正交試驗(yàn)優(yōu)化鹽酸帕洛諾司瓊口腔崩解片的制備工藝

林鳳云，羅 易，楊潔芳△

（1.重慶醫(yī)藥高等專(zhuān)科學(xué)校藥學(xué)院，重慶401331；2.重慶市第九人民醫(yī)院藥劑科 400700）

鹽酸帕洛諾司瓊（palonosetron hydrochloride）是一種高效、高選擇性的新型5－HT3受體拮抗劑［1］，臨床常用于預(yù)防和緩解化療引起的惡心和嘔吐［2－4］。與其他5－HT3受體拮抗劑相比較，其治療劑量更小，作用時(shí)間更長(zhǎng)。口腔崩解片（簡(jiǎn)稱(chēng)口崩片），是指患者服用時(shí)不必飲水，在口腔內(nèi)少量唾液的作用下，即可在60s內(nèi)迅速崩解成細(xì)顆粒的新型固體速釋劑型。該劑型具有服用方便、起效快、生物利用度高的特點(diǎn)［5－6］。將鹽酸帕洛諾司瓊制備成口腔崩解片，可解決老人、兒童及吞咽困難患者的服藥問(wèn)題，避免了注射的痛苦，提高患者的用藥順應(yīng)性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料 目前口腔崩解片最常用的制備方法是粉末直接壓片法，采用具有較強(qiáng)可壓性及崩解性的優(yōu)化微晶纖維素（SMCC）為填充劑，和崩解性能較強(qiáng)的崩解劑，如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉（CCMC－Na）、低取代羥丙甲基纖維素（L－HPC）和交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）等，使片劑可在短時(shí)間內(nèi)崩解。

1.1.2 試劑與儀器 鹽酸帕洛諾司瓊對(duì)照品（重慶市藥品檢驗(yàn)所，含量99.9%），鹽酸帕洛諾司瓊原料藥（江蘇正大天晴藥業(yè)，含量99.5%，批號(hào)130901），L－HPC（美國(guó)ISP公司），PVPP（XL－10，美國(guó)ISP公司），CCMC－Na（美國(guó) FMC公司），SMCC（德國(guó)JRS公司），甘露醇（法國(guó)Roqustte公司），硬脂酸鎂（德國(guó)皮特脂化有限公司），微粉硅膠（德國(guó) Wacker公司），阿斯巴甜（美國(guó)Nutlasweet公司），甜菊苷（南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司），甲醇（色譜純，Merck）。

DV215CD型電子天平（美國(guó)奧豪斯公司），2DP30型單沖壓片機(jī)（上海天凡藥機(jī)制造廠），RCZ－8型藥物智能溶出試驗(yàn)儀（上海黃海藥檢儀器有限公司），78－XZ型片劑四用測(cè)定儀（上海黃海藥檢儀器廠），蘭博Series PC4060高效液相色譜儀（美國(guó)蘭博公司）。

1.2 方法

1.2.1 制備 按處方量稱(chēng)取已過(guò)80目篩的主藥與輔料，等量遞加法混合均勻后直接壓片。每片重約60.0mg（每片含鹽酸帕洛諾司瓊0.5mg）。由于暫沒(méi)有鹽酸帕洛諾司瓊固體制劑上市，參照注射劑規(guī)格和參考文獻(xiàn)［7］的規(guī)格。

1.2.2 崩解時(shí)限的測(cè)定 根據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局（CFDA）藥品審評(píng)中心發(fā)布的“口崩片的劑型特點(diǎn)和質(zhì)量控制會(huì)議紀(jì)要”要求［8－9］，在5mL玻璃小管中預(yù)先盛有37℃的蒸餾水2mL，任取片劑1片置于小玻璃管中，即刻計(jì)時(shí)，靜態(tài)條件下觀察片劑崩解情況，以完全崩解且混懸介質(zhì)全部通過(guò)710 μm（25目）篩網(wǎng)為準(zhǔn)，記錄崩解時(shí)限。連續(xù)測(cè)定6片。

