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    酰胺態(tài)氮對菘藍生長及活性成分積累動態(tài)的影響

    2015-06-15 16:01:16楊月呂婷婷唐曉清李艷張毅王康才
    江蘇農業(yè)科學 2015年4期

    楊月+呂婷婷+唐曉清+李艷+張毅+王康才

    摘要:采用盆栽試驗研究不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍生長及活性成分積累的影響,為菘藍合理施用有機氮肥提供理論依據(jù)。結果表明:(1)葉面噴施2次和1次酰胺態(tài)氮,隨著濃度的增大,菘藍單株干質量先增加后降低,葉面噴施3次酰胺態(tài)氮,隨著濃度增大,單株干質量增加;葉面噴施酰胺態(tài)氮對葉片的促生長作用大于對根的作用。(2)葉面噴施2次5 g/L的酰胺態(tài)氮有利于葉內靛藍的積累,噴施1次10 g/L利于靛玉紅的積累。(3)葉面噴施3次10 g/L的酰胺態(tài)氮利于根中(R,S)-告依春含量的積累。研究結果說明酰胺態(tài)氮對菘藍葉中靛藍、靛玉紅與根中(R,S)-告依春含量的動態(tài)積累影響不一致。結合酰胺態(tài)氮對菘藍生長的影響,為獲得高產優(yōu)質的大青葉與板藍根,應在菘藍苗期葉面噴施質量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮2次。

    關鍵詞:菘藍;酰胺態(tài)氮;靛藍;靛玉紅;(R,S)-告依春

    中圖分類號: S567.901 文獻標志碼: A

    文章編號:1002-1302(2015)04-0241-04

    收稿日期:2014-04-17

    基金項目:國家自然科學基金(編號:31171486);國家級大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃(編號:201310307026)。

    作者簡介:楊 月(1992—),女,河南三門峽人,從事藥用植物栽培生理與中藥質量研究。E-mail: 14411110@njau.edu.cn。

    通信作者:唐曉清,博士,副教授,從事藥用植物栽培與中藥質量控制研究。E-mail:xqtang@njau.edu.cn。

    十字花科植物菘藍(Isatis indigotica Fort.)的干燥根入藥為板藍根,葉入藥為大青葉[1],為我國常用的大宗中藥材。板藍根具有抗病毒、抗活性氧、抗炎抗菌以及抗內毒素的作用[2-5],是公認的有較好抗病毒效果的中藥之一,在臨床配方中應用較多,廣泛用于治療流感、腮腺炎、乙腦、肝炎等多種疾病。板藍根中的(R,S)-告依春與大青葉中的靛玉紅為其活性成分[1],靛玉紅及其衍生物可用于治療慢性粒細胞白血病[6-7]。作為常用中藥來源的菘藍,在其栽培生產中,如何采取適宜的措施提高其產量與質量是值得研究的課題。而氮是植物重要的營養(yǎng)元素,植物體吸收的氮素形態(tài)主要有無機態(tài)氮如硝態(tài)氮(NO-3-N)和銨態(tài)氮(NH+4-N)、有機態(tài)氮如尿素[CO(NH2)2]等,各種形態(tài)氮吸收利用的形式不同[8]。關于硝態(tài)氮和銨態(tài)氮對菘藍品質和產量的影響已有報道[9],菘藍生物量隨著銨硝比的降低先增加后下降,全銨營養(yǎng)下最小,銨硝比為50 ∶ 50時最大。單用酰胺態(tài)氮對植物產量和品質影響的研究已有報道[10-13]。肖云華等研究表明,不同的氮素形態(tài)和濃度對菘藍生物量和活性成分含量的影響存在很大差異,酰胺態(tài)氮對菘藍生物量的影響最大,其次是銨態(tài)氮,影響最小的是硝態(tài)氮,生物量并不隨著總氮量提高而增加,而與氮素形態(tài)有關[14]。在不同形態(tài)氮素中酰胺態(tài)氮顯著影響了菘藍的氣孔導度與蒸騰速率[15]。但不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍生長量及活性成分動態(tài)積累的影響尚未見報道。本研究采用盆栽試驗,研究不同濃度下酰胺態(tài)氮對菘藍的生長及藥材品質的影響,以期為提高菘藍產量和品質合理施用有機氮肥提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    材料來自于山西栽培居群的菘藍果實,采用盆缽(外口徑44 cm,底直徑30 cm,高35 cm),栽培基質為蛭石和珍珠巖按2 ∶ 1的比例混合而成,2013年5月2日播種,適時間苗,選擇長勢一致、真葉4~5張的菘藍幼苗,每盆8株。

