雙酚A與其替代品對(duì)黑斑蛙急性毒性的比較

李圓圓，付旭鋒,2，趙亞嫻，蘇紅巧，秦占芬,*

1. 中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心 環(huán)境化學(xué)與生態(tài)毒理學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100085 2. 云南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，昆明 650091

雙酚A與其替代品對(duì)黑斑蛙急性毒性的比較

李圓圓1，付旭鋒1,2，趙亞嫻1，蘇紅巧1，秦占芬1,*

1. 中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心 環(huán)境化學(xué)與生態(tài)毒理學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100085 2. 云南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，昆明 650091

雙酚F(BPF)和雙酚S(BPS)作為雙酚A(BPA)替代品廣泛使用，然而有關(guān)BPF和BPS的毒性數(shù)據(jù)非常有限。采用系列濃度的BPA、BPF、BPS溶液，暴露黑斑蛙胚胎和蝌蚪96 h，通過(guò)半致死濃度(LC50)、最小生長(zhǎng)抑制濃度(MCIG)和致畸率等指標(biāo)比較3種化合物的急性毒性。結(jié)果顯示：100 mg·L-1BPS未導(dǎo)致黑斑蛙胚胎及蝌蚪畸形和死亡。BPA和BPF對(duì)黑斑蛙胚胎的96 h-LC50分別為7.68 mg·L-1和7.99 mg·L-1，MCIG分別為4.47 mg·L-1和4.77 mg·L-1，最大致畸率為33.33%；對(duì)蝌蚪的96 h-LC50分別為9.00 mg·L-1和9.52 mg·L-1。依據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)準(zhǔn)則》的毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，判定BPA和BPF的毒性等級(jí)為中毒，BPS的毒性等級(jí)為低毒。表明BPF急性毒性與BPA相當(dāng)，BPS急性毒性低于BPA。本研究數(shù)據(jù)可為BPF、BPS作為BPA替代品的生產(chǎn)和使用以及相應(yīng)的環(huán)境管理提供毒理學(xué)參考。

雙酚A；雙酚F；雙酚S；黑斑蛙；胚胎；蝌蚪；急性毒性

鑒于雙酚A(bisphenol A, BPA)廣泛的生物毒性和人體暴露風(fēng)險(xiǎn)[1]，一些國(guó)家和政府相繼對(duì)BPA的使用做出限制[2-4]。結(jié)構(gòu)和功能與BPA相似的一些雙酚類(lèi)化合物開(kāi)始作為其替代品使用，其中雙酚S(bisphenol S, BPS)和雙酚F(bisphenol F, BPF)使用較多。BPS和BPF的結(jié)構(gòu)與BPA類(lèi)似，含有以碳原子或者硫原子連接的2個(gè)酚狀結(jié)構(gòu)(圖1)。BPF主要用于制備環(huán)氧樹(shù)脂和聚碳酸酯，制造清漆、涂料、襯墊、粘合劑、管道等產(chǎn)品，此外在口腔修復(fù)設(shè)備和食品包裝等日常用品中也有應(yīng)用[5-6]。BPS除用于制備耐高溫?zé)崴苄原h(huán)氧樹(shù)脂、碳酸酯單體和磺化物外，還用于農(nóng)藥、皮革鞣劑、染料分散劑和纖維添加劑[7]。文獻(xiàn)報(bào)道多種環(huán)境介質(zhì)(如水體，底泥，室內(nèi)空氣，土壤)和生活用品(如罐裝食品，紙制品)中均檢測(cè)到BPF和BPS的污染[8-9]。近期研究證實(shí)，普通人群廣泛暴露于BPF和BPS中，人體尿液中可檢測(cè)到這2種污染物的存在[10]。隨著環(huán)境污染水平和人體暴露風(fēng)險(xiǎn)的增加，BPF、BPS的毒性開(kāi)始受到關(guān)注。體外試驗(yàn)得出BPS和BPF可能具有與BPA類(lèi)似的雌激素活性[11]。資料顯示，BPF對(duì)大鼠經(jīng)口暴露的半數(shù)致死劑量(LD50)為4 950 mg·kg-1[12-13]；BPS對(duì)大鼠、小鼠、兔的經(jīng)口暴露LD50分別為4 556 mg·kg-1、1 600 mg·kg-1、4 700 mg·kg-1[13-14]，化學(xué)品數(shù)據(jù)庫(kù)缺少BPF、BPS對(duì)水生生物的急性毒性數(shù)據(jù)。文獻(xiàn)報(bào)道BPF和BPS對(duì)大型溞的半數(shù)效應(yīng)濃度(EC50)分別為56 mg·L-1和55 mg·L-1[15]。總體來(lái)看，

