尼美舒利通過PPARγ途徑抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖*

章向成,陳光俠,張 紅,何曉華,劉世育,晏 燕

(1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院ICU，江蘇淮安 223300；2.江蘇省徐州市第一人民醫(yī)院消化科 221002；3.南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院內(nèi)分泌科，江蘇淮安 223300)

論著·基礎(chǔ)研究

尼美舒利通過PPARγ途徑抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖*

章向成1,陳光俠2△,張 紅3,何曉華2,劉世育2,晏 燕2

(1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院ICU，江蘇淮安 223300；2.江蘇省徐州市第一人民醫(yī)院消化科 221002；3.南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院內(nèi)分泌科，江蘇淮安 223300)

目的 觀察過氧化物酶增殖物激活受體γ(PPARγ)抑制劑GW9662干預(yù)后，尼美舒利(N)對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡和增殖的影響，探討PPARγ途徑在N抗癌機(jī)制中的作用。方法 體外培養(yǎng)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞，設(shè)立不加藥對(duì)照組、單用PPARγ抑制劑GW9662組(GW9662組，藥物濃度0.1、0.5、1.0、5.0 μmol/L)、單用N組、GW9662+N組共4組。MTT檢測(cè)各組細(xì)胞生長抑制率；流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的變化。Western blot檢測(cè)各組中PPARγ、p21Waf1、p27Kip1、Bcl-2、Bax、VEGF蛋白的表達(dá)。結(jié)果 MTT檢測(cè)結(jié)果：GW9662組較對(duì)照組細(xì)胞增殖差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；N組呈時(shí)間依賴性抑制SW480細(xì)胞增殖(P<0.01)；在GW9662+N組中GW9662呈劑量及時(shí)間依賴性減弱N抑制細(xì)胞增殖的作用。FCM檢測(cè)結(jié)果：細(xì)胞凋亡率在GW9662組與對(duì)照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；N組與對(duì)照組比較，SW480細(xì)胞凋亡率顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，G0/G1期細(xì)胞比例明顯增加，S期及G2/M期細(xì)胞比例顯著減少；GW9662+N組細(xì)胞凋亡率較N組明顯降低(P<0.01)，細(xì)胞在G0/G1期的比例降低，S期和G2/M期細(xì)胞的比例升高。Western blot檢測(cè)結(jié)果：N組與對(duì)照組比較SW480細(xì)胞的PPARγ、p21Waf1、 p27Kip1、Bax蛋白表達(dá)率顯著增加(P<0.05或P<0.01)，Bcl-2、VEGF的表達(dá)率則明顯下調(diào)(P<0.01)；GW9662+N組與N組比較，SW480細(xì)胞的PPARγ、p21Waf1、 p27Kip1、Bax蛋白顯著表達(dá)下調(diào)(P<0.05或P<0.01)，而Bcl-2、VEGF的表達(dá)則上調(diào)(P<0.05)。結(jié)論 N在體外能有效抑制結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的增殖，促進(jìn)其凋亡。PPARγ通路在N影響結(jié)腸癌細(xì)胞增殖、凋亡中發(fā)揮重要作用。

