籠養(yǎng)褐馬雞繁殖期行為與其糞便中性激素的變化1)

張文博 隋金玲 齊磊 胡德夫 李世廣

(北京林業(yè)大學(xué)，北京，100083) (山西龐泉溝國家級自然保護(hù)區(qū)管理局)

責(zé)任編輯:潘 華。

褐馬雞(Crossoptilon mantchuricum)是鳥綱(Aves)，雞形目(Galliformes)，雉科(Phasianidae)，馬雞屬(Crossoptilon)的一種珍稀瀕危鳥類，為中國的特有種，國家I 級重點(diǎn)保護(hù)動物。世界自然保護(hù)聯(lián)盟(IUCN)將其列為瀕危物種(EN)，同時褐馬雞也是《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》(CITES)附錄I物種。歷史上，褐馬雞曾廣泛分布于我國的大部分地區(qū)，而到20 世紀(jì)70年代，由于亂砍濫伐，人為捕殺等多方面原因，其棲息地遭到嚴(yán)重破壞，種群數(shù)量急劇下降［1］。目前，僅分布于山西呂梁山、陜西黃龍山、河北小五臺山和北京東靈山的部分地區(qū)［2］。

近年來，我國的學(xué)者為了保護(hù)褐馬雞這一珍稀瀕危物種已在多個方向進(jìn)行研究，如種群數(shù)量［3－4］，地理分布［5］，棲息地選擇［6］，繁殖生理生態(tài)［7－8］，遺傳多樣性［9－10］，寄生蟲與疾?。?1－12］等。這些研究都為褐馬雞的保護(hù)工作做出了巨大的貢獻(xiàn)。

我國的學(xué)者針對鳥類行為學(xué)進(jìn)行的研究中，大部分工作主要是繁殖行為和社群行為的觀察或食性分析、生活史描述等［13］，褐馬雞這一物種也是如此，盧豹［14］、劉煥金［15］等曾在野外觀察褐馬雞的生物學(xué)特性;戴強(qiáng)等［16－17］研究籠養(yǎng)褐馬雞非繁殖期的社群等級與打斗行為;劉如筍［18］、尹祚華［19］、龐新博［20］等人針對籠養(yǎng)褐馬雞的繁殖行為進(jìn)行觀察并對雛鳥的生長發(fā)育做了簡述。近些年來，用非損傷取樣法(以糞便、尿液、毛發(fā)等為樣品)提取測定類固醇激素在鳥類中的研究正逐漸發(fā)揮重要的作用，這種對動物產(chǎn)生較少影響的研究方法為鳥類的人工繁育和保護(hù)工作提供了較好的指導(dǎo)作用［21］。

本研究重點(diǎn)分析籠養(yǎng)褐馬雞群體進(jìn)入繁殖期各種行為上的變化及影響因素，并研究糞便中性激素的變化與行為的關(guān)系，探討利用糞便內(nèi)的激素變化檢測褐馬雞的的繁殖活動的可行性，為這一物種的重引入工作提供一些有效的建議。

1 研究區(qū)概況

龐泉溝國家級自然保護(hù)區(qū)位于呂梁山脈中段，海拔1 600～2 831 m，年平均氣溫4 ℃，年降水量830.8 mm，屬暖溫帶半濕潤大陸性季風(fēng)氣候［22］。褐馬雞人工飼養(yǎng)籠位于保護(hù)區(qū)山腳下，人工飼養(yǎng)籠面積約為2 000 m2(長100 m，寬20 m，高4～5 m)，30%有塑料頂棚，70%無頂，籠內(nèi)種植一些人工植被為褐馬雞提供隱蔽環(huán)境。

2 材料與方法

龐泉溝自然保護(hù)區(qū)人工繁育的褐馬雞(♂13只，♀10 只)為研究對象，飼養(yǎng)籠內(nèi)部設(shè)置了食盆和水槽，并搭建了8 個人工松枝巢為其提供營巢產(chǎn)卵的場所(見圖1)。主要飼喂玉米，每3～5 d 添加一次蛋雞用配合飼料，每5～7 d 補(bǔ)充一次青飼料(蘿卜、白菜等)。

圖1 人工飼養(yǎng)籠內(nèi)設(shè)施

個體識別方法:褐馬雞用彩環(huán)標(biāo)識(黃、紫、橘紅、綠、草綠5 種顏色排列組合)，因褐馬雞雌雄外表相似，為便于觀察，每個雄性個體至少標(biāo)記一個綠環(huán)。

