高危人群中紅細(xì)胞Duffy抗原與HIV感染關(guān)系研究*

王勝藍(lán)，吳明瞬，魏祿川

(四川省涼山彝族自治州中心血站，四川西昌 615000)

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·論 著·

高危人群中紅細(xì)胞Duffy抗原與HIV感染關(guān)系研究*

王勝藍(lán)，吳明瞬，魏祿川

(四川省涼山彝族自治州中心血站，四川西昌 615000)

目的 探討紅細(xì)胞Duffy抗原和人類免疫缺陷病毒(HIV)感染的關(guān)系。方法 2008年在涼山州疾病預(yù)防控制中心和涼山州皮膚病性病防治站檢測(cè)的高危人群427例，根據(jù)HIV-1檢測(cè)篩查和確診試驗(yàn)結(jié)果分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，兩種試驗(yàn)結(jié)果不一致者不納入該研究。應(yīng)用血清學(xué)方法進(jìn)行Duffy血型表型鑒定，比較兩組Duffy血型表型分布及其與該地區(qū)已知報(bào)道的差異，以及不同Duffy血型表型的HIV感染率。結(jié)果 共322例高危人群進(jìn)行Duffy血型抗原鑒定，其中HIV感染156例(試驗(yàn)組)，未感染166例(對(duì)照組)，高危人群Duffy血型表型分布與同地區(qū)同民族人群比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。322例高危人群中Fy(a+b-)304例(94.41%)，其中試驗(yàn)組146例，對(duì)照組158例；Fy(a+b+)14例(4.35%)，其中試驗(yàn)組6例，對(duì)照組8例；Fy(a-b+)4例(1.24%)，均在試驗(yàn)組；兩組均未檢出Fy(a-b-)表型；兩組Duffy血型表型分布比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Fy(a-)與Fy(a+)高危人群，以及Fy(b+)與Fy(b-)高危人群HIV-1感染率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 流行病學(xué)調(diào)查尚不能認(rèn)為紅細(xì)胞Duffy 抗原與HIV感染相關(guān)，需進(jìn)一步的深入研究。

Duffy抗原/趨化因子受體； 人類免疫缺陷病毒； 血型； 高危人群

Duffy血型是人類紅細(xì)胞血型系統(tǒng)中較為重要的血型之一,其表現(xiàn)型由紅細(xì)胞表面攜帶的血型抗原蛋白決定，在新生兒溶血病、自身免疫性疾病、移植排斥反應(yīng)、炎癥及腫瘤等方面有著重要的臨床意義[1]。紅細(xì)胞Duffy抗原與人類免疫缺陷病毒(HIV)感染的關(guān)系目前尚存在爭(zhēng)議。本研究應(yīng)用血清學(xué)方法對(duì)HIV-1感染者和高危人群中非感染者進(jìn)行Duffy血型表型檢測(cè),由此調(diào)查紅細(xì)胞Duffy抗原和HIV感染是否相關(guān)?，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 2008年在涼山州疾病預(yù)防控制中心、涼山州皮膚病性病防治站檢測(cè)者中，經(jīng)病史詢問(wèn)有下列高危行為之一者視為HIV高危人群：靜脈吸毒、性工作者及多性伴侶[2]。共427例，其中男304例、女123例；年齡12～63歲，年齡中位數(shù)為26歲；均為彝族；互為性伴侶者26例，未見(jiàn)同性伴侶。所有研究對(duì)象均采集乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝全血5 mL，血樣均經(jīng)EDTA抗凝后離心，血漿部分用于HIV檢測(cè)，紅細(xì)胞用于Duffy表現(xiàn)型檢測(cè)。

1.2 儀器與試劑 微量移液器(上海百德公司，型號(hào)BI0HIT)；洗板機(jī)(奧地利安圖斯公司，型號(hào)Fluido)；酶標(biāo)儀(奧地利安圖斯公司，anthos 2010)；孵育箱(天津泰斯特儀器公司，型號(hào)IDH4000AB)；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑(上海梅里埃生物工程有限公司，批號(hào)20071205)；全自動(dòng)免疫印跡儀(美國(guó)MP公司，型號(hào)AutoBlot System 20)；免疫印跡試劑(上海英旻泰生物技術(shù)有限公司，批號(hào)IMT0712002)；血清學(xué)離心機(jī)(日本KuBoTa公司，型號(hào)KA-2200)；水浴箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠制造，型號(hào)HHW21600s)；IgG型抗-Fya、抗-Fyb單克隆試劑(美國(guó)Immucor公司，批號(hào)FYA64H-1、6061002280、FYB70H-1、6021004300)；抗球蛋白血清(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院輸血研究所，批號(hào)20091012)。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法