1.2.3 單因素考察

1.2.3.1 崩解劑的考察及其用量 以SMCC和甘露醇為填充劑，按片劑處方每片加入10%崩解劑，以崩解時(shí)限為評(píng)價(jià)指標(biāo)，考察PVPP、CCMC－Na、L－HPC 3種崩解劑的優(yōu)劣。

1.2.3.2 矯味劑的考察 鹽酸帕洛諾司瓊味苦，為提高患者用藥順應(yīng)性，必須對(duì)其進(jìn)行矯味。初步選擇甜菊苷和阿斯巴甜作為矯味劑，按片重3%的比例將上述兩種矯味劑分別加入處方，其他組分不變，制備成口崩片備用。選擇6例22～32歲健康志愿者（男女各半），用水清潔口腔，口腔崩解片置于舌面，不飲水，不咀嚼，允許舌適當(dāng)上下運(yùn)動(dòng)，考察口崩片的口感，試驗(yàn)重復(fù)6次。

1.2.3.3 潤(rùn)滑劑的考察 選擇微粉硅膠和硬脂酸鎂為潤(rùn)滑劑，按處方量1%加入處方中，制備口崩片，考察崩解劑優(yōu)劣。

1.2.3.4 壓片硬度的考察 以L－HPC為崩解劑，甘露醇和SMCC為填充劑，硬脂酸鎂為潤(rùn)滑劑，甜菊苷為矯味劑，改變壓片壓力制備口崩片，使片劑硬度分別為2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 kg，測(cè)其崩解時(shí)限。

1.2.3.5 正交試驗(yàn)優(yōu)化處方 在單因素考察的基礎(chǔ)上，確定處方（60mg/片）由主藥鹽酸帕洛諾司瓊、崩解劑L－HPC、填充劑甘露醇和SMCC、潤(rùn)滑劑硬脂酸鎂、矯味劑甜菊苷等組成。按L9（33）正交設(shè)計(jì)表設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)方案，考察L－HPC（A）、甘露醇和SMCC比值（B）、硬脂酸鎂質(zhì)量百分比（C）對(duì)口腔崩解片質(zhì)量的影響，以崩解時(shí)間（T）為考察指標(biāo)。正交試驗(yàn)因素水平見(jiàn)表1。

表1 正交試驗(yàn)因素水平

1.2.3.6 最優(yōu)處方的驗(yàn)證 按照優(yōu)化后的處方制備鹽酸帕洛諾司瓊口崩片樣品3批，考察3批樣品的口感和崩解時(shí)間，每批重復(fù)6次。

1.2.4 含量測(cè)定 采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定藥物含量。

1.2.4.1 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性［10－12］色譜柱為 Diamonsil ODS－C18柱（200mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相為磷酸鹽緩沖液（pH3.1）－甲醇（60∶40），流速1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)241 nm，進(jìn)樣量為10μL，柱溫25℃，理論塔板數(shù)不低于3 000。

1.2.4.2 溶液的配制 對(duì)照品溶液：取鹽酸帕洛諾司瓊對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，用流動(dòng)相溶解成每1mL含50μg的鹽酸帕洛諾司瓊對(duì)照品溶液。樣品溶液：取本品20片（批號(hào)20140316－3），研成細(xì)粉，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于鹽酸帕洛諾司瓊5mg）置100mL容量瓶中，用流動(dòng)相超聲溶解并定量稀釋制成每1mL中含50μg的溶液，微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液作為對(duì)照品溶液，備用?？瞻纵o料溶液：按照制劑處方不加鹽酸帕洛諾司瓊，按供試品溶液配制方法配成空白輔料溶液。

1.2.4.3 專(zhuān)屬性實(shí)驗(yàn) 取空白液、對(duì)照品液和樣品液各進(jìn)樣10μL，記錄色譜圖。

1.2.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 取鹽酸帕洛諾司瓊對(duì)照品10.17 mg，精密稱(chēng)定，置100mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，作為貯備液。分別精密量取貯備液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0、5.0、8.0、10.0mL置10mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。各取10μL進(jìn)樣，記錄色譜圖，以質(zhì)量濃度（C，μg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積（A）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。

