虹吸法制備冷沉淀質(zhì)控不合格原因分析

單泓 王姣杰

[摘要] 目的 探討虹吸法制備冷沉淀不合格發(fā)生率及不合格的原因，為采供血機(jī)構(gòu)制備出高質(zhì)量的冷沉淀提供理論依據(jù)。 方法 回顧性分析2011年1月～2014年1月期間我血液中心質(zhì)控科對(duì)我科采用虹吸法制備的冷沉淀質(zhì)量控制結(jié)果，統(tǒng)計(jì)不合格原因，計(jì)算不合格率，并從各個(gè)環(huán)節(jié)探討影響冷沉淀質(zhì)量的因素。 結(jié)果 每個(gè)月隨機(jī)抽檢4袋，連續(xù)36個(gè)月，共抽檢144袋，不合格產(chǎn)品共計(jì)17袋，不合格率為11.8%；不合格產(chǎn)品中，均為Ⅷ因子含量不足。 結(jié)論 冷沉淀不合格原因主要為Ⅷ因子含量不足，從原料血、原料血漿及冷沉淀制備等多個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行控制可以減少或預(yù)防不合格產(chǎn)品的出現(xiàn)。

[關(guān)鍵詞] 冷沉淀；虹吸法；不合格原因；質(zhì)量控制

[中圖分類號(hào)] R457 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）02-0094-03

冷沉淀是從新鮮冰凍血漿中提取、低溫下不溶解的血漿蛋白部分，主要含有第Ⅷ因子、纖維蛋白原、血管性血友病因子、第XⅢ因子以及纖維結(jié)合蛋白等成分。近年來隨著對(duì)冷沉淀臨床應(yīng)用領(lǐng)域的研究不斷深入，冷沉淀臨床應(yīng)用范圍也在擴(kuò)大，不僅用于血液病的治療，而且越來越多地用于各種外科手術(shù)及創(chuàng)傷引起的凝血機(jī)制異常等出血性疾病[1-5]。因此，冷沉淀的需求量也在不斷增加。制備出足量、高質(zhì)量的冷沉淀制品是采供血機(jī)構(gòu)的職責(zé)。我們通過對(duì)2011年1月～2014年1月期間用虹吸法制備的冷沉淀質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行分析，從各個(gè)環(huán)節(jié)探討影響冷沉淀質(zhì)量的因素，現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1 儀器設(shè)備及試劑

大容量低溫離心機(jī)（德國賀利氏）、CT-4T-6C型數(shù)字控制水浴血液融化箱、熱合機(jī)、DXJ-1型血漿速凍機(jī)（鄭州）、因子Ⅷ活性測(cè)定試劑盒（凝固法）（德國希森美康公司）、纖維蛋白原檢測(cè)試劑盒（德國希森美康公司）。

1.2 冷沉淀原料血漿

河南省紅十字血液中心2011年1月～2014年1月期間制備的200 mL新鮮冰凍血漿，由400 mL新鮮全血在采集后6 h內(nèi)經(jīng)大容量低溫離心機(jī)離心后分離并置-65℃冰箱速凍而成。

1.3 冷沉淀制備方法

我血液中心采用虹吸法制備冷沉淀，具體步驟：①全自動(dòng)低溫循環(huán)水浴融化箱預(yù)溫至6℃，將新鮮冰凍血漿置于融化箱內(nèi)，每次不超過30袋；②10 min后，將轉(zhuǎn)移袋移至融化箱外的托盤中，并打開止流夾，調(diào)整至虹吸狀態(tài)；③當(dāng)血漿融化至剩余40～50 mL血漿及白色冷不融物時(shí)，關(guān)閉止流夾，熱合斷開，并迅速將其置于血漿速凍機(jī)中。

1.4 質(zhì)控科常規(guī)抽檢

2011年1月～2014年1月期間，每月隨機(jī)抽檢4袋，連續(xù)36個(gè)月，共計(jì)抽檢144袋，每袋產(chǎn)品檢測(cè)內(nèi)容包括容量及Ⅷ因子、纖維蛋白原含量。Ⅷ因子、纖維蛋白原含量檢測(cè)按試劑盒操作說明進(jìn)行。

1.5 不合格產(chǎn)品判斷

國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求來源于400 mL全血制備的冷沉淀 FⅧ≥80 IU，纖維蛋白原含量≥150 mg，我血液中心容量為標(biāo)示量50（mL）±10%，容量超標(biāo)或不足、Ⅷ因子及纖維蛋白原含量不符合國家標(biāo)準(zhǔn)[6]均視為不合格產(chǎn)品。

2 結(jié)果

2.1 抽檢結(jié)果

2011年1月～2014年1月期間共抽檢36批次144袋產(chǎn)品中，不合格產(chǎn)品共計(jì)17袋，總不合格率為11.8%，總合格率為88.2%，見表1。由表1中數(shù)據(jù)可知，冷沉淀合格率呈增加趨勢(shì)。

表1 2011年1月～2014年1月期間冷沉淀質(zhì)控結(jié)果不合格例數(shù)統(tǒng)計(jì)

2.2 虹吸法制備冷沉淀不合格產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果

不合格產(chǎn)品共計(jì)17袋，每袋產(chǎn)品均不同批次，均為Ⅷ因子含量低于國家標(biāo)準(zhǔn)，具體每袋產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果見表2。

