shì)也較好;試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，雖然培養(yǎng)基類型對(duì)增殖倍數(shù)影響不大，但改良MS上的芽葉片更綠，生長也更健壯.

表5 不同添加劑對(duì)增殖的影響Tab.5 Effects of different additives on proliferation

綜合以上試驗(yàn)結(jié)果，馬大雜種相思比較適宜的增殖培養(yǎng)基為改良MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖30～40 g·L-1，培養(yǎng)35 d可獲得3.97的有效增殖倍數(shù)，且芽體較健壯(圖1B).在工廠化生產(chǎn)中，多次繼代需要添加適量的Ac來改善芽苗生長情況，減小玻璃化現(xiàn)象發(fā)生.

2.3 生根誘導(dǎo)

2.3.1 高質(zhì)量濃度激素浸泡法(兩步生根法) 將在含有高質(zhì)量濃度IBA的MS培養(yǎng)基預(yù)培養(yǎng)4、8 h的芽接入無激素的MS培養(yǎng)基后，第5天即可見白色圓點(diǎn)冒出，第10天時(shí)調(diào)查結(jié)果見表6.兩步生根法生根效果普遍較好，不僅生根率高，平均生根數(shù)也較多.雖然不同質(zhì)量濃度的IBA對(duì)生根率的影響達(dá)顯著、極顯著水平，但I(xiàn)BA200～800 mg·L-14個(gè)組誘導(dǎo)的生根效果總體差異不顯著，芽長勢(shì)也無明顯區(qū)別;隨著IBA質(zhì)量濃度的升高，生根率呈先上升后下降趨勢(shì)，而生根數(shù)逐漸增多，當(dāng)IBA為1 000mg·L-1時(shí)，基部形成大量愈傷組織，根系過于發(fā)達(dá)，導(dǎo)致苗長勢(shì)較差(表6).比較發(fā)現(xiàn)，4和8 h的預(yù)培養(yǎng)時(shí)間對(duì)生根效果并無顯著差別，但預(yù)培養(yǎng)8 h的芽生根數(shù)略多，總體的生根率也較高.當(dāng)選擇IBA 600 mg·L-1預(yù)培養(yǎng)4～8 h后再轉(zhuǎn)接至MS中，生根率可達(dá)100%，且苗較健壯，是較好的處理方法.

表6 兩步生根法結(jié)果1)Tab.6 Results of the two-step rooting method

2.3.2 低質(zhì)量濃度激素誘導(dǎo)法 將2～3 cm長的增殖芽接入I型至VI型生根培養(yǎng)基中，4～5 d后基部出現(xiàn)白點(diǎn)，6～7 d開始生根，15 d根最長，可達(dá)6.5 cm.由表7可知，I型、V型和VI型這3種培養(yǎng)基的生根效果均極顯著高于另3種培養(yǎng)基，而添加了0.1和0.5 mg·L-1活性炭的II型和III型培養(yǎng)基雖然平均根長要遠(yuǎn)高于其他組，但生根率卻比不添加活性炭的低17.07%和40.50%;此外，蔗糖質(zhì)量濃度為30 g·L-1的生根效果(I)要優(yōu)于10 g·L-1(IV);1/2 MS(V)比MS(I)更利于不定根的誘導(dǎo);IBA 1.5 mg·L-1(VI)比IBA 1.0 mg·L-1(V)誘導(dǎo)的根數(shù)要多，但根系太發(fā)達(dá)反而會(huì)抑制苗的生長;由此可見，不添加活性炭的V型培養(yǎng)基誘導(dǎo)馬大雜種相思不定根效果最好，不僅生根率達(dá)99.4%，且根系較長，有須根，苗健壯.

表7 不同培養(yǎng)基的生根效果1)Tab.7 Effects of differentmedia on rooting

綜上所述，馬大雜種相思增殖苗生根可采用2種辦法.方法1，用兩步生根法，將增殖苗接入含IBA600 mg·L-1的固體培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)4-8 h后接種到1/2MS基本培養(yǎng)基上，15 d即可全部生根.方法2，直接將較健壯的增殖苗接入1/2 MS+IBA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1培養(yǎng)基上，第15天時(shí)生根率可達(dá)99.43%(圖1C).從節(jié)約成本，縮減操作程序的角度出發(fā)，方法2更利于工廠化生產(chǎn).

2.4 馴化與移栽

生根培養(yǎng)10～15 d后，苗長至2～4 cm，根長達(dá)2～3 cm，在自然條件下煉苗5～10 d后，將苗根部的培養(yǎng)基洗凈，移植于經(jīng)高錳酸鉀消毒過的5種基質(zhì)的營養(yǎng)袋中，5種基質(zhì)分別為:黃心土、黃心土∶沙(體積比分別為3∶1、2∶1、1∶1)、沙，蓋膜保濕.1周后揭開薄膜，1個(gè)月后調(diào)查其存活率分別為94.67%、94.00%、96.00%、96.00%、93.33%，均在90%以上(圖1D)，以黃心土∶沙(體積比為2∶1、1∶1)生根率最高，在實(shí)際生產(chǎn)過程中，含沙量較多的營養(yǎng)杯在上山造林的運(yùn)輸過程中，容易松散，使得造林存活率低，因而，移栽基質(zhì)應(yīng)盡可能考慮黃心土.至此，馬大雜種相思的組培快繁體系基本建立(圖1).

