李忠鴻
【摘要】目的 探討不同抗菌藥物體外對沙眼衣原體的單獨和聯(lián)合抗菌的作用;方法 使用培養(yǎng)液稀釋法來測定體外抗菌藥物體對沙眼衣原體的單獨以及聯(lián)合抗菌作用,并著重分析抗菌藥物聯(lián)合之后相互作用狀況;結(jié)果 對體外沙眼衣原體而言,大觀霉素以及頭孢曲松同抗菌藥物聯(lián)合之后在體外對于沙眼衣原體為無關(guān)作用。大觀霉素以及紅霉素、多西環(huán)素進行聯(lián)合的時候,分別有25%以及50%菌株表現(xiàn)為協(xié)同作用,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),頭孢曲松以及多西環(huán)素聯(lián)合的情況下8%的菌株體現(xiàn)出拮抗作用,氧氟沙星以及頭孢曲松聯(lián)合的情況下17%的菌株體現(xiàn)出協(xié)同作用;結(jié)論 體外聯(lián)合使用莫西沙星以及阿奇霉素,抗菌活性顯著提高,在生殖道感染患者治療過程當中有重要應(yīng)用價值。
【關(guān)鍵詞】抗菌藥物;沙眼衣原體;體外;抗菌;作用
【中圖分類號】R-1 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2015)05-0158-02
生殖道的沙眼農(nóng)原體感染可以說是世界范圍內(nèi)最為常見的性傳播疾病之一,有著發(fā)病率高以及流行廣泛的特點,給人體健康帶來嚴重危害,已經(jīng)發(fā)展成為重要的公共衛(wèi)生問題之一。因為泌尿生殖道的沙眼農(nóng)原體感染在臨床癥狀方面往往無特異性并且呈現(xiàn)出隱匿性,容易遭到醫(yī)護人員的忽視,使得病情遷延甚至反復感染,抗菌藥物敏感性嚴重下降,治療失敗的患者數(shù)量不斷上升[1]。本研究選取12例體外沙眼衣原體菌株,分析不同抗菌藥物單獨以及聯(lián)合使用的抗菌效果。
1資料與方法
1.1一般資料
菌株來源方面,選取12例我院收治的泌尿生殖道疾病患者標本。采集患者標本并接種于McCoy細胞,培養(yǎng)篩查得到陽性標本,增殖傳代3次到一定的濃度之后,使用氨酸磷酸鹽液保存,低溫(-70℃)條件下凍存待檢。
抗菌藥物方面,選用大觀霉素、頭孢曲松、氧氟沙星、多西環(huán)素以及紅霉素,均購買于藥品生物制品所??咕幬锔鶕?jù)試劑說明溶解之后,使用維持培養(yǎng)基(培養(yǎng)基+2‰的放線菌酮+0.25%的葡萄糖)稀釋分裝抗菌藥物,-20℃條件下凍存[2]。
1.2方法
1.2.1最低抑菌濃度的測定方法。首先使用96孔板制備單層細胞,然后接種沙眼衣原體每ml4×104)到單層細胞,轉(zhuǎn)速設(shè)定為2500r/min,溫度設(shè)定為3O℃,離心50min,去除生長培養(yǎng)基,添加含有濃度(經(jīng)5次倍比稀釋)的抗菌藥物培養(yǎng)基,在37℃以及5%的CO2環(huán)境中培養(yǎng)48h。去除維持培養(yǎng)基使用丙酮固定,并使用FITC標記之后的抗沙眼衣原體抗體染色1h,熒光顯微鏡視野觀察沙眼衣原體的生長狀況。可以抑制包涵體生長的藥物濃度是該藥的最低抑菌濃度(MIC)。每個實驗都需要重復進行3次,同時設(shè)定陽性對照以及陰性對照,其中陽性對照不加藥但是接種沙眼衣原體,陰性對照加入藥物但是并不接種沙眼衣原體)[3]。
1.2.2聯(lián)合藥敏試驗方法?;具^程類似于MIC測定試驗。使用棋盤格模型稀釋需要測量的藥物,設(shè)定抗菌藥物的濃度范圍為3-1/12倍的MIC。使用無菌96孔板進行藥物稀釋。分別在縱向以及橫向上對A藥以及B藥做好倍比稀釋,確保獲得含有系列濃度的藥物A以及B的培養(yǎng)基。使用稀釋板當中含有的藥物A以及藥物B的培養(yǎng)基,離心之后替換接種板上各個孔內(nèi)的內(nèi)生長培養(yǎng)基。試驗結(jié)果中FIC(部分抑菌濃度)的指數(shù)越高,表明拮抗作用越強,同時FIC指數(shù)越低,表明協(xié)同作用越強。
1.3統(tǒng)計學方法
將所檢測的數(shù)據(jù)用統(tǒng)計學專業(yè)軟件數(shù)據(jù)包SPSS18.0進行分析,數(shù)據(jù)用(x±s)表示,以P<0.05具有差異統(tǒng)計學意義。
2結(jié)果
大觀霉素以及頭孢曲松同抗菌藥物聯(lián)合之后在體外對于沙眼衣原體為無關(guān)作用。大觀霉素以及紅霉素、多西環(huán)素進行聯(lián)合的時候,分別有25%以及50%菌株表現(xiàn)為協(xié)同作用,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),頭孢曲松以及多西環(huán)素聯(lián)合的情況下8%的菌株體現(xiàn)出拮抗作用,氧氟沙星以及頭孢曲松聯(lián)合的情況下17%的菌株體現(xiàn)出協(xié)同作用,具體結(jié)果見表1。
3結(jié)論
沙眼衣原體作為臨床上的常見病原體,迄今為止并沒有有效疫苗,所以抗生素是治療衣原體引發(fā)泌尿生殖道感染的常規(guī)途徑,尤其是喹喏酮類的抗生素有著比較明顯的抗沙眼衣原體活性,因此在近年來被推薦作為沙眼衣原體宮頸炎以及尿道炎感染治療的藥物,同時用來治療沙眼衣原體感染誘發(fā)的慢性盆腔炎,臨床上有著比較理想的使用價值。其中氧氟沙星在臨床上的應(yīng)用不夠廣泛,其抑菌以及殺菌的濃度最低,并且抗沙眼衣原體的活性也最強,并且氧氟沙星的半衰期比較長,能夠每天單次給藥,因此在治療泌尿生殖道的沙眼衣原體感染過程當中,使用前景理想。不過需要注意的是,體外藥物敏感性實驗的抗沙眼衣原體活性強,并不等同與治療沙眼衣原體泌尿生殖道炎癥的臨床效果一定滿意,仍需要進行體內(nèi)藥物的敏感性實驗。
綜上所述,體外聯(lián)合使用莫西沙星以及阿奇霉素,抗菌活性顯著提高,在生殖道感染患者治療過程當中有重要應(yīng)用價值。
參考文獻:
[1]韓建德,陳木開,李斌,等.沙眼衣原體致小鼠輸卵管炎的病理研究[J].中山大學學報:醫(yī)學科學版,2014,26(5):520-522.
[2]韓建德,張云青,涂裕英,等.泌尿生殖道沙眼衣原體體外藥物敏感性測定[J].中國抗生素雜志,2013,27(7):441-442.
[3]楊曉靜,楊昕娜,江勇,等.天津地區(qū)泌尿生殖道沙眼衣原體臨床株藥敏分析[J].中華皮膚科雜志,2014.42(1):56-57.