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    不同劑量川芎天麻湯對小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響*

    2015-06-02 07:14:12王田田付彥君
    關(guān)鍵詞:小鼠實驗

    劉 晴 ,王田田,梁 源 ,付彥君

    (1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床學(xué)院,沈陽 110847;2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué),沈陽 110847)

    早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中就有對川芎和天麻的記載,川芎“味辛溫,主中風(fēng)入腦,頭痛,寒痹”;天麻“赤箭,味辛溫。久服益氣力,長陰,肥健,輕身,增年”[1]。宋朝的《圣濟總錄》亦載有川芎、天麻配伍應(yīng)用,“芎?(即川芎)一斤大者,天麻四兩(比例為4∶1)。同搗羅為末,蜜煉為丸,治頭風(fēng)旋運,目昏眩急,偏正頭痛,解身體拘倦,清爽神志,通利關(guān)竅”[2]。在現(xiàn)代中醫(yī)臨床中川芎、天麻配伍常被用來治療頭痛、高血壓等病癥[3-4]。有研究顯示,川芎嗪對中樞神經(jīng)有鎮(zhèn)靜作用[5],天麻對中樞神經(jīng)系統(tǒng)也有一定的保護作用[6-7]。但川芎、天麻按傳統(tǒng)的配伍比例對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響尚未見文獻報道。本研究應(yīng)用曠場實驗的方法,觀察天麻、川芎對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響。

    1 實驗材料與方法

    1.1 實驗材料

    1.1.1 實驗動物 清潔雄性昆明小鼠,體質(zhì)量18~22 g,由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。

    1.1.2 實驗藥品 川芎、天麻均購于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥局。

    1.1.3 實驗儀器 采用成都泰盟軟件有限公司OFT-100型號曠場實驗視頻分析系統(tǒng)。曠場實驗箱是長×寬×高為50 cm×50 cm×40 cm的黑箱,底部畫有25個小方格,周邊16個格為外周區(qū),中間9格為中央?yún)^(qū)。

    1.2 實驗方法

    1.2.1 藥品制備 按1∶4配比川芎、天麻,加8倍清水,浸泡1 h,煮沸后再煎煮40 min,濾出煎煮液。再加6倍水,煮沸后再煮40 min,濾出煎煮液。將兩次煎煮液混合,濃縮至3.6 g/mL。再將藥液留取一部分待用之后,剩余藥液分別用蒸餾水配制成2.4、1.2、0.3 g/mL,4℃冰箱保存?zhèn)溆茫ǜ鲃┝拷M留取藥量大約為每組30 mL)。無菌生理鹽水100 mL。4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2.2 實驗方法 雄性小鼠40只,按隨機數(shù)字表法隨機分為5組,分別為生理鹽水對照組、川芎天麻湯3 g/kg組(臨床等效劑量組)、12 g/kg組(4倍臨床等效劑量)、24 g/kg組(8倍臨床等效劑量)和36 g/kg組(12倍臨床等效劑量)。連續(xù)灌胃給藥11 d,末次給藥2 h后進行曠場實驗,記錄小鼠在曠場環(huán)境內(nèi)的運動時間、運動路程、在中央?yún)^(qū)及外周區(qū)停留的時間。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 使用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件,計量資料均以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示,對曠場實驗兩組間比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較若方差齊采用LSD法,若方法不齊采用Dunnett’s法進行統(tǒng)計處理,以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 實驗結(jié)果

    2.1 川芎天麻湯對小鼠運動時間和運動路程的影響 不同劑量的川芎天麻湯對小鼠在曠場實驗中的運動時間和路程均有抑制作用,且隨劑量增加,抑制作用增強,見表1。

    表1 川芎天麻湯對小鼠運動路程的影響(s)

    表1 川芎天麻湯對小鼠運動路程的影響(s)

    注:與生理鹽水組相比,*P<0.05;與 12 g/kg 組相比,#P<0.05;與3 g/kg組相比,△P<0.05。

    組別 運動路程(cm)生理鹽水組 16 897.12±799.01川芎天麻湯3 g/kg組 16 442.11±764.61川芎天麻湯12 g/kg組 15 854.61±494.64*川芎天麻湯24 g/kg組 15 834.47±257.88*川芎天麻湯 36 g/kg 組 15 221.26±595.10*#△n 8 8 8 8 8運動時間(s)125.59±7.83 119.72±13.10 115.37±7.02*111.80±3.50*103.21± 6.59*#△

    從表1可以看出,川芎天麻湯的實驗組小鼠的運動時間及運動路程較生理鹽水組有所減少,且隨著川芎天麻湯濃度的增加,小鼠的運動時間及運動路程逐漸減少。川芎天麻湯的12、24、36 g/kg組小鼠的運動時間減少、運動路程減少,與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。36 g/kg組小鼠的運動時間、運動路程與3 g/kg組、12 g/kg組的比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。3 g/kg組的運動時間、運動路程與生理鹽水組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。36 g/kg組小鼠的運動時間、運動路程與24 g/kg組的比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

