大鼠人迎穴定位標(biāo)準(zhǔn)及針刺降壓效應(yīng)

付靜靜,王永,王舒

(1.天津中醫(yī)藥大學(xué),天津 300073;2.天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,天津 300193;3.國(guó)家中醫(yī)藥管理局腦病針刺療法重點(diǎn)研究室,天津市針灸學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津市針灸研究所,天津 300193)

《針灸大成》載人迎穴為“頸大動(dòng)脈應(yīng)手,俠結(jié)喉兩旁一寸五分,仰而取之”。當(dāng)前權(quán)威的針灸專業(yè)教材[1-4]將人迎穴的解剖位置定為“結(jié)喉旁 0.5寸,胸鎖乳突肌前緣,約當(dāng)頸內(nèi)外動(dòng)脈分叉、頸總動(dòng)脈搏動(dòng)處”。文獻(xiàn)記載及現(xiàn)代臨床研究均證實(shí)針刺人迎穴可雙向調(diào)節(jié)血壓,具有治療高血壓[5]、低血壓[6]、腦梗死后肩手綜合征[7]、腦卒中假性球麻痹[8]、頑固性呃逆[9]等功效。在機(jī)理研究方面,已知解剖部位有頸動(dòng)脈竇壓力感受器可調(diào)控血壓;交感神經(jīng)干、頸交感神經(jīng)節(jié)可通過突觸間連接將信息傳入脊髓、腦干、丘腦,然后上升至大腦皮層;迷走神經(jīng)可使信息經(jīng)孤束核、丘腦,傳至大腦皮層,兩者經(jīng)大腦皮層的整合與調(diào)整,可能產(chǎn)生調(diào)節(jié)外周神經(jīng)的特異作用。但經(jīng)絡(luò)系統(tǒng)不等同于神經(jīng)系統(tǒng),很多研究只是根據(jù)臨床療效做出假說、推論,并無后續(xù)實(shí)驗(yàn)機(jī)理的驗(yàn)證。針刺效能的發(fā)揮與準(zhǔn)確定位密切相關(guān),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腧穴的準(zhǔn)確定位是實(shí)現(xiàn)針刺效應(yīng)機(jī)理研究的必要前提。眾多可供參考的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腧穴定位中,如何在活體大鼠身上準(zhǔn)確定位人迎穴,尚無確切描述?！短绞セ莘健?“穴點(diǎn)以差訛,治病全然皆謬?！币虼擞斜匾獙?duì)大鼠人迎穴的定位進(jìn)行探究,為實(shí)驗(yàn)機(jī)理研究提供可靠保障。為此,本研究依據(jù)人體人迎穴解剖特點(diǎn),通過對(duì) Wistar大鼠人迎穴解剖測(cè)量建立體表定位方法和針刺操作標(biāo)準(zhǔn),并通過觀察針刺自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)的降壓效應(yīng)進(jìn)行功效驗(yàn)證。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康 Wistar大鼠 10只,雌雄各半,體重(300±10)g,購(gòu)自中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物研究所。健康雄性SHR 20只,18周齡,體重(300±10)g,購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于二級(jí)動(dòng)物房喂養(yǎng),室溫(20～25)℃,光照時(shí)間 07:00～19:00,自由攝食、飲水。手術(shù)和實(shí)驗(yàn)過程經(jīng)天津中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn),所有實(shí)驗(yàn)均遵守相關(guān)規(guī)定進(jìn)行處理。

1.2 腧穴體表定位方法

10只雌雄各半的健康Wistar大鼠以10%水合氯醛腹腔過度麻醉(3.5mL/kg)處死后,頸部備皮,將其仰臥位固定于解剖手術(shù)板,使下唇、頸、胸在同一水平面上。用記號(hào)筆畫出左右下頜骨隅突(E、F點(diǎn))連線、頸部正中線(見圖 1-1)。心臟注入空氣處死后低溫冰凍固定尸體,沿頸部正中線做一 2 cm長(zhǎng)的縱行切口,切開皮膚、皮下組織,然后體視學(xué)顯微鏡下操作,分離兩側(cè)的肌肉和組織(頜下腺、淋巴結(jié)、二腹肌、胸骨舌骨肌、胸鎖乳突肌)(見圖 1-2),充分暴露兩側(cè)頸部血管神經(jīng)束,小心剝離頸總、內(nèi)、外動(dòng)脈,避免牽拉移位,暴露頸總動(dòng)脈分為內(nèi)、外動(dòng)脈的分叉點(diǎn)(A、B點(diǎn))。以數(shù)顯游標(biāo)卡尺測(cè)量?jī)煞植纥c(diǎn)間的距離(AB長(zhǎng)度),分別測(cè)量?jī)煞植纥c(diǎn)到兩隅突連線的垂直距離(線段AC、BD長(zhǎng)度)。最后使用數(shù)碼相機(jī)拍照獲得圖片(見圖1-3)。

