成年榮昌豬血液生理生化及免疫指標(biāo)特性研究

白小青，張鳳鳴，張亮，陳英涂志（.重慶市畜牧科學(xué)院，重慶402460；2.農(nóng)業(yè)部養(yǎng)豬科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶402460；3.重慶市養(yǎng)豬工程技術(shù)研究中心，重慶402460）

成年榮昌豬血液生理生化及免疫指標(biāo)特性研究

白小青1，2，3*，張鳳鳴1，3，張亮1，2，3，陳英1涂志1
（1.重慶市畜牧科學(xué)院，重慶402460；2.農(nóng)業(yè)部養(yǎng)豬科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶402460；3.重慶市養(yǎng)豬工程技術(shù)研究中心，重慶402460）

為了深入了解榮昌豬不同性別間血液生理生化及免疫指標(biāo)及其差異，采用常規(guī)方法測(cè)定了32頭成年榮昌豬血液的13項(xiàng)生理指標(biāo)、12項(xiàng)生化指標(biāo)和2項(xiàng)免疫學(xué)指標(biāo)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，與國(guó)內(nèi)主要的小型豬品系及人類進(jìn)行了比較。結(jié)果表明：所測(cè)榮昌豬血液27項(xiàng)指標(biāo)中，白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和白蛋白（ALB）在性別間差異極顯著（P＜0.01），葡萄糖（GLU）、堿性磷酸酶（ALP）和載脂蛋白AⅠ（AP0AⅠ）在性別間差異顯著（P＜0.05），其余指標(biāo)性別間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。榮昌豬的HCT、血小板（PLT）、尿素（UREA）和葡萄糖（GLU）測(cè)定平均值均小于小型豬，其余指標(biāo)均接近于小型豬。榮昌豬的7項(xiàng)血液生理指標(biāo)和4項(xiàng)血液生化指標(biāo)測(cè)定平均值均處于人類血液生理生化正常參考指標(biāo)范圍內(nèi)。研究確定了榮昌豬血液生理生化及免疫指標(biāo)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，為榮昌豬品種特性開發(fā)及其在畜牧生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)研究上進(jìn)一步利用提供了參考。

榮昌豬；血液；生理指標(biāo)；生化指標(biāo)；免疫指標(biāo)

血液生理生化指標(biāo)是動(dòng)物生理狀態(tài)和機(jī)體健康狀況最直觀的反映，而免疫指標(biāo)則體現(xiàn)了機(jī)體的免疫狀態(tài)和抗病力，這些都是獸醫(yī)臨床診斷疾病、防治疾病不可缺少的重要依據(jù)，也是生理學(xué)、免疫學(xué)、病理學(xué)等研究的重要參考指標(biāo)。研究榮昌豬不同性別的血液生理生化及免疫指標(biāo)的變化情況及其差異，確定榮昌豬血液生理生化及免疫指標(biāo)正常參考數(shù)據(jù)，對(duì)于進(jìn)一步探究榮昌豬的品種特性，促進(jìn)在畜牧生產(chǎn)和生物醫(yī)學(xué)研究上的開發(fā)利用有著重要的意義。目前，系統(tǒng)研究我國(guó)地方豬品種血液生理生化指標(biāo)特性的報(bào)道多見(jiàn)于小型豬，如五指山豬［1］、巴馬香豬［2-3］、合作豬［4］、藏豬［5］、滇南小耳豬［6］等，也有太湖豬［7］、清平豬［8］、莆田黑豬［9］、皖南花豬［10］等其地方豬品種。王孝友等［11］測(cè)定了1～4月齡榮昌豬仔血液生理生化指標(biāo)，并與國(guó)內(nèi)部分地方豬種和人進(jìn)行了比較。廖均華等［12］曾測(cè)定了生長(zhǎng)豬、妊娠和泌乳母豬、公豬的部分血液生理指標(biāo)。蔣茂成等［13］曾測(cè)定了成年榮昌閹公、母豬，雙月齡仔豬的12項(xiàng)生化指標(biāo)。但目前7月齡以上成年榮昌豬種豬的血液生理生化及免疫指標(biāo)數(shù)據(jù)還明顯不足，有待進(jìn)一步完善。本研究通過(guò)對(duì)不同性別成年榮昌豬種豬血液生理生化及免疫指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定分析，為榮昌豬進(jìn)一步作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供可靠的基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物在重慶市畜牧科學(xué)院榮昌豬國(guó)家級(jí)資源保護(hù)場(chǎng)保種核心群中隨機(jī)選取7月齡以上成年榮昌豬種豬32頭。其中，種母豬20頭（妊娠期12頭，哺乳期8頭）：10～11月齡2頭，1～2年4頭，2年以上14頭；種公豬12頭，全部為已配種公豬：7～11月齡4頭，1～2年5頭，2年以上3頭。

