阿維菌素在辣椒中的殘留動態(tài)研究

徐 瓊，聶 嬋，熊云剛，鄒 焰

(1遵義醫(yī)學院，貴州遵義 563000;2貴州航天醫(yī)院，貴州遵義 563000)

阿維菌素以其穩(wěn)定、經(jīng)濟、農(nóng)畜兩用等一系列優(yōu)點而在市場上流行，商家為了追逐經(jīng)濟利益，導致不同濃度、不同劑型的阿維菌素在市場上頻繁出現(xiàn)。姜艷杰［1］研究得出，1.8%的阿維菌素乳油以其指標的穩(wěn)定性、安全性等性能為最佳產(chǎn)品配比。在對阿維菌素的研究中，關(guān)于其在農(nóng)作物上的殘留動態(tài)研究已有不少［2-4］，但這些研究中多以白菜、甘藍等農(nóng)作物以及果樹最多。貴州省因地域優(yōu)勢而盛產(chǎn)辣椒［5］，貴州空氣的濕度也相對較大，各種辣椒已成為貴州人們餐桌上的必備食物之一，但目前還未見相關(guān)的文獻對阿維菌素在辣椒上的殘留進行探索。為了研究阿維菌素在辣椒中的消解規(guī)律，于2013年在貴州省遵義地區(qū)進行了消解動態(tài)實驗，旨在為阿維菌素的登記及安全使用標準的制訂提供科學依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗作物 新鮮辣椒。

1.1.2 試驗試劑 1.8%阿維菌素乳油(河北威遠生物化工);已腈(色譜純);甲醇(色譜純);阿維菌素標準品(B1a 含量為91.2 %) (上海市農(nóng)藥研究所);無水硫酸鎂、檸檬酸鈉、硫酸鎂、及石墨化炭黑粉末(GCB)、C18E、PSA 粉末。

1.1.3 試驗儀器 LC-20A 高效液相色譜儀(日本島津公司);RE52-AA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SHZ-Ⅲ型循環(huán)水真空泵(上海亞榮生化儀器廠);離心機;食品粉碎機;YP402N 電子天平。

1.2 試驗方法

1.2.1 配制標準溶液

阿維菌素標準儲備液 (100μg/mL)，準確稱取0.0105g 阿維菌素標準品 (精確到0.001 g)至100 mL 容量瓶中，用甲醇定容。

1.2.2 田間試驗

試驗于2013年7月13 日在貴州省遵義高坪蔬菜實驗基地進行。試驗區(qū)分別設(shè)空白對照區(qū)、低劑量處理區(qū)、2 倍劑量處理區(qū)和4 倍劑量處理區(qū)，各處理區(qū)分別按不噴灑農(nóng)藥、噴灑推薦使用劑量的最高值、推薦使用劑量最高值的2 倍、4 倍進行常規(guī)兌水噴霧，施藥器械為噴霧器。施藥時間在當天早上10 點以前進行，試驗期間除第三、四天下雨外，其余時候天氣晴朗，日平均氣溫為29～32℃，濕度為33%～45%。

1.2.3 消解動態(tài)試驗

按一次施藥多次取樣的方法進行，試驗分別設(shè)3個處理和1 個空白對照，處理的施藥劑量為推薦使用劑量、2 倍推薦使用劑量和4 倍推薦使用劑量，施藥次數(shù)為1 次。在辣椒成長期(辣椒長至8cm 以上)，把阿維菌素分別按不同濃度兌水進行稀釋，對辣椒(包括葉子、辣椒)進行均勻周到的噴霧。于施藥后1、3、8h 和2、3、4d 在每個濃度區(qū)域隨機采集辣椒樣品，每小區(qū)視植株大小每次每小區(qū)采集18—22 株生長正常的辣椒植株，用聚乙烯袋密封后放在冰袋上運回實驗室待制備，分別按照《農(nóng)藥殘留試驗準則》［6］對辣椒進行采樣和樣品處理。

1.3 分析方法

1.3.1 樣品的提取

將辣椒樣品摘去根部，去除明顯萎蔫的部分，用剪刀將其剪小后經(jīng)食品加工機粉碎混勻，準確稱取混勻后的辣椒菜樣本10.00g，將其置于50mL 的離心管中，然后加入15mL 乙腈溶液作為萃取溶劑，蓋緊蓋子，搖晃1min左右，再加入萃取鹽無水硫酸鎂6.0 g 、1g 檸檬酸鈉和1g NaCl 均質(zhì)提取，然后以4 000 r/min 離心5 min，使農(nóng)藥進入有機層。用移液槍準確吸取15mL 上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用1.5mL 乙腈溶液充分溶解殘渣并將其移至離心管中，待凈化。

1.3.2 樣品的凈化

稱取適量的石墨化炭黑粉末(GCB)、PSA 粉末、C18E 和MgSO4移入上述1.5mL 溶解液中，以6 000 r/min 離心2min 以達到去除樣品中主要干擾物的作用，將離心后取其上清液，放入2mL 離心管中，用一次性注射器取出至0.45μm 濾膜過濾，濾液待上機測定。

1.3.3 色譜條件

色譜柱C18 為不銹鋼柱(250 ×4.6mm，5um);阿維菌素:檢測波長:245nm;流動相:V (甲醇)∶V(水)=85∶15;進樣量20μL;流速1.0mL/min;柱溫:30 ℃;保留時間約為25min (圖1)。