目前有關(guān)BPF和BPS對(duì)水生生物的毒性數(shù)據(jù)還很缺乏，有必要開(kāi)展更多的毒理學(xué)研究。

兩棲動(dòng)物胚胎和蝌蚪急性毒性試驗(yàn)，是評(píng)價(jià)化學(xué)品急性毒性的方法之一[16-17]。本實(shí)驗(yàn)室研究表明，我國(guó)本土物種黑斑蛙(Pelophylax nigromaculatus)適合作為急性毒性的材料，用于化學(xué)品的毒性測(cè)試[18]。本文比較研究了BPA、BPF和BPS對(duì)黑斑蛙胚胎和蝌蚪的急性毒性，從毒理學(xué)角度分析BPF和BPS的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。

1 材料與方法 (Materials and methods)

1.1 儀器與試劑

儀器和設(shè)備：兩棲動(dòng)物誘導(dǎo)繁育設(shè)備(本實(shí)驗(yàn)室研發(fā))；體視顯微鏡XTL0745型(重慶光電儀器有限公司，重慶)；脫色搖床TS-1型(海林市其林貝爾儀器制造有限公司，江蘇)；500 mL燒杯和90 mm培養(yǎng)皿(北京玻璃集團(tuán)臺(tái)州博美玻璃儀器廠，北京)；巴斯德吸管(海門(mén)市如意橡塑制品廠，江蘇)。

試劑：雙酚A(CAS NO. 80-05-7; 97%，ACROS ORGANICS)；雙酚F(CAS NO. 620-92-8; >99%，東京化成工業(yè))；雙酚S(CAS NO. 80-09-1; >98%，東京化成工業(yè))；人絨毛膜促性腺激素(HCG，煙臺(tái)北方制藥有限公司)；注射用促黃體素釋放激素(LHRH，Sigma)；半胱氨酸(分析純，北京索萊寶科技有限公司)；二甲基亞砜(DMSO，Sigma-Alorich公司)；氯化鈉和氫氧化鈉(分析純，北京化學(xué)試劑公司)；MS-222 (分析純，Sigma)。

圖1 雙酚A、雙酚F和雙酚S的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig. 1 Chemical structures of bisphenol A, bisphenol F and bisphenol S

1.2 試驗(yàn)生物

黑斑蛙成蛙飼養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)室營(yíng)造水陸兩棲環(huán)境的玻璃缸中，水溫(24±1) °C，明暗光周期12 h∶12 h。每天傍晚給黑斑蛙喂食活體面包蟲(chóng)，次日清洗飼養(yǎng)缸。

成年雌蛙雄蛙各注射20 μg LHRH(以0.6%的生理鹽水配制)和HCG(雌蛙300 IU，雄蛙200 IU)(以0.6%的生理鹽水配制)，放入兩棲動(dòng)物誘導(dǎo)繁育設(shè)備中，誘導(dǎo)其抱對(duì)產(chǎn)卵。

黑斑蛙胚胎：黑斑蛙排卵后，立即檢查卵的受精率和質(zhì)量，受精率應(yīng)大于75%。產(chǎn)卵結(jié)束后，立即用2%半胱氨酸(pH 7.0～8.0)脫膜。參照Gosner[19]的階段劃分描述，篩選卵裂正常的8～10階段胚胎進(jìn)行試驗(yàn)。

黑斑蛙蝌蚪：在水溫(24±1) °C，明暗光周期12 h∶12 h的條件下，胚胎發(fā)育至Gosner 26階段的蝌蚪，用于急性毒性試驗(yàn)。

1.3 試驗(yàn)方法

BPA、BPF、BPS用助溶劑DMSO分別配成100 g·L-1、 100 g·L-1、250 g·L-1的儲(chǔ)備液。設(shè)置溶劑對(duì)照組，其中溶劑的濃度與最高濃度處理組溶劑濃度相同，溶劑的體積濃度不超過(guò)1‰，暴露試驗(yàn)時(shí)用除氯自來(lái)水稀釋至相應(yīng)濃度。

1.3.1 胚胎急性毒性試驗(yàn)