1.3.1 HIV-1檢測(cè)和Duffy血型表型鑒定方法 HIV-1檢測(cè)篩查試驗(yàn)為固相ELISA，確認(rèn)試驗(yàn)為免疫印跡法(WB)；Duffy血型表型鑒定使用IgG型抗-Fya和抗-Fyb，采用間接抗球蛋白法，根據(jù)抗原抗體反應(yīng)可以鑒定出4種紅細(xì)胞表面抗原表型：Fy(a+b-)、Fy(a+b+)、Fy(a-b+)、Fy(a-b-)。所有試驗(yàn)方法和步驟參考試劑說(shuō)明書(shū)。表型分布結(jié)果與本課題前期研究結(jié)果[3]、本地區(qū)彝族人群Duffy血型表型分布[4]進(jìn)行比較。

1.3.2 研究分組 HIV-1檢測(cè)篩查和確認(rèn)試驗(yàn)均為陽(yáng)性則視為感染者納入試驗(yàn)組；篩查試驗(yàn)陰性視為未感染者納入對(duì)照組；篩查和確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果不一致者未納入本研究；為防止窗口期檢測(cè)結(jié)果干擾研究，對(duì)照組于3個(gè)月后再次抽取標(biāo)本進(jìn)行HIV檢測(cè)，并根據(jù)結(jié)果重新進(jìn)行分組。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HIV篩查、確認(rèn)試驗(yàn)及分組結(jié)果 427例高危人群中HIV-1篩查試驗(yàn)陽(yáng)性者261例，其中經(jīng)確認(rèn)試驗(yàn)重復(fù)陽(yáng)性者156例，篩查試驗(yàn)陽(yáng)性而確認(rèn)試驗(yàn)陰性者105例未納入本研究，篩查試驗(yàn)陰性者166例經(jīng)3個(gè)月后復(fù)查均仍為陰性。根據(jù)分組方法，試驗(yàn)組156例(48.45%)，對(duì)照組166例(51.55%)，共322例進(jìn)行Duffy血型抗原鑒定。

2.2 血清學(xué)Duffy血型抗原鑒定結(jié)果 Fy(a+b-)者304例(94.41%)，F(xiàn)y(a+b+)者14例(4.35%)，F(xiàn)y(a-b+)者4例(1.24%)，未檢出Fy(a-b-)表型，表型分布結(jié)果與本課題前期研究結(jié)果比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.80，P>0.05),同時(shí)與本地區(qū)彝族人群Duffy血型表型分布比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.12,P>0.05)。

2.3 Duffy血型表型與HIV-1感染率 322例高危人群中，確認(rèn)HIV-1感染者156例，每種Duffy血型表型的HIV-1感染者和未感染者例數(shù)和百分比，見(jiàn)表1。試驗(yàn)組與對(duì)照組Duffy血型表型比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.45，P>0.05)。按照Fya抗原的狀態(tài)分為Fy(a+)和Fy(a-)組，F(xiàn)y(a-)組HIV-1感染率為100.00%(4/4)，F(xiàn)y(a+)組為47.80%(152/318)，F(xiàn)y(a-)組比Fy(a+)組的HIV-1感染率高,但組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.47,P>0.05)；按照Fyb抗原的狀態(tài)分為Fy(b+)和Fy(b-)組，F(xiàn)y(b-)組HIV-1感染率為48.03%(146/304)，F(xiàn)y(b+)組的HIV-1感染率為55.56%(10/18)，F(xiàn)y(b+)組比Fy(b-)組的HIV-1感染率高,但組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.39,P>0.05)。

表1 各Duffy血型表型HIV-1感染率[n(%)]

3 討 論

近年來(lái)Duffy抗原在HIV-1感染過(guò)程中的作用引起了研究者的關(guān)注[5]。He等[6]發(fā)現(xiàn)個(gè)體對(duì)HIV-1的易感性與紅細(xì)胞Duffy抗原的表達(dá)相關(guān)，HIV-1通過(guò)Duffy抗原與紅細(xì)胞結(jié)合，已經(jīng)感染HIV的個(gè)體其Duffy抗原的缺失可減緩疾病的發(fā)展進(jìn)程。而B(niǎo)eck等[7]研究表明，紅細(xì)胞Duffy抗原陽(yáng)性或陰性的個(gè)體，其紅細(xì)胞在體外均可選擇性地與富集感染性HIV-1病毒顆粒結(jié)合，因此推測(cè)紅細(xì)胞可能并非通過(guò)Duffy抗原與HIV-1結(jié)合。所以,盡管Duffy抗原/趨化因子受體(DARC)對(duì)HIV-1感染性和疾病進(jìn)展的影響在理論上是完全可能的,但實(shí)際情況仍有待于進(jìn)一步的研究[8]。流行病學(xué)研究表明，不同民族、地區(qū)的Duffy血型系統(tǒng)分布不同，本研究旨在流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上探討Duffy抗原是否與HIV-1感染有關(guān)。結(jié)果顯示：高危人群的Duffy血型抗原分布與相同地區(qū)同一民族比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，高危人群中HIV-1感染者與未感染者的Duffy血型表型分布比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