    基本營養(yǎng)液配方中大量元素和微量元素都采用霍格蘭營養(yǎng)液配方,基本營養(yǎng)液pH值 6.0。處理液為不同濃度的酰胺態(tài)氮,由純脲[CO(NH2)2]提供,磷、鉀(P、K)由磷酸二氫鉀(KH2PO4)提供,所用試劑為分析純(AR)。

    1.2 試驗方法

    1.2.1 試驗設計 試驗設4個質量濃度,分別為0.5%(5 g/L)、1.0%(10 g/L)、1.5%(15 g/L)、2.0%(20 g/L),各以N0.5%、N1.0%、N1.5%、N2.0%表示,各處理重復5次,隨機排列;以清水為對照,記為NCK處理,正常供給P、K。材料出苗15 d后,每隔 10 d 澆灌1次基本營養(yǎng)液,每次1 000 mL。播種 85 d 后開始處理,葉面噴施有機氮純脲[CO(NH2)2]溶液,第1次處理A組,第2次處理A與B組,第3次處理A、B與C 3組,即A處理3次,B組處理2次,C組處理1次。每次處理后間隔30 d處理1次,最后一次處理后10 d開始第1次采樣,之后間隔15 d采樣1次,共采樣4次。

    1.2.2 生物量測定 每個處理隨機采收6株,清洗干凈,按地上部(大青葉)、地下部(板藍根)2個部位分開,準確稱取質量,105 ℃殺青15 min后60 ℃烘干至恒質量,準確稱取干質量,粉碎,葉過60目篩備用,根過100目篩備用。

    1.2.3 葉中靛藍、靛玉紅的測定 參照《中國藥典》(2010版)高效液相色譜法測定大青葉中靛藍、靛玉紅含量的條件[1],略作修改。超高效液相色譜(UPLC)條件:采用Acclaim RSLC120 C18 (3.0×100 mm,2.2 μm)分析柱;以甲醇-水(72 ∶ 28)為流動相,流速0.40 mL/min;柱溫30 ℃;檢測波長為289 nm;進樣體積5 μL。

    1.2.4 根中(R,S)-告依春測定 參照《中國藥典》(2010版)高效液相色譜法測定根中(R,S)-告依春含量的條件[1],略作修改。UPLC色譜條件:分析柱同“1.2.3”節(jié),以甲醇-0.02%磷酸溶液(7 ∶ 93)為流動相;流速0.40 mL/min;柱溫30 ℃;檢測波長為245 nm;進樣體積5 μL。endprint

    1.2.4 線性關系 精密配制質量濃度為0.2、0.4、1、2、3、4、8 μg/mL 的靛藍標準溶液,質量濃度分別為0.4、0.8、2、4、6、8、10 μg/mL 的靛玉紅標準溶液,質量濃度為1、2.5、5、10、20、30、40 μg/mL的(R,S)-告依春標準溶液,進樣5 μL,用UPLC進行測定,以色譜峰面積(Y)和對應的質量濃度(X,μg/mL)作標準曲線,計算回歸方程。靛藍的回歸方程:Y1=0.117 9X1-0.037 3,r=0.999 1(n=3);靛玉紅的回歸方程:Y2=0.184 4X2-0.135 1,r=0.999 9(n=3);(R,S)-告依春的回歸方程:Y3=2.266 8X3-0.884 2,r=0.999 5(n=3)。

