中藥誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡機(jī)制研究進(jìn)展

邱淑敏，陳 濤，劉美玲，李龍飛，漢麗梅＊

（沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110866）

細(xì)胞凋亡（cell apoptosis）是一個(gè)多因素參與的生理過(guò)程，涉及到免疫應(yīng)答、基因調(diào)控、信號(hào)傳導(dǎo)等多種過(guò)程［1］。細(xì)胞凋亡在多種正常生理過(guò)程中可起到調(diào)節(jié)作用，若此功能出現(xiàn)異?；蛉笔t可導(dǎo)致一系列病理情況發(fā)生。腫瘤細(xì)胞的特征之一就是缺乏這種程序性的死亡過(guò)程，而抗腫瘤中藥可以誘導(dǎo)這種程序性死亡而達(dá)到治療腫瘤的目的。英國(guó)科學(xué)家Hickman J A等［2］首次提出可以將誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡作為以后腫瘤治療研究的主要目標(biāo)和手段，隨后誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡成為腫瘤治療研究的新途徑，也同樣成為篩選抗癌藥物的新靶點(diǎn)、新熱點(diǎn)。學(xué)者們?cè)谥兴幷T導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的研究中，取得了較大進(jìn)展，尤其是中藥誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制方面的研究更加深入。研究發(fā)現(xiàn)中藥可以通過(guò)調(diào)控原癌基因及抑癌基因的表達(dá)、影響細(xì)胞凋亡信號(hào)傳導(dǎo)和阻滯腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)周期等方面誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。本文對(duì)近幾年的有關(guān)中藥單味藥及中藥復(fù)方誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究做一綜述。

1 單味藥及其有效成分誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及其機(jī)制的研究

1.1 對(duì)原癌基因及抑癌基因的調(diào)控

在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中，凋亡相關(guān)基因起重要的調(diào)控作用，其中某些基因發(fā)生缺失、突變或過(guò)度表達(dá)，可導(dǎo)致細(xì)胞增殖失控或凋亡受阻。

野生型p53是抑癌基因，其編碼蛋白的分子質(zhì)量為53ku，通過(guò)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)控和促進(jìn)細(xì)胞程序性死亡的發(fā)生而起抑癌作用。Bcl－2為凋亡抑制基因，根據(jù)Bcl－2的結(jié)構(gòu)和功能可將Bcl－2基因家族分為兩類(lèi)，一類(lèi)是抗凋亡基因，如Bcl－2、Bcl－xl、Bcl－w、Mcl－1；另一類(lèi)是促進(jìn)凋亡基因，如 Bax、Bak、Bad、Bid、Bim。采用四甲基偶氮噻唑藍(lán)（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法檢測(cè)番茄紅素對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的誘導(dǎo)凋亡情況，并應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈?zhǔn)?反 應(yīng) （reverse transcription－polymerase chain reaction，RT－PCR）檢測(cè) Bax和 Bcl－2基因表達(dá)情況，研究發(fā)現(xiàn)番茄紅素下調(diào)人結(jié)腸癌細(xì)胞中Bcl－2基因的表達(dá)，上調(diào)Bax基因的表達(dá)，Bcl－2／Bax的比值下降，其通過(guò)調(diào)控原癌基因及抑癌基因的表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡［3］。牛蒡子苷元對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞SW480凋亡的影響及相關(guān)機(jī)制研究中發(fā)現(xiàn)，牛蒡子苷元可誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與抗凋亡基因Bcl－2和IAP－1表達(dá)下調(diào)、促凋亡基因Smac和Bax表達(dá)上調(diào)有關(guān)［4］。

Survivin是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的凋亡抑制因子，可抑制多種刺激因素誘導(dǎo)的凋亡，使細(xì)胞永生化，并有利于細(xì)胞的異常增殖和惡性轉(zhuǎn)化，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。應(yīng)用 MTT法、RT－PCR和蛋白印跡法（Western blot）檢測(cè)不同濃度苦參堿對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡情況及survivin基因表達(dá)量的變化，研究顯示苦參堿下調(diào)人宮頸癌Hela細(xì)胞survivin基因的表達(dá)，其誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡的機(jī)制與survivin基因表達(dá)被抑制有關(guān)［5］。研究發(fā)現(xiàn)厚樸酚能夠誘導(dǎo)大腸癌細(xì)胞凋亡，在這一過(guò)程中，與凋亡相關(guān)的sur－vivin基因和野生型p53基因起到相反的調(diào)控作用［6］。

