GC—MS測定白酒中3種鄰苯二甲酸酯

萬素琴　周瑋　顏春榮　徐春祥

摘要：建立了白酒中3種鄰苯二甲酸酯類的GC-MS分析方法，通過比較不同的前處理方法，確定白酒的提取方法，同時確定質(zhì)譜條件。試驗表明：方法檢出限0.05 mg/kg，相關(guān)系數(shù)大于0.998，線性范圍為0.05～5mg/kg，高中低濃度添加回收率為84-115%。該方法前處理過程簡單、凈化效果好，可用于白酒樣品中3種鄰苯二甲酸酯類增塑劑的測定。

關(guān)鍵詞：白酒 鄰苯二甲酸酯 氣質(zhì)聯(lián)用儀

中圖分類號：TS262.3 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-5336（2015）02-0014-02

鄰苯二甲酸酯（Phthalic Acid Esters，PAEs），是鄰苯二甲酸形成的酯的統(tǒng)稱，俗名叫“增塑劑”。它是一種環(huán)境荷爾蒙，廣泛分布于各種食物內(nèi)，其毒性超過三聚氰胺20倍。塑化劑DEHP的作用類似于人工荷爾蒙，其生物毒性主要屬雌激素與抗雄激素活性，對人體的健康危害極大。目前其測定方法主要有薄層掃描法、傅里葉變換紅外光譜法、氣相色譜法、液相色譜法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法和GC-MS法，GC-MS方法能進(jìn)行選擇性離子進(jìn)行定性定量，抗干擾能力較強[1-3]。因此，本文擬采用GC-MS法對白酒中鄰苯二甲酸酯類化合物進(jìn)行測定，以提高測定精度。

塑化劑包括鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP）和鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）以及鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）等17種，本實驗主要以DIBP，DBP，DEHP為分析目標(biāo)物，建立白酒中PEAs的GC-MS測定方法。

1 實驗部分

（1）儀器與試劑。Agilent7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS），超聲波發(fā)生器，正己烷（色譜純），乙腈（色譜純），丙酮（色譜純），無水硫酸鈉（分析純，200℃烘3h后備用），無水乙醇（色譜純），氯化鈉（色譜純），3種鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)品（純度均在95%以上）。

（2）試驗所用玻璃器皿。所有試驗用玻璃器皿均用丙酮浸泡12h后200℃烘烤2h。

（3）原料。白酒。

（4）標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備。準(zhǔn)確稱取DIBP、DBP、DEHP標(biāo)準(zhǔn)品各0.05g，分別用正己烷稀釋定容至50mL，配制成1000mg/L的單標(biāo)儲備液于棕色容量瓶中。分別移取上述3種單標(biāo)儲備液各1mL，用正己烷定容至10mL，配制成100mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液，置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

（5）標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。取100mg/L儲備溶液，60%乙醇溶液稀釋成0.5、1、2、5、10mg/L工作液，以DIBP、DBP、DEHP含量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（6）樣品處理。準(zhǔn)確移取5ml白酒樣品至25mL具塞試管中，85℃水浴30min（期間振蕩混勻數(shù)次），從而蒸發(fā)乙醇。加入5ml正己烷，渦旋振蕩1min，加入1g氯化鈉30min后靜置分層，取上層進(jìn)樣分析，過濾膜供氣相色譜-質(zhì)譜檢測[3-4]。

2 色譜條件

色譜柱：HP-5MS 30m×0.25mm×0.25μm，載氣為高純氦氣（純度為99.99%），恒流模式，柱流速1mL/min，進(jìn)樣口溫度250℃，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1μL。升溫程序：柱溫60℃保持1min，以20℃/min升溫至220℃，保持1min，再以5℃/min升溫至280℃，保持4min。

MS條件：EI離子源，電子能源70eV，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃，連接線溫度為280℃。電子倍增器電壓2300V，GC-MS接口溫度280℃，分析結(jié)果運用NIST標(biāo)準(zhǔn)譜庫進(jìn)行檢索，列出匹配度大于90%的結(jié)果，并結(jié)合圖譜進(jìn)行定性分析，利用外標(biāo)法計算已定性物質(zhì)的含量。

