富貴竹采后病害種類調(diào)查及其病原菌鑒定

楊少瑕　于莉　邱逸斯

摘 要：為研究富貴竹切口保鮮及貯運(yùn)問題，分別于2012年、2013年不同季節(jié)對(duì)湛江市霞山區(qū)、湖光鎮(zhèn)、東海島和南山村等地區(qū)多個(gè)富貴竹加工廠進(jìn)行調(diào)查，結(jié)果顯示富貴竹（Dracaena sanderiana）采后的主要病害包括由黑曲霉（Aspergillus niger V. Tiegh.）引起的黑腐病、尖鐮孢霉（Fusarium oxysporum Schlecht）引起的莖腐病、叢刺盤孢菌（Vermicularia sp.）引起的炭疽病和紫變青霉（Penicillium purpurogenum）為主引起的青霉病。

關(guān)鍵詞：富貴竹；采后病害

中圖分類號(hào)：S436.8 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 論文編號(hào)：2014-0345

Abstract： To studies on cutting surface preservative and storage and transport of lucky bamboo（Dracaena sanderiana）， surveys on post-harvest diseases of lucky bamboo were conducted in factories of Xiashan， Huguang Town， Donghai Island and Nanshan Village of Zhanjiang in 2012 and 2013 respectively. The result showed that black-rot disease caused by Aspergillus niger V. Tiegh.， stem rot disease by Fusarium oxysporum Schlecht， anthracnose disease by Vermicularia sp. and Penicillium diseases chiefly by Penicillium purpurogenum were the main post-harvest diseases of lucky bamboo.

Key words： Lucky Bamboo； Post-harvest Disease

0 引言

富貴竹是湛江市花卉出口創(chuàng)匯的一個(gè)重要來源，從20世紀(jì)80年代引入湛江以來，出口創(chuàng)匯穩(wěn)步增長(zhǎng)，出口量居全國(guó)首位。但隨著富貴竹種植面積的增加，以及一味地追求利潤(rùn)而缺乏管理，各種病蟲害的發(fā)生成為制約富貴竹加工出口的主要障礙。由于采后加工的工藝要求，富貴竹經(jīng)剝?nèi)~剪切產(chǎn)生大量傷口，富貴竹在加工過程時(shí)間長(zhǎng)，極易受到病菌的侵染。被病菌侵染的富貴竹在長(zhǎng)途運(yùn)輸中腐爛嚴(yán)重，常常造成出口產(chǎn)品被整批退回，造成了比較大的損失。

出口富貴竹竹條在長(zhǎng)達(dá)20多天的避光運(yùn)輸中，腐爛死亡的比例一直居高不下，經(jīng)常被整個(gè)批次退貨。盛愛武[1]調(diào)查在出口運(yùn)輸?shù)倪^程中損失率達(dá)30%～50%。采后腐爛主要?dú)w因于病原微生物的致病作用，導(dǎo)致腐爛的病原菌可來自大田或加工過程。在貯藏保鮮方面，劉奕清[2]嘗試通過硝酸銀對(duì)出口水培富貴竹霉菌的控制，并對(duì)貯運(yùn)富貴竹進(jìn)行保鮮處理，霉菌得到一定程度的控制。余前媛[3]通過對(duì)富貴竹莖段保鮮研究，有效防止植株腐爛。吳士彬[4]通過正交試驗(yàn)法在金邊富貴竹模擬貯運(yùn)保鮮試驗(yàn)中的應(yīng)用，減少了富貴竹葉片的黃化率。在大田栽培方面，李潤(rùn)唐[5]通過3種肥料對(duì)帶葉富貴竹的試驗(yàn)，進(jìn)行貯藏保鮮效果的對(duì)比，減少葉片黃葉率。而富貴竹采后腐爛在加工過程中尚無人研究，了解富貴竹采后病害的主要種類及病害發(fā)生情況，對(duì)于采取科學(xué)有效的措施防治病害具有重要的意義。

