山梔茶化學(xué)成分的研究*

喬 里， 汪石麗， 李勇軍， 劉俊宏， 王永林， 劉麗娜**

(1.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院 貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 貴州 貴陽(yáng) 550004；2.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附院 臨床醫(yī)學(xué)研究中心, 貴州 貴陽(yáng) 550004；3.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 民族藥與中藥開(kāi)發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心， 貴州 貴陽(yáng) 550004；4.貴州省骨科醫(yī)院 藥劑科， 貴州 貴陽(yáng) 550004)

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山梔茶化學(xué)成分的研究*

喬 里1,2， 汪石麗3，4， 李勇軍3， 劉俊宏3， 王永林1， 劉麗娜1**

(1.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院 貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 貴州 貴陽(yáng) 550004；2.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附院 臨床醫(yī)學(xué)研究中心, 貴州 貴陽(yáng) 550004；3.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 民族藥與中藥開(kāi)發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心， 貴州 貴陽(yáng) 550004；4.貴州省骨科醫(yī)院 藥劑科， 貴州 貴陽(yáng) 550004)

目的： 對(duì)山梔茶的化學(xué)成分進(jìn)行研究。方法： 應(yīng)用正、反相硅膠和Sephadex LH-20等柱層析方法分離純化山梔茶，根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果： 從山梔茶中分離得到7個(gè)化合物，分別鑒定為(1)丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷、(2)紫丁香苷、(3)3, 4, 5-三甲氧基苯-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、(4)丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(5)異落葉松樹(shù)脂醇-9′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(6)南燭木樹(shù)脂酚-9′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(7)芥子醛葡萄糖苷。結(jié)論： 化合物(2), (4),(5), (7)為首次從該植物中分離得到，為山梔茶質(zhì)量控制指標(biāo)性成分的選擇提供了依據(jù)。

化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定；海桐花科；山梔茶

山梔茶為海桐花科海桐花屬植物光葉海桐(PittosporumglabratumLindl.)的干燥根，收載于2003年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中，具有鎮(zhèn)靜、散瘀、止痛等作用，常用于神經(jīng)衰弱，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等癥的治療[1-2]。山梔茶主產(chǎn)地為貴州、廣東、廣西、湖南等，另外香港的大帽山和嘉道理農(nóng)場(chǎng)暨植物園也有少量分布[3]。文獻(xiàn)報(bào)道山梔茶以三萜、木脂素、環(huán)烯醚萜及其苷類(lèi)為主要成分，其醇提取物具有鎮(zhèn)痛和降壓作用[4-7]。為了開(kāi)發(fā)我國(guó)的植物資源，尋找新的有效藥物，對(duì)山梔茶不同極性部位進(jìn)行了鎮(zhèn)痛活性篩選，結(jié)果顯示在大孔樹(shù)脂柱層析水洗脫、70%乙醇洗脫和95%乙醇洗脫3個(gè)部位中，70%乙醇洗脫部位對(duì)醋酸引起的疼痛和熱板引起的疼痛抑制作用較為明顯，為山梔茶鎮(zhèn)痛有效組分，但其化學(xué)成分未知。本文對(duì)該鎮(zhèn)痛有效組分進(jìn)行類(lèi)化學(xué)成分研究，從中分離得到了7個(gè)化合物，發(fā)現(xiàn)了一個(gè)鎮(zhèn)痛作用較為突出的化合物，其中有4種化合物為首次從該植物中分離得到，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

RUDOLPH型自動(dòng)旋光測(cè)定儀(A201102)，JEOL ECX 500MHz核磁共振波譜儀(日本電子株式會(huì)社)，ACQUITY-TQD串聯(lián)質(zhì)譜儀，ACQUITY UPLC 超高液相色譜儀(美國(guó)沃特世公司)。D101大孔樹(shù)脂(青島海洋化工廠)，色譜用硅膠(200～300目)及硅膠GF254預(yù)制板為青島海洋化工廠產(chǎn)品，MCI 75～150 (m為日本三菱化學(xué)公司產(chǎn)品；Sephadex LH-20為瑞士Pharmacia Biotech公司產(chǎn)品；其他化學(xué)試劑均為分析純。山梔茶藥材采收于貴州省，經(jīng)貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院生藥學(xué)教研室王世清教授鑒定為海桐花科海桐花屬植物光葉海桐的根。