1.2 飼料配方及營(yíng)養(yǎng)成分采用玉米-豆粕型日糧，飼料原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

1.3 飼養(yǎng)管理及免疫程序開放式豬舍，水泥地板。采用全價(jià)配合飼料，每日人工加料2次。試驗(yàn)豬自由采食，自由飲水。每日清掃圈舍2次，保持地面清潔。按豬場(chǎng)常規(guī)程序免疫，即每年2、3、8月分別免疫豬乙腦、豬瘟、豬偽狂犬疫苗。

表1 榮昌豬飼料原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分

1.4 血樣采集用5 mL一次性注射器前腔靜脈取血4～5 mL，立刻向2 mL EDTA.K2抗凝血真空管注入血液2 mL，并顛倒混勻數(shù)次，用于血常規(guī)檢查；留有2～3 mL非抗凝血的注射器倒置2～3 h后將上清轉(zhuǎn)入2 mL滅菌離心管中，1 000×g離心20 min取血清分裝并存于-20℃冰箱備用，用于生化和免疫指標(biāo)的測(cè)定。

1.5 測(cè)定指標(biāo)血液生理指標(biāo)（13項(xiàng)）：白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量（MCH）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（RDW-SD）、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)（RDW-CV）、血小板（PLT）、血小板平均體積（MPV）、血小板壓積（PCT）和血小板分布寬度（PDW）。

血清生化指標(biāo)（12項(xiàng)）：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、堿性磷酸酶（ALP）、葡萄糖（GLU）、尿素（UREA）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）和載脂蛋白AⅠ（APOAⅠ）。

血清免疫指標(biāo)：免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）。

1.6 測(cè)定方法抗凝血送至重慶市榮昌縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，利用SYSMEX公司生產(chǎn)的全自動(dòng)血液分析儀（Sysmex XT-2000i）測(cè)定各項(xiàng)血液生理指標(biāo)；血清利用日本日立公司生產(chǎn)的全自動(dòng)生化儀（automatic biochemical analyzer，Hitachi 7020）常規(guī)操作測(cè)定各類生化和免疫指標(biāo)。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間比較采用t檢驗(yàn)。結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 榮昌豬血液生理指標(biāo)測(cè)定結(jié)果由表2可知，榮昌公豬的RBC、HGB、HCT均高于榮昌母豬（P＜0.01），而WBC正好相反（P＜0.01）。榮昌豬其他生理指標(biāo)在性別間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表2 榮昌豬血液生理指標(biāo)比較

2.2 榮昌豬血液生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果由表3可知，榮昌公豬的血清ALB、堿性磷酸酶ALP和葡萄糖GLU均極顯著或顯著高于榮昌母豬（P＜0.01或P＜0.05），而血清ALT、APOAⅠ均極顯著和顯著低于榮昌母豬（P＜0.01 or P＜0.05）。榮昌豬其他生化指標(biāo)在性別間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表3 榮昌豬血液生化指標(biāo)比較

2.3 榮昌豬血液免疫指標(biāo)測(cè)定結(jié)果由表4可知，榮昌豬血清IgG、IgM在性別間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表4 榮昌豬血液免疫指標(biāo)比較g·L-1