1.2 影響細(xì)胞凋亡通路的信號(hào)傳導(dǎo)

1.2.1 內(nèi)源性線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路 研究發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞凋亡早期可觀察到線粒體膜電位下降，膜通透性轉(zhuǎn)變孔（permeability transition pore，PTP）開(kāi)放，導(dǎo)致線粒體內(nèi)細(xì)胞色素C（cytochrome C）、凋亡誘導(dǎo)因子、鈣離子等從線粒體釋放入胞質(zhì)，通過(guò)級(jí)聯(lián)反應(yīng)啟動(dòng)凋亡。

通過(guò)提高細(xì)胞內(nèi)鈣離子的濃度［7］和動(dòng)員凋亡相關(guān)基因的遷移導(dǎo)致線粒體膜通透性增大，促進(jìn)凋亡誘導(dǎo)因子釋放，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

有研究發(fā)現(xiàn)，丹參提取物作用于神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH－SY5Y后，細(xì)胞內(nèi)活性氧水平下降，半胱氨酸蛋白酶－3（caspase－3）的表達(dá)下調(diào)，胞漿內(nèi)細(xì)胞色素C，Bax／Bcl－2比值減小，表明丹參提取物可能是通過(guò)抑制氧化應(yīng)激和激活線粒體依賴(lài)的凋亡途徑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的［8］。半枝蓮提取物作用于肝癌細(xì)胞H22后，經(jīng)透射電子顯微鏡可觀察到核碎裂和細(xì)胞膜皺縮，此時(shí)細(xì)胞色素C從線粒體釋放到細(xì)胞漿，活化caspase－3，從而誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞 H22凋亡［9］。應(yīng)用原位末端標(biāo)記法和免疫組化法檢測(cè)到P53表達(dá)的變化與細(xì)胞凋亡呈現(xiàn)相同變化規(guī)律，表明P53與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)［10］。Western blot結(jié)果顯示，在1.0μmol／L～12.0μmol／L濃度范圍內(nèi)，新藤黃酸明顯升高M(jìn)GC－803細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)基因P53的表達(dá)，降低線粒體膜電位，其機(jī)制可能與促進(jìn)P53介導(dǎo)的線粒體途徑依賴(lài)的細(xì)胞凋亡相關(guān)［11］。

1.2.2 外源性死亡受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路 外源性死亡受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路，起始于細(xì)胞外的死亡受體與死亡配體的結(jié)合。已知的死亡受體有TNFR－1／TNFR－2、Fas、DR3、DR4和 DR5，目前被大家所熟知是CD95（Fas或Apo－1）和TNFRs死亡受體，均屬腫瘤壞死因子受體（tumor necrosis factor receptor，TNFR）超家族，作用于細(xì)胞凋亡的信號(hào)傳遞途徑。細(xì)胞外的死亡信號(hào)通過(guò)死亡區(qū)域（death domain，DD）、死亡影響區(qū)域和半胱氨酸蛋白酶（caspase）補(bǔ)充區(qū)域（CARD），使配體與相應(yīng)死亡受體結(jié)合引起凋亡。去甲斑蝥素（norcantharidin，NCTD）誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞Hep3B凋亡過(guò)程中，細(xì)胞周期分析結(jié)果顯示，NCTD作用于腫瘤細(xì)胞后，細(xì)胞被阻 滯 于 G2／M 期 或 G0／G1 期，caspase－8 和caspase－3活化，表明NCTD誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制是通過(guò)非p53依賴(lài)途徑活化caspase－8和caspase－3，進(jìn)而激活死亡受體通路 TRAIL／DR5［12］。

研究顯示腫瘤細(xì)胞通過(guò)Fas的表達(dá)下調(diào)，逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視，發(fā)生免疫逃逸，最終腫瘤細(xì)胞惡性增殖，腫瘤發(fā)生。Dai X L等［13］研究顯示，F(xiàn)as在乳腺導(dǎo)管癌中的表達(dá)低于在正常組織中的表達(dá)。抗腫瘤中藥通過(guò)誘導(dǎo)Fas／FasL凋亡途徑，調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡。通過(guò)熒光顯微鏡觀察和流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)β－欖香烯對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2的凋亡具有積極作用，能誘導(dǎo)細(xì)胞HepG2的細(xì)胞周期阻滯在G2／M期，明顯上調(diào)Fas和FasL的表達(dá)［14］。曲欣等［15］采用化學(xué)分離方法，從連翹中分離提取抗腫瘤活性成分LQ－4，探討LQ－4體外對(duì)人宮頸癌細(xì)胞HeLa的增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用，發(fā)現(xiàn)LQ－4作用HeLa細(xì)胞后，透射電鏡觀察可見(jiàn)典型凋亡細(xì)胞形態(tài)，促進(jìn)caspase－8酶原活化，在43ku及18ku上均有表達(dá)，得出其機(jī)制可能與參與死亡受體途徑的啟動(dòng)子caspase－8蛋白酶原裂解有關(guān)。