1.2 提取與分離

取山梔茶藥材粗粉11 kg，用70%乙醇回流提取3次，合并提取液，減壓回收溶劑，濃縮至浸膏，浸膏用水混懸，上D101大孔樹(shù)脂層析柱，依次用水、70%乙醇、95%乙醇洗脫，分別用水洗脫、70%乙醇洗脫、95%乙醇洗脫3個(gè)部位。取70%乙醇洗脫部位400 g，經(jīng)硅膠柱層析以乙酸乙酯-甲醇(10∶0→6∶4，加0.1%醋酸)進(jìn)行梯度洗脫，得組分S1～S3。組分S3經(jīng)RP-18、Sephadex LH-20、正相硅膠等反復(fù)柱層析分離純化后，得到化合物1(87 mg)、2(20 mg)、3(60 mg)、4(85 mg)、5(7 mg)及6(15 mg)。S1依次經(jīng)MCI、Sephadex LH-20、硅膠等柱層析分離純化得到化合物7 (30 mg)。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物(1) 白色粉末, ESI-MSm/z：741.3[M-H]-.1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ6.92 (4H, s, H-2, 6, 2′, 6′), 4.88 (2H, d,J= 3.0 Hz, H-7, 7′), 3.12 (2H, m, H-8, 8′), 4.00 (2H, dd,J= 9.0, 3.0 Hz, H-9a, 9′a), 4.15 (2H, m, H-9b, 9′b), 3.76 (12H, s, 3, 3′, OCH3-5,5′), 5.78 (2H, d,J= 6.6 Hz, Glc-H-1, 1′), 4.30-4.39 (12H, m, 葡萄糖2～6位質(zhì)子信號(hào))。13C-NMR (150 MHz, CD3OD) δ 153.8 (C-3,5,3′,5′), 139.1 (C-4,4′), 134.7 (C-1,1′), 105.0 (C-2,2′), 105.0 (Glc-C-1,1′), 104.4 (C-6,6′), 86.7 (C-7,7′), 77.5 (Glc-C-5,5′) ,77.0 (Glc-C-3,3′), 74.9 (Glc-C-2,2′), 72.7 (C-9,9′),70.5 (Glc-C-4,4′), 61.7 (Glc-C-6,6′), 57.4 (OCH3-3,3′,5,5′), 54.7 (C-8,8′)。所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道的丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物(2) 白色粉末, ESI-MSm/z: 417.1 [M+HCOO]-.1H-NMR (600 MHz，CD3OD) δ 6.75 (2H, s, H-3, 5) , 6.55 (1H, d,J= 15.9 Hz,H-7) , 6.33 (1H, d, t,J= 15.9, 5.5 Hz, H-8), 4.23 (2H, d,J= 5.5 Hz, H-2,9), 3.86 (6H, s, OCH3-2), 3.35～3.70 (6H, m, 葡萄糖2～6位質(zhì)子信號(hào))。13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 154.1 (C-2), 154.1 (C-6), 135.7 (C-1), 135.1 (C-4), 131.1 (C-8), 129.8 (C-7), 105.2 (C-3), 105.2 (C-5), 63.4 (C-9), 56.8 (2-OCH3) , 105.1 (Glc-1), 78.2 (Glc-5), 77.6 (Glc-3), 75.5 (Glc-2), 71.4 (Glc-4), 62.4 (Glc-6)。所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道的紫丁香苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為紫丁香苷。