《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》[20]規(guī)定，如果受試化學(xué)品的最大水溶解度大于或等于100 mg·L-1，以100 mg·L-1濃度進(jìn)行限度試驗(yàn)。限度濃度下96 h暴露，胚胎沒(méi)有出現(xiàn)死亡和畸形，則不再進(jìn)行下一步試驗(yàn)，認(rèn)為該受試化學(xué)品的96 h半數(shù)致死濃度(LC50)和96 h半數(shù)致畸濃度(TC50)大于限度濃度。根據(jù)文獻(xiàn)[21]和限度試驗(yàn)濃度上限，BPS、BPA、BPF分別以100 mg·L-1、9.00 mg·L-1、11.50 mg·L-1為最高濃度，1.15為公比，8個(gè)濃度梯度進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)。BPS各濃度組96 h胚胎無(wú)死亡和畸形，9.00 mg·L-1BPA暴露組96 h胚胎未全部死亡，進(jìn)行第2次預(yù)試驗(yàn)，設(shè)置BPA最高濃度11 mg·L-1。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置BPA和BPF的濃度范圍分別為：11.00 mg·L-1～3.88 mg·L-1和10.00 mg·L-1～4.77 mg·L-1進(jìn)行正式試驗(yàn)；BPS以100 mg·L-1進(jìn)行限度試驗(yàn)。隨機(jī)選取25只胚胎放于加入40 mL暴露液的培養(yǎng)皿中，設(shè)置2個(gè)平行，將其置于25 ℃的恒溫箱中，明暗光周期為12 h∶12 h，每隔24 h換液，清除死亡個(gè)體并記錄死亡數(shù)，試驗(yàn)持續(xù)96 h。96 h后，將所有胚胎取出，用10%福爾馬林固定，體視顯微鏡下觀察形態(tài)，測(cè)量胚胎體長(zhǎng)。

1.3.2 蝌蚪急性毒性試驗(yàn)

根據(jù)胚胎試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置BPS以100 mg·L-1濃度進(jìn)行限度試驗(yàn)，BPA、BPF暴露濃度為14.00 mg·L-1～4.82 mg·L-1，1.15為公比，8個(gè)梯度進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)。隨機(jī)取10只蝌蚪放于盛有300 mL暴露液的燒杯中，設(shè)置3個(gè)平行，每隔24 h換液，清除死亡個(gè)體并記錄死亡數(shù)，試驗(yàn)持續(xù)96 h。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，得到BPA和BPF正式試驗(yàn)的濃度范圍分別為：12.00 mg·L-1～6.94 mg·L-1和12 mg·L-1～4.82 mg·L-1，每個(gè)處理組3個(gè)平行。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

詳細(xì)記錄每個(gè)培養(yǎng)皿中胚胎死亡、畸形、生長(zhǎng)情況和每個(gè)燒杯中蝌蚪死亡數(shù)。以受試化學(xué)品的對(duì)數(shù)值為自變量(x)，以相應(yīng)濃度下胚胎或蝌蚪死亡的機(jī)率為因變量(y)，采用SPSS 16數(shù)據(jù)處理軟件，使用Probit進(jìn)行回歸分析，建立“劑量-效應(yīng)”線(xiàn)性方程，并計(jì)算LC50值及其95%置信限。黑斑蛙胚胎體長(zhǎng)數(shù)據(jù)，通過(guò)One-Way ANOVA統(tǒng)計(jì)分析其最小抑制生長(zhǎng)濃度(MCIG)。

2 結(jié)果(Results)

2.1 胚胎急性毒性

胚胎急性毒性試驗(yàn)，溶劑對(duì)照組無(wú)死亡，致畸率為2.56%，符合質(zhì)量控制要求。BPS限度試驗(yàn)結(jié)果，100 mg·L-1BPS暴露胚胎96 h無(wú)死亡，無(wú)畸形，認(rèn)為BPS的96 h-LC50和96 h-TC50大于100 mg·L-1。BPA和BPF暴露的胚胎在48 h、72 h、96 h的死亡率如圖2所示。96 h后觀察畸形胚胎(圖3)，統(tǒng)計(jì)致畸率(圖4)。測(cè)量96 h胚胎體長(zhǎng)，統(tǒng)計(jì)各劑量與對(duì)照是否有顯著性差異(表2、表3)，確定有差異的最小濃度即MCIG(表1)。

表1 BPA和BPF對(duì)黑斑蛙胚胎的LC50和MCIGTable 1 LC50 and MCIG values of BPA and BPF for Pelophylax nigromaculatus embryos

注：MCIG為通過(guò)One-Way ANOVA統(tǒng)計(jì)分析得到的最小抑制生長(zhǎng)濃度。

Note:MCIG represents minimal concentration to inhibit growth by One-Way ANOVA method.