    1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

    采用Excel 2010和SAS 9.2統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,數(shù)據(jù)間比較采用LSD最小顯著差數(shù)法。

    2 結果與分析

    2.1 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍生長的影響

    2.1.1 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍單株葉與根干質量的影響 不同濃度酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)后,隨著菘藍生長時間的延長,菘藍單株葉與根的干質量積累基本趨于一致,均呈現(xiàn)依次遞增的動態(tài)規(guī)律(表1)。第4次采樣與前3次采樣差異顯著。對于單株葉干質量,第1次采樣,處理C組N1.5%葉干質量最高(1.66 g),隨著酰胺態(tài)氮濃度的增大,A組葉干質量先減小再增大而后減小,濃度為N0.5%時葉干質量最高,B組葉干質量先增大后減小,濃度為N1.0%時葉干質量最高,C組先增大后減小,濃度為N1.5%時葉干質量最高;第2次采樣,C組對照NCK葉干質量最高(5.01 g),隨著處理濃度的增大,A組葉干質量先增大后減小,濃度為N1.0%時最高,B組葉干質量先減小后增大,濃度為N0.5%時最高,C組先減小后增大,對照葉干質量最高;第3次采樣,處理均高于對照,處理B組N0.5%最高(4.76 g),隨著處理濃度的增大,A組葉干質量先增大再減小而后增大,濃度為N2.0%時最高,B組葉干質量先減小后增大,濃度為N0.5%時最高,C組先減小后增大,濃度為N0.5%時最高;第4次采樣,處理C組N1.0%最高(9.79 g),隨著處理濃度增大,A組葉干質量增大,濃度為N2.0%時最高,B組葉干質量先增大后減小,濃度為N1.5%時最高,C組先增大后減小,濃度為N1.5%時最高。

    表1 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍單株葉與根干質量的影響

    組別 質量

    濃度

    單株葉干質量(g) 單株根干質量(g)

    10月6日 10月21日 11月5日 11月20日 10月6日 10月21日 11月5日 11月20日

    A NCK 1.33±0.11bab 3.38±0.29abab 3.11±0.11aba 4.90±0.97acde 0.81±0.22bbc 0.92±0.26bb 2.39±0.29aab 3.15±0.28abc

    N0.5% 1.62±0.50ba 1.82±0.24bb 3.34±0.16aba 4.37±0.57ade 1.51±0.24ba 0.54±0.03bb 1.14±0.37bab 3.99±0.67aabc

    N1.0% 1.22±0.35bab 3.48±0.37abab 3.48±0.42aba 4.38±0.18ade 0.75±0.12bbc 2.46±0.34ba 2.56±0.43ba 2.31±0.59ac

    N11.5% 1.35±0.14cab 2.90±0.41bcab 3.27±0.36ba 7.44±0.06aabcde 0.81±0.09bbc 0.84±0.13bb 1.20±0.34bab 3.97±0.48abc

    N2.0% 0.96±0.18cab 2.39±0.64bcb 3.97±0.36ba 9.14±1.97aab 0.81±0.13bbc 1.35±0.22bb 2.09±0.75bab 5.49±1.18aabc

    B NCK 1.18±0.04bab 2.86±0.28bab 3.36±0.20ba 6.46±0.79aabcde 0.64±0.05bbc 1.28±0.25bb 1.33±0.39bab 4.03±0.91aabc

    N0.5% 1.37±0.13aab 3.68±0.70aab 4.76±0.58aa 3.97±0.22ae 0.57±0.02abc 1.01±0.20ab 2.61±0.23aa 2.29±0.75ac

    N1.0% 1.44±0.28bab 3.07±0.28bab 4.21±0.79aba 7.93±0.85aabcde 0.90±0.13babc 1.34±0.37bb 1.61±0.30bab 7.74±1.30aa

