液相色譜法高效測定新型殺菌劑咯菌腈原藥的方法

谷 兵，肖慧明

（1.國家農(nóng)藥質(zhì)檢中心，遼寧沈陽 110000； 2.遼寧軌道交通職業(yè)學(xué)院，沈陽 110036）

咯菌腈 (Fludioxonil)是一種新型的高效、低毒、低殘留的仿生殺菌劑。它被廣泛地應(yīng)用于防治農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的真菌性病害，對棉花、花生、水稻、蔬萊等作物的雪腐病、青枯病、莖基腐病等疾病具有顯著的效果，不易產(chǎn)生藥害。由于現(xiàn)在咯菌腈制劑種類繁多，每種制劑咯菌腈含量是否準(zhǔn)確，就直接決定著相應(yīng)劑型的采用是否能產(chǎn)生足夠的藥效，是否會(huì)產(chǎn)生藥害。而這些也直接取決于我們用于配制劑型的咯菌腈原藥的有效成分咯菌腈含量是否能較好地在短時(shí)間內(nèi)被確定出來。

該文介紹一種高效液相色譜法可快速的將有效成分咯菌腈與雜質(zhì)有效分離，對優(yōu)化咯菌腈原藥的制備工藝，簡化檢測過程提供很好的借鑒。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑及試驗(yàn)設(shè)備

試驗(yàn)設(shè)備：液相色譜儀 （Waters2489美國Waters公司）；紫外-可見分光光度計(jì) （UV-2201，日本島津科技有限公司）。

試劑：乙腈 （色譜級），丙酮，新蒸二次蒸餾水，咯菌腈標(biāo)準(zhǔn)品 （含量99.5%）。

1.2 色譜操作條件

色譜柱：150mm×4.6mmC18不銹鋼柱，粒徑5μm填充物；流動(dòng)相：ψ （乙腈∶水）=55∶45；流速：1.0ml/min；檢測波長：215nm；進(jìn)樣體積：5.0μm；保留時(shí)間約7.0min。

1.3 溶液配制

標(biāo)樣溶液的制備：稱取咯菌腈標(biāo)樣0.01 g（精確至0.000 2 g），置于50ml容量瓶中，加乙腈使之溶解并稀釋至刻度，搖勻，冷卻至室溫。樣品溶液的制備：稱取試樣0.01 g（精確至0.000 2 g），置于50mL容量瓶中，加乙腈使之溶解并稀釋至刻度，搖勻，冷卻至室溫。

1.4 測定及計(jì)算

在上述色譜操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)進(jìn)數(shù)針標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至相鄰兩針的響應(yīng)值的變化不大于1.5%時(shí)，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測定。試樣中咯菌腈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1(%)，按下公式計(jì)算：

式中：A1—標(biāo)樣溶液中，咯菌腈的峰面積；A2—試樣溶液中，咯菌腈的峰面積；m1—標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2—試樣的質(zhì)量，g；p—標(biāo)樣中咯菌腈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；f—校正因子。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

通過對五批咯菌腈原藥的光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行采集，獲得其紫外最大吸收波長平均值為215 nm，紫外吸收光譜圖譜特征符合咯菌腈的結(jié)構(gòu)。標(biāo)樣及樣品的高效液相色譜圖 1，圖 2。

表1 咯菌腈線性關(guān)系測定結(jié)果 (標(biāo)樣含量99.5%)

圖1 咯菌腈標(biāo)樣的高效液相色譜

圖2 咯菌腈原藥的高效液相色譜

2.2 方法的線性相關(guān)性測定

按咯菌腈測定時(shí)標(biāo)樣濃度的0.6～6.8倍配制6個(gè)標(biāo)樣溶液，進(jìn)行液相色譜測定，經(jīng)計(jì)算得峰面積值，其結(jié)果見表1。

以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，其響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，測試方法的線性相關(guān)性，得到咯菌腈原藥的線性方程為A=247.13X*106，R2=1，呈良好的線性關(guān)系。

2.3 方法的精密度測定

對同一批咯菌腈原藥試樣中咯菌腈成分進(jìn)行了6次平行測定，精密度分析變異系數(shù)為0.61%。

2.4 方法的準(zhǔn)確度測定

準(zhǔn)確稱取已知咯菌腈含量的原藥樣品若干，分別加入一定量的咯菌腈標(biāo)樣，配成5個(gè)已知樣，測定每個(gè)樣品的咯菌腈總質(zhì)量并計(jì)算回收率，其值在100.08%～101.94%之間。

3 結(jié)論

該次試驗(yàn)用上述方法對5批咯菌腈原藥試樣進(jìn)行了兩次平行測定，由試驗(yàn)結(jié)果可以看出，當(dāng)咯菌腈測定的范圍為 0.006～0.068 g時(shí)，峰面積比與質(zhì)量呈良好的線性關(guān)系；精密度分析變異系數(shù)為0.61%；準(zhǔn)確度測定回收率在100.08%～101.94%之間，保留時(shí)間7.031 min，保留時(shí)間相對偏差0.01%。該文的分析方法快速簡便且分離效果好，具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，線性關(guān)系良好，保留時(shí)間較短，是比較理想的測定咯菌腈含量方法。

[1]閆瀟敏,寧斌科,王列平,張媛媛,新型殺菌劑氟咯菌腈及其研究開發(fā)進(jìn)展.世界農(nóng)藥,2010～03

[2]吳進(jìn)龍,胡琴,陳鐵春,50g/L咯菌腈·苯醚甲環(huán)唑懸浮劑高效液相色譜分析.農(nóng)藥,2008～11