117株結(jié)核分枝桿菌臨床分離株對注射用抗結(jié)核藥物耐藥水平的研究

宋艷華 馬麗萍 陸宇 付育紅 高孟秋

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·論著·

117株結(jié)核分枝桿菌臨床分離株對注射用抗結(jié)核藥物耐藥水平的研究

宋艷華 馬麗萍 陸宇 付育紅 高孟秋

目的 對臨床Mtb菌株進(jìn)行鏈霉素(Sm)、卡那霉素(Km)、阿米卡星(Am)、卷曲霉素(Cm)的藥物敏感性試驗(yàn)(簡稱“藥敏試驗(yàn)”)，了解其耐藥程度和交叉耐藥水平。方法 采用微孔板Alamar blue試驗(yàn)(microplate Alamar Blue assay，MABA)，檢測117株Mtb臨床分離菌株的Sm、Km、Am和Cm的體外最低抑菌濃度(MIC)值。Sm、Km、Am、Cm的臨界濃度分別為2、4、1、2.5 μg/ml。將Sm、Km、Am 的MIC值大于臨界濃度≤16 μg/ml、32～64 μg/ml、>64 μg/ml分別為低度耐藥、中度耐藥、高度耐藥；Cm的MIC值大于臨界濃度≤20 μg/ml、40～80 μg/ml、>80 μg/ml分別為低度耐藥、中度耐藥、高度耐藥。結(jié)果 117株臨床分離株中，83株耐Sm，其中63株(75.9%)為高度耐藥，18株(21.7%)為低度耐藥，2株(2.4%)中度耐藥；23株耐Km和19株耐Am的耐藥株中分別有78.3%(18/23)和94.7%(18/19)高度耐藥，其余分別為兩藥的低度耐藥菌株，未發(fā)現(xiàn)中度耐Km或Am的菌株；14株Cm耐藥株的MIC值都在5～20 μg/ml，未發(fā)現(xiàn)高度耐藥株。83株Sm耐藥的菌株中有27.7%(23/83)和22.9%(19/83)分別對Km和Am耐藥，71.1%(59/83)對Am和Km均敏感。Km耐藥株和Am耐藥株中分別有78.3%(18/23)和94.7%(18/19)同時(shí)耐Km和Am(χ2=1.157，P>0.05)，且對Km和Am均高度耐藥；5株對Km低度耐藥，但對Am敏感。Am耐藥株和Cm耐藥株中，分別有68.4%(13/19)和92.9%(13/14)同時(shí)耐Am和Cm。結(jié)論 耐Sm或Km或Am的Mtb臨床分離株絕大多數(shù)為高度耐藥，耐Cm的Mtb臨床分離株以低度耐藥為主；絕大多數(shù)的Sm高度耐藥株仍對Am、Km敏感；高度耐Am或Km的菌株互為為完全交叉耐藥，Km低度耐藥的菌株對Am敏感；Am高度耐藥株多數(shù)對Cm為低度耐藥，絕大多數(shù)Cm耐藥株對Am高度耐藥。

結(jié)核分枝桿菌； 抗結(jié)核藥； 抗藥性, 細(xì)菌

結(jié)核病是由Mtb感染引起的一種嚴(yán)重危害人類健康的慢性傳染性疾病，是伴隨人類歷史最長的疾病之一。注射用抗結(jié)核藥物Sm、Km、Am、Cm是一類重要的抗結(jié)核注射劑，作用機(jī)制相似，這組藥物之間存在交叉耐藥性[1-3]。了解目前流行臨床菌株對這類藥物的耐藥和交叉耐藥情況，對于選擇合理的抗結(jié)核藥物組成化療方案至關(guān)重要。微孔板Alamar blue試驗(yàn)(microplate Alamar Blue assay，MABA)是一種顏色指示劑法，是近些年應(yīng)用與檢測藥物最低抑菌濃度(MIC)值的一種重要方法，本實(shí)驗(yàn)通過用MABA 法測定結(jié)核分枝桿菌對Sm、Km、Am、Cm的藥物敏感性，并分析Sm、Km、Am、Cm的交叉耐藥水平，以期望為臨床抗結(jié)核藥物的選擇提供科學(xué)的依據(jù)。