1.3 腧穴深度定位方法

在完成腧穴體表定位后,另取10只雌雄各半的健康Wistar大鼠,以10%水合氯醛腹腔過度麻醉(3.5 mL/kg)處死后,用記號(hào)筆按上述人迎穴體表定位參考值標(biāo)準(zhǔn)畫定穴位,低溫冰凍固定尸體,沿穴點(diǎn)切割出矢狀斷面,用數(shù)顯游標(biāo)卡尺測(cè)量穴點(diǎn)至頸內(nèi)外分叉點(diǎn)的距離,即為人迎穴深度。

1.4 降壓效應(yīng)驗(yàn)證方法

將健康雄性SHR隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組各10只,治療組取人迎穴(按上述人迎穴定位標(biāo)準(zhǔn)取穴),對(duì)照組取非穴(倒數(shù)第 1肋游離端下 1cm,距后正中線3cm),均取雙側(cè)。施用捻轉(zhuǎn)手法,捻轉(zhuǎn)幅度小于90°,捻轉(zhuǎn)頻率為120轉(zhuǎn)/min,行手法1 min,不留針。每日針刺1次,共針刺4星期。分別于治療前、治療后用鼠尾無創(chuàng)血壓儀[BP 98A,日本軟隆(Softron)株式會(huì)社生產(chǎn)]監(jiān)測(cè)收縮壓、舒張壓。

2 結(jié)果

2.1 腧穴體表定位

用SPSS17.0進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析,各線段長(zhǎng)度分布呈近似正態(tài)分布,計(jì)算95%參考值范圍,則線段AB長(zhǎng)度為(10.21～11.85)mm,線段 AC長(zhǎng)度為(7.65～8.31)mm,線段 BD長(zhǎng)度為(7.61～8.39)mm,線段 AC與BD經(jīng)配對(duì) t檢驗(yàn)無顯著性差異(t=﹣0.304,P=0.768＞0.05),詳見表1。

根據(jù)以上結(jié)果,可認(rèn)為大鼠人迎穴體表定位為兩側(cè)下頜骨隅突連線下(8±0.3)mm,前正中線旁開(5.5±0.4)mm,左右各一。

圖1 大鼠頸部各層次結(jié)構(gòu)

表1 大鼠人迎穴體表定位標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)表 (mm)

2.2 腧穴深度定位

用SPSS17.0進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)分布呈近似正態(tài)分布,計(jì)算 95%參考值范圍,則左側(cè)深度為(5.07～6.01)mm,右側(cè)深度為(5.16～5.92)mm,兩側(cè)經(jīng)配對(duì) t檢驗(yàn)無顯著性差異(t=﹣0.073,P=0.944＞0.05),詳見表2。

表2 大鼠人迎穴穴位深度標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)表 (mm)

綜上研究結(jié)果,可以判定成年大鼠人迎穴定位標(biāo)準(zhǔn)為兩側(cè)下頜骨隅突連線下(8±0.3)mm,前正中線旁開(5.5±0.4)mm,左右各一。針刺操作標(biāo)準(zhǔn),直刺(5.5±0.4)mm,慎行提插手法,以免傷及動(dòng)脈。

2.3 針刺“人迎穴”降壓效應(yīng)

經(jīng)獨(dú)立樣本 t檢驗(yàn),治療前兩組血壓數(shù)據(jù)差異無顯著性意義(t收縮壓=﹣0.680,P收縮壓=0.505＞0.05;t舒張壓=0.175,P舒張壓=0.863＞0.05),基線水平一致。