過氧化物酶體增殖物激活受體；細(xì)胞增殖；細(xì)胞凋亡；結(jié)腸癌細(xì)胞；SW480細(xì)胞；尼美舒利

結(jié)腸癌是最常見的消化道惡性腫瘤之一，流行病學(xué)研究顯示，長期服用阿司匹林可明顯降低結(jié)直腸癌發(fā)病的危險(xiǎn)性[1]。2000年，美國食品與藥品管理局(U.S.food and drug administration,FDA)已批準(zhǔn)將選擇性環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)抑制劑羅非昔布用于FAP的治療[2]。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為非甾體抗炎藥(NSAIDs)主要通過抑制COX途徑發(fā)揮抗腫瘤作用，本課題組前期試驗(yàn)證明，無論是選擇性還是非選擇性COX-2抑制劑均可呈時(shí)間和劑量依賴性抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖[3]。過氧化物酶增殖物激活受體(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)是一類由配體激活的核轉(zhuǎn)錄因子，PPARγ在多種腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，如結(jié)腸癌、胃癌、前列腺癌等[4-6]，國外最近有學(xué)者發(fā)現(xiàn)PPARγ、NF-κB等非COX途徑在NSAIDs的抗腫瘤機(jī)制中也具有重要作用[4]。NSAIDs可通過激活PPARγ在結(jié)腸癌早期調(diào)節(jié)炎性因子，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡[7]。本研究旨在探討PPARγ在尼美舒利(nimesulide,N)影響結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡及增殖中發(fā)揮的作用及其機(jī)制，以期為臨床提供結(jié)腸癌防治的新策略。

1 材料與方法

1.1 材料 人結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480購自上海細(xì)胞生物研究所。碘化丙啶(PI)購自晶美生物有限公司。胰蛋白酶、小牛血清、RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)液購自美國Gibco公司；N、四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT) 、二甲基亞砜(DMSO)、GW9662 購自美國Sigma公司，青霉素、鏈霉素購自華北制藥廠，RNA酶購自廈門泰晶生物有限公司；DAB試劑盒、Power vision染色試劑盒購自北京中山金橋生物技術(shù)有限公司；兔抗PPARγ單克隆抗體、鼠抗p21Waf1、 p27Kip1、Bcl-2、Bax、VEGF單克隆抗體購自美國Santa Cruz生物技術(shù)公司；二抗購自北京中山金橋生物工程公司。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng) 復(fù)蘇后細(xì)胞轉(zhuǎn)入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，加入約5 mL細(xì)胞培養(yǎng)液，在37 ℃，5% CO2條件下含有雙抗(青霉素100 U/mL；鏈霉素100 U/mL)的RPMI-1640培養(yǎng)基(含0.002 μmol/L的L-谷氨酞胺40 μL，10%小牛血清)培養(yǎng)，常規(guī)進(jìn)行細(xì)胞傳代，取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組 實(shí)驗(yàn)共分4組：(1)不加藥對(duì)照組；(2)GW9662組(終濃度分別為0.1、0.5、1.0、5.0 μmol/L)；(3)N組；(4)GW9662+N組。

1.2.3 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況 取對(duì)數(shù)生長期SW480細(xì)胞，以1×105/mL的細(xì)胞密度接種于96孔板中，0.2 mL/孔，常規(guī)培養(yǎng)。24 h后加入GW9662(終濃度分別為0.1、0.5、1.0、5.0 μmol/l)干預(yù)，干預(yù)0.5 h后再分別加入N(終濃度為200 μmol/L)，按實(shí)驗(yàn)分組，每組每個(gè)濃度每個(gè)時(shí)間點(diǎn)設(shè)12個(gè)復(fù)孔，分別培養(yǎng)至24、48、72 h后，每孔加入MTT液20 μL，37 ℃孵育4 h后棄上清液，每孔加入DMSO 150 μL，輕輕震蕩10 min使其充分溶解后，在490 nm波長酶標(biāo)儀上測(cè)定各孔光吸收值(OD) 來評(píng)估細(xì)胞增殖情況。細(xì)胞生長抑制率=(1-給藥組OD值/空白組OD值)×100%。

1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡情況 將對(duì)數(shù)生長期SW480細(xì)胞以每孔2×105/mL的細(xì)胞密度接種于24孔板，1 mL/孔，常規(guī)培養(yǎng)，24 h后加入GW9662(終濃度為0.5 μmol/L)干預(yù)，干預(yù)0.5 h后加入N(終濃度為200 μmol/L)。按實(shí)驗(yàn)分組每組設(shè)6個(gè)復(fù)孔，進(jìn)行下面步驟：(1)0.25%胰蛋白酶消化收集細(xì)胞，用RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌3遍；(2)加入70%冷乙醇4 ℃固定過夜；(3)PBS洗滌3次，每次洗滌后，800 r/min，離心2～3 min，去上清液。最后加入PI染液，4 ℃避光染色30 min。采用Beckon/Dickinson FACSCalibur型流式細(xì)胞儀，在488 nm波長處進(jìn)行檢測(cè)，記錄激發(fā)波長488 nm處的紅色熒光。

