煙葉唇柱苣苔組培苗的生根與移栽技術(shù)研究

潘梅+王景飛+戚華莎+黃賽+呂德任+姜殿強(qiáng)

摘要：以煙葉唇柱苣苔無(wú)菌芽苗為試材，研究基本培養(yǎng)基、糖濃度和不同生長(zhǎng)素對(duì)其根系分化及移栽基質(zhì)對(duì)組培苗移栽成活率的影響。結(jié)果表明，生根培養(yǎng)基為MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L時(shí)，組培苗生根率高達(dá)100%，生根數(shù)多;在珍珠巖基質(zhì)中栽培的生根苗，成活率高，生長(zhǎng)狀況好，是煙葉唇柱苣苔組培苗移栽的合適基質(zhì)。

關(guān)鍵詞：煙葉唇柱苣苔;葉片;離體培養(yǎng);生根;移栽;培養(yǎng)基

中圖分類(lèi)號(hào)： Q943.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2015）04-0206-02

收稿日期：2014-06-06

基金項(xiàng)目：海南省科學(xué)事業(yè)費(fèi)項(xiàng)目（編號(hào)：瓊財(cái)預(yù)[2013]131號(hào)）。

作者簡(jiǎn)介：潘 梅（1962—），女，廣西隆安人，高級(jí)園藝師，從事植物組織培養(yǎng)與開(kāi)發(fā)利用研究。Tel：（0898）65380711;E-mail：panmei200@sina.com。

通信作者：姜殿強(qiáng)，碩士，副研究員，從事藥用植物資源開(kāi)發(fā)與利用研究。Tel：（0898）65393907;E-mail：dqjiang2004@163.com。

煙葉唇柱苣苔（Chirita heterotricha Merr.）是苦苣苔科唇柱苣苔屬多年生草本植物，是海南特有珍稀苦苣苔科植物，分布于海南的瓊中、瓊海、保亭、三亞、白沙、東方，生長(zhǎng)于海拔約430 m的山谷林中或溪邊石上[1]。煙葉唇柱苣苔根狀莖粗約1.5 cm，頂部節(jié)間長(zhǎng)1.0～2.2 cm;葉對(duì)生或簇生，橢圓或長(zhǎng)橢圓形;花序腋生，不分枝或2～3回分枝，有花2～15朵;花冠淡紫色或白色，花期長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月，是一種適合觀(guān)賞和園藝的野生花卉，尚無(wú)人工栽培。煙葉唇柱苣苔可種子繁殖或葉片扦插繁殖，但受季節(jié)限制或繁殖系數(shù)低、繁殖速度慢，離體培養(yǎng)是種苗快速繁殖最為有效的方法。 組培苗的生根與移栽是組培快繁中最為關(guān)鍵的一環(huán)，關(guān)系到工廠(chǎng)化育苗能否成功。目前，關(guān)于煙葉唇柱苣苔組織培養(yǎng)的研究極少[2]，組培生根培養(yǎng)及出瓶移栽方面的研究更為有限。本試驗(yàn)針對(duì)煙葉唇柱苣苔生根階段的培養(yǎng)基配方選擇和移栽基質(zhì)的優(yōu)化進(jìn)行探討，旨在提供一套科學(xué)的生根移栽技術(shù)，為煙葉唇柱苣苔種苗快繁提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

無(wú)菌煙葉唇柱苣苔芽苗，由海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園林花卉研究所組培繁殖。

1.2 不同培養(yǎng)基配方對(duì)小苗生根的影響

除試驗(yàn)項(xiàng)外，所有培養(yǎng)基中均添加蔗糖30 g/L、卡拉膠9.0 g/L，滅菌前pH值為6.0。取高約1.2 cm的小苗接入各生根培養(yǎng)基中，每袋接種3株，每處理均接種8袋，重復(fù)3次;接種后，在光照度1 500 lx、光照時(shí)間9 h/d、溫度（26±2） ℃條件下培養(yǎng);接種30 d后統(tǒng)計(jì)生根率、生根數(shù)及株高。

1.2.1 基本培養(yǎng)基對(duì)小苗生根的影響 以1/4MS、1/2MS 、3/4MS、MS作為基本培養(yǎng)基，各添加NAA 0.5 mg/L。

1.2.2 糖濃度對(duì)小苗生根的影響 以MS+NAA 0.5 mg/L為基本培養(yǎng)基，蔗糖濃度分別設(shè)置為10、20、30、40、50 g/L共5種處理。

1.2.3 生長(zhǎng)素種類(lèi)對(duì)小苗生根的影響 以MS為基本培養(yǎng)基，分別添加NAA、IBA、IAA各0.5 mg/L，以不添加任何生長(zhǎng)素的MS培養(yǎng)基作為對(duì)照。