    N1.5% 1.31±0.29bab 1.79±0.10bb 3.69±0.70ba 8.50±1.88aabcde 0.78±0.13bbc 0.64±0.12bb 1.71±0.43bab 6.34±0.92aab

    N2.0% 1.26±0.13cab 2.54±0.15bcb 4.01±0.86ba 6.87±0.46aabcde 0.66±0.17bbc 1.04±0.25bb 1.06±0.38bab 3.69±0.56abc

    C NCK 1.38±0.18cab 5.01±0.93aba 2.20±0.62bca 6.33±1.30aabcde 1.20±0.12bab 1.36±0.33abb 0.89±0.39bb 4.65±0.22aabc

    N0.5% 1.06±0.15bab 2.81±0.34bab 4.15±0.48aba 8.29±1.20aabcd 0.99±0.16babc 1.01±0.31bb 2.12±0.61bab 5.55±0.16aabcendprint

    N1.0% 1.65±0.25ba 2.69±0.15bab 3.08±0.52ba 9.79±1.42aa 1.13±0.25babc 1.09±0.27bb 1.88±0.54bab 5.57±0.61aabc

    N1.5% 1.66±0.50ba 1.39±0.17bb 2.99±0.15ba 5.53±0.16abcde 0.93±0.14babc 0.80±0.17bb 1.10±0.71bab 2.67±0.39abc

    N2.0% 0.62±0.04cb 2.47±0.22bb 3.65±0.37aba 5.23±0.20abcde 0.55±0.08bc 0.86±0.29bb 1.43±0.82bab 3.82±0.55abc

    注:不同字母表示處理間差異達到5%顯著水平,上標為橫向同指標不同日期比較,下標為縱向不同處理比較。

    對于單株根干質量,第1次采樣,處理A組N0.5%最高(151 g),隨著酰胺態(tài)氮濃度增大,A組根干質量先減小再增大而后持平,濃度為N0.5%時最高,B組先增大后減小,濃度為N1.0%時最高,C組先增大后減小,對照根干質量最高;第2次采樣,A組N1.0%最高(2.46 g),隨著處理濃度增大,A組根干質量先增大再減小而后增大,濃度為N1.0%時最高,B組先增大再減小而后增大,濃度為N1.0%時最高,C組先增大再減小而后增大,對照根干質量最高;第3次采樣,處理B組N0.5%最高(2.61 g),隨著處理濃度增大,A組根干質量先增大再減小而后增大,濃度為N1.0%時最高,B組根干質量先減小后增大而后減小,濃度為N0.5%時最高,C組先減小后增大,但均高于對照,濃度為N0.5%時最高;第4次采樣,處理B組N1.0%最高(774 g),隨著處理濃度增大,A組根干質量先減小后增大,濃度為N2.0%時最高,B組根干質量先增大后減小,濃度為N1.0%時最高,C組先增大后減小而后增大,濃度為N1.0%時最高。說明不同濃度酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)對菘藍地上部分和地下部分的影響不同,菘藍葉與根并不是在酰胺態(tài)氮濃度最大時干質量最高,說明高濃度酰胺態(tài)氮不利于菘藍葉與根干質量的積累,葉面噴施1次質量濃度為10 g/L的酰胺態(tài)氮有利于菘藍葉干質量的積累,葉面噴施2次質量濃度為10 g/L的酰胺態(tài)氮有利于菘藍根干質量的積累。