1.2.3 其他信號(hào)調(diào)節(jié)通路 研究發(fā)現(xiàn)，木犀草素可誘導(dǎo)CHOP、Grp78和Grp94表達(dá)，誘導(dǎo)eIF2α磷酸化和ATF6α的剪切，基因敲除CHOP或者應(yīng)用內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑苯基丁酸可減輕木犀草素誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡［16］。體內(nèi)外研究姜黃素對(duì)惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的作用，發(fā)現(xiàn)其可降低Sonic hedgehog（Shh）和膠質(zhì)瘤相關(guān)癌基因同系物1（glioma－associated oncogene homolog 1，GLI－1）的表達(dá)水平，抑制 Shh－GLI1信號(hào)通路的活化，誘導(dǎo)惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡［17］。丹參酮ⅡA（TanshinoneⅡA ）是從中藥丹參中提取的活性成分，作用于非小肺癌細(xì)胞A549（non－small cell lung cancer，NSCLC）后，可抑制NSCLC的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，除了通過(guò)激活caspase－9和caspase－3的線粒體途徑誘導(dǎo)凋亡，還激活了JNK信號(hào)通路，這可能是丹參酮ⅡA誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的又一重要機(jī)制［18］。研究發(fā)現(xiàn)中藥溫郁金的有效活性成分β－欖香烯，可以治療膠質(zhì)瘤，其機(jī)制是破壞Raf－1的構(gòu)象穩(wěn)定性，減弱RAS／RAF／MEK／ERK激酶家族的磷酸化，包括Raf－1和ERK以及下游的目標(biāo)信號(hào)如Bcl－2，進(jìn)而引起Raf－1和ERK信號(hào)通路的抑制失活，導(dǎo)致膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡［19］。

1.3 阻滯腫瘤細(xì)胞增殖周期

目前已有的研究證實(shí)，多數(shù)抗腫瘤中藥的活性成分均可以通過(guò)細(xì)胞毒作用殺死腫瘤細(xì)胞，主要的機(jī)制是通過(guò)阻滯腫瘤生長(zhǎng)所必需的RNA、DNA及蛋白質(zhì)的合成，使腫瘤細(xì)胞增殖周期的一個(gè)或幾個(gè)環(huán)節(jié)受阻，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡。

胡桃科植物胡桃未成熟外果皮（青皮）、樹(shù)枝和樹(shù)皮中含有胡桃醌化合物，有研究發(fā)現(xiàn)其含藥血清對(duì)人肺癌細(xì)胞A549可能具有生長(zhǎng)抑制作用，將細(xì)胞阻滯在S期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［20］。青蒿琥酯可以下調(diào)人表皮癌細(xì)胞A431細(xì)胞周期蛋白A1（cyclin A1）、細(xì)胞周期蛋白B（cyclin B）、細(xì)胞周期蛋白D1（cyclin D1）、周期蛋白依賴(lài)性激酶2（cyclin－dependent kinase 2，CDK2）和周期蛋白依賴(lài)性激酶4（cyclin－dependent kinase 4，CDK4），將細(xì)胞阻滯于 G0／G1期，最終致使腫瘤細(xì)胞凋亡［21］。從苦蕎中提取出槲皮素，研究其對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC－7901增殖、凋亡和細(xì)胞周期的影響，結(jié)果表明槲皮素可使G1期和S期細(xì)胞減少，G2／M期細(xì)胞增多，且細(xì)胞凋亡率明顯增加，其抗腫瘤機(jī)制可能是通過(guò)阻斷細(xì)胞增殖周期而達(dá)到誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的目的［22］。