材料和方法

一、試驗(yàn)菌株

117株臨床Mtb菌株來自北京胸科醫(yī)院參比室菌株庫2008年11月至2010年11月肺結(jié)核患者的菌株，菌株均經(jīng)羅氏培養(yǎng)陽性且硝基苯甲酸(PNB)、噻吩-2-羧酸肼(TCH)菌種鑒定為Mtb；其中至少耐1種抗結(jié)核注射劑者89株，對上述4種藥物(Sm、Km、Am、Cm)均敏感者28株。來源患者中初治患者67例，復(fù)治50例；女34例，男83例，年齡(45.64±16.71) 歲。117例患者中35例曾經(jīng)用過注射劑，其中初治1例，復(fù)治34例；應(yīng)用Sm 6例，Sm+Km 1例，Sm+Am+Cm 6例，Km 1例，Am 10例，Am+CPm 6例，Cm 5例，注射劑的用藥時(shí)間在10 d 至24個(gè)月。H37Rv 標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC27294)由北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所藥物研究室提供。

二、試驗(yàn)藥物

Sm(美國Sigma公司，批號(hào)：638K0813)，Km(Sigma公司，批號(hào)：109K0147)，Am(Sigma公司，批號(hào)：048K1289)，Cm(Sigma公司，批號(hào)：018K10680)。

三、主要儀器及設(shè)備

恒溫培養(yǎng)箱(BINDER BD720，美國)；生物安全柜(ESCO LA2-6A1，新加坡)；壓力蒸汽滅菌器(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠，HHS型)；電子天平(北京塞多利斯儀器系統(tǒng)有限公司，京利00000249)；超低溫冰箱(SANYO MDF-U4186F，日本)；低溫冰箱(青島海爾股份有限公司 BCD-2007ADZ)；渦旋震蕩器(Scientific industries G560E Vortex-2，美國)。

四、試驗(yàn)方法

1.Mtb的培養(yǎng)及菌懸液的制備：將Mtb菌株從-80 ℃的冰箱中取出，融化后放置于7H11培養(yǎng)基上在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，取3～4周處于對數(shù)生長期的亞培養(yǎng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將菌落刮取并研磨均勻，配置成麥?zhǔn)蠞舛葹?的菌懸液[1×107菌落形成單位(CFU)/ml]。

2.MIC值的測定：將96孔微孔板除四周邊和第2列微孔外，其余各孔均加入100 μl 7H9液體培養(yǎng)基(不含吐溫)，向第2列微孔加入193.6 μl (Cm 孔為192.0 μl)7H9液體培養(yǎng)基，藥物的儲(chǔ)存液解凍后向第2列各孔加入6.4 μl濃度為2 mg/ml 的Sm、Km、Am，或8 μl濃度為2 mg/ml Cm，用移液器混合均勻并吸取100 μl加入第3列，依次稀釋到第10列，棄去自第10孔吸出的100 μl，分別得到Sm、Km、Am終濃度為：32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0 μg/ml；Cm 為: 40、 20、10、 5、 2.5、 1.25、0.625、0.3125、0.156、0 μg/ml的藥物濃度。第11列為空白對照。200 μl滅菌水加入96孔板的四周邊的各孔中。對于羅氏培養(yǎng)基比例法(L-J法)顯示耐藥的菌株或者L-J法敏感但MABA法檢測Sm、Km、Am的MIC>32 μg/ml(或Cm的MIC>40 μg/ml)的菌株，設(shè)定Sm、Km、Am的終濃度為 128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0 μg/ml；Cm 的終濃度為 160、80、40、20、10、 5、 2.5、 1.25、0.625、0 μg/ml。每批試驗(yàn)以Mtb參考株(H37Rv敏感株)作為實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制。將Mtb菌懸液(1×107CFU/ml)用7H9培養(yǎng)基(不含吐溫)進(jìn)行20倍稀釋，取100 μl/孔接種于含100 μl抗菌藥的96孔微孔培養(yǎng)板中(菌液的終濃度約為2.5×105CFU/ml)，方法參照文獻(xiàn)[4-5]。置于37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。7 d 后生長對照孔和含藥孔加入20 μl Alamar blue和20% 吐溫-80 12.5 μl的混合液，37 ℃孵育24 h，記錄各孔的顏色，藍(lán)色孔為無生長，粉紅色孔為有生長，紫紅色孔再繼續(xù)37 ℃培養(yǎng)24 h，不變?yōu)榉奂t色，其相連的藍(lán)色孔仍為藍(lán)色，則記錄為有生長。MIC定義為阻止顏色變化(從藍(lán)色變?yōu)榉奂t色)的最低藥物濃度。每批試驗(yàn)以H37Rv敏感株作為實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制。