1.2.5 Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞PPARγ、p21Waf1、 p27Kip1、Bcl-2、Bax和VEGF蛋白的表達(dá) 將SW480細(xì)胞稀釋為1×105/mL，按每瓶10 mL接種于50 mL培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)24 h細(xì)胞附壁后，倒掉培養(yǎng)液，加入GW9662(終濃度分別為0.1、0.5 μmol/L)干預(yù)，干預(yù)0.5 h后再加入N(終濃度為200 μmol/L)，按實(shí)驗(yàn)分組，每組3個(gè)平行樣本，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后取出，0.25%胰酶消化、離心收集細(xì)胞，PBS洗滌3次。細(xì)胞超聲粉碎機(jī)粉碎細(xì)胞后收集上清液作為細(xì)胞總蛋白，并用考馬斯亮藍(lán)蛋白定量試劑盒進(jìn)行蛋白定量。取一定量的蛋白質(zhì)樣品與2×十二烷基硫酸鈉(SDS)上樣緩沖液(100 mmol/L Tris堿、200 mmol/L DTT、4% SDS、0.2%溴酚藍(lán)、20%甘油)混合，按每泳道30 μg加載于SDS-PAGE凝膠電泳樣品孔中，100 V電泳至溴酚藍(lán)達(dá)分離膠，加大電壓至200 V，直至溴酚藍(lán)達(dá)凝膠底部。半干電轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜上，3%牛血清清蛋白封閉，分別加入1∶500稀釋的兔抗PPARγ單克隆抗體、1∶400稀釋的鼠抗p21Waf1、 p27Kip1、Bcl-2、Bax、VEGF單克隆抗體，4 ℃孵育過夜，加入二抗，室溫孵育2 h，NBT/BCIP顯色觀察結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度GW9662干預(yù)后，N對(duì)SW480細(xì)胞增殖影響的變化 MTT法結(jié)果顯示，單用不同濃度的GW9662(0.1、0.5、1.0、5.0 μmol/L)作用于SW480細(xì)胞24、48、72 h較對(duì)照組無明顯變化，見圖1。N(200 μmol/L)較對(duì)照組呈時(shí)間依賴性抑制SW480細(xì)胞的生長(P<0.01)。在一定劑量范圍內(nèi)，不同濃度GW9662干預(yù)后，N作用于SW480細(xì)胞24、48、72 h，其抑制SW480細(xì)胞增殖的作用被GW9662呈時(shí)間劑量依賴性減弱。當(dāng)GW9662濃度為0～0.5 μmol/L，24 h時(shí)，對(duì)N的抑制作用達(dá)高峰，48 h后開始下降，而到72 h時(shí)對(duì)N的抑制作用明顯下降，見表1、圖2。

表1 GW9662、N對(duì)SW480細(xì)胞增殖的影響

續(xù)表 1GW9662、N對(duì)SW480細(xì)胞增殖的影響

G：GW9662；a：P<0.05，b：P<0.01，與對(duì)照組比較；c：P<0.01，與N組比較。

2.2 不同濃度GW9662干預(yù)后，N對(duì)SW480細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期影響的變化 FCM分析結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，GW9662組無明顯變化，N組SW480細(xì)胞凋亡率明顯增加，G0/G1期細(xì)胞比例增加，S期和G2/M期細(xì)胞比例減少，細(xì)胞阻滯在G0/G1期；GW9662+N作用于SW480細(xì)胞24 h后細(xì)胞凋亡率較N組明顯降低，見表2、圖3，并且改變了細(xì)胞周期的分布：SW480細(xì)胞在G0/G1期受阻滯的比例降低，S期和G2/M期比例升高，見表2。GW9662+N組與N組或?qū)φ战M比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