    2.1.2 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍生物量和根冠比的影響 不同濃度的酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)后,隨生長時間延長,菘藍植株總干質量整體呈現(xiàn)增加的趨勢;同一采樣時期,不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍植株生長有不同的影響,A組隨著處理濃度增大,單株菘藍干質量前3次采樣基本呈先增大后減小趨勢,第3次采樣呈增大趨勢,而B組、C組隨濃度的增大,單株菘藍干質量均先增大后降低;處理間差異顯著(P<0.05)(表2);第4次采樣,處理B組N1.0%(14.49 g)單株干質量最大,顯著高于對照(P<0.05),說明葉面噴施2次10 g/L的酰胺態(tài)氮更有助于菘藍生物量的積累;不同濃度的酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)對菘藍不同采樣時期的根冠比影響不同(表2);第1次采樣,除B組N2.0%、C組N1.5%,其他各處理均高于對照,隨著處理濃度增大,A組、C組根冠比呈降低的趨勢,高濃度N2.0%處理增大,B組根冠比先減小后增加,高濃度N2.0%處理下降低;第2次采樣,除B組N0.5%、C組N0.5%,其他各處理均高于或等于對照,隨著濃度增大,A組根冠比先增大后減小,高濃度N2.0%處理下增大,B組、C組根冠比先增大后減小,高濃度處理下N2.0%持平;第3次采樣,除A組N1.0%、B組N1.5%,其他各處理均低于對照,隨著濃度增大,A組根冠比先增大后減小,高濃度N2.0%處理下增大,B組根冠比先減小后增大,高濃度N2.0%處理下降低,C組根冠比先增大后減小,高濃度N2.0%處理下仍降低;第4次采樣,A組處理N0.5%高于對照,其他各處理均低于對照,B組各處理均高于對照,C組處理N1.5%低于對照,其他各處理均高于對照,A組、C組根冠比呈降低的趨勢,高濃度N2.0%處理下增大,B組根冠比先增大后減小,在高濃度處理下N2.0%增大。整體分析,酰胺態(tài)氮對菘藍生長前期對地上部分的促進作用大于地下部分,后期則反之。

    表2 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍生物量和根冠比的影響

    組別 質量

    濃度

    單株總干質量(g) 根冠比

    10月6日 10月21日 11月5日 11月20日 10月6日 10月21日 11月5日 11月20日

    A NCK 2.27±0.13bbcd 3.26±0.87bcdef 4.69±0.51abbcd 7.04±0.43agh 0.33±0.04abcd 0.18±0.06bc 0.28±0.10aab 0.31±0.07aabcd

    N0.5% 2.65±0.52bab 2.27±0.37abef 3.01±0.54abgh 6.46±0.32ah 0.53±0.20aa 0.18±0.04bc 0.19±0.06bbcd 0.41±0.05aa

    N1.0% 1.57±0.30bfgh 4.04±0.68babc 5.10±0.56bab 6.07±0.76ah 0.40±0.16aabcd 0.33±0.13aba 0.30±0.10aba 0.25±0.01bcd

    N1.5% 2.13±0.37bcde 3.78±0.88babcd 3.72±0.50befgh 12.71±0.26abc 0.33±0.12acd 0.18±0.02bc 0.17±0.05bcd 0.22±0.04bd

    N2.0% 1.11±0.23bh 3.17±0.43bcdef 3.93±0.80abdefg 13.38±0.34aab 0.51±0.12aab 0.24±0.05bbc 0.22±0.04babcd 0.25±0.08bcdendprint

    B NCK 1.69±0.02befg 3.73±0.59babcd 4.61±0.29bbcde 9.90±0.72ae 0.32±0.10acd 0.21±0.08abc 0.22±0.15aabcd 0.24±0.11acd

    N0.5% 2.39±0.05aabc 5.00±0.45aab 2.98±0.19agh 6.44±0.56ah 0.39±0.32aabcd 0.18±0.07ac 0.24±0.08aabc 0.25±0.08acd

    N1.0% 2.17±0.46bbcde 4.02±0.81babc 6.02±0.19ba 14.79±0.57aa 0.33±0.08abbcd 0.26±0.06bab 0.18±0.05cbcd 0.36±0.08aab

    N1.5% 1.92±0.21bcdef 2.54±0.46bdef 4.57±0.74bbcde 12.84±0.48abc 0.41±0.16aabcd 0.21±0.05bbc 0.21±0.04babcd 0.29±0.08bbcd