[6-7]設(shè)定Sm、Km、Am、Cm的臨界濃度分別為2、4、1、2.5 μg/ml。將Sm、Km、Am 的MIC值大于臨界濃度≤16 μg/ml、32～64 μg/ml、>64 μg/ml分別為低度耐藥、中度耐藥、高度耐藥；Cm的MIC值大于臨界濃度≤20 μg/ml、40～80 μg/ml、>80 μg/ml分別為低度耐藥、中度耐藥、高度耐藥。

五、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對所記錄的研究菌株的MIC值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，本研究采用SPSS 17.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，使用χ2檢驗(yàn)分析耐藥構(gòu)成比，P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、Mtb臨床分離株對Sm、Km、Am、Cm的MIC值分布

117株臨床株中，Sm、Km、Am、Cm的MIC值分布見表1。耐Sm、Km、Am、Cm的菌株分別為83株(70.9%)、23株(19.7%)、19株(16.2%)、14株(12.0%)。

83株對Sm耐藥的菌株中，63株(75.9%)為高度耐藥，18株(21.7%)為低度耐藥，2株(2.4%)為中度耐藥；63株對Sm 高度耐藥的菌株中，44株(69.8%)對其他3種藥物均敏感，19株(30.2%)合并耐其他3種藥物中的至少1種藥物，兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.841，P<0.001)。

表1 117株臨床分離株對Sm、Km、Am、Cm 的MIC值分布(株)

注 MIC 值0.5、1.0、2、4、16 μg/ml對應(yīng)Cm的MIC值是0.625、1.25、2.5、5、20 μg/ml

二、Mtb臨床分離株對Sm與Am、Km、Cm交叉耐藥結(jié)果

83株耐Sm的菌株中，23株(27.7%)耐Km，19株(22.9%)耐Am，18株(21.7%)同時(shí)耐Km和Am(見表2)，三者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.922，P>0.05)；Sm耐藥株中，59株(71.1%)對Am和Km均敏感。

63株Sm的MIC>64 μg/ml的高度耐藥株中，20.6%(13/63)合并Am和Km高度耐藥(MIC>128 μg/ml)；69.8%(44/63)對Km和Am均敏感(兩藥的MIC均≤1 μg/ml)，同時(shí)耐Km和Am的菌株(13株)所占比率低于對Km、Am均敏感的菌株(44株)所占的比率(χ2=30.787，P<0.001)。2株 Sm的MIC值在32～64 μg/m的菌株，均對Km、Am高度耐藥(MIC>128 μg/ml)。18株Sm的MIC在4～16 μg/ml的菌株中，3株(16.7%)對Km、Am均高度耐藥(MIC>128 μg/ml)，15株(83.3%)對Km、Am敏感(1株對Km、Am的MIC值分別為4 μg/ml和0.5 μg/ml；其余14株Km 的MIC值均≤2 μg/ml，Am的 MIC值均≤0.5 μg/ml)。

表2 117株臨床分離株對Sm與Am、Km交叉耐藥的檢測結(jié)果

18株Km和Am 的MIC均>128 μg/ml耐藥的菌株中，15株(83.3%)Sm的 MIC值≥32 μg/ml，2株(11.1%) Sm的 MIC是8 μg/ml，1株(5.6%)MIC是4 μg/ml (表2)；Sm高中度耐藥株所占比率高于其低度耐藥株(χ2=16.000，P<0.001)，沒有發(fā)現(xiàn)對Km和Am均高度耐藥但對Sm敏感(MIC≤2 μg/ml)的菌株。

23株Km耐藥株和19株Am耐藥株中，18株對Km和Am均耐藥，且都是高度耐藥(MIC>128 μg/ml)，分別占Km耐藥株和Am耐藥株的78.3%(18/23)和94.7%(18/19)，兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.157，P>0.05)。而Km低度耐藥株共5株，這5株均對Am敏感(MIC≤1 μg/ml)，Am低度耐藥株1株(MIC為4 μg/ml)，其Km的MIC是4 μg/ml。94株Km敏感的菌株中，有93株對Am敏感，這些菌株中Km的MIC均值[(1.0672±0.60919)μg/ml]高于Am的MIC均值[(0.4005±0.19114)μg/ml]。