1.2.4.5 精密度試驗(yàn) 取已配制好的對(duì)照品溶液，按“1.2.4.1”項(xiàng)下條件測(cè)定，同一天連續(xù)進(jìn)樣6次、連續(xù)6d，每天測(cè)定含量，考察日內(nèi)、日間精密度。

1.2.4.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、12、24h進(jìn)樣測(cè)定，考察穩(wěn)定性。

1.2.4.7 回收率試驗(yàn) 精密稱(chēng)取已知含量的鹽酸帕洛諾司瓊口腔崩解片粉末（批號(hào)20140316－3），共9份，用流動(dòng)相配制成相當(dāng)于供試品溶液濃度80%，100%，120%的樣品各3份，按“1.2.4.1”項(xiàng)下條件測(cè)定，記錄峰面積。

1.2.4.8 含量均勻度測(cè)定 取樣品10片（批號(hào)20140316－3），每次將1片置于20mL容量瓶中，加入流動(dòng)相超聲溶解，稀釋至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，以續(xù)濾液為供試品。另取適量對(duì)照品，精密稱(chēng)定，同法配制成約50μg/mL的溶液作為對(duì)照品溶液。進(jìn)樣10μL，計(jì)算每片含量及平均含量。

1.2.4.9 溶出度測(cè)定 按《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄ⅩC第三法，以100mL水為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速100r/min，溫度（37.0±0.5）℃，每一樣品重復(fù)6次。分別在0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0、60.0min取樣1.5mL，0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，同時(shí)補(bǔ)充1.5mL新鮮介質(zhì)，取續(xù)濾液10μL進(jìn)樣，依“1.2.4.1”項(xiàng)下方法測(cè)定含量。

2 結(jié) 果

2.1 單因素考察

2.1.1 崩解劑的考察及其用量 按片劑處方每片加入10%崩解劑時(shí)，PVPP、CCMC－Na、L－HPC 3種口腔崩解片的崩解時(shí)間分別為25、18、14s，L－HPC最優(yōu)，且不易吸濕。

2.1.2 矯味劑的考察 口感考察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，阿斯巴甜、甜菊苷所制口崩片的口感分別為微苦、微甜。甜菊苷優(yōu)于阿斯巴甜。再將甜菊苷以片重1%、2%、3%、4%、5%的比例制備口崩片，考察所制口崩片的口感，分別為苦、微苦、微甜、過(guò)甜、過(guò)甜。故選擇片重比例3%的甜菊苷為矯味劑。

2.1.3 潤(rùn)滑劑的考察 硬脂酸鎂用量為 0.1%、0.5%、1.0%、2.0%、3.0%時(shí)的崩解時(shí)限分別為11、14、18、25、30s，硬脂酸鎂用量增加可延長(zhǎng)崩解時(shí)限，但均在30s內(nèi)，且用量為0.1%、0.5%時(shí)壓片出現(xiàn)粘沖。故硬脂酸鎂用量應(yīng)在1%～3%。

2.1.4 壓片硬度的考察 片劑硬度增大可延長(zhǎng)崩解時(shí)限，硬度大于3.5kg時(shí)崩解時(shí)限大于30s；當(dāng)硬度為1.0～2.5kg時(shí)，片劑出現(xiàn)松散或脆碎度不合格。最終選擇3.0kg為口崩片的硬度。

2.2 正交試驗(yàn)優(yōu)化處方 由表2結(jié)果可見(jiàn)，因素A即L－HPC對(duì)結(jié)果的影響有顯著差異，3種因素的主次從大到小順序?yàn)長(zhǎng)HPC、甘露醇與SMCC比例、硬脂酸鎂，最后確定的最佳工藝參數(shù)為：A3B3C2。即每片（60mg/片）中L－HPC用量為12%，甘露醇∶SMCC為2∶1，硬脂酸鎂為2%，3%的甜菊苷為矯味劑，硬度為3kg，每片含鹽酸帕洛諾司瓊0.5mg。