    N2.0% 1.47±0.28cfgh 2.79±0.08bccdef 5.00±0.62bbc 11.08±0.62ad 0.27±0.05ad 0.21±0.06abbc 0.13±0.01bd 0.31±0.17abcd

    C NCK 1.86±0.33bdef 5.13±1.04aba 2.92±0.80bh 8.34±0.53af 0.39±0.14aabcd 0.24±0.09abc 0.30±0.20aa 0.24±0.09acd

    N0.5% 1.67±0.27befg 3.38±0.58bcdef 5.24±0.25bab 9.78±0.62ae 0.52±0.19aa 0.21±0.04bbc 0.25±0.08babc 0.30±0.05bbcd

    N1.0% 2.87±0.52ba 2.64±0.25bcdef 4.57±0.10bbcde 14.04±1.22aa 0.41±0.15aabcd 0.25±0.06bbc 0.27±0.05bab 0.26±0.08bcd

    N1.5% 2.39±0.05babd 1.99±0.30bf 3.51±0.10bfgh 7.93±0.77afg 0.33±0.15acd 0.22±0.05abbc 0.21±0.08babcd 0.22±0.04abd

    N2.0% 1.19±0.12cgh 3.65±0.39bcbcde 4.11±0.36bcdef 8.86±0.93aef 0.48±0.07aabc 0.22±0.05cbc 0.19±0.08cbcd 0.34±0.08babc

    注同表1。

    2.2 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍活性成分積累的影響

    2.2.1 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍葉內靛藍與靛玉紅積累的影響 不同濃度的酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)后,隨生長時間延長,菘藍葉中靛藍與靛玉紅的含量整體上明顯呈下降趨勢(圖1、圖2);不同酰胺態(tài)氮處理靛藍的含量在 0.067~0.313 mg/g之間,靛玉紅含量在0.035~0.572 mg/g之間。整體比較,第1次采樣菘藍葉片中的靛藍、靛玉紅含量已達或接近藥典的標準含量0.02%,第2次之后采樣,菘藍葉片內靛藍、靛玉紅含量則低于藥典的標準含量002%,說明大青葉的采收最佳時期為10月上旬;靛藍含量最高的是第1次采樣處理2次的N0.5%(0.313 mg/g),說明葉面噴施2次5 g/L的酰胺態(tài)氮最有助于菘藍葉中靛藍的積累;靛玉紅含量最高的是第1次采樣處理C組N1.0%(0.572 mg/g),說明葉面噴施1次10 g/L的酰胺態(tài)氮有助于菘藍葉內靛玉紅含量的積累。結合酰胺態(tài)氮對菘藍葉干質量的影響,葉面噴施2次質量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮有助于獲得高產優(yōu)質的大青葉。

    2.2.2 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍根中(R,S)-告依春的影響 不同濃度的酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)后,隨著菘藍生長時間的延長,菘藍根中(R,S)-告依春含量整體上明顯呈上升趨勢(圖3);不同酰胺態(tài)氮處理的(R,S)-告依春含量在 0.266~2.056 mg/g之間,均已達藥典的標準含量0.02%,并且在后期采樣有增加的趨勢,說明板藍根的最佳采收時期為11月中下旬。(R,S)-告依春含量最高的是第4次采樣處理A組N1.0%(2.056 mg/g),說明葉面噴施3次質量濃度為

    10 g/L 的酰胺態(tài)氮有助于菘藍根中(R,S)-告依春含量的積累。結合酰胺態(tài)氮對菘藍根干質量的影響,葉面噴施2次質量度為 15 g/L 的酰胺態(tài)氮有助于獲得高產優(yōu)質的板藍根。