    2.2 川芎天麻湯對小鼠在中央?yún)^(qū)停留時間的影響 川芎天麻湯的實驗組小鼠在中央?yún)^(qū)停留時間均少于生理鹽水組小鼠,且隨藥物濃度的增加,小鼠在中央?yún)^(qū)停留時間也隨之增加;反之,實驗組小鼠在外周區(qū)停留時間與生理鹽水組小鼠相比更長,且隨藥物濃度增加,小鼠在外周區(qū)停留時間隨之減少。見表2。

    表2 川芎天麻湯對小鼠在中央?yún)^(qū)停留時間的影響(s)s

    表2 川芎天麻湯對小鼠在中央?yún)^(qū)停留時間的影響(s)s

    注:與生理鹽水組相比,*P<0.05;與 12 g/kg組相比,#P<0.05;與3 g/kg組相比,△P<0.05。

    組別生理鹽水組川芎天麻湯3 g/kg組川芎天麻湯12 g/kg組川芎天麻湯24 g/kg組川芎天麻湯36 g/kg組n 8 8 8 8 8中心區(qū)停留時間 外周區(qū)停留時間64.33±4.90 835.67±4.90 66.72±7.57 833.28±7.57 74.03±4.04* 825.97±4.04*84.96±5.90*#△ 815.04±5.90*#△85.61±7.65*#△ 814.39±7.65*#△

    從表2可以看出,川芎天麻湯的12、24、36 g/kg組小鼠在中心區(qū)停留時間增加,與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。24 g/kg組、36 g/kg組小鼠在中心區(qū)停留時間分別與3 g/kg組、12 g/kg組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。3 g/kg組小鼠在中心區(qū)停留時間與生理鹽水組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。36 g/kg組小鼠小鼠在中心區(qū)停留時間與24 g/kg組的比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

    3 討論

    現(xiàn)代研究表明,川芎主要成分為川芎嗪,能通過血腦屏障改善微循環(huán)[7-8],抗血栓改善血液流變學(xué),保護冠狀動脈[9-10],保護心肌細(xì)胞及心肌缺血再灌注損傷,清除氧自由基,還有鎮(zhèn)痛、抗癲癇、改善學(xué)習(xí)記憶能力、抗組織纖維化、抗腫瘤的作用,此外,對呼吸、消化、泌尿系統(tǒng)均有作用[11]。川芎水煎劑對動物神經(jīng)系統(tǒng)有鎮(zhèn)靜作用,并有明顯而持久的降壓作用[12]。天麻有效成分天麻苷元可作用于腦部發(fā)揮藥效[13],具體機制尚不明確。天麻水、醇提取物及不同制劑,均能使小鼠自發(fā)活動減少延長睡眠時間,可抑制或縮短實驗性癲癇的發(fā)作時間,天麻還可以降低外周血管、腦血管和冠狀血管阻力[14],有降壓減慢心率及鎮(zhèn)痛抗炎的作用[15]。

    在曠場實驗中各組小鼠均表現(xiàn)出在外周停留時間明顯多于在中央?yún)^(qū)停留時間,這與小鼠趨避未知環(huán)境的生活習(xí)性有關(guān)。根據(jù)實驗數(shù)據(jù)可知,所有實驗組與生理鹽水對照組相比小鼠的總運動時間、總運動路程均有減少,說明川芎天麻藥對對小鼠中樞神經(jīng)有鎮(zhèn)靜作用,對小鼠自主活動有抑制作用,這與已有的研究結(jié)論一致[16-17]。川芎中的川芎嗪和阿魏酸均對小鼠的中樞神經(jīng)興奮性有明顯的抑制作用[18],且川芎嗪的鎮(zhèn)靜作用明顯于阿魏酸。天麻中的天麻素、天麻苷元、香莢蘭醇等成分也能夠顯著地抑制小鼠的中樞神經(jīng)興奮性。天麻注射液能夠通過抑制小鼠中樞神經(jīng)對去甲腎上腺素的重提取和儲存,從而可使小鼠腦內(nèi)去甲腎上腺素含量減少,這可能是天麻抑制小鼠中樞神經(jīng)的機制作用。實驗中,隨著藥物濃度增加,各組小鼠在中心區(qū)活動時間有明顯增高趨勢,說明小鼠的運動能力下降,對未知環(huán)境的恐懼感減少,中樞興奮性降低。陳振華等[19]人的研究中提到,曠場實驗中小鼠在中央格停留時間的延長、警覺性的降低以及緊張狀態(tài)的減弱等均表示小鼠的興奮性下降,這對本課題組的實驗具有明確的支持意義。隨實驗藥物劑量逐漸增加,小鼠總的運動路程和運動時間均隨之減少,說明川芎天麻湯對小鼠鎮(zhèn)靜、自主活動抑制作用有一定劑量依賴性。對于傳統(tǒng)比例配伍的天麻、川芎的藥對組合對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響與兩藥的單獨應(yīng)用對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響的差別,有待進一步的實驗研究。

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