表2 虹吸法制備冷沉淀不合格產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果（x±s）

注：每袋冷沉淀為IU，由200 mL新鮮冰凍血漿制備而成，國家標(biāo)準(zhǔn)：FⅧ含量≥80 IU/U

3 討論

冷沉淀是從新鮮冰凍血漿中提取、低溫下不溶解的血漿蛋白部分，主要含有第Ⅷ因子、纖維蛋白原、血管性血友病因子、第XⅢ因子以及纖維結(jié)合蛋白等成分，是臨床常用的血液成分之一。目前制備冷沉淀常用的方法有傳統(tǒng)離心法和水浴虹吸法。由于傳統(tǒng)離心法需要在4℃冰箱長時(shí)間緩慢融化至一段時(shí)間后，再進(jìn)行離心分離，耗時(shí)長，Ⅷ因子衰減過多，再加上離心時(shí)不可避免使溫度上升，從而導(dǎo)致Ⅷ因子喪失過多，最終使所制備的冷沉淀制品合格率較低[7-9]，難以滿足臨床需求。而虹吸法制備冷沉淀具備操作簡(jiǎn)單、制備時(shí)間短、溫度恒定、Ⅷ因子含量高等優(yōu)點(diǎn)，近年來該方法受到很多采供血機(jī)構(gòu)的青睞。盡管虹吸法制備冷沉淀有諸多優(yōu)點(diǎn)，筆者發(fā)現(xiàn)仍然有不合格產(chǎn)品出現(xiàn)，對(duì)不合格產(chǎn)品進(jìn)行分析，有利于今后工作的改進(jìn)，整體提高冷沉淀的質(zhì)量，從而有利于臨床患者的治療。

從抽檢結(jié)果看，纖維蛋白原含量合格率為100%，不合格原因主要為Ⅷ因子含量不足，總不合格率為11.8%。纖維蛋白原是較為穩(wěn)定的凝血因子，冷沉淀的制備溫度和制備時(shí)間對(duì)其影響較少，因此抽檢合格率為100%，與李雪梅等[7]的報(bào)道一致。Ⅷ因子為不穩(wěn)定凝血因子，主要參與內(nèi)源性凝血過程，能形成凝血活酶，加速凝血因子Ⅹ活化，加快內(nèi)源性凝血過程，Ⅷ因子含量不足直接影響著冷沉淀的臨床應(yīng)用效果。血液離體后，影響不穩(wěn)定凝血因子質(zhì)量的因素有多種，溫度、時(shí)間、工作人員的操作方式等都能影響[10-13]。冷沉淀為新鮮冰凍血漿的衍生制品，新鮮冰凍血漿的質(zhì)量也直接影響著冷沉淀的質(zhì)量。制備新鮮冰凍血漿需要的全血，不僅要求符合制備成分血的要求，還需要在采血源頭加以控制，要求一針穿刺成功、采血順暢的全血，如果穿刺不順暢、采血時(shí)間過長，可能會(huì)啟動(dòng)獻(xiàn)血者的凝血機(jī)制，引起全血中的凝血因子含量異常，這種全血不宜制備新鮮冰凍血漿，在血液采集時(shí)，應(yīng)對(duì)此類血液給予標(biāo)識(shí)，以避免制備成新鮮冰凍血漿；另外，制備新鮮冰凍血漿的原料血即新鮮全血，應(yīng)盡快放在4℃冰箱保存，盡可能減少不穩(wěn)定凝血因子效價(jià)降低。全血分離制備出新鮮液體血漿后，要迅速在-65℃以下的速凍機(jī)中凍成固體狀態(tài)，然后保存在-20℃以下的冰箱中。如果新鮮液體血漿在室溫存放時(shí)間過長，也會(huì)影響血漿中不穩(wěn)定凝血因子含量。冷沉淀制備過程中，影響不穩(wěn)定凝血因子質(zhì)量的因素也是多方面的，融化溫度、時(shí)間都會(huì)影響冷沉淀的質(zhì)量[14，15]。制備冷沉淀應(yīng)使用專用低溫水浴融化箱，微電腦能把溫度控制在1～6℃，并能較好地控制融化速度，這些是保證冷沉淀質(zhì)量的重要因素之一。冷沉淀制備好后，應(yīng)盡快放置在-65℃以下的速凍機(jī)中凍成固體狀態(tài)，速凍是保存凝血因子Ⅷ的關(guān)鍵步驟，速凍時(shí)，要把冷沉淀逐袋擺平，不要重疊堆放。臨床患者輸注冷沉淀時(shí)，重癥患者常常需要一次性輸入多袋產(chǎn)品以保證療效，如果容量過多就會(huì)不可避免地增加患者的心臟負(fù)擔(dān)或循環(huán)血容量。因此容量控制也很重要，要求工作人員制備時(shí)嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)，每袋產(chǎn)品都要用電子秤稱重，以避免每袋冷沉淀容量過多。

從連續(xù)三年的抽檢結(jié)果看出，通過對(duì)血液源頭及制備過程的嚴(yán)格管理，用虹吸法制備的冷沉淀不合格制品呈逐漸減少趨勢(shì)。我中心將冷沉淀質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)定為75%抽檢合格為符合血液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。目前，我中心冷沉淀合格率已達(dá)到90%以上。冷沉淀產(chǎn)品合格率的不斷提升，不僅可以保證患者的療效，同時(shí)也可以減少用量起到相對(duì)節(jié)約血源的作用，因此，在一定程度上可以緩解血站冷沉淀供給緊張的局面。

總之，冷沉淀是臨床常用血液制品之一，近年來其應(yīng)用范圍及用量呈上升趨勢(shì)，采供血機(jī)構(gòu)應(yīng)該重視影響冷沉淀質(zhì)量的各個(gè)環(huán)節(jié)，從采血源頭抓起，注重從業(yè)人員的專業(yè)知識(shí)培訓(xùn)及責(zé)任感教育，從而為臨床提供充足、高效、優(yōu)質(zhì)的冷沉淀制品。

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（收稿日期：2014-09-26）