RhD紅細(xì)胞陰性確認(rèn)與臨床輸血的關(guān)聯(lián)

摘要：目的 研究分析RhD紅細(xì)胞陰性確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，探討RhD抗原在臨床輸血工作中的重要意義。方法 血站檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室217例無(wú)償獻(xiàn)血者初篩為陰性的標(biāo)本用鹽水介質(zhì)法進(jìn)行復(fù)初篩，對(duì)復(fù)初篩為陰性的標(biāo)本采用間接抗球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)出弱D和部分D表型。結(jié)果 217例初篩陰性的標(biāo)本檢出212例為RhD（-）（97.70%） ，5例確定為弱D或部分D型（2.30%）。結(jié)論 RhD抗原呈復(fù)雜變異性，RhD紅細(xì)胞陰性確認(rèn)與防范輸血風(fēng)險(xiǎn)，避免由RhD抗原引起的溶血性輸血反應(yīng)息息相關(guān)。

關(guān)鍵詞：RhD紅細(xì)胞陰性 確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 臨床輸血

Abstract：Objective Research and analysis the results of confirming RhD negative red blood cells，toexplore the significance of RhD antigent in clinical transfusion. Methods By using saline medium method to experiment 217 RhD negative samples from blood donors in blood testing Laboratory again，then by indirect antiglobulin test to detect weak and part D. Results 212 of 217 samples were RhD negative（97.70%），and 5 samples were identified as weak D or part D（2.30%）. Conclusion RhD antigens is complicated and also with a variation of characteristics， the confirm of RhD negative red blood cells and to pvevent the risk of blood transfusion are associated with the hemolytic transfusion reaction which caused by RhD antigen.

Key words：RhD negative red blood cells；Experimental results confirm analysis；Clinical transfusion

Rh血型系統(tǒng)是最復(fù)雜和多態(tài)的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)，臨床輸血重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)，D抗原是Rh血型系統(tǒng)中50個(gè)不同血型抗原[1-2]中免疫原性最強(qiáng)的一個(gè)血型抗原，常能引起溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血癥（HDN）而備受關(guān)注。D抗原在不同類型紅細(xì)胞上表達(dá)的強(qiáng)度不均一，表型分為RhD（+）、RhD（-）、弱D、部分D和Del，獻(xiàn)血者RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)采用經(jīng)典間接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)（IAT）技術(shù)，IAT檢測(cè)為陰性則判定為RhD（-），檢測(cè)為陽(yáng)性則判定為RhD（+）、弱D、部分D型[3]。其中弱D、部分D型對(duì)獻(xiàn)血者個(gè)體判定為RhD（+），對(duì)受血者個(gè)體則判定為RhD（-）；血站對(duì)每一位初篩為RhD陰性的供血者都要作RhD陰性確認(rèn)，2011～2014年共檢測(cè)初篩RhD陰性217例，其中5例為弱D、部分D型，確認(rèn)為RhD（+）；212例確認(rèn)為RhD（-）。本站在稀有血型臨床供應(yīng)上做到有求必應(yīng)，很好滿足了臨床需求，受到社會(huì)和臨床的一致好評(píng)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般資料 廣元市中心血站2011年1月～2014年12月217例血液檢測(cè)試驗(yàn)室RhD初篩為陰性的獻(xiàn)血者標(biāo)本。

1.2儀器和試劑

1.2.1儀器 血型專用離心機(jī)，恒溫水浴箱。

1.2.2試劑

1.2.2.1鹽水法抗-D（IgM或IgM+IgG）單克隆試劑[北京金豪醫(yī)藥有限公司，批號(hào)：2011093028、2013053011等；上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號(hào)：20101018、20120420、20130306等）；Millipore（UK）Ltd（IgM+IgG）（上海：密理博貿(mào)易有限公司，批號(hào)：BMJ1204C等]。

1.2.2.2 IAT法抗-D（IgG）單克隆試劑[上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號(hào)：20101022、20111212、20120823、20130301、20140303等；Millipore（UK）Ltd（IgM+IgG）（上海：密理博貿(mào)易有限公司，批號(hào)：BMJ1204C等）；抗人球蛋白試劑（多特異性抗-IgG+C3d）上海血液生物有限責(zé)任公司，批號(hào)：20100818、20110328、20130418、20140424等]。

1.3 RhD陰性確認(rèn) 先用鹽水凝集法用4種不同批號(hào)或生產(chǎn)廠家的單克隆抗-D（IgM或IgM+IgG）進(jìn)行初篩，再用4種不同批號(hào)或生產(chǎn)廠家的單克隆抗-D（IgG或IgM+IgG）采用IAT法檢測(cè)RhD抗原。