圖2 BPA和BPF暴露后黑斑蛙胚胎的死亡率Fig. 2 Lethal rates of Pelophylax nigromaculatus embryos after exposure to BPA and BPF

黑斑蛙胚胎經(jīng)BPA、BPF暴露48 h后，各暴露組沒(méi)有或者僅有少量胚胎死亡；72 h，11.00 mg·L-1BPA暴露組胚胎全部死亡；96 h，10 mg·L-1BPF暴露組胚胎全部死亡(圖2)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，BPA的96 h-LC50為7.68 mg·L-1；BPF的96 h-LC50為7.99 mg·L-1(表1)。

對(duì)照組胚胎發(fā)育正常，96 h后達(dá)到Gonser 25階段，蝌蚪體表光滑，脊柱正直，尾無(wú)彎曲，游泳活躍(圖3A)。BPA和BPF暴露96 h，胚胎出現(xiàn)尾彎曲(B)，脊椎彎曲(C)，軸縮短(D)，頭面部、心臟、腹部水腫(E)，面部水皰(F)，腹部水皰(G)，頭部發(fā)育不全、腦未發(fā)育(H)，眼睛無(wú)色素(I)等現(xiàn)象。統(tǒng)計(jì)96 h后各暴露組畸形數(shù)量(活體)，計(jì)算致畸率，BPA和BPF最高的致畸率均未達(dá)到50%(圖4)，因此未能計(jì)算它們的半數(shù)致畸濃度(TC50)。

測(cè)量胚胎體長(zhǎng)，溶劑對(duì)照組體長(zhǎng)范圍為7.5～8.5 mm；BPA和BPF暴露組體長(zhǎng)范圍均為5.0～8.5 mm。BPA和BPF暴露組胚胎的平均體長(zhǎng)隨劑量

增加而減小，呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，BPA和BPF均抑制胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育：暴露濃度4.47 mg·L-1的BPA(表2)和4.77 mg·L-1的BPF對(duì)胚胎體長(zhǎng)有明顯抑制作用(表3)；BPA的MCIG為4.47 mg·L-1，BPF的MCIG小于最低暴露劑量4.77 mg·L-1(表1)。

圖3 BPA和BPF暴露96 h導(dǎo)致的黑斑蛙胚胎的各種畸形注：箭頭所指為典型畸形部位。Fig. 3 Malformations of Pelophylax nigromaculatus embryos caused by 96 h-exposure of BPA and BPFNote: The arrow shows the malformed part.

圖4 BPA和BPF暴露96 h對(duì)黑斑蛙胚胎的致畸率Fig. 4 Teratogenic rates of Pelophylax nigromaculatus embryos after 96 h-exposure to BPA and BPF

表2 BPA對(duì)黑斑蛙胚胎體長(zhǎng)的影響Table 2 Effects of BPA on body length of Pelophylax nigromaculatus embryos

注：*表示與對(duì)照組相比存在顯著性差異(P<0.05)。

Note: * indicate significant difference compared with the control group (P<0.05).

表3 BPF對(duì)黑斑蛙胚胎體長(zhǎng)的影響Table 3 Effects of BPF on body length of Pelophylax nigromaculatus embryos

注：*表示與對(duì)照組相比存在顯著性差異(P<0.05)。

Note: * indicate significant difference compared with the control group (P<0.05).

2.2 蝌蚪急性毒性

溶劑對(duì)照組蝌蚪無(wú)死亡，表明質(zhì)量控制良好。100 mg·L-1BPS暴露蝌蚪96 h無(wú)死亡，認(rèn)為BPS的96 h-LC50大于100 mg·L-1。BPA和BPF暴露黑斑蛙蝌蚪24 h，最高劑量12 mg·L-1濃度下蝌蚪全部死亡。48 h，10.00 mg·L-1BPA暴露組蝌蚪死亡率上升20%。72 h，BPF的6.94 mg·L-1暴露組開(kāi)始出現(xiàn)死亡，BPA的9.09 mg·L-1和10.00 mg·L-1暴露組死亡率略微升高。96 h暴露終點(diǎn)，BPA和BPF最低濃度暴露組蝌蚪無(wú)死亡(圖5)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析得到BPA和BPF對(duì)蝌蚪的48 h-LC50分別為9.34 mg·L-1和10.12 mg·L-1；72 h-LC50分別為9.13 mg·L-1和10.10 mg·L-1；96 h-LC50分別為9.00 mg·L-1和9.52 mg·L-1(表4)。

