趙 艷 山西省介休市連福畜牧獸醫(yī)中心站 032000
近些年動(dòng)物疫情復(fù)雜,制約我國(guó)畜牧業(yè)健康發(fā)展的重要因素是畜禽傳染病。鑒于眾多畜禽傳染病的臨床癥狀有很多相似之處,單純依靠傳染病流行特點(diǎn)、臨床癥狀及剖檢病變很難確診,開(kāi)展獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室診斷實(shí)有必要。
當(dāng)前,動(dòng)物疫病診斷常用的實(shí)驗(yàn)室診斷和檢測(cè)技術(shù)有以下諸方面。
(1)組織病理學(xué)檢測(cè)技術(shù)。病理學(xué)診斷技術(shù):動(dòng)物疫病診斷依據(jù)基本病理變化和組織出現(xiàn)的特征性病變;免疫病理學(xué)檢測(cè)技術(shù):用標(biāo)記的抗原或抗體對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗體或抗原開(kāi)展定量、定位或定性檢測(cè),通過(guò)組織化學(xué)呈色后,利用(電子)顯微鏡觀察結(jié)果。
(3)分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)。聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室診斷中最常用的技術(shù),也是一種體外迅速擴(kuò)增DNA 的技術(shù)。該技術(shù)能夠?qū)?dòng)物疫病分子流行病學(xué)動(dòng)態(tài)進(jìn)行準(zhǔn)確、及時(shí)的掌握,為動(dòng)物疫病防控提供基因理論分析依據(jù)。
(3)病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)。對(duì)致病性微生物(病毒、細(xì)菌和寄生蟲(chóng)等)進(jìn)行分離、培養(yǎng)和鑒定。病毒分離和鑒定作為流行病學(xué)調(diào)查、病毒性疫病檢測(cè)和診斷的主要方法,旨在對(duì)病毒引起的疫病開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查;對(duì)患病畜禽準(zhǔn)確診斷,及時(shí)采取有效防治措施;對(duì)未知病毒進(jìn)行分類(lèi)和鑒定。相較于其他傳染病檢測(cè)方法而言,寄生蟲(chóng)病檢測(cè)方法不僅有通常的流行病學(xué)調(diào)查與臨床檢查,還包括定諸如免疫學(xué)檢測(cè)方法、蟲(chóng)體(蟲(chóng)卵)檢查法等定性的實(shí)質(zhì)性方法。
(4)血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)。中和試驗(yàn):毒素中和試驗(yàn)和病毒中和試驗(yàn);補(bǔ)體參與的反應(yīng):免疫粘附血凝試驗(yàn)和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn);標(biāo)記抗體技術(shù):放射性標(biāo)記抗體、酶標(biāo)抗體、熒光抗體;凝集性反應(yīng):沉淀試驗(yàn)和凝集試驗(yàn)。血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)是基于抗原抗體特異性反應(yīng)的檢測(cè)技術(shù),目前應(yīng)用最為普遍和發(fā)生最快的一項(xiàng)技術(shù)是酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)。
獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室實(shí)現(xiàn)規(guī)范化管理需要做好以下幾點(diǎn)。提高獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員專業(yè)素質(zhì),加強(qiáng)崗前培訓(xùn),使其對(duì)崗位操作規(guī)程與工作內(nèi)容了解并掌握。上崗需取得相應(yīng)資格證明。加大操作知識(shí)培訓(xùn)力度,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室操作技能,對(duì)常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目能夠熟練掌握。有條件的地區(qū)可以選派知識(shí)扎實(shí)、業(yè)務(wù)素質(zhì)高的實(shí)驗(yàn)人員赴國(guó)外學(xué)習(xí)最新實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目,不斷加強(qiáng)檢測(cè)技能,與時(shí)俱進(jìn)。由取得相應(yīng)證書(shū)的專業(yè)人員負(fù)責(zé)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備(凝膠成像系統(tǒng)、全自動(dòng)酶免儀和PCR 儀等)的維護(hù)、保管,制定使用規(guī)程和期間核查、校準(zhǔn)等工作,保證實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備能夠達(dá)到開(kāi)展檢測(cè)工作的要求。檢測(cè)過(guò)程中的耗材、試劑(藥物標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清和標(biāo)準(zhǔn)抗原)和樣品應(yīng)由專人負(fù)責(zé)管理和控制,設(shè)置耗材室、試劑室和樣品室。按照樣品采集、保存和處理規(guī)范,驗(yàn)收樣品狀態(tài),確保樣品完整性。制定適用于本實(shí)驗(yàn)室的管理規(guī)范,嚴(yán)格依據(jù)農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)量管理?xiàng)l例等規(guī)范化的文件,進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)監(jiān)測(cè)工作。對(duì)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部布局、設(shè)施、濕度、溫度和衛(wèi)生等環(huán)境進(jìn)行嚴(yán)格控制,特別要重視實(shí)驗(yàn)室生物安全問(wèn)題。其一,實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)熟悉生物安全防護(hù)知識(shí)和實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)定等;其二,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室重點(diǎn)環(huán)節(jié)的管控,病料采集、接收、保存、實(shí)驗(yàn),以及樣品處理等各環(huán)節(jié)應(yīng)嚴(yán)格依據(jù)生物安全規(guī)定進(jìn)行操作,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中禁止將活性物質(zhì)直接沖入下水道,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)所有廢棄物、培養(yǎng)物和樣品要進(jìn)行消毒、燒毀和高壓滅菌等無(wú)害化處理;最后,獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室需配備呼吸防護(hù)裝備、防護(hù)鞋、防護(hù)手套和防護(hù)服等個(gè)人防護(hù)裝備。只有控制好上述幾方面才可規(guī)范管理獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室,確保達(dá)到檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的標(biāo)準(zhǔn)。