Duffy抗原和DARC是同一物質(zhì)[9]。Duffy血型不同的表現(xiàn)型，決定其紅細(xì)胞表面是否表達(dá)DARC及其表達(dá)量。Fy(a-b-)的個(gè)體紅細(xì)胞表面沒(méi)有DARC，而其他表現(xiàn)型個(gè)體的紅細(xì)胞膜表面具有不同的DARC配體結(jié)合力和DARC結(jié)合數(shù)量。Fy(a+)個(gè)體比Fy(a-)個(gè)體表達(dá)更多的DARC[10],Fy(a+)個(gè)體很可能比Fy(a-)個(gè)體具有更強(qiáng)的趨化因子結(jié)合能力[9]，這似乎可以推論，就DARC而言Fya-個(gè)體更不容易感染HIV-1。但在本研究中，HIV-1感染者中發(fā)現(xiàn)了4例Fy(a-)個(gè)體，未感染者中卻未發(fā)現(xiàn)，雖然比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，尚不能據(jù)此認(rèn)為DARC的數(shù)量與HIV-1感染無(wú)關(guān)，但這至少為紅細(xì)胞Duffy 抗原與HIV感染的相關(guān)性提供了相反的證據(jù)。

綜上所述，本研究顯示流行病學(xué)調(diào)查尚不能認(rèn)為紅細(xì)胞Duffy抗原與HIV感染相關(guān)。這與文獻(xiàn)[6]的結(jié)論相反，而與文獻(xiàn)[7，11]的研究結(jié)果相似。造成結(jié)論不一致的原因可能與試驗(yàn)設(shè)計(jì)、樣本量大小、試驗(yàn)方法的差異等因素有關(guān)。

(本研究得到中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院輸血研究所宋寧教授、涼山州疾病預(yù)防控制中心衛(wèi)大英教授、涼山州皮膚病性病防治站朱國(guó)平主任的大力支持，特此感謝！)

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Research on relationship between erythrocyte Duffy antigen and HIV infection in high-risk group*

WANGSheng-Lan,WUMing-Shun,WEILu-Chuan

(CentralBloodStationsofLiangshanAutonomousPrefecture,Xichang,Sichuan615000,China)

Objective To investigate the relationship between erythrocyte Duffy antigen and human immunodeficiency virus(HIV) infection.Methods 427 cases of high-risk group in the Liangshan Prefecture Center for Disease Control and Prevention and the Liangshan Prefecture Satation for Dermatosis and Venereal Disease Prevention and Treatment during 2008 were divided into experimental group and control group according to the results of screening and confirming test，and cases with inconsistent results were not enrolled in this study.The serological method was adopted to identify the Duffy blood group phenotype.The difference in the distribution of Duffy blood group phenotype between the two groups,the differences of the distribution between this report and other published reports in this area,and HIV infection rate in different Duffy blood group phenotypes were compared.Results A total of 322 cases were carried out Duffy blood group antigen identification，156 cases were HIV infection(experimental group)and 166 cases were non-HIV infection(control group). The distribution of the Duffy blood group phenotype had no statistical difference between the high-risk population and the population of the same nationality in the same area (P>0.05).Among 322 high-risk cases,304 cases (94.41%) were the phenotype Fy (a+b-),in which the experimental group had 146 cases and the control group had 158 cases;14 cases(4.35%) were the phenotype Fy(a+b+),in which the experimental group had 6 cases and the control group had 8 case;only 4 cases (1.24%) were phenotype Fy(a-b+),which all were in the experimental group;no case of phenotype Fy(a-b-) was detected in the two groups;the distribution of the Duffy blood group phenotype had no statistical difference between the two groups(P>0.05).The HIV infection rate in the high-risk population had no statistical difference between the Fy(a-) and Fy(a+) high-risk populations and between the Fy(b+) and Fy(b-) high-risk populations(P>0.05).Conclusion It may not be considered from the epidemiological investigation that the erythrocyte Duffy antigen is related with the HIV infection,which needs to conduct further deep research.

Duffy antigen/receptor for chemokines； human immunodeficiency virus； blood group； high risk group

四川省衛(wèi)生廳科研項(xiàng)目(130525)；四川省涼山州科技局科研項(xiàng)目(12YYJS0013)。

王勝藍(lán)，男，本科，副主任檢驗(yàn)師，主要從事輸血檢驗(yàn)研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.05.002

A

1672-9455(2015)05-0580-02

2014-11-10

2014-12-10)