19株Am耐藥株和14株Cm耐藥株中，有13株菌同時(shí)對Am和Cm耐藥(表3)，分別占 68.4%(13/19)和92.9%(13/14)(P>0.05，F(xiàn)isher確切概率)；并且這13株菌株均對Am高度耐藥，占Am高度耐藥株的72.2%(13/18)，98株Am敏感株中只有1株耐Cm。

表3 117株臨床菌株對Am與Cm的交叉耐藥表

討 論

一、MABA 法測定Mtb的Sm、Km、Am、Cm臨界濃度的界定

基于Alamar blue測定Mtb對藥物敏感性的MABA法是種較為經(jīng)濟(jì)、快速、準(zhǔn)確的顏色指示劑藥敏法。這種方法與傳統(tǒng)比例法及其他液體培養(yǎng)基藥敏法有很好的一致性[4,6,8-9]。使用96孔板相對于試管可以減少加入藥品及菌液的用量，而且時(shí)間較短，僅用8 d就能得出結(jié)果，比傳統(tǒng)方法縮短近3周時(shí)間。這種方法更能直接、快速地檢測菌株對藥物的應(yīng)答情況，有助于指導(dǎo)臨床早期選擇合理的藥物制定合適的化療方案。藥物敏感性判定的關(guān)鍵在于耐藥的臨界濃度，本研究根據(jù)WHO推薦的液體培養(yǎng)法Bactec 460和MGIT 960法抗Mtb注射劑的臨界濃度[6-7]，Sm、Km、Am、Cm臨界濃度參考值分別為2.0、4.0、1.0、2.5 μg/ml。

二、Mtb臨床分離株對4種抗結(jié)核注射劑的MIC值分布

本研究中，Sm的MIC值分布顯示對Sm耐藥株中75.9%(63/83)菌株為高度耐藥株(MIC≥128 μg/ml)，這一比例明顯高于對Sm的中低度耐藥株(MIC=4～64 μg/ml)所占比例之和，而且發(fā)現(xiàn)Sm的MIC值以中度耐藥(MIC=32～64 μg/ml)的菌株最少，本研究只發(fā)現(xiàn)2例。Sugawara等[10]測定74株來自中國的耐Sm的Mtb菌株，顯示45株(61%)是MIC>100 μg/ml的高度耐藥，與本研究結(jié)果接近。但是巴塞羅納地區(qū)一項(xiàng)研究的菌株則以中低度耐藥為主[11]。Km和Am耐藥菌株的MIC值分布顯示，78.3%和94.7%為高度耐藥，Cm的耐藥株MIC值都在5～20 μg/ml，沒有高度耐藥菌株，耐藥株對Cm的MIC值略低于美國和非洲的報(bào)道[1,12]，這可能與菌株來源不同及不同的藥敏試驗(yàn)方法的差異相關(guān)。但總的來說臨床分離株耐Cm的比例較低，且是以低度耐藥為主。

三、Mtb臨床分離株對4種抗結(jié)核注射劑的交叉耐藥分析

Sm和Am、Km分子結(jié)構(gòu)和抗菌機(jī)制相似，均作用于細(xì)菌的核糖體，阻礙蛋白的合成，這類藥物之間存在交叉耐藥性。我國Mtb對氨基苷類藥物耐藥及交叉耐藥情況缺乏大規(guī)模的調(diào)查，最新全國結(jié)核病耐藥性基線調(diào)查報(bào)告顯示[13]，我國的涂陽肺結(jié)核患者對抗結(jié)核藥物的總耐藥率為39.12%，其中一線抗結(jié)核藥物耐藥率最高的是Sm (28.93%，初治27.69% 復(fù)治37.20%)，而對Km的耐藥率為2.34%。結(jié)合近些年其他小范圍的注射劑耐藥率的調(diào)查，顯示Sm的耐藥率明顯高于其他3種藥物[2,14-15]，對Sm耐藥的菌株仍可有70%以上對其他3種藥物敏感，但是耐Km(Am)或Cm的菌株90%左右對Sm耐藥[2, 15]， Km與Am的耐藥率相近。Am(Km)與Cm的耐藥率不同報(bào)道間有差異，上海報(bào)道Am與Cm的耐藥率相近，分別為22.1%和19.5%[2]；而江蘇報(bào)道為8.2%和3.3%[16]，但是較為一致的是對Cm耐藥的菌株絕大多數(shù)也對Am耐藥。