3 討論

3.1 榮昌豬及其他豬種血液生理生化及免疫指標(biāo)性別間的差異作為生物醫(yī)學(xué)研究的重要基礎(chǔ)指標(biāo)之一，豬的血液生理生化指標(biāo)受品種、年齡、性別、生理狀態(tài)和生活環(huán)境等因素的影響，具有一定的變異度。本研究測(cè)定的榮昌豬13項(xiàng)血液生理指標(biāo)中，MCV等9項(xiàng)在性別間無(wú)顯著差異，這與在藏豬［5，14-15］、莆田黑豬［9］、劍白香豬［16］、五指山豬［17］、合作豬［18］、太湖豬［7］中研究結(jié)果基本一致。另外，RBC、HGB、HCT和WBC 4項(xiàng)指標(biāo)在性別間有顯著差異，且前3項(xiàng)指標(biāo)榮昌公豬均極顯著高于榮昌母豬，后1項(xiàng)指標(biāo)榮昌母豬極顯著高于榮昌公豬。廖均華等［12］比較成年榮昌公豬與空懷期母豬的RBC和HGB，結(jié)果與本研究相似。李波等［6］測(cè)定了8～12月齡滇南小耳豬的血液生理指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)RBC、HGB和紅細(xì)胞壓積HCT在性別間也有顯著差異，但公豬低于母豬。而其他地方豬種［5，7，15，18］在上述4個(gè)差異指標(biāo)上均未發(fā)現(xiàn)有性別差異。

本研究測(cè)定的榮昌豬12項(xiàng)血液生化指標(biāo)中，AST、UREA、LDL-C、TP、TC、TG、HDL-C 7項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著的性別差異，而ALT、GLU、ALB、ALP、APOAⅠ5項(xiàng)指標(biāo)存在顯著或極顯著的性別差異。與其他中國(guó)地方豬種比較，不同指標(biāo)在不同豬種中研究的結(jié)果并不一致：如TC在榮昌豬中未表現(xiàn)顯著的性別差異，這與在藏豬［14-15］、五指山豬［17］和安慶六白豬［19］中研究結(jié)果一致，而在莆田黑豬［9］、合作豬［18］和皖南花豬［10］中卻表現(xiàn)顯著的性別差異；ALP在榮昌豬中均表現(xiàn)出顯著的性別差異，榮昌公豬ALP極顯著高于榮昌母豬，這與在藏豬［14-15］中研究結(jié)果一致，但在莆田黑豬［9］、五指山豬［17］和合作豬［18］中未表現(xiàn)顯著的性別差異。

免疫球蛋白是存在于動(dòng)物血液、組織液及其他分泌液中的一類具有抗體活性的球蛋白，通常分為五類：IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。其中，IgG是人和動(dòng)物血清中含量最高的免疫球蛋白，是介導(dǎo)體液免疫的主要抗體。血清中IgG含量可以反映血清中抗體的主要部分，代表了機(jī)體體液免疫的狀態(tài)。IgM是初次體液免疫反應(yīng)中最早出現(xiàn)的免疫球蛋白，在感染初期發(fā)揮著先鋒免疫作用。本研究測(cè)定了成年榮昌豬血清IgG和IgM，發(fā)現(xiàn)2個(gè)指標(biāo)在性別間均無(wú)明顯差異。而盛晟等［10］測(cè)定不同日齡皖南花豬血清IgG和IgM，發(fā)現(xiàn)母豬血清IgG在45 d和90 d大于公豬，而在0、30、180 d時(shí)性別間均無(wú)明顯差異；血清IgM在各日齡階段均有顯著的性別差異，母豬顯著大于公豬。

綜上所述，與國(guó)內(nèi)其他地方豬種相比，榮昌豬血液生理生化及免疫指標(biāo)在性別間的差異既有一致性又有差異性。這也進(jìn)一步表明榮昌豬既有地方豬種的共有特性，又有其獨(dú)特的品種特性。