1 材料與方法

1.1 富貴竹品種

大葉富貴竹（Dracaena sanderiana）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 病害調(diào)查 分別于2012年3、12月，2013年7、9、10月對(duì)廣東省湛江市霞山區(qū)（銀河、一方、金陽、巧手）、湖光鎮(zhèn)（木華、福記）、東海島（潭西村）、南山村（寶鑫）等不同區(qū)域8個(gè)富貴竹加工廠進(jìn)行10個(gè)廠次的病害種類和發(fā)病程度調(diào)查。

1.2.2 病原菌分離鑒定 將采集的病害樣本用保鮮袋分裝標(biāo)記帶回實(shí)驗(yàn)室。對(duì)采集的各種病害樣本進(jìn)行癥狀描述。對(duì)病害樣本進(jìn)行組織分離[6]，通過柯赫氏法則驗(yàn)證致病菌，并觀察接種發(fā)病癥狀。病原真菌分離使用PDA培養(yǎng)基，將分離純化的病菌進(jìn)行鑒定。

2 結(jié)果與分析

2.1 病害種類及發(fā)生概況

由于富貴竹的加工工藝特點(diǎn)，湛江市的加工廠普遍都是以竹塔、竹條及竹條的各種造型進(jìn)行銷售。富貴竹在加工中都要進(jìn)行剪切及剝?nèi)~，病菌多由莖桿的切口以及各種傷口侵入危害。如表1病害調(diào)查結(jié)果顯示，黑腐病、莖腐病、炭疽病以及青霉病為主要的采后病害，加工期間檢出率較高。黑腐病可在不同季節(jié)條件下侵染發(fā)病，特別是每年的6—8月發(fā)病率比較高，在湛江市不同加工廠發(fā)生普遍，工廠間檢出率為87.5%，田間也偶有發(fā)生。

2.2 富貴竹采后病害的鑒定

2.2.1 富貴竹黑腐病

（1）癥狀。侵染初期，竹條切口處出現(xiàn)水漬狀病斑，隨后出現(xiàn)菌絲并開始腐爛，腐爛向整個(gè)竹條蔓延并在切口產(chǎn)生大量黑色分生孢子。濕度大時(shí)呈軟腐癥，內(nèi)部中空殘留纖維物質(zhì)并呈黑色（圖1a）。干燥時(shí)莖稈枯黃，切口黑色，莖稈內(nèi)部充滿大量分生孢子呈黑粉狀（圖1b）。該菌主要從切口、受傷芽眼或傷口侵入，造成竹條腐爛。接種試驗(yàn)表明，黑曲霉主要從切口侵染危害且發(fā)病嚴(yán)重，切口接種發(fā)病部位的組織可觀察到細(xì)胞核膨大，而離發(fā)病部位較遠(yuǎn)的組織則無膨大現(xiàn)象。刺傷接種發(fā)病極輕，只略形成小病斑，但經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間仍可從干燥的小病斑分離到病菌，具有一定的潛伏侵染性。該病在高溫、高濕的條件下發(fā)病迅速危害嚴(yán)重，外運(yùn)集裝箱中發(fā)病率高。

（2）病原，在PDA培養(yǎng)基菌落圓形平展（圖1c），產(chǎn)孢面邊緣可呈黃色，為未成熟的分生孢子梗頂囊；28℃培養(yǎng)3天可產(chǎn)生黑色分生孢子，菌落背面產(chǎn)生黃色。在查氏培養(yǎng)基上25℃培養(yǎng)7天，菌落平均直徑41 mm，菌落中心稍凸起有不規(guī)則的輻射狀溝紋，質(zhì)地緊密，菌落僅中心為灰黃褐色，邊緣為白色稀薄菌絲，無滲出液。菌落背面為嵴狀溝，產(chǎn)生鮮黃色。分生孢子梗具足細(xì)胞，分生孢子頭初為球形，老后分裂（圖1d），頂囊表面全部可育，產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)雙層（圖1e）。分生孢子球形老后橫向變扁，黑褐色，孢子表面有不規(guī)則的脊?fàn)钔黄鸹蚩v向條紋（圖1f），孢子常鏈生。根據(jù)《中國(guó)真菌志·曲霉屬及其相關(guān)有性型》鑒定為黑曲霉（Aspergillus niger V. Tiegh.）[7]。