圖1 阿維菌素標準品色譜圖

2 結(jié)果與分析

2.1 阿維菌素標準曲線的繪制

分別配制濃度為0.5、1、2、5 和10μg/mL 的標準溶液。在上述色譜條件下進樣20μL，以峰面積為縱坐標、溶液質(zhì)量濃度為橫坐標繪制標準工作曲線，其阿維菌素的回歸方程為:y=38 819x+8 239.4，R2=0.999 2(圖2)。

2.2 添加回收率試驗

在對照組空白辣椒中添加適量的阿維菌素標準溶液，按上述方法進行提取凈化和高效液相色譜分析，測定樣品中阿維菌素的回收率。從表1 中可以看出，在辣椒中不同濃度阿維菌素的添加回收率為86.88%～90.73%，相對標準偏差(RSD)為2.53%～4.20%，滿足農(nóng)藥殘留分析方法測試的要求。

圖2 阿維菌素的標準曲線

表1 阿維菌素在辣椒中的添加回收率

2.3 阿維菌素在辣椒中的消解

在辣椒中推薦劑量阿維菌素的初始殘留量為37.813μg/kg，推薦劑量的2 倍的初始殘留量為84.850μg/kg，推薦劑量的4 倍的初始殘留量為173.616μg/kg，可以看出阿維菌素在辣椒上的初始殘留量都比較低，可能是因為施藥時辣椒枝葉茂盛，絕大多數(shù)農(nóng)藥都噴灑到辣椒葉上而使得辣椒表面的量有所減少，也有可能是因為使用的阿維菌素是乳油型的，乳油型的光解較其它劑型的迅速，消解也較快。而從不同濃度的消解動態(tài)趨勢上還可以看出隨著施藥后采樣時間的延長，阿維菌素在辣椒中的殘留量逐漸減少，不同濃度的阿維菌素在辣椒中的降解過程都是先快后慢的，阿維菌素在辣椒上的殘留量與施藥后的取樣時間之間呈較明顯的負指數(shù)函數(shù)關(guān)系，它們的消解基本符合一級反應動力學方程降解模型，用一級化學反應動力學方程表示如表2，得到相關(guān)系數(shù)(R2)范圍為0.966～0.995，由此可以得到不同濃度的阿維菌素在辣椒中的半衰期分別為3.79d、4.44d、4.30d，可以看出阿維菌素屬于易降解的農(nóng)藥［7］。

表2 阿維菌素在辣椒中的一級消解動力學方程

3 結(jié)論

阿維菌素在農(nóng)藥中以其農(nóng)畜兩用的生物特點成為現(xiàn)階段發(fā)展最快的農(nóng)藥之一。隨著中國阿維菌素科研攻關(guān)目標的不斷完成，阿維菌素生產(chǎn)趨于穩(wěn)定，生產(chǎn)成本達到很低的水平，可以登記在更廣泛的作物上［8］。雖然它穩(wěn)定、劑量低，但按WHO 五級分類標準，阿維菌素類仍屬高毒化合物，所以本試驗以阿維菌素為藥劑進行研究。我國尚未制定阿維菌素具體在辣椒中的最高殘留限量(MRL)，但我國農(nóng)業(yè)部已規(guī)定阿維菌素在葉菜中的最高殘留限量為50μg/kg［9-11］，按照這個標準來看，辣椒在經(jīng)過7 d 的安全間隔期只有在噴施4 倍推薦使用劑量的阿維菌素殘留量造成了超標，因此按照正常的使用劑量7 d 安全間隔期管理，阿菌維素在辣椒上的使用是安全的。

［1］姜艷杰.1.8%阿維菌素乳油新配方的研究［J］.安徽化工，2011，37(1):61-62

［2］HUANG Yu-nan，et al.Study on residue trends of imidacloprid in pear fruit ［J］.Journal of Fruit Science，2010，27(3):453-45.

［3］張少華，皇甫偉國，何新華，等.高效液相色譜法檢測蔥中阿維菌素的殘留量［J］.農(nóng)藥，2006，45(4):263-264.

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［5］詹永發(fā)，楊紆，余文中.遵義朝天椒高產(chǎn)配套栽培技術(shù)［J］.貴州農(nóng)業(yè)科學，2005，33(5):94-95.

［6］農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.農(nóng)業(yè)部行業(yè)標準NY/T 788-2004《農(nóng)藥殘留試驗準則》［S］.北京:中國標準出版社，2004.

［7］林偉宣.各國食品中農(nóng)藥獸藥殘留限量規(guī)定［M］.大連:大連海事大學出版社，2002.

［8］陳瓊，陳榮華，聶嬋，等.阿維菌素的發(fā)展與應用概況［J］.中國食物與營養(yǎng)，2014，20(9):30-32.

［9］農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.農(nóng)藥合理使用準則實用手冊［M］.北京:中國標準出版社，2002:1-2.

［10］Ministry of Agriculture of the People's Repubfie of China(中華人民共和國農(nóng)業(yè)部).農(nóng)藥最大殘留限量:阿維菌素，葉菜類(NYl500.1.1-2007)［S］.2008.

［11］NZ Food Safety Authority.Pesticide MRL Database ［S］.2003.