3.2 榮昌豬血液生理生化指標(biāo)與小型豬及人類比較由于具有體型較小、易于實(shí)驗(yàn)操作、易于微生物控制、飼養(yǎng)成本低等優(yōu)點(diǎn)，小型豬日益成為生命科學(xué)研究中的重要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。我國(guó)擁有小型豬品系資源豐富，包含了2個(gè)資源品系、7個(gè)封閉群和2個(gè)近交培育系。與我國(guó)主要的小型豬相比，榮昌豬的WBC、MCV、MCH、ALB和TP測(cè)定平均值與封閉群五指山小型豬［1］接近，RDW-CV測(cè)定平均值與近交系五指山小型豬［20］接近，RBC、HGB、PDW、MPV、AST和ALB測(cè)定平均值與廣西巴馬小型豬［2-3］接近，MCHC、ALT、TP和TC測(cè)定平均值與貴州小型豬［21-22］接近，而HCT、PLT、UREA和GLU測(cè)定平均值均小于上述4個(gè)小型豬。研究表明，封閉群五指山小型豬、近交系五指山小型豬、廣西巴馬小型豬和貴州小型豬分別有8項(xiàng)、5項(xiàng)、9項(xiàng)、8項(xiàng)血液生理指標(biāo)處于人類血液生理正常參考指標(biāo)范圍內(nèi)，分別有6項(xiàng)、8項(xiàng)、6項(xiàng)、8項(xiàng)血液生化指標(biāo)處于人類血液生化正常參考指標(biāo)范圍內(nèi)［1］。本研究結(jié)果顯示，13項(xiàng)榮昌豬的血液生理指標(biāo)有7項(xiàng)的平均值處于人類血液生理正常參考指標(biāo)范圍內(nèi)，可比較的9項(xiàng)榮昌豬的血液生化指標(biāo)有4項(xiàng)的平均值處于人類血液生化正常參考指標(biāo)范圍內(nèi)。該結(jié)果說(shuō)明榮昌豬和人的血液生理生化特性存在一定的相似性，可以應(yīng)用于比較醫(yī)學(xué)、藥物測(cè)試等方面的生物醫(yī)學(xué)研究。

4 結(jié)論

通過(guò)系統(tǒng)研究成年榮昌豬不同性別血液生理生化及免疫指標(biāo)的變化情況及其差異，確定了榮昌豬血液生理生化及免疫指標(biāo)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，為探究榮昌豬的品種特性及其在畜牧生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)研究上進(jìn)一步利用提供了參考。榮昌豬和人的血液生理生化特性存在一定的相似性，是理想的醫(yī)學(xué)研究用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

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Abstract：To analyze and compare the characteristics and difference of blood physiological，biochemical and immune parameters in Rongchang pigs in different sexes，13 blood physiological parameters，12 biochemical parameters and 2 immune parameters of 32 adult Rongchang pigs were detemined by conventional means.The statistical analysis of the data was made later.The comparison of the data with the domestic miniature pig strains and human beings was also made.The results showed that there were no significant difference between male and female except some blood parameters such as WBC，RBC，HGB，HCT，ALT，ALB，GLU，ALP and APOAⅠ.The average values of most of the detected items in Rongchang pigs were close to that in Mini-pigs.The average values of HCT，PLT，UREA and GLU in Rongchang pigs were less than that in Mini-pigs.7 blood physiological indexes and 4 blood biochemical indexes of Rongchang pigs were measured in the average range of blood normal physiology indexes and biochemical indexes in human.The normal ranges of blood physiological，biochemical and immune parameters of Rongchang pigs were therefore established and these data may give a useful reference for further studies of characteristics of varieties in Rongchang pigs and use of Rongchang pigs in livestock production and medical research field.There are some simiarities in blood physiological，biochemical characters between Rongchang pigs and human beings.Rongchang pig is an ideal experimental animal for medical researches.

Study on Blood Physiological，Biochemical and Immune Parameters in Adult Rongchang Pigs

BAI Xiao-qing1，2，3*，ZHANG Feng-ming1，3，ZHANG Liang1，2，3，CHEN Ying1，TU Zhi1
（1.Chongqing Academy of Animal Sciences，Chongqing 402460，China；2.Key Laboratory of Pig Industry Sciences，Ministry of Agriculture，Chongqing 402460，China；3.Chongqing Engineering Research Center for Swine，Chongqing 402460，China）

Rongchang pigs；blood；physiological parameters；biochemical parameters；immune parameters

S828.2

：A

：0258-7033（2015）19-0009-04

2014-12-12；

2015-05-18

重慶市自然科學(xué)基金（CSTC2011JJA80015）；重慶市科委基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)（12620）

白小青（1976-），男，陜西涇陽(yáng)縣人，碩士，副研究員，主要從事豬的遺傳育種，E-mail：cqaav@163.com

*通訊作者