本研究中采用的菌株多數(shù)為羅氏藥敏試驗(yàn)結(jié)果為至少耐4種抗結(jié)核注射劑中的一種藥的菌株，Sm、Km、Am、Cm的耐藥率分別為70.9%、19.7%、16.2%、12.0%。Sm耐藥率明顯高于其他3種藥物，而Am、Km、Cm的耐藥率比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。即使對Sm高度耐藥的菌株中也有69.8%對Km、Am、Cm均敏感，所以多數(shù)對Sm高度耐藥的菌株仍然可以選用其他3種藥物治療。本研究中對Km、Am、Cm同時(shí)耐藥的菌株均耐Sm，且絕大多數(shù)是高度耐Sm，但小部分菌株對Sm的MIC在4～16 μg/ml，應(yīng)用Sm可能有效。有報(bào)道少數(shù)對Km、Am高度耐藥菌株對Sm敏感[17-18]，但是本研究中沒有發(fā)現(xiàn)這種菌株。注射劑的現(xiàn)狀考慮與抗結(jié)核用藥歷史有關(guān)，早期Sm應(yīng)用后選擇出對Sm耐藥菌株的基礎(chǔ)上，隨著Km、Am的應(yīng)用進(jìn)一步選擇出了聯(lián)合耐藥突變株。目前，尚未發(fā)現(xiàn)關(guān)于Sm耐藥株中產(chǎn)生耐Am或Km突變株頻率是否增加的研究報(bào)道。所以，一般情況下考慮對Km、Am、Cm耐藥的患者不再考慮采用Sm治療，但是在有可靠的藥敏試驗(yàn)結(jié)果、而且需要注射劑組成方案時(shí)也不能完全放棄Sm。

Km、Am和Cm是目前MDR-TB治療中的核心抗結(jié)核藥物，這3種藥物的交叉耐藥情況是我們關(guān)注的重點(diǎn)。本研究顯示，對Am或Km耐藥的菌株中絕大多數(shù)是對兩藥同時(shí)高度耐藥的菌株，即Am和Km高比例交叉耐藥；而且對于高度耐藥的菌株，兩藥是完全交叉耐藥，但仍有一小部分對Km低度耐藥的菌株對Am敏感，這與Maus等[1]和Engstr?m等[19]的體外試驗(yàn)結(jié)果及臨床株藥敏試驗(yàn)結(jié)果相一致。另外，體外試驗(yàn)可以篩選出對Km高度耐藥、對Cm低度耐藥的Mtb突變株[19]；本研究在臨床株中也發(fā)現(xiàn)了類似的交叉耐藥表型，即多數(shù)對Am高度耐藥菌株對Cm呈現(xiàn)中低度耐藥，但是也發(fā)現(xiàn)部分對Am高度耐藥菌株(27.8%)對Cm仍然敏感。體外研究顯示，Cm從敏感株中篩選出的耐藥株對Km呈現(xiàn)低度耐藥，對Am敏感[1,19]。所以，目前專家建議Km、Am和Cm三藥的選用順序是Cm→Km→Am，這樣前藥耐藥出現(xiàn)后后藥仍可能有效。但是從本研究及其他研究的結(jié)果來看[1,19-20]，Mtb臨床分離株中，對Km和Am的耐藥率相當(dāng)，幾乎完全交叉耐藥；所以，在沒有藥敏試驗(yàn)條件下如果對Km和Am中的一種藥物治療無效，則不主張應(yīng)用另一種藥物。另外，本研究表明對Km和(或)Am高度耐藥菌株絕大多數(shù)對Cm呈現(xiàn)低度耐藥或者敏感；國內(nèi)其他研究也顯示對Km和(或)Am的耐藥率高于Cm，對于Km和(或)Am耐藥的菌株卻部分對Cm敏感[20]。所以，筆者考慮對Km和Am耐藥的菌株仍有部分可以選用Cm進(jìn)行抗結(jié)核治療，這尤其在XDR-TB治療中有重要意義。

