張福新
(龍巖人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,福建 龍巖364000)
隨著血液分析儀的推廣和普及,血液分析儀越來越廣泛地應(yīng)用于臨床血常規(guī)分析中。血細(xì)胞分析儀具有快速、方便、重復(fù)性好、工作效率高等優(yōu)點(diǎn)[1,2],在檢驗(yàn)工作中廣泛應(yīng)用。在日常使用Sysmex XT-1800i血細(xì)胞分析儀工作中,發(fā)現(xiàn)有小紅細(xì)胞的標(biāo)本血小板計(jì)數(shù)結(jié)果普遍偏高[3,4]。筆者按紅細(xì)胞平均體積(MCV)大小分類,比較儀器法與手工法血小板計(jì)數(shù)的差異,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1.1 一般資料 抽取我院2015年1月至5月門診及住院的150例患者標(biāo)本,按MCV大小進(jìn)行分組,第 1 組 MCV<60fl,第 2 組 MCV60~69.9fl,第 3組 MCV70~81.9fl,每組 50 例,其中男性 20 例,女性30例。第3組根據(jù)RDW是否正常再進(jìn)行分組,每組25例。
1.2 儀器與試劑 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀Sysmex XT-1800i及原裝進(jìn)口配套試劑、質(zhì)控品;Olympus雙目顯微鏡、改良牛鮑計(jì)數(shù)板、鏡檢法所用試劑為1%草酸銨稀釋液,按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3 版)配置[5]。
1.3 檢測(cè)方法 抽取患者靜脈血2ml,加入含EDTA-K2抗凝劑的真空管中,輕輕搖勻,在2h內(nèi)檢測(cè)完畢。定期對(duì)Sysmex XT-1800i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行保養(yǎng)、校準(zhǔn)及室內(nèi)質(zhì)控,以保證其正常運(yùn)行及檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。儀器檢測(cè)標(biāo)本的同時(shí)用草酸銨法進(jìn)行手工血小板計(jì)數(shù),采用雙人計(jì)數(shù)的方法,血小板手工計(jì)數(shù)中均勻充計(jì)數(shù)池,上下兩池一起計(jì)數(shù),結(jié)果取平均值。所有操作均嚴(yán)格按照Sysmex XT-1800i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀操作規(guī)程及《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)分析,結(jié)果以x±s表示,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 以MCV分組的3組結(jié)果比較結(jié)果 見表1。
表1 儀器法及手工法計(jì)數(shù)血小板結(jié)果的比較(±s)×109/L
表1 儀器法及手工法計(jì)數(shù)血小板結(jié)果的比較(±s)×109/L
方法 <60fl(第 1 組) 60~69.9fl(第 2 組)70~81.9fl(第 3 組)MCV儀器法手工法P 322.2±61 236.2±52 P<0.01 279±52 212±48 P<0.01 241±30 226±28 P>0.05
2.2 將第3組血小板結(jié)果再按RDW大小進(jìn)行分組 RDW小于正常值為一組,大于正常值為另一組,其中RDW小于正常值的儀器檢測(cè)結(jié)果為(233±33)×109/L,手工計(jì)數(shù)結(jié)果為(228±38)×109/L,兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);RDW大于正常值的儀器檢測(cè)結(jié)果為(271±52)×109/L,手工計(jì)數(shù)結(jié)果為(211±59)×109/L,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
血小板計(jì)數(shù)在臨床上意義重大,其結(jié)果的準(zhǔn)確性對(duì)臨床尤為重要,影響血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的原因有很多,方法學(xué)上的不足造成的影響往往容易被忽視[6-8]。Sysmex XT-1800i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的血小板計(jì)數(shù)與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)在同一個(gè)通道內(nèi)電阻抗法完成。采用浮動(dòng)界標(biāo)技術(shù),根據(jù)紅細(xì)胞和血小板兩群分布曲線的不同,在其交界處用微積分方法計(jì)算出體積間的最低點(diǎn),并以此作為紅細(xì)胞和血小板的分界線。由于電阻抗法不能分辨顆粒內(nèi)部結(jié)構(gòu)和形態(tài),故儀器不能真正區(qū)分小紅細(xì)胞和血小板。儀器把2~30fl范圍的顆粒判定為血小板,而將25~250fl范圍的顆粒判定為紅細(xì)胞,因而紅細(xì)胞與血小板之間存在計(jì)數(shù)的交叉區(qū)域。當(dāng)紅細(xì)胞體積正常時(shí),與血小板體積懸殊很大,不會(huì)干擾血小板計(jì)數(shù)。紅細(xì)胞體積偏小時(shí),儀器會(huì)將小紅細(xì)胞誤認(rèn)為血小板,使血小板假性增高。而且MCV越小,對(duì)血小板計(jì)數(shù)影響越大,血小板計(jì)數(shù)假性增高就越多[9-11]。臨床上最常見的小紅細(xì)胞性貧血有缺鐵性貧血、地中海貧血。紅細(xì)胞分布寬度(RDW)是紅細(xì)胞體積異質(zhì)性參數(shù),反映紅細(xì)胞體積大小不一致的程度。當(dāng)MCV在70~81.9fl之間,RDW異常時(shí),小紅細(xì)胞比例增加,血小板假性增高。當(dāng)患者標(biāo)本中的小紅細(xì)胞增多時(shí),血小板相應(yīng)參數(shù)PDW、P-LCR、PCT無法得出結(jié)果,儀器報(bào)警提示血小板分布異常,直方圖右側(cè)抬高,不與橫坐標(biāo)重合甚至平行,呈拖尾狀,這是因?yàn)樾〖t細(xì)胞的脈沖被誤認(rèn)為血小板,而體積又比血小板大的原因[12-14]。
綜上所述,使用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀Sysmex XT-1800i檢測(cè)血小板時(shí),容易受小紅細(xì)胞干擾。在實(shí)際操作過程中,檢驗(yàn)人員應(yīng)掌握儀器的原理,注意觀察紅細(xì)胞、血小板直方圖及儀器報(bào)警,當(dāng)出現(xiàn)MCV小于70 fl或MCV在70~81.9fl之間而RDW大于正常值時(shí),應(yīng)及時(shí)進(jìn)行顯微鏡計(jì)數(shù)復(fù)檢,校正血小板數(shù)值,以保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性,為臨床提供更有意義的參考數(shù)據(jù)。
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