2結(jié)果

2.1鹽水凝集法（復(fù)初篩） 217例初篩陰性的標(biāo)本經(jīng)4批不同批號(hào)或生產(chǎn)廠家的單克隆抗-D初篩均為陰性。

2.2 IAT法 對(duì)上述217例復(fù)初篩為陰性的標(biāo)本采用IAT法檢測(cè)，212例結(jié)果報(bào)告為RhD（-），5例確定為弱D或部分D型，結(jié)果報(bào)告為RhD（+）。

3討論

3.1 RhD紅細(xì)胞陰性確認(rèn)一般須首先通過抗-D（IgM或IgM+IgG）進(jìn)行初篩，然后對(duì)初篩為陰性的標(biāo)本通過經(jīng)典IAT法進(jìn)行確認(rèn)。其中，1種或1種以上試劑結(jié)果為陽(yáng)性則表明受檢紅細(xì)胞為弱D、部分D型，則該獻(xiàn)血者為RhD（+）；結(jié)果全為陰性，該獻(xiàn)血者為RhD（-）[4]。

3.2在常規(guī)血清學(xué)初篩（鹽水IgM或IgM+IgG）RhD陰性獻(xiàn)血者個(gè)體中，除了存在真正Rh陰性外，還有D變異體（包括弱D、部分D、Del型）。弱D、部分D與IgM抗-D呈弱反應(yīng)或陰性，需IgG抗-D IAT法才能檢出，但無(wú)法區(qū)分。弱D、部分D型紅細(xì)胞抗原性遠(yuǎn)比正常D的抗原性弱，但具有免疫原性，若將之輸給RhD陰性受血者，有可能免疫受血者，使之產(chǎn)生抗-D；輸入已有抗-D的受血者，輸入紅細(xì)胞會(huì)被加速破壞，從而引起溶血性輸血反應(yīng)。所以對(duì)弱D或部分D抗原的檢測(cè)十分必要，弱D或部分D型個(gè)體作為獻(xiàn)血者，其血液應(yīng)視為RhD（+）血液。Del型是1種變異極弱的RhD（+）血型，其極弱的D抗原只能通過敏感的吸收放散試驗(yàn)才可檢測(cè)出。Del型D抗原表達(dá)量極弱，但仍具有一定的免疫原性，可免疫RhD（-）個(gè)體[5]，在RhD（-）人群的中國(guó)漢族個(gè)體中，大約有20%～30%為Del型，所占比例很高[6]。雖然血站系統(tǒng)弱D、部分D型可通過經(jīng)典IAT法可檢出，但不能排除RhD陰性獻(xiàn)血者中的Del型，Del表型個(gè)體作為RhD（-）獻(xiàn)血者，可能會(huì)帶來(lái)一定的安全隱患，值得血站每位血型工作者探討和重視。隨著血型檢測(cè)手段不斷提升，可采用基因分型技術(shù)檢測(cè)Del型獻(xiàn)血者，來(lái)降低RhD（-）受血者發(fā)生同種免疫反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。

3.3在臨床輸血工作中，以輸血為目的常規(guī)檢測(cè)不必要使用高效IgM單克隆抗-D試劑檢測(cè)除極弱反應(yīng)外的所有D抗原以及對(duì)明顯為D陰性的標(biāo)本作確認(rèn)試驗(yàn)，否則會(huì)有不必要的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)于受血者RhD抗原初篩試驗(yàn)陰性，RhD抗原結(jié)果難以判定或/和先前鑒定不符，均應(yīng)按RhD（-）血型處理。輸注紅細(xì)胞時(shí)，無(wú)論有無(wú)抗-D，都應(yīng)首選ABO血型與受血者同型RhD（-）紅細(xì)胞；RhD（-）且無(wú)抗-D的受血者，在血液短缺緊急搶救情況下，可根據(jù)\"血液相容性輸注\"原則，須在與受血者主側(cè)交叉配血陰性情況下，首選與受血者ABO血型相容RhD（-）紅細(xì)胞，次選與受血者ABO同型RhD（+）紅細(xì)胞，三選O型RhD（+）紅細(xì)胞輸注。輸注血漿時(shí)，與受血者ABO血型同型的RhD（-）、RhD（+）血漿均可，無(wú)法滿足可選擇AB型RhD（-）和RhD（+）血漿，同時(shí)建議對(duì)RhD（-）血漿做抗-D篩查。輸注血小板時(shí)，首選與受血者ABO/RhD血型同型血小板輸注；緊急搶救受血者血小板供應(yīng)短缺時(shí)，可輸注RhD（+）血小板，應(yīng)向受血者及其家屬告知輸注RhD（+）供者血小板后可能被其中殘留的紅細(xì)胞免疫產(chǎn)生抗-D，尤其是生育期婦女（女童受血者成年后）可能發(fā)生流產(chǎn)、死胎、新生兒溶血病等風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)無(wú)抗-D的上述受血者可盡快注射抗-D免疫球蛋白來(lái)預(yù)防抗體產(chǎn)生[7]。

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