3 結(jié)果與分析

3.1 提取溶劑及體積的選擇

以不含塑化劑的空白酒樣為基質(zhì)，在5ml酒樣品加入1ml濃度為 3mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別以正己烷、甲醇、三氯甲烷為提取溶劑，按照（6）同法處理。結(jié)果見表1。提取結(jié)果表明甲醇、三氯甲烷超聲提取的效果不及正己烷。因此，實驗選擇以正己烷作為提取溶劑（見表1）。

在5ml酒樣品加入1ml濃度為 3mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別以正己烷、甲醇、三氯甲烷為提取溶劑，按照（6）同法處理。結(jié)果表明選擇2ml正己烷的提取效率較好（見表2）。

3.2 提取時間的選擇

分別采用正己烷平行測定3組，震搖后超聲振蕩每組分為10min，20min，30min，60min。實驗表明30min時可得到最佳回收率。

3.3 除水試劑的選擇

分別采用氯化鈉、無水硫酸鈉、一水合碳酸鈉、氫氧化鈉。其中氯化鈉的吸水性較好（142g吸180g的水），選擇其作為除水試劑。根據(jù)上述中提取試劑選用2ml正己烷，且酒樣品中一般含水量為60%，可選用1g左右的氯化鈉。

3.4 特征離子的選擇

對樣品進(jìn)行SCAN掃描，確定3種鄰苯二甲酸酯類的定量碎片離子（表3）。進(jìn)行SIM模式，只對分析物某些特征離子進(jìn)行選擇性檢測，因而分析物的色譜峰強度增大，同時消除了樣品基體中其他共存組分產(chǎn)生的影響，提高了分析方法的選擇性和靈敏度[5-7]。

將3種目標(biāo)物的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液通過SIM模式得到TIC離子流圖（圖1）。

3.5 方法的線性關(guān)系與檢出限

將三種標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述實驗方法和儀器色譜質(zhì)譜條件進(jìn)行測定，以鄰苯二甲酸酯的濃度X（mg/L）為縱坐標(biāo)，峰面積Y為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。各鄰苯二甲酸酯的質(zhì)量濃度在范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為：Y=217974X+56，相關(guān)系數(shù)r為0.998。以信噪比S/N=3，計算出檢出限，當(dāng)取樣量為1.0g時，檢出限為0.05mg/L。

3.6 方法的回收率與精密度

取濃度為2.0mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，進(jìn)樣1μL進(jìn)行儀器分析，重復(fù)測定6次，峰面積RSD為2.19%。取酒樣加入（0.05mL，0.1mL，1mL，2mL） 1mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述方法進(jìn)行樣品前處理和測定，計算該方法回收率為84%～115%。

3.7 樣品的測定

測定了某白酒的含量，其中DIBP和DBP含量分別為0.13和0.23mg/kg。實際樣品TIC圖見圖2。

3.8 空白試驗

為了降低白酒中PAEs本底的干擾，經(jīng)試驗證明試驗過程中的試劑，器皿及其塑料用繩，對實驗有干擾（圖3），故實驗過程中應(yīng)注意如下幾點：

（1）試劑：選用純度較高的色譜純試劑，以降低試劑空白；無硫酸鈉裝于塑料瓶中是造成空白值高的主要原因之一，未被200℃烘烤的玻璃器皿采用1ml正己烷超聲提取后DEHP的含量為0.07mg/kg，且基線較不穩(wěn)。該試驗所用無水硫酸鈉均于200℃烘烤3h后在干燥器中保存。

（2）試驗用水：新制純水，減少實驗室空氣及盛水容器對試驗空白值的影響。

（3）器皿：稱取塑料用繩（1g），1ml正己烷超聲提取后DEHP的含量為0.15mg/kg.所有玻璃器皿經(jīng)12h浸泡、洗凈、200℃烘干的，瓶子上的繩子應(yīng)采用棉繩，防止塑料繩帶入的影響。

（4）人員操作時帶入的影響，如手套等。稱取手套（1g），1ml正己烷超聲提取后DEHP的含量為0.04mg/kg。

（5）儀器應(yīng)保持最佳狀態(tài)，樣品測定前應(yīng)考察儀器系統(tǒng)中殘留的PEAS本底值，本底值偏高時應(yīng)可采取措施：高溫烘烤離子源，多次進(jìn)空白樣品。

參考文獻(xiàn)

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