表4 BPA和BPF對(duì)黑斑蛙蝌蚪的LC50,95%置信 區(qū)間和回歸方程Table 4 LC50, 95% confidence interval and regression equations of BPA and BPF to Pelophylax nigromaculatus tadpoles

注：LC50及其95%置信區(qū)間的單位為mg·L-1。

Note: The unit of LC50and its 95% confidence interval is mg·L-1.

圖5 BPA和BPF對(duì)黑斑蛙蝌蚪的致死率Fig. 5 Lethal rates of Pelophylax nigromaculatus tadpoles after exposure to BPA and BPF

3 討論(Discussion)

BPS、BPF作為BPA的替代品，具有類(lèi)似結(jié)構(gòu)及功能，其對(duì)兩棲動(dòng)物的急性毒性及生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)值得探討。BPS對(duì)黑斑蛙蝌蚪及胚胎的96 h-LC50>100 mg·L-1，按農(nóng)業(yè)部《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)準(zhǔn)則》[20]的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，BPS對(duì)黑斑蛙的毒性等級(jí)為低毒。按世界衛(wèi)生組織(WHO)建議的分類(lèi)準(zhǔn)則[22]，BPS對(duì)大鼠、小鼠、兔的急性毒性等級(jí)為低毒[13-14]，與BPS對(duì)黑斑蛙的毒性等級(jí)一致。BPA對(duì)胚胎和蝌蚪的96 h-LC50分別為7.68 mg·L-1和9.00 mg·L-1，BPF對(duì)胚胎和蝌蚪的96 h-LC50分別為7.99 mg·L-1和9.52 mg·L-1，比較2種化學(xué)品對(duì)胚胎和蝌蚪96 h-LC50，發(fā)現(xiàn)胚胎比蝌蚪更敏感。胚胎體長(zhǎng)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明BPF與BPA對(duì)胚胎的生長(zhǎng)抑制作用無(wú)顯著差異。另外，BPA、BPF暴露的胚胎在最低劑量出現(xiàn)畸形且癥狀相似，意味著二者對(duì)黑斑蛙胚胎有相似的致畸作用。綜合考慮胚胎急性毒性試驗(yàn)的96 h-LC50、MCIG、致畸率等指標(biāo)，認(rèn)為BPF與BPA對(duì)胚胎的發(fā)育毒性相當(dāng)。根據(jù)農(nóng)業(yè)部[20]和WHO的化學(xué)品分類(lèi)準(zhǔn)則[21]，BPF對(duì)黑斑蛙的毒性等級(jí)為中毒，對(duì)大鼠的毒性為低毒[12-13]；BPA對(duì)黑斑蛙、黑頭呆魚(yú)、斑馬魚(yú)的毒性等級(jí)均為中毒[21,23]，對(duì)大鼠、小鼠的毒性為低毒[13,24]。可見(jiàn)BPF對(duì)黑斑蛙的毒性高于對(duì)大鼠的毒性；BPA對(duì)黑斑蛙和魚(yú)類(lèi)的毒性相同，高于對(duì)鼠類(lèi)的毒性。研究顯示，某些化學(xué)品對(duì)鼠類(lèi)低毒，但是對(duì)兩棲動(dòng)物或其它水生生物有更高的毒性，BPA和BPF具有此特征[25-26]。因此，使用兩棲動(dòng)物測(cè)試化學(xué)品的毒性對(duì)于全面認(rèn)識(shí)化學(xué)品的生態(tài)安全是必要的。