化合物(3) 無(wú)色粉末, ESI-MSm/z: 477.2 [M-H]-.1H-NMR (600 MHz, CD3OD) δ 6.46 (2H, s, H-2, H-6), 4.96 (1H, d,J= 2.6 Hz, H-1″) , 4.79 (1H, d,J= 7.5 Hz, H-10), 4.02 (2H, d,J= 9.2 Hz, H-6′), 3.94 (1H, d,J= 9.6 Hz, H-4″), 3.87 (1H, d,J= 2.6 Hz, H-2″), 3.81 (6H, s, OCH3-3, 5), 3.75 (1H, d,J= 9.5 Hz, H-4″), 3.70 (3H, s, OCH3-4), 3.63～3.53 (4H, m, 葡萄糖2～6位質(zhì)子信號(hào)), 3.42 (2H, s, H-5″)。13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ156.0 (C-1),154.8 (C-3, C-5), 134.5 (C-4), 110.8 (C-1″), 103.1 (C-1′), 96.2 (C-2, C-6), 80.5 (C-3″), 77.9 (C-3′), 77.8 (C-2″), 77.0 (C-4″), 74.9 (C-2′, C-5′), 71.6 (C-4′), 68.8 (C-6′), 65.3 (C-5″), 61.2 (OCH3-4), 56.7 (OCH3-3, 5)。 所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道的3,4,5-三甲氧基苯-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為3,4,5-三甲氧基苯-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物(4) 無(wú)色粉末, ESI-MSm/z: 579.2 [M-H]-.1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.69 (2H, d, H = 2, 6), 6.63 (2H, d, H-2′, 6′) , 4.86 (1H, d,J= 7.2 Hz, Glc-H-1″), 4.74 (1H, m, H-7), 4.69 (1H, m, H-7′), 4.25 (2H, m, H-9a, 9′a), 3.88 (2H, m, H-9b, 9′b), 3.81～3.83 (12H, m, OCH3-3, 5, 3′, 5′), 3.75 (1H, m, Glc-H-6″a), 3.64 (1H, m, Glc-H-6″b), 3.44 (1H, m, Glc-H-2″), 3.38 (2H, m, Glc-H-3″, 4″), 3.33 (1H, m, Glc-H-5″, 3.28 (2H, m, H-8, 8′)。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ 154.4 (C-3, 5), 149.3 (C-3′, 5′), 139.5 (C-1), 136.1 (C-4′), 135.5 (C-4), 133.0 (C-1′), 105.3 (Glc-C-1″), 104.8 (C-2, 6), 104.5 (C-2′, 6′), 87.6 (C-7′), 87.1 (C-7), 78.3 (Glc-C-5″), 77.8 (Glc-C-3″),75.7 (Glc-C-2″), 72.9 (C-9, 9′), 71.3 (Glc-C-4″), 62.5 (Glc-C-6″), 57.0 (OCH3-3′, 5′), 56.8 (OCH3-3, 5), 55.7 (C-8′), 55.5 (C-8)。所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道的丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物(5) 無(wú)色粉末, ESI-MSm/z: 521.2 [M-H]-.1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.77 (1H, d,J= 1.5Hz, H-2′), 6.72 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.62 (1H, s, H-2), 6.61 (1H, d,J= 1.5 Hz, H-6′), 6.15 (1H, s, H-5), 4.09 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-1″), 3.82 (1H, m, H-8′), 3.78 (6H, s, OCH3-3, 3′), 3.63 (2H, m, H-9), 3.33 (2H, m, H-9′), 3.30～3.20 (6H，葡萄糖2 ～6位質(zhì)子信號(hào)), 2.80 (2H, m, H-7), 2.04 (1H, m, H-8), 1.77 (1H, m, H-7′)。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ 148.9 (C-3), 147.1 (C-3′), 145.8 (C-4), 145.1 (C-4′), 138.7 (C-1′), 134.4 (C-6), 129.1 (C-1), 123.1 (C-6′), 117.4 (C-5), 116.1 (C-5′), 114.3 (C-2′), 112.3 (C-2), 105.2 (C-1″), 78.1 (C-5″), 77.9 (C-3″), 75.2 (C-2″), 71.6 (C-4″), 69.5 (C-9′), 65.2 (C-9), 62.8 (C-6″), 56.4 (OCH3-3, 3′), 47.9 (C-8′), 45.9 (C-7′), 39.5 (C-8), 33.9 (C-7)。所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道的異落葉松樹(shù)脂醇-9′-O-β-D-葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為異落葉松樹(shù)脂醇-9′-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物(6) 無(wú)色粉末， ESI-MSm/z:587.2 [M-H]-.1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.56 (1H, brs, H-8), 6.41 (2H, brs, H-2,6), 4.41 (1H, d,J= 5.9 Hz, H-4), 4.22 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-1″), 3.83 (1H, m, H-3′a), 3.79 (3H, s, OCH3-7), 3.82 (1H, m, Glc-H-6a), 3.72 (6H, s, OCH3-3′,5′), 3.63 (2H, Glc-H-6b, H-2′a), 3.54 (1H, dd,J= 7.7, 14.7 Hz, H-2′b), 3.43 (1H, d,J= 6Hz, H-3′b), 3.33 (3H, s, OCH3-5), 3.30～3.20 (6H，葡萄糖2 ～6位質(zhì)子信號(hào)), 2.70 (1H, dd,J= 4.0, 15.1 Hz, H-1a), 2.60 (1H, dd,J= 11.8, 14.5 Hz, H-1b), 2.05 (1H, brs, H-3), 1.69 (1H, brs, H-2)。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ 148.9 (C-3′, 5′), 148.6 (C-7),147.5 (C-5), 139.4 (C-6), 138.9 (C-1′), 134.4 (C-4′), 130.1 (C-9), 126.4 (C-10), 107.8 (C-8) , 106.8 (C-2′, 6′), 104.8 (Glc-C-1), 78.2 (Glc-C-5), 77.9 (Glc-C-3), 75.2 (Glc-C-2), 71.6 (C-3′), 71.3 (Glc-C-4), 66.1 (C-2′), 62.8 (Glc-C-6), 60.1 (OCH3-5), 56.8 (OCH3-3′,5′), 56.5 (OCH3-3), 46.7 (C-3), 42.8 (C-4), 40.5 (C-2), 33.9 (C-1)。所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道的南燭木樹(shù)脂酚-9′-O-β-D-葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為南燭木樹(shù)脂酚-9′-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物(7) 無(wú)色粉末， ESI-MSm/z: 415.1 [M+HCOO]-.1H-NMR (400 MHz, C5D5N) δ 9.86 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-9), 7.49 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-7), 7.04 (2H, s, H-2, 6) , 6.95 (1H, dd,J= 7.8, 15.8 Hz, H-8), 4.54～4.21 (6H, m, 葡萄糖2～6位質(zhì)子信號(hào)), 4.02 (1H, m, 糖上OH), 3.81 (6H, OCH3-2), 糖上的端基質(zhì)子信號(hào)被吡啶溶劑峰覆蓋。13C-NMR (100 MHz, C5D5N) δ 193.7 (C-9), 153.9 (C-7), 153.2 (C-3, 5), 138.5 (C-4), 130.2 (C-1), 128.4 (C-8), 107.4 (C-2, 6), 104.2 (C-1′), 79.1 (C-3′), 78.5 (C-5′), 76.1 (C-2′), 71.6 (C-4′), 62.6 (C-6′), 56.6 (OCH3-2)。 所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道的芥子醛葡萄糖苷波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為芥子醛葡萄糖苷。