表2 L9（33）正交試驗(yàn)結(jié)果

2.3 最優(yōu)處方的驗(yàn)證 按照優(yōu)化后的處方制備3批樣品（批號(hào)分別為20140316－1、20140316－2、20140316－3）外觀均完整光潔、色澤均一，硬度為3kg，口感微甜，無(wú)沙礫感，能在12s內(nèi)完全崩解，表明所制口崩片的口感和崩解時(shí)限均符合相關(guān)質(zhì)量要求。按《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄檢查脆碎度減重、主藥含量均勻度均符合要求。

2.4 含量測(cè)定

2.4.1 專(zhuān)屬性試驗(yàn) 色譜圖顯示供試品溶液的主峰與對(duì)照溶液主峰的保留時(shí)間一致，在主成分出峰的位置沒(méi)有出現(xiàn)其他雜質(zhì)峰，說(shuō)明本測(cè)定方法符合要求，見(jiàn)圖1。

2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 線性回歸方程為：A＝23.37C＋2.85，r2＝0.999 9，鹽酸帕洛諾司瓊濃度與峰面積在1.017～101.7μg·mL－1范圍內(nèi)線性良好。

2.4.3 精密度試驗(yàn) 結(jié)果顯示日內(nèi)、日間RSD分別為0.67% 和0.88%，故本方法精密度良好。

圖1 鹽酸帕洛諾司瓊口腔崩解片中鹽酸帕洛諾司瓊色譜圖

2.4.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 峰面積的RSD為0.88%，說(shuō)明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.4.5 回收率試驗(yàn) 結(jié)果測(cè)得低、中、高3濃度的平均回收率分別為99.2%，99.9%，100.3%；RSD分別為0.77%，0.59%和0.68%。

2.4.6 含量均勻度測(cè)定 按《中國(guó)藥典》2010年版附錄ⅩE含量均勻度檢查法計(jì)算，A＋1.80S≤15.00。3批樣品含量均勻度的測(cè)定結(jié)果分別為6.65，7.21，5.32，均小于15.00，結(jié)果表明，此口腔崩解片含量均勻度符合要求。

2.4.7 溶出度測(cè)定 結(jié)果顯示口腔崩解片在30s時(shí)溶出鹽酸帕洛諾司瓊超過(guò)55%，在1min時(shí)溶出超過(guò)75%，在2min時(shí)就達(dá)到88%，4min已經(jīng)達(dá)到99%，釋放完全。表明鹽酸帕洛諾司瓊口腔崩解片溶出性能良好，結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖2 鹽酸帕洛諾司瓊口腔崩解片溶出曲線

3 討 論

口腔崩解片制法多樣［13］，直接壓片法不經(jīng)制粒、干燥等過(guò)程，工藝簡(jiǎn)單、成本低、應(yīng)用廣，但對(duì)輔料的可壓性、流動(dòng)性要求較高［14］。在本實(shí)驗(yàn)制備過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)SMCC流動(dòng)性好、可壓性好，但由于SMCC不溶于水，在口中易造成砂礫感；而甘露醇口感好，但其流動(dòng)性差，藥片易碎。本實(shí)驗(yàn)將兩者合用，均衡其口感和流動(dòng)性，大大改善了片劑的質(zhì)量。

本研究通過(guò)正交試驗(yàn)，以崩解時(shí)間為指標(biāo)，優(yōu)化篩選出的處方（60mg/片）：以12%L－HPC、甘露醇∶SMCC為2∶1、2%硬脂酸鎂、3%甜菊苷，每片重60mg，主藥含量0.5mg/片。按最優(yōu)處方制備的3批樣品均口感良好，崩解時(shí)限為12s，4 min溶出度為99%，均符合要求。但藥物體內(nèi)外崩解環(huán)境不同，崩解時(shí)限有一定的差異性，后期實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)對(duì)口崩片的體內(nèi)外崩解一致性做出評(píng)價(jià)。

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