系統(tǒng)性紅斑狼瘡合并血栓形成患者狼瘡抗凝物水平分析

饒 繪 李智山 趙建忠 童允潔 潤(rùn)袁敏，＊

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）患者存在血栓前狀態(tài)，許多臨床并發(fā)癥與血栓形成密切相關(guān)。血栓事件發(fā)生機(jī)制涉及除血管內(nèi)皮損傷、凝血、抗凝、纖溶系統(tǒng)平衡失調(diào)等多個(gè)血栓形成因素外，最近研究發(fā)現(xiàn)狼瘡抗凝物（LA）在SLE患者的檢出率較高，而且與血栓事件發(fā)生率相關(guān)［1］。本文檢測(cè)分析合并血栓形成SLE患者的LA水平變化。

1 資料與方法

1.1 對(duì)象和分組

2012－06－2015－04在本院風(fēng)濕免疫科住院的SLE患者78例（SLE組），其中男8例，女70例，年齡13－61歲，平均37±9歲，SLE診斷符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì)SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］。SLE組患者入院時(shí)病情均處于活動(dòng)期，住院期間使用甲基強(qiáng)的松龍或聯(lián)合應(yīng)用環(huán)磷酰胺沖擊治療。按是否合并血栓事件將SLE組分為SLE－血栓組（n＝8）和SLE－非血栓組（n＝70）兩個(gè)亞組。SLE－血栓組與SLE－非血栓組年齡、性別組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。其中SLE－血栓組8例（8／78）共發(fā)生11次血栓事件，血栓類型包括下肢深靜脈血栓（6／11）、上肢靜脈血栓（1／11）、缺血性腦卒中（2／11）、腦靜脈竇血栓形成（1／11）和胎盤血栓（1／11）。對(duì)照組為本院同期體檢健康者（n＝40），男6例，女34例，年齡14－60歲，平均36±8歲。對(duì)照組性別、年齡與SLE組相匹配，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 血樣采集和LA檢測(cè)

所有受檢者取血前一周均未使用抗凝藥物。清晨空腹取靜脈血2.7ml于枸櫞酸鈉抗凝管中，混勻后離心（1200g，10min）。為去除血小板，取離心后的上層血漿進(jìn)行二次離心（1200g，10min）［3］。將上層乏血小板血漿于－80℃冰箱保存、批檢。LA檢測(cè)采用改良稀釋蝰蛇毒磷脂時(shí)間法，試劑和質(zhì)控物購自美國(guó)沃芬醫(yī)療設(shè)備國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司（篩 選 試 劑 Lot：NO249101；確 診 試 劑 Lot：NO349312；陽性質(zhì)控Lot：NO440025；陰性質(zhì)控Lot：EO942625），按照試劑說明書，采用血凝分析儀（STAGO－Evolution，法國(guó)）檢測(cè)。篩選試驗(yàn)：分別取患者和同批對(duì)照血漿100μl，37℃預(yù)熱240s，加100μl篩選試劑（試劑主要成分為蝰蛇蛇毒和鈣離子混合液），記錄血漿凝固時(shí)間，計(jì)算篩選試驗(yàn)比值（＝患者凝固時(shí)間／對(duì)照凝固時(shí)間）；確診試驗(yàn)：分別取患者和同批對(duì)照血漿100μl，37℃ 預(yù)熱240s，加100μl確診試劑（試劑主要成分為蝰蛇蛇毒、鈣離子混合液和血小板溶解液），記錄血漿凝固時(shí)間，計(jì)算確診試驗(yàn)比值（＝患者凝固時(shí)間／對(duì)照凝固時(shí)間）。同批完成質(zhì)控并計(jì)算LA比值（＝篩選試驗(yàn)比值／確診試驗(yàn)比值）。

1.3 臨床血栓事件的確定

深靜脈血栓形成經(jīng)多普勒超聲掃描、血管造影證實(shí)；缺血性腦卒中經(jīng)CT及臨床表現(xiàn)證實(shí)；腦靜脈竇血栓形成經(jīng)頭顱磁共振成像聯(lián)合磁共振靜脈成像、全腦數(shù)字減影血管造影并結(jié)合臨床表現(xiàn)證實(shí)；胎盤血栓經(jīng)病理證實(shí)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 14.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，Shapiro－wilk檢驗(yàn)判定符合正態(tài)分布。兩組間LA比值比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

與對(duì)照組比較，SLE組LA比值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（1.04±0.07vs 1.30±0.36，t＝6.139，P＜0.01）。

與SLE－非血栓組比較，SLE－血栓組LA比值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（1.25±0.30vs 1.80±0.44，t＝－4.659，P＜0.01）。

3 討 論

SLE是一種多系統(tǒng)、多器官組織損害的慢性、自身免疫性疾病，發(fā)病機(jī)制涉及體內(nèi)免疫、激素和神經(jīng)調(diào)節(jié)失衡。血栓形成是SLE患者的重要表現(xiàn)之一。除因廣泛血管損傷導(dǎo)致凝血增強(qiáng)外，LA水平升高對(duì)SLE血栓形成可能也有一定的作用［4，5］。本文結(jié)果不僅顯示SLE患者LA比值明顯高于健康對(duì)照組（P＜0.05），而且SLE－血栓組LA比值顯著高于SLE－非血栓組（P＜0.05），提示LA在SLE血栓事件中起重要作用。

作為抗磷脂抗體之一，LA在體外試驗(yàn)中表現(xiàn)為延長(zhǎng)磷脂依賴的凝血過程，但在體內(nèi)，LA反而具有促血栓形成的作用。LA促進(jìn)SLE患者發(fā)生血栓事件的可能機(jī)制包括：（1）LA與血管內(nèi)皮細(xì)胞膜磷脂作用，干擾內(nèi)皮細(xì)胞釋放纖溶酶原激活物而抑制纖溶；（2）LA與血小板膜磷脂作用，干擾花生四烯酸代謝，促進(jìn)血小板活化；（3）LA可抑制與磷脂相關(guān)的內(nèi)源性抗凝物質(zhì)，使血液凝固性增強(qiáng)，如LA通過競(jìng)爭(zhēng)磷脂酰乙醇胺，抑制蛋白C途徑，引起獲得性活化蛋白C抵抗，使之減少或喪失對(duì)FⅤa和FⅧa的快速水解作用。LA的上述多途徑促血栓作用的持續(xù)存在，有助于處于血栓前狀態(tài)SLE患者的血栓形成［6］。因此臨床有必要對(duì)SLE患者進(jìn)行LA水平檢測(cè)，一方面用于評(píng)估患者血栓形成風(fēng)險(xiǎn)，另一方面還可對(duì)LA持續(xù)中、高滴度SLE患者使用羥氯喹的療效進(jìn)行監(jiān)測(cè)［7］，也能通過LA水平的升降變化預(yù)測(cè)治療后血栓的轉(zhuǎn)歸［8］，從而為SLE血栓事件的防治起到積極作用。