3 討論

通過(guò)對(duì)山梔茶鎮(zhèn)痛有效組分進(jìn)行了化學(xué)成分研究，從中分離鑒定得到7個(gè)化合物。其中，據(jù)Jung等[15]報(bào)道，以5、10 mg/kg口服給藥后，丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷(1)在醋酸扭體法和熱板法兩個(gè)模型中均顯示出較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛活性。故認(rèn)為山梔茶鎮(zhèn)痛有效組分的鎮(zhèn)痛作用與丁香脂素-4,4′-雙-O-β-D-葡萄糖苷(1)的存在有關(guān)。由于未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道，其余化合物是否具有鎮(zhèn)痛活性尚待進(jìn)一步研究。本論文為尋找山梔茶的鎮(zhèn)痛活性成分、確定山梔茶及其相關(guān)制劑的質(zhì)量控制方法奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

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(2015-02-09收稿，2015-03-14修回)

中文編輯： 周 凌；英文編輯： 劉 華

Research On the Chemical Constituents ofPittosporumglabratum

QIAO Li1,2, WANG Shili3,4, LI Yongjun3, LIU Junhong3, WANG Yonglin1, LIU Lina1

(1.GuizhouProvincialKeyLaboratoryofPharmaceutics,SchoolofPharmacy,GuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 2.ClinicalResearchCenter,theAffiliatedHospitalofGuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 3.EngineeringResearchCenterofMinistryofEducationforDevelopmentandApplicationofEthnicMedicineandTCM,GuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 4.PharmaceuticalPreparationSection,OsteologicalHospitalofGuizhouProvince,Guiyang550004,Guizhou,China)

Objective: To study the chemical constituents of the root ofPittosporumglabratum. Methods: Various column chromatographic techniques including silica gel column chromatography (CC), reversed phase C18 CC and Sephadex LH-20 CC were used to isolate the constituents ofP.Glabratum, whose structures were determined by physicochemical property and spectroscopic analysis. Results: Seven compounds were isolated fromP.glabratumand their structures were identified as (1)syringaresinol-4,4'-bis -O-β-D-glucopyranoside, (2)syringin, (3)3,4,5-trimethoxyphenol-1-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside, (4)syringaresinol-4-O-β-D-glucopyranoside, (5)isolariciresinol 9′-O-β-D-glucopyranoside, (6)lyoniresinol 9′-O-β-D-glucopyranoside and (7)sinapaldehyde glucoside. Conclusions: Compounds (2), (4), (5), and (7) are isolated fromP.glabratumfor the first time and can be regarded as the chemical markers forP.Glabratumt'squality control．

chemical constituents; structural determination;Pittosporaceae;Pittosporumglabratum

國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題(2013BAI11B01); 貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目(20102217); 貴州省中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)研究開(kāi)發(fā)專(zhuān)項(xiàng)基金黔科合重G字(2013) 4001); 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院院基金(2012021號(hào))

時(shí)間：2015-05-21

http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20150521.1251.017.html

R284.1

A

1000-2707(2015)05-0447-03

**通信作者 E-mail:yylln815@126.com