大麻素受體2對肥胖小鼠空腹血糖、胰島素的影響

陳彥++++++許桂平++++++陳剛++++++余惠珍++++++吳冰

[摘要] 目的 研究大麻素受體2（type 2 cannabinoid receptor，CB2受體）對肥胖小鼠空腹血糖（fasting blood-glucose，F(xiàn)BS）和空腹胰島素的影響（fasting insulin，F(xiàn)INS）。方法 在2012年6—9月期間，把20只雄性小鼠隨機分為正常組（N=4）、肥胖組（N=16），分別給予普通飼料和高脂飼料喂養(yǎng)6周，成功制作肥胖小鼠模型。再將肥胖小鼠隨機分為4組：模型組（S組、N=4）、CB2激動劑JWH-133干預(yù)組（J組、N=4）、CB2拮抗劑AM-630干預(yù)組（A組、N=4）、JWH-133+AM-630干預(yù)組（AJ組、N=4）。N組、S組腹腔內(nèi)注射生理鹽水，10mg/kg；J、A、AJ組分別腹腔內(nèi)注射JWH-133、AM-630、JWH-133+ AM-630，10mg/kg；均1次/d，共28 d。藥物干預(yù)前后測定小鼠的FBS、FINS。結(jié)果 給藥第4周J組小鼠水平FBS、FINS明顯高于S組，A組小鼠上述指標明顯低于S組（P<0.05），AJ組指標與S組對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 CB2受體在肥胖、胰島素抵抗發(fā)病機制中起重要作用，激活CB2受體會增加肥胖小鼠FBS、FINS水平，抑制CB2受體會減低肥胖小鼠FBS、FINS水平。

[關(guān)鍵詞] 大麻素受體2；肥胖小鼠；空腹血糖；空腹胰島素

[中圖分類號] R4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2014）12（b）-0047-02

內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)（endocannabinoid，EC）與肥胖和胰島素抵抗的發(fā)生關(guān)系密切[1]。分離出的胰島β細胞上發(fā)現(xiàn)了CB1和CB2受體，文獻表明通過刺激鼠與人胰島素上的CB1受體，鼠與人的胰島素與胰高血糖素分泌增加[2-4]。CB2受體主要存在于生物體的外周免疫系統(tǒng)中，還有少部分在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，具有很好的神經(jīng)保護及鎮(zhèn)痛的作用[5]。目前國際對CB2在肥胖中的發(fā)病機制還沒有定論，該研究于2012年6—9月通過CB2受體激動劑及拮抗劑的干預(yù)，觀察CB2受體對肥胖小鼠FBG、FINS的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

胰島素放射免疫試劑盒（羅氏公司），JWH-133、AM-630（Sigma公司），7200型全自動分析儀（津島公司）。

1.2 實驗分組

20只野生型C57Bl/6J小鼠，2月齡，雄性，平均體重（21±2）g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機分組。正常組（N=4）飼以普通鼠料，脂肪占總熱量10%。其余大鼠飼以高脂飼料，脂肪占總熱量65%，制備肥胖小鼠模型。肥胖小鼠造模成功標準參照如下：小鼠體重高于正常組，空腹血糖、TG水平高于正常組。16只小鼠飼養(yǎng)6周時，均造模成功。將肥胖小鼠隨機分為4組：模型組（S組，N=4）、CB2激動劑JWH-133干預(yù)組（J組，N=4）、CB2拮抗劑AM-630干預(yù)組（A組，N=4）、JWH-133+AM-630干預(yù)組（AJ組，N=4）。N組、S組腹腔內(nèi)注射生理鹽水，10 mg/kg；J、A、AJ組分別腹腔內(nèi)注射JWH-133、AM-630、JWH-133+ AM-630，10 mg/kg；均1次/d，共28 d。

1.3 觀測指標

藥物干預(yù)前后檢測各組小鼠FBG、FINS水平。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件處理實驗數(shù)據(jù)，計量資料用（x±s）表示，其中多個樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用Bonferroni檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組小鼠的FBG

