單純性膽紅素溶液對(duì)果糖胺測定的影響分析

摘要：目的 探討單純的膽紅素溶液在日立7180全自動(dòng)生化分析儀上對(duì)果糖胺測定的影響。方法 用實(shí)驗(yàn)制品膽紅素溶液，取健康體檢者200例采血作為標(biāo)本，按黃疸診斷標(biāo)準(zhǔn)加入膽紅素溶液，反復(fù)比對(duì)使膽紅素溶液濃度分別達(dá)到或接近預(yù)先設(shè)定好的濃度，分為隱性黃疸組、輕度黃疸組、中度黃疸組、重度黃疸組四組；用礬酸鹽反應(yīng)法和果糖胺法分別測定膽紅素和果糖胺。結(jié)果 中度黃疸組和重度黃疸組加入膽紅素溶液的標(biāo)本果糖胺檢測數(shù)據(jù)較未加入膽紅素溶液的檢測數(shù)據(jù)在中有顯著差異。結(jié)論 膽紅素溶液可對(duì)果糖胺的測定造成一定影響，膽紅素濃度越高影響越顯著，中高濃度膽紅素可致果糖胺水平誤差；在篩查、診斷、鑒別與果糖胺有關(guān)疾病時(shí)，應(yīng)考慮患者是否合并有可致高濃度膽紅素疾病如黃疸、高膽紅素血癥。

關(guān)鍵詞：膽紅素；果糖胺；測定；影響

果糖胺（FRUC）又稱糖化血清蛋白（GSP）它是葡萄糖在血液中與白蛋白發(fā)生緩慢且不可逆的非酶促反應(yīng)形成的糖基化蛋白。這種蛋白的組成是由白蛋白肽鏈189位賴氨酸與葡萄糖結(jié)合形成相對(duì)穩(wěn)定的高分子酮胺結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)中的葡萄糖只有在白蛋白降解后才得以釋放，且糖基化蛋白的合成速率與血糖的濃度成正比。故可通過檢測血清的糖基化蛋白的水平來反映患者前2～3w的血糖水平。果糖胺檢測已在國內(nèi)外醫(yī)院廣泛用于對(duì)患者血糖的監(jiān)控，但由于目前的生化檢測方法和儀器的技術(shù)層面上的問題仍存在一定的局限性，致使生化的大部分項(xiàng)目在遇到溶血、脂血、黃疸等異常標(biāo)本時(shí)，儀器不能自動(dòng)排除干擾而導(dǎo)致生化大部分的項(xiàng)目失準(zhǔn)[1]。本文主要探討單純性的膽紅素溶液能否對(duì)果糖胺測定造成影響。意在明確在黃疸血清條件下測定的果糖胺結(jié)果是否會(huì)受到膽紅素的干擾而失準(zhǔn)。

1資料與方法

1.1一般材料 選擇2013年5月～6月在我院體檢的健康成年人200例，其中男132例、女68例，年齡18～55歲，平均（43.2±4.9）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所選體檢者均要求各項(xiàng)指標(biāo)基本正常，無服用藥物史、無肝、腎及胰腺功能異常，無糖尿病、高血脂及其他內(nèi)分泌疾病病史；②采用統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)，相同質(zhì)控管理采樣。

1.2方法

1.2.1檢測指標(biāo) 依照人民衛(wèi)生部出版的第七版《診斷學(xué)》制定內(nèi)容?？偰懠t素（TBIL）在17.1～34.2umol/L為隱性或生理性黃疸，TBIL在34.2～171umol/L為輕度黃疸。TBIL在171～342umol/L為中度黃疸，TBIL在大于342umol/L為重度黃疸。

1.2.2檢測方法

1.2.2.1所選體檢者均在清晨空腹抽取靜脈血3～4ml。不加抗凝劑，離心分離血清；-20℃冰箱保存，待標(biāo)本收集完畢后。使用儀器為日立7180全自動(dòng)生化分析儀對(duì)這200例血清標(biāo)本進(jìn)行果糖胺測定。果糖胺試劑盒選擇北京九強(qiáng)公司產(chǎn)品，檢驗(yàn)操作嚴(yán)格按照廠家提供的說明書及檢驗(yàn)科生化室制定的SOP文件執(zhí)行。