G:GW9662。

圖1 GW9662對(duì)SW480細(xì)胞增殖的影響

2.3 GW9662及N對(duì)SW480細(xì)胞PPARγ和p21Waf1、p27Kip1、Bcl-2、Bax、VEGF表達(dá)的影響 Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示，N組較對(duì)照組細(xì)胞的PPARγ表達(dá)增強(qiáng)，同時(shí) p21Waf1、 p27Kip1、Bax表達(dá)亦增強(qiáng)，而Bcl-2、VEGF的表達(dá)下調(diào)；GW9662+N組與N組比較，細(xì)胞的PPARγ表達(dá)減低，同時(shí) p21Waf1、 p27Kip1、Bax表達(dá)亦減低，而Bcl-2、VEGF的表達(dá)增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)，見表3。

G:GW9662;N:N；a:P<0.01，與N組比較。

圖2 GW9662、N對(duì)SW480細(xì)胞增殖的影響

a:P<0.01,與對(duì)照組比較;b:P<0.01,與N組比較。

圖3 GW9662、N對(duì)細(xì)胞凋亡率的影響

表2 GW9662、N對(duì)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響

G：GW9662；a：P<0.01，與對(duì)照組比較；b：P<0.01，與N組比較。

表3 GW9662、N對(duì)PPARγ、p21Waf1、p27Kip1、Bcl-2、Bax、VEGF表達(dá)的影響

續(xù)表3 GW9662、N對(duì)PPARγ、p21Waf1、p27Kip1、Bcl-2、Bax、VEGF表達(dá)的影響

G:GW9662;a：P<0.01，與對(duì)照組比較；b：P<0.01，c：P<0.05，與N組比較。

3 討論

本研究MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況，結(jié)果顯示，當(dāng)GW9662濃度超過0.5 mol/L時(shí)，對(duì)N的對(duì)抗的作用不再增強(qiáng)，反而使細(xì)胞增殖抑制率明顯增加，可能與PPARγ受體已飽和及GW9662本身對(duì)細(xì)胞的毒性作用有關(guān)。NSAIDs可改變結(jié)腸癌細(xì)胞周期分布，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡[8]。本研究進(jìn)一步行FCM檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，N作用后可增加細(xì)胞的凋亡率，并使G0/G1期細(xì)胞比例升高，S期和G2/M期細(xì)胞比例降低。而加入GW9662干預(yù)后，N的促細(xì)胞凋亡減弱，且G0/G1期細(xì)胞比例有所降低，S期和G2/M期細(xì)胞比例有所升高。說明N促使結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡、改變細(xì)胞周期的作用能被PPARγ抑制劑GW9662對(duì)抗，提示PPARγ通路在NSAIDs影響細(xì)胞周期中很可能具有重要作用。國外Schwab等[9]研究亦表明美沙拉嗪可通過PPARγ通路抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖并使結(jié)腸癌細(xì)胞阻滯于G0/G1期 。