2.2.2 富貴竹莖腐病

（1）癥狀。3月對(duì)霞山區(qū)的銀河、一方、金陽、巧手等園藝廠的病害調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，該病發(fā)生普遍。主要在切口產(chǎn)生紅點(diǎn)及表面產(chǎn)生乳黃色粘分生孢子團(tuán)的腐爛竹條中分離到此菌，為多種鐮刀菌屬的真菌復(fù)合侵染引起，其中以尖孢鐮孢菌侵染為主。調(diào)查顯示鐮刀菌在湛江不同富貴竹家工廠中的分布極為廣泛且種類多，除了造成腐爛外，還可使竹條切口出現(xiàn)紅色點(diǎn)，剖開見維管束變紅（圖2a）。經(jīng)分離純化的病菌接種也產(chǎn)生同樣的癥狀，初期竹條切口產(chǎn)生“紅點(diǎn)”經(jīng)組織切片顯微觀察為富貴竹維管束變紅?？v切可觀察到維管束內(nèi)部為紅色物質(zhì)阻塞（圖2b～c）。隨時(shí)間增加維管束變紅數(shù)量增多，且向竹內(nèi)延伸。

（2）病原。病菌在PDA培養(yǎng)基上，菌絲白色纖細(xì)，菌落平展，背面中心有時(shí)可產(chǎn)生淺紫色（圖2d）?？稍谂囵B(yǎng)后期形成乳黃色的粘分生孢子團(tuán)，與竹條上所產(chǎn)生的相似。自然菌大型孢子較狹長(zhǎng)，培養(yǎng)菌則較寬度較大。該菌小型分生孢子單胞，卵型至長(zhǎng)橢圓形，著生于由菌絲直接生出的短小或較長(zhǎng)的單出瓶梗上，常呈假頭狀。大型孢子兩端彎曲，中間較直（圖2e），在分生孢子座或粘分生孢子團(tuán)內(nèi)形成，多數(shù)3隔，（23～33） μm×（3～4） μm，少數(shù)為4隔。兩端較細(xì)，頂端略呈彎鉤狀，足細(xì)胞不明顯，厚垣孢子頂生或間生（圖2f）。大型分生孢子產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)分枝多且復(fù)雜，孢子梗短而粗，單瓶梗（圖2g）。

該菌與Booth著的《鐮刀菌屬》中所描述的尖孢鐮刀菌屬中的美麗組[8]：[（27～46） μm×（3～5） μm]接近，只是大型孢子略小。根據(jù)魏景超《真菌鑒定手冊(cè)》將其鑒定為尖鐮孢霉（Fusarium oxysporum Schlecht）[8]。

2.2.3 富貴竹炭疽病

病原：自然菌分生孢子盤黑色，圓形至橢圓形，先閉合后開裂產(chǎn)生大量分生孢子，呈琥珀色（圖3a）。分生孢子盤較大，（174.8～503.7） μm×（102.8～257） μm（圖3b～c）。分生孢子單胞，有或無油滴，有油滴的1～3個(gè)，多數(shù)2個(gè)，孢子長(zhǎng)橢圓形，兩端鈍圓或一端稍尖。分生孢子大小為（20.6～36） μm×（5.1～7.7） μm。剛毛混生于分生孢子梗間，深褐色，2～4隔，常見的為3隔，從基部向頂端漸尖，基部色深，極少數(shù)有分枝，大小為（61.7～154.2） μm×（2.57～5.14） μm。PDA上菌落呈細(xì)絨毛狀，菌絲灰黃色（圖3d），培養(yǎng)時(shí)間久可在培養(yǎng)基中產(chǎn)生黑色顆粒狀物。根據(jù)以上特征將其歸入?yún)泊瘫P孢菌（Vermicularia sp.）[8]。富貴竹莖桿上未見病菌的有性型。