1.2.2.2將200份血清以50份為一組，分別加入一定比例的膽紅素溶液，使這四組標(biāo)本分別按照衛(wèi)生部對(duì)黃疸程度制定的標(biāo)準(zhǔn)來配制成隱性黃疸組、輕度黃疸組、中度黃疸組、重度黃疸組。測定并驗(yàn)證各組膽紅素濃度是否在標(biāo)準(zhǔn)中的范圍，按要求加入不同濃度的膽紅素溶液后再次測定各組中所有血清果糖胺的數(shù)據(jù)，收集并統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 對(duì)每組的每一份標(biāo)本在加入膽紅素溶液前后各測定一次果糖胺數(shù)據(jù)，對(duì)比隱性黃疸、輕度黃疸組、中度黃疸組、重度黃疸組各組在加入膽紅素前后數(shù)據(jù)的差異。相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以x±s表述。各組間前后兩組數(shù)據(jù)比較均用t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

各組血清標(biāo)本在加入膽紅素溶液前后分別測定的果糖胺結(jié)果比較顯示。隱性黃疸和輕度黃疸組FRUC，P>0.05無顯著性的差異，其余的中度黃疸和重度黃疸組的FRUC前后結(jié)果對(duì)比顯示，均為P<0.05結(jié)果有顯著性差異。見表1。

3討論

果糖胺是血漿蛋白質(zhì)在葡萄糖非酶糖化過程中的產(chǎn)物，可較好的反應(yīng)1～3w內(nèi)人體血糖水平，一定程度上彌補(bǔ)了糖化血紅蛋白不能反映較短期內(nèi)血糖濃度，是評(píng)價(jià)糖尿病短期控制效果的可靠指標(biāo)，適用于血糖波動(dòng)較大的脆性糖尿病、妊娠糖尿病診斷 [3]。近年來，果糖胺測定由化學(xué)法逐漸轉(zhuǎn)為全自動(dòng)生化分析儀分析，受限于儀器測量原理，果糖胺測定結(jié)果易受溶血、脂血、黃疸影響，測量精準(zhǔn)度顯著下降，影響疾病的診斷與療效評(píng)估。

本次實(shí)驗(yàn)是利用添加單純性的膽紅素溶液來干擾正常血清的果糖胺的測定，其目的是觀察模擬血標(biāo)本在不同程度的黃疸影響條件下，其果糖胺的測定是否會(huì)受到膽紅素的干擾[4]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明低濃度的膽紅素對(duì)果糖胺測定的結(jié)果影響不大，但隨著膽紅素濃度的不斷加大，膽紅素濃度達(dá)到一定程度時(shí)，便可干擾到果糖胺的測定結(jié)果，導(dǎo)致果糖胺的測定結(jié)果失準(zhǔn)。其原因在于目前我們所使用的日立7180全自動(dòng)生化分析儀在對(duì)物質(zhì)反應(yīng)結(jié)果的識(shí)讀時(shí)均需要通過比色來分辨。對(duì)于低濃度膽紅素的干擾而言，儀器可通過樣本空白或兩點(diǎn)的比色法連續(xù)監(jiān)測在一定程度上消除了膽紅素對(duì)測定結(jié)果的干擾。而高濃度的膽紅素（即黃疸）血清較大程度的改變了反應(yīng)杯中反應(yīng)混合物的色度，影響了儀器光電部分的敏感性。膽紅素濃度越大，色素越深，則儀器的光電部分的敏感性就越低。也正因如此，許多生化項(xiàng)目的測定會(huì)在光度的非反應(yīng)性變化的干擾下而失準(zhǔn)[1，2]。由此可見，隨著濃度的增大，其干擾果糖胺測定的程度也越大。

綜上所述：醫(yī)院若有測定果糖胺需要，需綜合考慮干擾因素，特別是針對(duì)伴有黃疸等臨床表現(xiàn)，膽紅素水平較高者，應(yīng)提高警惕，必要時(shí)轉(zhuǎn)人工化學(xué)法測量，以提高測量精度[5]。

參考文獻(xiàn)：

[1]Bonini P，Plebani M，Ceriotti F，el al.Errors in laboratory medicine[J].Clin Chem，2002，48（5）：691-698.

[2]顏思仁麥芒.黃疸對(duì)已糖激酶法測定血糖的影響[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2003，10（5）：436-437.

[3]Robert M，Cohen MD，Yancey R，et al.Discordance Between HbA1c and Fructosamine[J].Diabetes Care，2003，26（1）：163-167.

[4]鄭為平，姜慶波，史偉峰，等.血清果糖胺測定的臨床意義[J].中國醫(yī)療前沿，2010，5（19）：62-64.

[5]朱筠，許慧，熊祝嘉，等.四氮唑藍(lán)法檢測果糖胺的分析性能評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2014，42（5）：522-524.

編輯/王海靜