2 中藥復(fù)方誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡與其機(jī)制的研究

中藥復(fù)方在治療腫瘤疾病時(shí)效果較好，其機(jī)制方面的研究更是成為熱點(diǎn)。焦寧等［23］研究益氣養(yǎng)陰方及其拆方對(duì)急性髓細(xì)胞白血病小鼠細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白的影響，發(fā)現(xiàn)治療組細(xì)胞凋亡率升高，淋巴結(jié)c－myc、survivin蛋白表達(dá)降低，表明益氣養(yǎng)陰方通過(guò)降低c－myc、survivin蛋白表達(dá)，誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡，起到治療作用。以HepG－2肝癌細(xì)胞為研究對(duì)象，探討小柴胡湯含藥血清對(duì)肝癌HepG－2細(xì)胞的影響，檢測(cè)結(jié)果表明，10%小柴胡湯含藥血清作用于HepG－2肝癌細(xì)胞28h后，凋亡率從6.78%上升至19.51%，細(xì)胞線粒體膜電位明顯降低，小柴胡湯含藥血清能夠抑制HepG－2肝癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)其凋亡，線粒體途徑參與了該過(guò)程［24］。周昕欣等［25］首次證明了加味四君子湯含藥血清抑制B16惡性黑色素瘤細(xì)胞增殖，促進(jìn)B16惡性黑色素瘤細(xì)胞凋亡，說(shuō)明加味四君子湯可能通過(guò)抑制B16惡性黑色素瘤細(xì)胞增殖和促進(jìn)其凋亡途徑，發(fā)揮治療惡性黑色素瘤作用。研究表明三物白散含藥血清作用MGC－803細(xì)胞后，隨著三物白散含藥血清藥物濃度的增加及作用時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞增殖率逐漸降低，細(xì)胞抑制率、凋亡率逐漸升高，survivin蛋白的表達(dá)相應(yīng)的降低，三物白散含藥血清能夠抑制人胃癌MGC－803細(xì)胞增殖，對(duì)細(xì)胞有誘導(dǎo)凋亡作用，在凋亡過(guò)程中涉及survivin基因表達(dá)下降［26］。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，抗腫瘤單味藥及其有效成分、中藥復(fù)方都是通過(guò)多種途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的，包括影響細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、阻滯細(xì)胞周期、調(diào)控原癌基因和抑癌基因等，充分體現(xiàn)了中藥抗腫瘤的多靶點(diǎn)作用。目前研究的熱點(diǎn)是靶向凋亡通路相關(guān)蛋白或酶的表達(dá)或功能調(diào)控，通過(guò)干預(yù)、調(diào)節(jié)與細(xì)胞凋亡相關(guān)因子的表達(dá)，廣泛開(kāi)展中藥靶向阻礙或活化細(xì)胞凋亡相關(guān)通路的研究。中藥誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究雖有較大進(jìn)展，但由于中藥化學(xué)成分復(fù)雜，藥理作用廣泛，其誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的機(jī)制是多個(gè)層面、多個(gè)環(huán)節(jié)、多個(gè)部位的，很難從單方面來(lái)進(jìn)行準(zhǔn)確定位，因此需要進(jìn)行深入的研究。如何合理利用中藥抗腫瘤的優(yōu)勢(shì)，使中藥在腫瘤的治療中發(fā)揮更加重要的作用仍是需要解決的問(wèn)題。

［1］Kerr J F，Wyllie A H，Currie A R.Apoptosis：a basic biological phenomenon with wide－ranging implications in tissue kinetics［J］.Br J Cancer，1972，26（4）：239－257.

［2］Hickman J A.Apoptosis induced by anticancer drugs［J］.Cancer Metastasis Rev，1992，11（2）：121－139.

［3］Zhao Qi－h(huán)ui，Qiu Qing－chao，Hu Bo.Mechanism of lycopene induced cell apoptosis on human colon cancer SW480cells［J］.Cancer Res Prevent Treat，2012，11（39）：1306－1310.

［4］張和平，王敬敏.牛蒡子苷元對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞SW480凋亡的影響及其機(jī)制［J］.結(jié)直腸肛門(mén)外科，2012，18（4）：230－233.

［5］陳立波.苦參堿對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞增殖、凋亡及Survivin基因表達(dá)的影響［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（15）：225－238.

［6］Lai Ying－Jiun，Lin Chien－I，Wang Chia－Lin，et al.Expression of survivin and p53modulates honokiol－induced apoptosis in colorectalcancer cells［J］.J Cell Biochem，2014，6：1－37.

［7］徐歡成，鄭明學(xué)，古少鵬，等.鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)細(xì)胞凋亡的影響［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013，34（1）：112－115.