1.3 移栽基質(zhì)對(duì)組培苗成活率的影響

無(wú)根苗在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)30 d時(shí)，根系發(fā)達(dá)、有6～8張葉片，將其移入拱棚內(nèi)煉苗7 d即可移栽。將苗從培養(yǎng)袋中取出，洗凈根部培養(yǎng)基，注意不要傷到根系和葉片，分別栽種到珍珠巖、河沙、表土和珍珠巖+河沙+表土配比為 1 ∶ 1 ∶ 1 的4種基質(zhì)中，每種基質(zhì)栽種35株，澆透定根水，用透明塑料薄膜覆蓋保濕，遮陽(yáng)網(wǎng)遮陰，30 d后統(tǒng)計(jì)成活率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基配方對(duì)小苗生根的影響

2.1.1 不同基本培養(yǎng)基對(duì)小苗生根的影響 由表1可見(jiàn)，在4種基本培養(yǎng)基中，組培苗生根率均達(dá)100%，但平均根數(shù)、株高及生長(zhǎng)狀況有差異。在MS培養(yǎng)基中，平均生根數(shù)最多，達(dá)22.78條，與其他處理差異極顯著，株高最高，為 2.18 cm，植株生長(zhǎng)狀況好，植株健壯，葉色深綠;1/2MS和3/4MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)生根效果次之，二者的平均生根數(shù)和株高接近，平均根數(shù)分別為19.39、19.84條，株高分別為2.06、2.07 cm，兩者之間差異極不顯著，植株較健壯;1/4MS培養(yǎng)基生根數(shù)最少，只有17.08條，且植株矮小、細(xì)弱，株高僅 1.57 cm。煙葉唇柱苣苔小苗生根最適宜的基本培養(yǎng)基是MS。

表1 不同基本培養(yǎng)基對(duì)煙葉唇柱苣苔小苗生根的影響

基本培養(yǎng)基 生根率

（%） 根數(shù)

（條） 株高

（cm） 生長(zhǎng)狀況

1/4MS 100A 17.00C 1.57B 較弱、葉綠

1/2MS 100A 19.39B 2.06A 較壯、葉綠

3/4MS 100A 19.84B 2.07A 健壯、葉深綠

MS 100A 22.78A 2.18A 健壯、葉深綠

2.1.2 不同糖濃度對(duì)小苗生根的影響 由表2可見(jiàn)，最低濃度和最高濃度的蔗糖生根效果均相對(duì)較差，10 g/L蔗糖時(shí)煙葉唇柱苣苔生根率和生根數(shù)最低，分別為74.6%和11.22條，其株高最高，為2.28 cm，植株細(xì)弱，葉片淡黃色，蔗糖為50 g/L時(shí)的生根率也較低，為90.0%，其生根數(shù)16.94條，植株矮小，葉色黃綠，莖基部膨大;蔗糖為 20、30、40 g/L時(shí)的生根率均達(dá)到100%，其中，30 g/L時(shí)的生根數(shù)最多，達(dá)到2022條，極顯著高于其他處理，其株高為2.14 cm，與10 g/L時(shí)的株高差異不顯著，且植株健壯，葉深綠色。煙葉唇柱苣苔小苗生根培養(yǎng)基的蔗糖濃度宜選用30 g/L。endprint

表2 不同蔗糖濃度對(duì)煙葉唇柱苣苔小苗生根的影響

蔗糖濃度

（g/L） 生根率

（%） 根數(shù)

（條） 株高

（cm） 生長(zhǎng)狀況

10 74.6C 11.22D 2.28A 細(xì)弱、葉淡黃

20 100A 14.06C 2.09AB 較壯、葉大而綠

30 100A 20.22A 2.14AB 健壯、葉深綠

40 100A 13.17C 1.96B 健壯、葉深綠、莖基少量愈傷

50 90.0B 16.94B 1.95B 矮小、葉黃綠、莖基膨大

2.1.3 不同生長(zhǎng)素種類(lèi)對(duì)小苗生根的影響 由表3可見(jiàn)，IBA、IAA和NAA對(duì)煙葉唇柱苣苔小苗生根都有促進(jìn)作用，生根率、根數(shù)和株高均高于對(duì)照;NAA生根效果最好，生根率達(dá)到100%，根粗，平均生根數(shù)19.95條，均極顯著高于IBA和IAA出來(lái)，植株健壯（圖1）;其次是IBA，生根率為94.74%，誘導(dǎo)的根細(xì)長(zhǎng)，平均生根數(shù)9.94條，植株較弱，葉微黃;IAA誘導(dǎo)生根效果最差，生根率偏低，只有80.95%，根細(xì)，平均根數(shù)9.67條，植株矮小。因此，煙葉唇柱苣苔組培苗的生根培養(yǎng)基宜選用MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/ L。