經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn),4星期針刺治療后,治療組治療后收縮壓呈下降趨勢(shì),但前后比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t收縮壓=2.078,P收縮壓=0.067＞0.05);對(duì)照組治療后收縮壓呈上升趨勢(shì),但前后比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t收縮壓=﹣1.306,P收縮壓=0.224＞0.05)。經(jīng)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),治療后兩組收縮壓比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t收縮壓=﹣3.024,P收縮壓=0.007＜0.05)。詳見表 3。

經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn),4星期針刺治療后,治療組治療后舒張壓呈下降趨勢(shì),且前后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t舒張壓=3.670,P舒張壓=0.005＜0.05);對(duì)照組治療后舒張壓呈上升趨勢(shì),但前后比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t舒張壓=﹣0.226,P舒張壓=0.826＞0.05)。經(jīng)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),治療后兩組舒張壓差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t舒張壓=﹣3.555,P舒張壓=0.002＜0.05)。詳見表 4。

表3 針刺前后收縮壓變化情況(n=10) (±s,mmHg)

表3 針刺前后收縮壓變化情況(n=10) (±s,mmHg)

注:與對(duì)照組比較1)P＜0.05

組別 治療前 治療后治療組 175±20 165±221)對(duì)照組 181±14 189±13

表4 針刺前后舒張壓變化情況(n=10) (±s,mmHg)

表4 針刺前后舒張壓變化情況(n=10) (±s,mmHg)

注:與同組治療前比較1)P＜0.05;與對(duì)照組比較2)P＜0.05

組別 治療前 治療后治療組 130±18 103±111)2)對(duì)照組 129±19 130±22

3 討論

從經(jīng)絡(luò)理論分析,人迎穴屬多氣多血的足陽明胃經(jīng),又是頭氣街和胸氣街的連接處,是調(diào)和營(yíng)衛(wèi)之氣的重要門戶。以人迎為主穴針刺降壓具有良好的即刻降壓效應(yīng)[10],在改善血壓晝夜節(jié)律[11]、平穩(wěn)降低24 h血壓[12]方面效果顯著,長(zhǎng)期堅(jiān)持治療可使血壓平穩(wěn)下降并維持在正常范圍內(nèi)[13]。人迎穴顯著的調(diào)控血壓效果與其特殊的解剖位置密切相關(guān),頸動(dòng)脈竇壓力感受器的作用最為關(guān)鍵。

在人體取穴尚需要仔細(xì)斟酌,在與人體積相差甚遠(yuǎn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身上,稍微偏差一點(diǎn),取穴就不精準(zhǔn),直接影響到研究結(jié)果。實(shí)驗(yàn)研究中動(dòng)物穴位的定位原則是以人體穴位按比例在動(dòng)物身上投影[14],這種方法簡(jiǎn)單方便、定位容易,但大鼠頸部比例較人體大,此法并不適用;且大鼠頸部的活動(dòng)度較大,頸動(dòng)脈被豐厚的肌肉覆蓋,結(jié)喉及動(dòng)脈搏動(dòng)不易觸及,在大鼠進(jìn)行人迎穴定位存在一定困難。

本研究以高血壓機(jī)理研究常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物——成年體重300 g左右的大鼠為研究對(duì)象,采用低溫冰凍尸體及斷層解剖法[15],保證了測(cè)量結(jié)果的可靠性。根據(jù)人體人迎穴的解剖特點(diǎn),運(yùn)用解剖學(xué)確定大鼠人迎穴的體表標(biāo)記定位。綜合以上研究結(jié)果,可以判定成年大鼠人迎穴針刺操作標(biāo)準(zhǔn)為,仰臥位固定大鼠,使下唇、頸、胸在同一水平面上,頸部剃毛,75%乙醇常規(guī)消毒,建議使用長(zhǎng)度小于40 mm、粗細(xì)小于0.30 mm的毫針針刺,管針快速進(jìn)針法直刺(5.5±0.4)mm,慎行提插手法(以免傷及動(dòng)脈),行針、留針時(shí)間不宜過長(zhǎng)(因大鼠易掙扎體動(dòng))。通過此定位及針刺標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行的針刺療效觀察,雖人迎穴組內(nèi)比較治療前后收縮壓差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但仍有明顯的降壓趨勢(shì),增加樣本量或許將得到顯著性差異;與非穴治療相比,經(jīng)人迎穴治療后血壓明顯降低,證實(shí)了確切的降壓效應(yīng)。

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