［8］Yu Hui－min，Yao Li－h(huán)ua，Zhou Hong－zu，et al.Neuroprotection against Aβ25－35－induced apoptosis bySalviamiltiorrhizaextract in SH－SY5Ycells［J］.Neurochem Int，2014，17：1－7.

［9］Dai Zhi－Jun，Wang Xi－Jing，Song Ling－Qin.Scutellariabarbateextract induces apoptosis of hepatoma H22cells via the mitochondrial pathway involving caspase－3［J］.World Gastroenterol，2008，14（48）：7321－7328.

［10］劉 文，趙佳榮，鄧 樺，等.禽流感病毒與番鴨呼腸病毒感染番鴨免疫器官細(xì)胞凋亡的研究［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013，34（2）：37－43.

［11］王訓(xùn)翠，朱國(guó)旗，程 卉，等.新藤黃酸誘導(dǎo)人胃癌 MGC－803細(xì)胞線粒體途徑凋亡的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中藥材，2014，37（1）：95－99.

［12］Yeh C H，Yang Y Y，Huang Y F，et al.Induction of apoptosis in human Hep3Bhepatoma cells by norcantharidin through ap53independent pathway via TRAIL／DR5signal transduction［J］.Chin J Integr Med，2012，18（9）：676－682.

［13］Dai X L，Zhou S L，Qiu Y F，et al.Correlated expression of Fas，NF－kappaB，and VEGF－C in infiltrating ductal carcinoma of the breast［J］.Urol J Gynaecol Oncol，2012，33（6）：633－639.

［14］Dai Zhi－Jun，Tang Wei，Wu Wen－Ying，et al.Antiproliferative and apoptotic effects ofβ－elemene on human hepatoma HepG2cells［J］.Cancer Cell Int，2013，13：27.

［15］曲 欣，李 鑫，蔡朋朋，等.連翹抗腫瘤活性成分體外誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡作用［J］.中國(guó)公共衛(wèi)生，2013，29（3）：397－399.

［16］Choi A Y，Choi J H，Yoon H，et al.Luteolin induces a apoptosis through endoplasmic reticulum stress and mitochondrial dysfunction in Nuro－2amouse neuroblastoma cells［J］.Eur J Pharmacol，2011，668（1－2）：115－126.

［17］Du W Z，F(xiàn)eng Y，Wang X F，et al.Curcumin suppresses malignant glioma cells growth and induces apoptosis by inhibition of SHH／GLI1signaling pathwayinvitroandinvivo［J］.CNS Neurosci Ther，2013，19（12）：926－936.

［18］Zhang Jian，Wang Ju，Jiang Jiu－Yang，et al.Tanshinone IIA induces cytochrome c－mediated caspase cascade apoptosis in A549human lung cancer cells via the JNK pathway［J］.Int J Oncol，2014，45（2）：1791－2423.

［19］Zhao Y S，Zhu T Z，Chen Y W，et al.β－elemene inhibits Hsp90／Raf－1molecular complex inducing apoptosis of glioblastoma cells［J］.J Neurooncol，2012，107（2）：307－314.

［20］李 巖，趙劍璞，王燕妮，等.胡桃醌含藥血清體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)研究［J］.北京理工大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，33（5）：545－549.

［21］Jiang Z，Chai J，Chuang H H，et al.Artesunate induces G0／G1cell cycle arrest and iron－mediated mitochondrial apoptosis in A431human epidermoid carcinoma cells［J］.Anticancer Drugs，2012，23（6）：606－613.

［22］李玉英，趙淑娟，白崇智，等.苦蕎麥槲皮素對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC－7901增殖及細(xì)胞周期的影響［J］.中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào)，2013，35（5）：615－621.

［23］焦 寧，陳 沖，徐瑞榮.益氣養(yǎng)陰方及其拆方對(duì)急性髓細(xì)胞白血病小鼠細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白的影響［J］.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2014，21（2）：42－45.

［24］李 然，劉立萍，馬 驥，等.小柴胡湯含藥血清對(duì)肝癌HepG－2細(xì)胞的影響［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（5）：218－220.

［25］周昕欣，王彩霞.加味四君子湯含藥血清對(duì)B16惡性黑色素瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（10）：178－181.

［26］王燚霈，朱 瑩，鄒君君，等.三物白散含藥血清對(duì)胃癌 MGC－803細(xì)胞增殖、凋亡及survivin基因表達(dá)的影響［J］.中國(guó)中醫(yī)急癥，2013，22（3）：366－369.