J組小鼠給藥第1、2周FBG較S組稍增高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；給藥第3、4周FBG明顯高于S組、高于同組給藥第1周，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。A組小鼠給藥第1、2、3周FBG均較S組稍減低，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；給藥第4周FBG明顯低于S組、低于同組給藥第1、2、3周，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。AJ組小鼠給藥后FBG與S組對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

表1 各組小鼠的FBG（mmol/l）（x±s）

2.2 各組小鼠的FINS

J組小鼠給藥第1、2周FINS水平較S組稍增高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；給藥第3、4周FINS水平明顯高于S組，給藥第4周FINS水平明顯高于同組給藥第1、2周，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。A組小鼠給藥第1周FINS水平均較S組稍減低，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；給藥第2、3、4周FINS水平明顯低于S組，給藥第3、4周FINS水平明顯高于N組，給藥第4周FINS水平明顯低于同組給藥第1周，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。AJ組小鼠給藥后FINS水平與S組對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

表2 各組小鼠的FINS（IU/L）（x±s）

3 討論

該研究發(fā)現(xiàn)與普通飼料喂養(yǎng)的小鼠對比，肥胖小鼠FBG、FINS水平明顯升高。給予CB2受體拮抗劑干預(yù)后，肥胖小鼠的FBG、FINS水平明顯下降，與模型組比較有明顯差異，且隨著干預(yù)的時間增加，下降的程度加大；相反，給予CB2受體激動劑干預(yù)后，肥胖小鼠的FBG、FINS水平亦明顯增高，與模型組比較有明顯差異，且隨著干預(yù)的時間增加，增高的程度加大。表明CB2受體和CB1受體相似，也在肥胖、胰島素抵抗的發(fā)病機制中起重要作用，導(dǎo)致血糖升高。該研究同時還發(fā)現(xiàn)，雖然給予CB2拮抗劑干預(yù)，但肥胖小鼠的FINS水平仍明顯高于N組，提示未能使高胰島素血癥完全恢復(fù)正常，考慮可能與藥物干預(yù)時間較短有關(guān)，仍需進一步增加藥物干預(yù)時間后進一步觀察。endprint

CB1和CB2受體均存在于胰島β細胞上，研究發(fā)現(xiàn)CB1受體在胰島素抵抗發(fā)病機制中起重要作用，而CB2受體有良好的鎮(zhèn)痛和神經(jīng)保護作用、在胰島素抵抗發(fā)病機制中的研究很少。有動物研究報道CB1受體激動劑使糖耐量減低，而CB1受體抑制劑可逆轉(zhuǎn)此效應(yīng)；有臨床研究中報道，服用CB1受體拮抗劑可以減輕體重、降血脂，還改善肥胖患者胰島素抵抗的程度[6-9]。既往的研究發(fā)現(xiàn)CB1主要使食物攝入增多、外周能量消耗減少，通過肝細胞中的CB1使肝細胞的脂肪生成增多；其機制可能是激活CB1可使肝臟脂肪合成轉(zhuǎn)錄因子固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2lc、乙酰輔酶A羧化酶-1和脂肪酸合成酶基因表達增高，引起小鼠肥胖[10-11]。目前已經(jīng)已經(jīng)研發(fā)出CB1拮抗劑如雷蒙那班（rimonabant）和泰倫那班（taranabant）以治療肥胖并可顯著改善胰島素抵抗。

該研究發(fā)現(xiàn)CB2受體和CB1受體一樣，在胰島素抵抗發(fā)病機制中起重要作用，對肥胖小鼠FBG和FINS產(chǎn)生影響。但激動或抑制CB2受體后產(chǎn)生上述效應(yīng)的具體分子機制尚不明確，今后仍需進一步的分子水平的研究闡述詳細作用機制。

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（收稿日期：2014-09-14）endprint