本研究數(shù)據(jù)顯示，臨床分離株中耐Sm和(或)Km和(或)Am的Mtb菌株均以高度耐藥為主，耐Cm的臨床分離株以低度耐藥為主，對Sm高度耐藥的絕大多數(shù)菌株仍可以選用 Am、Km、Cm治療；對Km和(或)Am的高度耐藥菌株呈現(xiàn)完全交叉耐藥，對Km低度耐藥的菌株對Am敏感。Cm仍是目前對Km和(或)Am耐藥菌株可以選用的抗結(jié)核藥物。

參 考 文 獻(xiàn)

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(本文編輯：薛愛華)

Study on the levels of injectable antituberculosis drug resistance in 117Mycobacteriumtuberculosisclinical strains

SONGYan-hua，MALi-ping，LUYu，F(xiàn)UYu-hong，GAOMeng-qiu.

DepartmentofTuberculosis,BeijingChestHospital,CapitalMedicalUniversity,BeijingTuberculosisandThoracicTumourResearchInstitute,Beijing101149,China

GAOMeng-qiu，Email：gaomqwdm@aliyun.com

Objective To observe the levels of the resistance and cross-resistance to streptomycin (Sm), kanamycin (Km), amikacin (Am), capreomycin (Cm) inMycobacteriumtuberculosis(Mtb) clinical strains by drug susceptibility test (DST). Methods The MICs of Sm, Km, Am, and Cm in 117 Mtb clinical strains were detected by microplate Alamar blue assay (MABA). The critical concentration of Sm, Km, Am, and Cm on Mtb were 2, 4, 1 and 2.5 μg/ml, respectively. When the MICs of Sm/Km/Am on Mtb were greater than critical concentration and ≤16 μg/ml, or 32-64 μg/ml, or >64 μg/ml, the drug resistances were defined as low level, moderate level, and high level, respectively. But that for Cm on Mtb was greater than critical concentration and ≤20 μg/ml, or 40-80 μg/ml, or >80 μg/ml. Results Of 117 Mtb clinical isolates, 83 were Sm-resistant, in which 63 isolates(75.9%)were high resitance, 18 isolates (21.7%) were low resistance, 2 isolates (2.4%) were moderate resis-tance. 78.3% of 23 Km-resistant strains and 94.7% of 19 Am-resistant strains were high-level resistance (MIC≥128 μg/ml), other isolates were low-level resistant to Am/Km, no moderate-level resistant isolates were observed. The MICs of 14 Cm-resistant isolates were 5-20 μg/ml, and there were not high level of Cm-resistant isolates. Of 83 Sm-resistant isolates, 27.7% (23/83) and 22.9% (19/83) were resistant to Km and Am respectively, 71.1% (59/83) were sensitive to both Km and Am. 78.3% (18/23) of Km-resistant isolates and 94.7% (18/19) of Am-resistant isolates were highly resistant to both Km and Am, which had no significant difference (χ2=1.157,P>0.05). Five strains were low resistance to Km, but sensitive to Am. 68.4%(13/19) of Am-resistant isolates and 92.9% (13/14) of Cm-resistant isolates were resistant to both Am and Cm. Conclusion The majority of the Sm/Km/Am-resistant clinical isolates were high resistance, and the majority of the Cm-resistant clinical isolates were low resistance. Most of highly Sm-resistant isolates were susceptible to Km/Am. The highly Am/Km-resis-tant isolates showed cross resistance each other. A small proportion of lowly Km-resistant isolates were sensitive to Am. Most of highly Am-resistant isolates were low resistance to Cm. Almost all of Cm-resistant isolates were high resistant to Am.

Mycobacteriumtuberculosis； Antitubercular agents； Drug resistance, bacterial

10.3969/j.issn.1000-6621.2015.04.009

北京市醫(yī)院管理局臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展專項(xiàng)(ZYLX201304)

101149 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院 北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所結(jié)核科(宋艷華、馬麗萍、高孟秋)，藥物研究室(陸宇)，國家結(jié)核病臨床實(shí)驗(yàn)室(付育紅)

高孟秋，Email：gaomqwdm@aliyun.com

2014-07-14)