2.2.4 富貴竹青霉病

（1）癥狀。受病菌侵染的切口面，初期產(chǎn)生紅色（圖4a），進(jìn)而隨菌落而產(chǎn)生不同的顏色。在不同條件下可使切口呈紅色、青灰色、灰色等不同癥狀。該病在富貴竹加工廠中十分普遍，主要造成上切口變色，溫濕條件適合情況下可加速竹條切口開裂、腐爛。

（2）病原。該病以青霉菌屬（Penicillium sp.）居多，其中分離率較高的菌株特征是：在PDA上菌落邊緣呈淡黃色，雜有橙色及紅色，培養(yǎng)后期菌落呈青色至青灰色，不產(chǎn)子囊殼或菌核。菌落絨氈狀，可產(chǎn)生水溶性紅色色素使培養(yǎng)基變紅，顏色隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而加深（圖4b～c）。分生孢子梗帚狀枝雙輪，對(duì)稱，間枝1層，孢子梗瓶型密集頂端較長(zhǎng)，分生孢子橢圓形至球形，表面光滑（圖4d）。根據(jù)《真菌鑒定手冊(cè)》將其鑒定為紫變青霉組（Penicillium purpurogenum）[8]。

3 討論與結(jié)論

近年來，富貴竹市場(chǎng)潛力很大，已經(jīng)成為部分農(nóng)民脫貧致富的途徑之一[9]。然而，富貴竹各種病蟲害的發(fā)生成為制約富貴竹加工出口的主要障礙[10]，至今尚無關(guān)于富貴竹采后加工病害調(diào)查及病原鑒定方面的研究報(bào)道。本研究對(duì)廣東湛江富貴竹加工廠進(jìn)行主要病害種類調(diào)查并對(duì)病原進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)富貴竹采后的主要病害包括由黑曲霉引起的黑腐病、尖鐮孢霉引起的莖腐病、叢刺盤孢菌引起的炭疽病和紫變青霉為主引起的青霉病等，對(duì)廣東富貴竹的病害防治和出口創(chuàng)匯具有重要的指導(dǎo)意義。

富貴竹是研究的鮮切花觀葉植物，過去對(duì)鮮切花的貯藏保鮮研究側(cè)重在采后處理技術(shù)和保鮮劑配方的研究，如采收時(shí)期、包裝材料、保鮮技術(shù)、貯藏中的溫度和濕度、運(yùn)輸?shù)葘?duì)鮮切花保鮮的影響[11]；采后有關(guān)生理變化的研究主要集中在水分、碳水化合物、蛋白質(zhì)、植物激素、自由基清除酶系等的變化及由此引起的膜脂過氧化[12]；鮮切花加工過程中生物防治對(duì)其保鮮效果是研究和應(yīng)用的趨勢(shì)。一般認(rèn)為，鮮切花各種化學(xué)成分的含量及其變化大部分取決于采前的生長(zhǎng)條件，如光照、溫度、濕度、空氣組成、營(yíng)養(yǎng)、水分、植物保護(hù)和園藝措施等都會(huì)影響鮮切花的生長(zhǎng)發(fā)育，進(jìn)而影響鮮切花的品質(zhì)形成和采后品質(zhì)變化[13]，因此，探討鮮切花采后加工病害防治是十分必要的。目前，防治采后病害的處理方法仍是化學(xué)防治為主[14]，由于生物防治方法控制采后病害具有一定優(yōu)勢(shì)，植物提取物被認(rèn)為是化學(xué)殺菌劑替代品最好的開發(fā)資源[15]。

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