    3 討論

    3.1 酰胺態(tài)氮對菘藍生長的影響

    由于不同濃度的酰胺態(tài)氮對作物生長的營養(yǎng)供給不同,因而對作物的植株整體以及地上部分、地下部分的影響存在差異。研究結果顯示酰胺態(tài)氮對菘藍根與葉干質量的影響不同,高濃度酰胺態(tài)氮不利于菘藍根與葉干質量的積累;不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍植株單株總干質量影響差異顯著,葉面噴施2次和1次酰胺態(tài)氮,隨著濃度的增大,單株菘藍干質量先增大后降低或呈降低趨勢,這與樊新華等研究在低濃度范圍內,隨著酰胺態(tài)氮施用量增加,豬毛菜的產量、氨基酸、維生素C含量均有不同程度的上升,達到一定施用量時則呈下降趨勢的結果[10]基本一致。而葉面噴施3次酰胺態(tài)氮,隨著酰胺態(tài)氮濃度的增大,單株菘藍干質量前3次采樣基本呈先增大后降低的趨勢,第4次采樣呈增大趨勢,但整體低于葉面噴施2次和1次酰胺態(tài)氮,可能是葉面噴施多次酰胺態(tài)氮導致酰胺態(tài)氮過量積累,從而影響菘藍植株正常的氮代謝,使植株正常生長發(fā)育受阻,單株總干質量下降,第4次采樣菘藍單株干質量增大可能是在菘藍植株的生長過程中,多次噴施酰胺態(tài)氮導致菘藍部分葉片死亡,而再次生長的菘藍葉片內酰胺態(tài)氮含量降低,使得菘藍植株正常生長。此外隨著酰胺態(tài)氮濃度的增大,菘藍根冠比呈降低的趨勢,說明葉面噴施酰胺態(tài)氮對菘藍地上葉片的促生長效應更加明顯,對地下根的促進作用小于對地上葉片的促進作用,這與肖云華等研究追施氮肥對菘藍地上部的促進效應明顯高于地下部的結果[16]基本一致。隨著菘藍生長時間的延長,根冠比也有降低的趨勢,說明葉面噴施酰胺態(tài)氮前期更有助于促進菘藍地上部分的生長,后期則更利于促進根的生長。endprint

    3.2 酰胺態(tài)氮對菘藍體內活性成分積累的影響

    酰胺態(tài)氮對菘藍葉中靛藍、靛玉紅和根中(R,S)-告依春含量的動態(tài)積累影響不一致。菘藍葉中靛藍、靛玉紅含量在10月上旬達最大,如以靛藍、靛玉紅為藥用指標成分,則大青葉的采收可在10月上旬,這與陳宇航等的研究結果[17]基本一致。處理后菘藍根中(R,S)-告依春含量在11月下旬達最大,如以(R,S)-告依春為藥用指標成分,則板藍根的收獲可在11月下旬進行,與陳宇航等的研究結果[17]基本一致,同時與《中國藥典》(2010年版)對板藍根采收期規(guī)定基本一致。此外葉面噴施2次質量濃度為5 g/L的酰胺態(tài)氮有助于葉中靛藍的積累,而葉面噴施1次質量濃度為10 g/L的酰胺態(tài)氮有助于葉內靛玉紅含量的積累,結合酰胺態(tài)氮對菘藍葉干質量的影響,葉面噴施2次質量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮有助于獲得高產優(yōu)質的大青葉。葉面噴施3次質量濃度為10 g/L的酰胺態(tài)氮有助于根中(R,S)-告依春含量的積累;盡管多次噴施酰胺態(tài)氮有助于菘藍根中(R,S)-告依春含量的積累,但過量酰胺態(tài)氮積累不利于菘藍植株根干質量的積累,因此為獲得高產優(yōu)質的板藍根,建議葉面噴施2次質量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮。因此為提高菘藍的產量和品質,合理施用有機氮肥,建議在菘藍生長約110 d后葉面噴施2次質量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮,間隔30 d處理。

    菘藍葉中的靛藍、靛玉紅與根中的(R,S)-告依春是生長過程中的次生代謝產物,植物次生代謝的正常進行是藥材質量的保證及臨床用藥有效性的基礎,而植物的氮代謝和氮積累勢必影響植物的次生代謝,因此酰胺態(tài)氮對菘藍次生代謝影響的具體機制還有待于進一步研究。

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