3 討論與結(jié)論

3.1 影響外植體消毒的相關(guān)因子

外植體消毒成功與否，不僅與消毒劑的處理時(shí)間有關(guān)，也與外植體采集時(shí)間、外植體部位等因素有關(guān)，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)半木質(zhì)化枝條的中上部節(jié)段是最理想的外植體部位，春末夏初的晴朗天氣采條可以降低污染.與趙建萍等［10］、張瑋等［11］的研究結(jié)果一致.

3.2 影響增殖效果的相關(guān)因子

想要獲得高增殖倍數(shù)和短增殖時(shí)間，必須選擇合適的細(xì)胞分裂素和生長素質(zhì)量濃度［12］.本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)6-BA 1.5 mg·L-1、NAA 0.1 mg·L-1是最佳的適宜馬大雜種相思增殖的激素質(zhì)量濃度，不僅增殖倍數(shù)較高，芽體也較健壯.

較高的激素質(zhì)量濃度易使芽玻璃化，且外源調(diào)節(jié)劑對(duì)植物作用的時(shí)效較長［13］，多次繼代會(huì)使芽苗增殖緩慢、質(zhì)量變差，可通過改變基本培養(yǎng)基類型、適當(dāng)提高蔗糖質(zhì)量濃度、適當(dāng)降低激素質(zhì)量濃度、添加低質(zhì)量濃度的活性炭解決.

3.3 影響生根效果的相關(guān)因子

IBA與NAA組合使用可明顯提高生根率，改善根的質(zhì)量和苗的生長情況［14］，本研究也證明，用IBA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1可獲得較好的生根效果.

Otroshy等［15］認(rèn)為合適質(zhì)量濃度的活性炭可提供暗環(huán)境、吸附激素和其他有害物質(zhì)，利于植株生長.本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，活性炭的存在確實(shí)能促進(jìn)苗的生長，但一定程度上抑制了馬大雜種相思不定根的形成，導(dǎo)致生根率下降，具體機(jī)理還有待相關(guān)研究證明.

蔗糖是生根培養(yǎng)基的重要組成部分，對(duì)維持培養(yǎng)基的滲透壓具有重要作用.本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)降低蔗糖質(zhì)量濃度對(duì)根的生長影響較大，10 g·L-1的蔗糖質(zhì)量濃度對(duì)根的生長不利，且苗生長緩慢，在生根培養(yǎng)基中添加30 g·L-1的蔗糖生根效果更佳.

從節(jié)約生產(chǎn)成本、簡化操作程序的角度來說，即使兩步生根法可使馬大雜種相思組培苗的生根率達(dá)到100%，卻不宜采用，但對(duì)其他生根較困難的相思樹種來說，是值得嘗試的生根方法.

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【責(zé)任編輯 柴 焰】

In vitro propagation of Acacia mangium×A.auriculiform is

SHIQiong1，HU Feng2，HUANG Liejian1，CHEN Yingbiao3
(1 Research Institute of Tropical Forestry，Chinese Academy of Forestry，Guangzhou 510520，China; 2 Crops Research Institute，Guangdong Academy of Agricultural Sciences，Guangzhou 510640，China; 3 Raoping County Forestry Research Institute，Raoping 515745，China)

【Objective】To improve the propagation efficiency and extend the planting of Acaciamangium× A.auriculiformis.【Method】This study was carried out to explore the techniques of in vitro propagation of A.mangium×A.auriculiformis using stem segments with buds collected from 16-year plants as the explant.【Result and conclusion】Current season stem segments carrying 3-5 axillary buds were sterilized with w=0.1%mercuric chloride andφ=75%alcoho1 for 15 min and 30 s respectively before they were inoculated onto MSmedium.Buds could be induced successfully on MSwith a shooting rate of95.68%.The bud proliferation index was 3.97 after being transferred onto MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+sucrose 30-40 g·L-1for 35 d.The buds all rooted on the 15thday from inoculation onto 1/2 MSmedium after pre-cultured on MS supplemented with IBA 600 mg·L-1for 4-8 h.Inoculating the proliferated buds onto 1/2 MS+IBA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+sucrose 30 g·L-1also generated a high rooting rate of 99.43%.The survival rate reach 94.67%after the rooted plantlet are transplanted to the yellow soilmedium.

Acacia mangium×A.auriculiformis;tissue culture;proliferation index

S722.89

A

1001-411X(2015)02-0079-06

施 瓊，胡 峰，黃烈健，等.馬大雜種相思組培快繁技術(shù)［J］.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，36(2):79-84.

2013-08-04 優(yōu)先出版時(shí)間:2015-01-21

優(yōu)先出版網(wǎng)址:http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.s.20150121.0936.010.html

施 瓊(1988—)，女，碩士，E-mail:shiqiongzai@163.com;通信作者:黃烈健(1971—)，男，副研究員，博士.E-mail: 13802987948@163.com

“十二五”國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2012BAD01B0402)