文獻(xiàn)報(bào)道，BPF和BPS在水體中濃度一般略低于BPA，環(huán)境濃度在幾個(gè)ng·L-1至幾個(gè)μg·L-1[27-28]。但是在某些水體中BPF的濃度與BPA相當(dāng)，西班牙某污水處理廠進(jìn)水中BPA與BPF濃度分別為(1.36±0.08) μg·L-1和(1.43±0.03) μg·L-1[27]。本研究結(jié)果，BPA和BPF對(duì)黑斑蛙的急性毒性高于報(bào)道的環(huán)境濃度，但是BPA和BPF在環(huán)境水體及其他介質(zhì)中廣泛檢出提示著，環(huán)境濃度下的長(zhǎng)期暴露，其毒性作用不容忽視。雖然BPS的急性毒性低于BPA和BPF，但是有研究表明BPS在水體中很難降解，具有持久性[29]，因此BPS在水體中的累積濃度和其對(duì)水中生物的長(zhǎng)期影響，仍值得關(guān)注。

綜上所述，本文首次報(bào)道了BPS、BPF對(duì)兩棲動(dòng)物的急性毒性，并且比較了BPA及其替代品BPS、BPF對(duì)黑斑蛙的毒性大?。築PF與BPA相當(dāng)，均為中毒化學(xué)品；BPS毒性低于BPA。鑒于不同物種得到的毒性數(shù)據(jù)存在差異，BPF、BPS仍需要開(kāi)展多方面的毒理學(xué)研究。本研究所得數(shù)據(jù)可為BPF、BPS作為BPA替代品的生產(chǎn)和使用以及相應(yīng)的環(huán)境管理提供毒理學(xué)參考。

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Comparison on Acute Toxicity of Bisphenol A with Its Substitutes toPelophylaxnigromaculatus

Li Yuanyuan1, Fu Xufeng1,2, Zhao Yaxian1, Su Hongqiao1, Qin Zhanfen1,*

1. State Key Laboratory of Environmental Chemistry and Ecological Toxicology, Research Center for Eco-Environmental Sciences, Chinese Academy of Sciences, Beijing 10085, China 2. School of Life Science, Yunnan University, Kunming 650091, China

13 May 2014 accepted 20 May 2014

Little is known about toxic effects of bisphenol F (BPF) and bisphenol S (BPS), although they have been used widely as BPA substitutes. To compare acute toxicity between BPF/BPS and BPA, the lethal concentrations 50% (LC50), minimum concentration to inhibit growth (MCIG) and teratogenic rate were measured for Pelophylax nigromaculatus embryos and tadpoles. It was found that 96 h-exposure to 100 mg·L-1BPS caused no malformation and death of P. nigromaculatus embryos and tadpoles. The 96 h-LC50values of BPA and BPF for embryos were 7.68 mg·L-1and 7.99 mg·L-1, with 4.47 mg·L-1and 4.77 mg·L-1for the MCIG values, respectively. The maximum teratogenic rates both are 33.33%. The 96 h-LC50values of BPA and BPF for tadpoles are 9.00 mg·L-1and 9.52 mg·L-1, respectively. The results showed that BPF was comparable to BPA in term of acute toxicity, while acute toxicity of BPS was considerably lower than that of BPA. According to toxicity grading standards of Guidelines on Environmental Safety Assessment for Chemical Pesticides, BPA and BPF are determined as medium toxic chemicals to P. nigromaculatus embryos and tadpoles, with BPS as a low toxic chemical. Our study can provide a helpful reference for the production and use of BPF and BPS, and also the corresponding environmental management.

bisphenol A; bisphenol F; bisphenol S; Pelophylax nigromaculatus; embryo; tadpole; acute toxicity

環(huán)保公益性行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)項(xiàng)目(201109048)；國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(21377153)

李圓圓(1988-)，女，碩士，研究方向?yàn)槎纠韺W(xué)，E-mail: liyuaner2012@126.com；

*通訊作者(Corresponding author)， E-mail: qinzhanfen@rcees.ac.cn

10.7524/AJE.1673-5897.20140513002

2014-05-13 錄用日期：2014-05-20

1673-5897(2015)2-251-07

X171.5

A

秦占芬(1971-)，女，環(huán)境科學(xué)博士，研究員，主要研究方向?yàn)樾滦蚉OPs的生殖和發(fā)育毒性，以及基于兩棲動(dòng)物的化學(xué)品毒性評(píng)價(jià)方法。

李圓圓, 付旭鋒, 趙亞嫻, 等. 雙酚A與其替代品對(duì)黑斑蛙急性毒性的比較[J]. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào), 2015, 10(2): 251-257

Li Y Y, Fu X F, Zhao Y X, et al. Comparison on acute toxicity of bisphenol A with its substitutes to Pelophylax nigromaculatus [J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2015, 10(2): 251-257 (in Chinese)