行為觀察方法:行為觀察采用瞬時掃描取樣法［23］和行為描述法［24］相結(jié)合，2012年3月5日至3月9日為預(yù)觀察期，2012年3月10日起至5月28日為正式觀察期，每個觀察日隨機(jī)抽取8 h 進(jìn)行觀察，依據(jù)每種行為產(chǎn)生的功能、動作或姿態(tài)進(jìn)行分類和描述，初步制定出褐馬雞行為譜，便于每位觀察者在行為譜的指導(dǎo)下，對繁殖后期褐馬雞的行為進(jìn)行觀察記錄。為了量化(時空分配)和統(tǒng)計分析，在行為記錄方式上，以每種行為持續(xù)的時間來記錄，少數(shù)瞬間行為則按出現(xiàn)的次數(shù)來記錄。

糞便中睪酮的提取與測定:在不干擾褐馬雞行為的情況下采集糞便樣品。糞便樣品中激素的提取和測定參照了Goymann［25］和Touma［26］等人所提出的方法，并結(jié)合實(shí)驗室實(shí)際條件進(jìn)行改良。使用有機(jī)溶劑(乙醇)提取褐馬雞糞便中的睪酮，并用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進(jìn)行測定，測定所用試劑為CalBioreagent 公司所生產(chǎn)。

所有數(shù)據(jù)均利用Microsoft Excel 和SPSS17.0 進(jìn)行整理分析，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

3 結(jié)果與分析

3.1 褐馬雞行為分類及其特征

經(jīng)過觀察，繁殖期籠養(yǎng)褐馬雞的日常行為主要有覓食、游走、靜棲、理羽、沙浴、警戒和繁殖，每種行為的具體表現(xiàn)見表1。

表1 褐馬雞行為分類及描述

3.2 繁殖期各種行為的比例

從表2可以看出，進(jìn)入繁殖期的褐馬雞無論是雄性還是雌性，覓食和靜棲兩種行為都占有很大比例，雄性褐馬雞的警戒行為所占比例也比較大。雄性和雌性的沙浴行為所占比例異常偏低。沙浴行為是雉類的常見行為［27］，為何籠養(yǎng)條件下沙浴行為會減少還有待進(jìn)一步研究。

表2 繁殖期籠養(yǎng)褐馬雞各行為所占百分比 %

3.3 雄性個體間行為差異

3.3.1 發(fā)情配對狀況和交配行為的差異

實(shí)驗過程中未見到褐馬雞有明顯的分群現(xiàn)象，未配對的個體始終混群活動。而配對個體往往離群單獨(dú)活動。不同個體進(jìn)入發(fā)情期的時間并不一致，配對持續(xù)時間也各不相同，具體情況如表3所示。從表3可以看出，發(fā)情配對開始時間比較早的雄性個體多數(shù)配偶固定，而且持續(xù)時間也較長(14 號和6 號個體例外，其進(jìn)入發(fā)情的時間較晚，但配偶固定)。發(fā)情比較晚的個體配對時間持續(xù)較短，且配偶不固定，但可以觀察到較多的交配行為次數(shù)。

不同褐馬雞個體其交配方式不同，配偶固定的個體在交配時，采取方式a，而配偶不固定的雄性在交配時，采取方式b(表1)。將配偶固定的雄性個體與配偶不固定的個體同一時期的行為數(shù)據(jù)進(jìn)行獨(dú)立樣本T 檢驗，可知每種行為的差異均不顯著(P＞0.05)，結(jié)果如表4所示。

表3 目標(biāo)個體配對與交配情況記錄

表4 求偶配對期間雄性褐馬雞間各行為所占百分比

3.3.2 領(lǐng)域行為及其與其他行為的關(guān)系

雄性褐馬雞之中僅觀察到11 號、18 號和19 號有較強(qiáng)的占區(qū)現(xiàn)象和保衛(wèi)領(lǐng)域行為，(領(lǐng)域范圍見圖1)。對進(jìn)入其領(lǐng)域的其他褐馬雞進(jìn)行驅(qū)趕。其他雄性個體占區(qū)行為不明顯，通常在飼養(yǎng)籠中隨意游走或靜棲。

對領(lǐng)域行為不同的褐馬雞同一時期內(nèi)的行為數(shù)據(jù)進(jìn)行獨(dú)立樣本T 檢驗，兩組雄性褐馬雞在靜棲(P=0.032＜0.05)和警戒(P=0.008＜0.05)兩種行為上存在顯著差異(表5)。說明占據(jù)領(lǐng)地的雄性褐馬雞靜棲行為會顯著減少而警戒行為顯著增多。