p21Waf1、p27Kip1屬于細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子(cyclin-dependent kinase inhibitors，CKIs)的CIP/KIP家族，是細(xì)胞周期調(diào)控的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。p21Waf1、p27Kip1在細(xì)胞周期調(diào)控細(xì)胞G1期向S期轉(zhuǎn)變。本研究結(jié)果證實(shí)N可明顯上調(diào)結(jié)腸癌細(xì)胞株p21Waf1、p27Kip1的表達(dá)，而且這種作用在GW9662+N組明顯減弱，從而證明N通過激活PPARγ通路，進(jìn)而引起p21Waf1、p27Kip1在細(xì)胞內(nèi)的活化，改變結(jié)腸癌細(xì)胞的細(xì)胞周期，促進(jìn)其凋亡。Bax通過與自身組成同源二聚體或與Bcl-2、Bcl-XL組成異源二聚體抑制Bcl-2或Bcl-XL的活性而發(fā)揮促細(xì)胞凋亡的作用。大量資料表明，在多種腫瘤組織中都存在Bcl-2和/或Bax蛋白表達(dá)失常，而一些抗癌藥物往往能夠調(diào)節(jié)Bcl-2及Bax蛋白的表達(dá)[10-11]。PPARγ被激活后可以通過下調(diào)Bcl-2家族蛋白發(fā)揮促凋亡作用。本研究對(duì)Bcl-2、Bax表達(dá)進(jìn)行了Western blot檢測(cè)，結(jié)果表明N對(duì)Bcl-2表達(dá)下調(diào)及Bax的上調(diào)作用可被GW9662所對(duì)抗。因此作者推斷PPARγ通路為N誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡的途徑之一。

VEGF是一種功能強(qiáng)大且能產(chǎn)生多種生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子，腫瘤VEGF的表達(dá)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)[12]。本研究通過Western blot檢測(cè)VEGF表達(dá)，觀察PPARγ通路是否參與了N下調(diào)VEGF表達(dá)，從而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的過程。研究結(jié)果表明PPARγ通路參與N抑制VEGF釋放的過程。

綜上所述，GW9662可部分對(duì)抗N對(duì)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞的作用，由于GW9662是特異性PPARγ抑制劑，所以作者推測(cè)N通過PPARγ途徑發(fā)揮抗腫瘤作用，其具體機(jī)制與以下因素有關(guān)：(1)增加p21Waf1、p27Kip1表達(dá)，阻止細(xì)胞周期進(jìn)程；(2)降低Bcl-2的表達(dá)，增加Bax的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡；(3)抑制VEGF表達(dá)，從而抑制腫瘤血管生成。

[1]Smalley W,Ray WA,Daugherty J,et al.Use of non steroidal anti-inflammatory drugs and incidence of colorectal cancer:a population-based study[J].Arch Intern Med,1999,159(2):161-166.

[2]Fujimura T,Ohta T,Oyama K,et al.Role of cyclooxygenase-2 in the carcinogenesis of gastrointestinal tract cancer:a review and report of personal experience[J].World J Gastroenterol,2006,12(9):1336-1345.

[3]陳光俠，費(fèi)素娟．兩種NSAIDs抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的機(jī)制[J]．南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，2005，25(12)：923-927．

[4]Vaish V,Tanwar L,Sanyal SN.The role of NF-κB and PPARγ in experimentally induced colorectal cancer and chemoprevention by cyclooxygenase-2 inhibitors[J].Tumour Biol,2010,31(5):427-436.

[5]Yu J,Leung WK,Chen J,et al.Expression of peroxisome proliferator-activated receptor delta in human gastric cancer and its response to specific COX-2 inhibitor[J].Cancer Lett,2005,223(1):11-17.

[6]Matsuyama M,Yoshimura R.The target of arachidonic acid pathway is a new anticancer strategy for human prostate cancer[J].Biologics,2008,2(4):725-732.

[7]Koelink PJ,Mieremet-Ooms MA,Cerver WE.5-aminosalicylic acid interferes in the cell cycle of colorectal cancercells and induces cell death modes[J].Inflamm Bowel Dis,2010,16(3):379-389.

[8]Vaish V,Rana C,Piplani H,et al.Sulindac and celecoxib regulate cell cycle progression by p53/p21 up regulation to induce apoptosis during initial stages of experimental colorectal cancer[J].Cell Biochem Biophys,2014,68(2):301-319.

[9]Schwab M,Reynders V,Loitsch S,et al.PPARgamma is involved in mesalazine-mediated induction of apoptosis and inhibition of cell growth in colon cancer cells[J].Carcinogenesis,2008,29(7):1407-1414.

