子宮內(nèi)膜異位癥實驗室診斷研究進展

摘要：子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病率不斷增高，目前認為腹腔鏡檢查是診斷內(nèi)異癥的最佳標(biāo)準，但是此項檢查價格昂貴，為有創(chuàng)性，很難用于常規(guī)檢查。目前已對一些與內(nèi)異癥密切相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物、細胞因子及基因等方面進行了廣泛研究?，F(xiàn)從內(nèi)異癥的發(fā)病機制入手，了解與內(nèi)異癥相關(guān)的診斷標(biāo)志物，明確其在實驗室診斷方面的意義。

關(guān)鍵詞：子宮內(nèi)膜異位癥；實驗室檢查；腫瘤標(biāo)志物；細胞因子

子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis，EMS）的發(fā)病率逐漸升高。該病所致的盆腔痛、不孕也成為困擾年輕女性的重要原因。由于其病理多型性、多樣性，臨床癥狀與體征不符，為診斷帶來困難。內(nèi)異癥的研究已涉及免疫學(xué)，遺傳學(xué)等多方面。

1 腫瘤標(biāo)志物與EMS

1.1 CA125 CA125是200000Da糖蛋白，在宮頸上皮，子宮內(nèi)膜和盆腔腹膜等上皮組織中均有表達，它的含量與卵巢惡性腫瘤，卵巢上皮性良性腫瘤，子宮腺肌癥及內(nèi)異癥等有一定相關(guān)性，是目前研究最多的腫瘤標(biāo)記物。施君等[1]研究發(fā)現(xiàn)，CA125水平在Ⅰ期和Ⅱ期子宮內(nèi)膜異位癥基本正常，而在Ⅲ期和Ⅳ期中顯著升高；Ⅰ期和Ⅱ期的CA125水平分別與Ⅲ期和Ⅳ期比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，Ⅰ期僅為37.5%，而Ⅳ期者為81.25%，且各期之間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Vicino等[2]對76例卵巢巧囊患者和41例非巧囊卵巢囊腫實施腹腔鏡，卵巢巧囊的纖維化越嚴重，半定量分析行腹腔鏡剝除術(shù)的正常卵巢組織的卵泡的形態(tài)學(xué)分級得分越高，由此CA125水平在術(shù)前可以預(yù)測卵泡丟失情況，曾有報道子宮內(nèi)膜異位癥患者CA125持續(xù)不正常，子宮內(nèi)膜異位癥惡變?yōu)槊缋展芟侔錍A125水平的波動反應(yīng)了病情及治療效果，成為判斷子宮內(nèi)膜異位癥惡變的指標(biāo)[3]。

1.2基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPS） MMPS是一個高度保守的依賴于鋅離子的內(nèi)切蛋白水解酶家族，可降解細胞外基質(zhì)的大多數(shù)蛋白。在創(chuàng)傷修復(fù)、組織重構(gòu)、腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過程中起重要作用。李艷等[4]用ELISA方法測定EMS患者血清和腹水中的MMP9及TIMP1的表達，發(fā)現(xiàn)血清中的MMP9明顯增高，III-IV期患者明顯高于I-II期患者，MMP9/TIMP1高于非內(nèi)異癥者，腹水中的MMP9高于非內(nèi)異癥患者，MMP-9能降解基底膜的主要成分IV型膠原，而它的活性可被特異的組織抑制劑TIMP1抑制。Uzan等[5]研究腹膜型、卵巢型、直腸型內(nèi)異癥的金屬蛋白酶的表達水平，發(fā)現(xiàn)MMP2、MMP3的表達在直腸內(nèi)異癥中都是最高的，在腹膜型和卵巢型表達水平不一，TIMP1的表達與內(nèi)異癥粘連的部位沒有關(guān)系，TIMP2在腹膜型內(nèi)異癥中最高，直腸型最低。

2 細胞因子

2.1血管內(nèi)皮生長因子及其受體（VEGF，SVEGFR-1） VEGF是1989年Ferrara等在牛垂體濾泡星狀細胞體外培養(yǎng)液中首先純化出來的糖類蛋白質(zhì)，是一高度特異性的血管內(nèi)皮細胞有絲分裂素。目前發(fā)現(xiàn)的VEGF可分為四類：VEGF-A，-B，-C和-D。VEGF-A又稱為血管通透因子（VPF），是最常見的一種類型。VEGF的主要生物學(xué)功能為：1促進有絲分裂和趨化作用（體外促進內(nèi)皮細胞生長，體內(nèi)誘導(dǎo)血管生成）2提高微血管的通透性，導(dǎo)致體液和蛋白的滲出。Goteri等[6]回顧性分析28例巧囊患者，通過組織學(xué)及免疫組化分析囊壁的VEGF，研究發(fā)現(xiàn)血管生成影響卵巢異位囊腫尤其是巨大的雙側(cè)異位囊腫，并在囊腫增生過程中促進組織粘連，形成纖維結(jié)締組織。