表3 不同生長(zhǎng)素種類(lèi)對(duì)煙葉唇柱苣苔小苗生根的影響

生長(zhǎng)素種類(lèi)

（mg/L） 生根率

（%） 根數(shù)

（條） 株高

（cm） 生長(zhǎng)狀況

CK 60.53D 5.94E 1.43C 細(xì)弱矮小、葉淡綠

IBA 94.74B 9.67B 2.13A 較弱、根細(xì)長(zhǎng)、葉較黃

IAA 80.95C 9.94B 1.93B 較弱、根細(xì)、葉綠

NAA 100.00A 19.95A 2.19A 健壯、根粗、葉深綠

2.2 不同移栽基質(zhì)對(duì)組培苗成活率的影響

由表4可見(jiàn)，不同基質(zhì)移栽的煙葉唇柱苣苔組培苗成活率不同，處理間差異極顯著，以珍珠巖作為基質(zhì)移栽成活率最高，為94.29%（圖2）;其次是河沙，為77.14%;最低的是表土，為22.86%，這可能是由于表土通透性較差，不利于根系生長(zhǎng);V珍珠巖 ∶ V河沙 ∶ V表土=1 ∶ 1 ∶ 1是在表土基質(zhì)中加入了等體積的珍珠巖和河沙，基質(zhì)的通透性有所改善，但成活率仍然較低，為37.14%，這可能與表土較為黏連有關(guān)。因此，選用珍珠巖作為基質(zhì)移栽煙葉唇柱苣苔組培幼苗較好。

表4 不同移栽基質(zhì)對(duì)煙葉唇柱苣苔組培苗生長(zhǎng)的影響

基質(zhì) 移栽株數(shù)

（株） 成活株數(shù)

（株） 成活率

（%）

珍珠巖 35 33 94.29A

河沙 35 27 77.14B

表土 35 8 22.86D

V珍珠巖 ∶ V河沙 ∶ V表土=1 ∶ 1 ∶ 1 35 13 37.14C

3 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，使用無(wú)機(jī)鹽減量的MS培養(yǎng)基，其煙葉唇柱苣苔小苗的生根效果較差，全量MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)生根效果最好，煙葉唇柱苣苔生根率達(dá)100%，生根數(shù)和生根率都極顯著高于3/4MS和1/2MS基本培養(yǎng)基，植株長(zhǎng)勢(shì)良好;較低和較高濃度的蔗糖對(duì)煙葉唇柱苣苔組培苗生根效果較差，表現(xiàn)為生根率低、生根數(shù)量少，以30 g/L 蔗糖濃度誘根效果最好，生根率為100%，生根數(shù)達(dá)20.22條，極顯著高于其他處理;生長(zhǎng)素IBA、IAA和NAA對(duì)煙葉唇柱苣苔培苗生根均有明顯的促進(jìn)作用，極顯著高于對(duì)照處理，其中，以NAA的生根效果最好，其生根率高，生根數(shù)多，且根粗，植株健壯。綜合分析結(jié)果可知，煙葉唇柱苣苔生根最佳培養(yǎng)基為MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L。

在組培苗移栽生根過(guò)程中，基質(zhì)的理化性質(zhì)起至關(guān)重要的作用，其透氣性和含水量對(duì)移栽成活率的影響較大，并對(duì)誘發(fā)新根起關(guān)鍵作用[3]。在煙葉唇柱苣苔組培苗移栽過(guò)程中，由于表土吸水性和保水性強(qiáng)，比較黏結(jié)，通氣性差，使組培苗根系的生長(zhǎng)受到影響，引起幼苗先萎蔫后死亡;在表土基質(zhì)中加入等體積的珍珠巖和河沙，基質(zhì)通透性有所改善，但由于透氣性仍較差，成活率仍然較低，可以考慮加大珍珠巖和河沙的比例以增強(qiáng)基質(zhì)通透性;河沙的透氣性好，潔凈，但保水性差，所以成活率也較低;珍珠巖吸水和貯水能力均很強(qiáng)，且疏松、通透性好，有利于根系的生長(zhǎng)發(fā)育，組培苗的成活率相對(duì)最高。因此，煙葉唇柱苣苔組培苗的移栽基質(zhì)以珍珠巖為佳。

參考文獻(xiàn)：

[1]史佑海，徐世松，黃覺(jué)武. 海南苦苣苔科野生植物資源及其觀(guān)賞特性評(píng)價(jià)[J]. 北方園藝，2011（11）：79-82.

[2]湯正輝. 苦苣苔科植物的快速繁殖、離體保存及耐陰性研究[D]. 成都：四川大學(xué)，2007.

[3]尹淑蓮，郭偉珍，林 艷，等. 基質(zhì)理化性質(zhì)對(duì)組培苗生根狀況的影響[J]. 遼寧林業(yè)科技，2005（5）：18-19，24.endprint