表5 領(lǐng)域大小對雄性褐馬雞行為的影響

3.3.3 糞便中睪酮濃度值測量結(jié)果

經(jīng)過測定，1－4 組褐馬雞糞便樣品中的睪酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為(319.76±42.01)、(390.51±53.88)、(507.98±6.65)、(296.40±24.42)ng·g－1。通過獨(dú)立樣本T 檢驗可以看出配偶不固定的雄性褐馬雞睪酮值顯著高于配偶固定的個體(P=0.018＜0.05)，而領(lǐng)域行為強(qiáng)的雄性褐馬雞睪酮值極顯著高于領(lǐng)域行為弱的個體(P=0.005＜0.01)。

4 結(jié)論與討論

籠養(yǎng)條件下的雄性褐馬雞繁殖期內(nèi)會出現(xiàn)較多的警戒行為，并且領(lǐng)域行為較強(qiáng)的雄性警戒行為會顯著多于其他雄性。從其他雉科鳥類的人工養(yǎng)殖經(jīng)驗上來看，攻擊性強(qiáng)、占區(qū)明顯的個體會干擾其他雄性的正常繁殖［28］，這種現(xiàn)象在本研究中也可以觀察到。本研究中觀察到的沙浴行為比較少，根據(jù)李宏群［27］等人對野生褐馬雞沙浴地選擇的研究可知，野生褐馬雞沙浴時對天敵和人畜的警惕性有所下降，且其本身的飛翔能力不強(qiáng)，故傾向于選擇草本蓋度＞30%，高度在10 cm 以上，水源距離在500 m 以上，隱蔽級＜10%的闊葉林作為沙浴地。因此，本研究中褐馬雞沙浴較少的原因除了可能是天氣寒冷、冰雪較多以外，還有一種比較可能的原因是飼養(yǎng)籠空間有限，缺少褐馬雞適宜沙浴的環(huán)境，雖然籠中有一部分的地面沙土比較多，但滿足其他適宜條件的設(shè)施則比較少。不過在觀察中注意到褐馬雞沙浴時警惕性有所下降。

本研究發(fā)現(xiàn)籠養(yǎng)褐馬雞有兩種不同的交配方式，這在以往的研究中未見報道，可以大致推測，籠養(yǎng)條件下的褐馬雞存在兩種不同的繁殖策略:有的雄性個體仍然為單配制，交配時也采取正常的方式，有的雄性個體并不選擇固定的配偶，而是采取隨機(jī)的強(qiáng)行交配的方式。兩種雄性個體除了交配方式不同外在行為上并沒有顯著差異。但是，無論哪種交配方式的持續(xù)時間都與野生褐馬雞的1 min 以上相比要短得多［29］。可能籠養(yǎng)環(huán)境在一定程度上影響了褐馬雞的繁殖行為。因此，在褐馬雞的人工繁育工作中，應(yīng)為配對個體提供良好的繁殖環(huán)境，如能每個繁殖對單獨(dú)隔離飼養(yǎng)最佳，繁殖過程中應(yīng)盡可能減少外界的干擾。

通過對雄性褐馬雞體內(nèi)睪酮值得比較可知，隨機(jī)擇偶和領(lǐng)域行為較強(qiáng)的褐馬雞體內(nèi)睪酮水平都顯著高于其他個體，雖然配偶不固定的個體在行為上沒有顯著差異，但體內(nèi)睪酮水平卻比配偶固定的個體高。因此，可以通過監(jiān)測雄性褐馬雞糞便中的睪酮變化并結(jié)合行為觀察，在褐馬雞進(jìn)入繁殖期時及時的篩選出這兩種雄性褐馬雞，一方面，進(jìn)行重引入工作時需要選擇領(lǐng)域行為強(qiáng)的褐馬雞，能更好地適應(yīng)野外生存環(huán)境;另一方面，這些褐馬雞會干擾其他個體的繁殖，不利于褐馬雞的人工繁育工作。

本次研究還發(fā)現(xiàn)，11 號個體有兩個固定的配偶，這在單配制的鳥類中是一個比較罕見的現(xiàn)象［30］，國外的學(xué)者曾指出環(huán)境壓力發(fā)生變化，同一物種的不同種群之間采取的婚配制度也可能發(fā)生變化［31］。籠養(yǎng)環(huán)境是否會使雄性褐馬雞傾向于同時擁有多個配偶有待進(jìn)一步研究。

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