可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體（SVEGFR-1）由Flt-1胞外域剪接而成，具有可分泌性。SVEGFR-1通過兩種途徑下調(diào)VEGF活性，①直接與VEGF結(jié)合，阻斷VEGF信號傳導(dǎo)而降低其生物利用度[7]。②通過與內(nèi)皮細胞Flt-1形成同源二聚體，而阻斷VEGF與膜表面受體Flt-1的結(jié)合，抑制VEGF作用的發(fā)揮[8]。Artini等[9]研究血清、腹腔液和囊液中VEGF及SVEGFR-1的含量，發(fā)現(xiàn)血清中VEGF，SVEGFR-1在內(nèi)異癥、卵巢囊腺瘤和囊腺癌中無區(qū)別。腹腔液中VEGF在內(nèi)異癥和囊腺癌中顯著高于囊腺瘤，但二者之間無差別。SVEGFR-1在內(nèi)異癥高于囊腺瘤和囊腺癌，但后二者無差別。

2.2抗內(nèi)膜抗體（EMAb） 許多抗原都可刺激抗內(nèi)膜抗體的產(chǎn)生，包括經(jīng)超聲處理的正常婦女的子宮內(nèi)膜，內(nèi)異癥患者的在位內(nèi)膜和異位內(nèi)膜，子宮內(nèi)膜癌細胞系，內(nèi)膜腺體和間質(zhì)細胞等，但是確切的抗原不明。當(dāng)比較患有內(nèi)異癥的不育婦女與不明原因的不育患者，Randall等[10，11]通過前瞻性多中心研究血清抗內(nèi)膜抗體含量（EMAb）測定與腹腔鏡下診斷內(nèi)異癥的關(guān)系，用間接免疫熒光方法測定EMAb與腹腔鏡診斷內(nèi)異癥的陽性預(yù)測值88%，陰性預(yù)測值86%，敏感度87%，特異度87%，說明EMAb測定是一個很好的篩選方法。

2.3其他細胞因子 TNF-a是一種由激活的單核細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等產(chǎn)生的高效能的細胞因子，是血管活性因子之一，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、炎癥介導(dǎo)、細胞毒性、細胞凋亡等作用。TNF-a在子宮內(nèi)膜異位癥與不孕的原因中，它們之間的關(guān)系不是非常明確，氧化性應(yīng)激是可能的機制，在內(nèi)異癥的腹腔液和血清中都發(fā)現(xiàn)了升高的活性氧。

3 中性粒細胞及淋巴細胞比值NLR

內(nèi)異癥伴隨著腹膜免疫相關(guān)細胞功能的改變，可以被認為是一種全身的亞臨床炎癥。由于免疫相關(guān)細胞功能的改變，及腹腔液中活化的巨噬細胞的增多，分泌各種局部產(chǎn)物，例如生長因子和細胞因子。細胞因子的增多和腹水中其他元素的增多伴隨著CRP，TNF-a，IL-8等因子的增高。全身的炎癥反應(yīng)伴隨著循環(huán)白細胞的一種改變，相對的白細胞增多和淋巴細胞減少。

4 遺傳學(xué)標(biāo)志物

有很多研究表明基因的改變與子宮內(nèi)膜異位癥有關(guān)。Treloar等[12，13]研究了931個澳大利亞家庭和245個美國家庭的同患內(nèi)異癥的姐妹，發(fā)現(xiàn)10q26遺傳型變異是有顯著的易感性。目前很多研究者應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)對內(nèi)異癥展開研究，Zachariah等[14，15]通過實時多聚合酶鏈反應(yīng)同步定量測量核DNA的3磷酸甘油醛脫氫酶基因序列和線粒體DNA的ATP合酶-8基因序列，發(fā)現(xiàn)輕度內(nèi)異癥患者血漿中無細胞核酸的核DNA的含量明顯增高，繪制ROC曲線，診斷敏感度為70%，特異度為87%，表明無細胞核酸可能是診斷內(nèi)異癥的一個非侵入性指標(biāo)。

綜上所述，內(nèi)異癥的發(fā)生、發(fā)展機制復(fù)雜，參與的因素繁多，且相互作用。伴隨著EMS的研究已深入到血管生成、免疫反應(yīng)、遺傳等多個領(lǐng)域，大量的實驗室標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)和測定。

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編輯/王海靜