[10]Zhang L,Liu WZ,Lu H,et al.Synergistic inhibitory effect of nimesulide in combination with 5-fluorouracil on gastric cancer cells and its possible mechanisms[J].Chin J Dig,2005,25(9):530-533.

[11] Cheng AC,Huan TC,Lai CS,et al.Induction of apoptosis by luteolin through cleavage of Bcl-2 family in human leukemia HL-60 cells [J].Eur J Pharmacol,2005,509(1):1-10.

[12]Eldesoky A,Shouma A,Mosaad Y,et al.Clinical relevance of serum vascular endothelial growth factor and interleukin-6 in patients withcolorectal cancer[J].Saudi J Gastroenterol,2011,17(3):170-173.

Proliferation inhibition induced by Nimesulide through PPARγ pathway in human colon cancer cell*

ZhangXiangcheng1,ChenGuangxia2△,ZhangHong3,HeXiaohua2,LiuShiyu2,YanYan2

(1.DepartmentofICU,theFirstAffiliatedHuaianHospitalofNanjingMedicalUniversity,Huaian,Jiangsu223300,China;2.DepartmentofGastroenterology,XuzhouFirstPeople′sHospital,Xuzhou,Jiangsu221002,China;3.DepartmentofEndocrinology,theFirstAffiliatedHuaianHospitalofNanjingMedicalUniversity,Huaian,Jiangsu223300,China)

Objective To study PPARγ inhibitor(GW9662),on colon cancer SW480 cell proliferation and apoptosis intervened by Nimesulide(N) in vitro,in order to investigate the role of PPARγ pathway in colon cancer cell proliferation inhibition and apoptosis promotion induced by Nimesulide.Methods Cells were divided into 4 groups,namely:the control group,GW9662 group(GW9662 0.1,0.5,1.0，5.0 μmol/L),N group,GW9662+N group.MTT assay and FCM were used to determine proliferation,apoptosis and cell cycle of SW480 cells.And the expression of PPARγ,p21Waf1,p27Kip1,Bcl-2,Bax,VEGF proteins were measured by Western-blot.Results N inhibited SW480 cells proliferation in a time-dependent manner (P<0.01).During a special range,GW9662 attenuated effect of nimesulide inhibiting SW480 cells proliferation in a dose-and time-dependent manner.The results of FCM showed:the apoptosis rates of SW480 cells had no statistical change between GW9662 group and control group(P>0.05).Cell apoptosis rate of group N increased significantly,compared with control group(P<0.01).The apoptosis rates of SW480 cells incubated with Nimesulide and GW9662 dropped significantly compared with Nimesulide alone(P<0.01).Above results showed that GW9662 could attenuate the effect of nimesulide on cell apoptosis and cell cycle.The results of Western-blot:Compared with the control group,the expression of PPARγ,p21Waf1,p27Kip1,Bax protein were up-regulated significantly in nimesulide group(P<0.05 orP<0.01),but Bcl-2 and VEGF were down-regulated significantly(P<0.01).Compared with the nimesulide group,the expression of PPARγ,p21Waf1,p27Kip1and Bax protein were down-regulated obviously in GW9662+N group(P<0.05 orP<0.01).Correspondingly,Bcl-2 and VEGF were up-regulated obviously(P<0.05).Conclusion N could effectively inhibit SW480 cell proliferation and induce its apoptosis.PPARγ pathway may play an important role in proliferation inhibition and apoptosis induced by Nimesulide in colon cancer cell.

peroxisome proliferator-activated receptors;cell proliferation;cell apoptosis;colon cancer cells;SW480 cell;nimesulide

10.3969/j.issn.1671-8348.2015.04.005

徐州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(社會(huì)發(fā)展-XF11C074)。 作者簡介：章向成(1979-),主治醫(yī)師/講師，碩士，主要從事消化系統(tǒng)腫瘤的研究?！?/p>

,E-mail：gx_chen2010@163.com。

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1671-8348(2015)04-0446-04

2014-08-02

2014-09-18)