用離子色譜法研究飲片中殘留二氧化硫在制劑過(guò)程中的變化

王國(guó)海，宋　莉，楊瑞瑞

(陜西省食品藥品檢驗(yàn)所,陜西 西安　710065)

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用離子色譜法研究飲片中殘留二氧化硫在制劑過(guò)程中的變化

王國(guó)海，宋莉，楊瑞瑞

(陜西省食品藥品檢驗(yàn)所,陜西 西安710065)

摘要：目的采用離子色譜法考察飲片中二氧化硫在牛黃上清丸制劑過(guò)程中的變化，為評(píng)價(jià)制劑安全性提供數(shù)據(jù)支撐。方法將飲片及自制樣品經(jīng)水蒸汽蒸餾，3%雙氧水氧化吸收后，進(jìn)離子色譜儀分析，測(cè)定其殘留量。結(jié)果在1～30 mg·L-1濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=0.999 9)；平均收率(n=9)為95.5%，RSD為3.0%。結(jié)論飲片中殘留二氧化硫在其與煉蜜加熱混合的過(guò)程中有一定程度的減少，但有部分伴隨原粉轉(zhuǎn)移到生藥粉制劑中。

關(guān)鍵詞：牛黃上清丸；二氧化硫；離子色譜法(IC)

牛黃上清丸由19味藥的原粉加煉蜜制成[1]，具有清熱瀉火散風(fēng)止痛的功效[1]。處方中的白芷、當(dāng)歸、白芷、菊花等中藥材炮制時(shí)常用硫磺熏蒸以達(dá)到防蛀蟲(chóng)、霉變，同時(shí)提升視覺(jué)感官效果。藥材中殘留的二氧化硫在以原粉入藥的制劑過(guò)程中是否會(huì)隨粉碎、混勻及加煉蜜而減少值得我們?nèi)ヌ剿?。為此，我們?cè)O(shè)計(jì)了合理的實(shí)驗(yàn)方案，考察飲片中二氧化硫在制劑制備過(guò)程中的變化[2-3]，為飲片安全、規(guī)范炮制提供參考依據(jù)，同時(shí)為評(píng)價(jià)制劑安全性提供數(shù)據(jù)支撐。

1儀器、試藥及藥材

1.1儀器萬(wàn)通離子色譜儀(型號(hào)761)；電導(dǎo)檢測(cè)器；水蒸汽蒸餾裝置[4]；超純水系統(tǒng)。

1.2試藥亞硫酸鈉(Na2SO3)為優(yōu)級(jí)醇(純度99.7%)，碳酸氫鈉(NaHCO3)、硫代硫酸鈉(Na2S2O3)、碳酸鈉(Na2CO3)、EDTA、碘(I2)、均為分析純；實(shí)驗(yàn)用去離子水(電阻率為18.2ΜΩ)；硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液購(gòu)自中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院(編號(hào)0942，標(biāo)示值為 1 000 mg·L-1)。

1.3藥材荊芥穗、黃芩、薄荷、梔子、連翹、白芷、黃連、黃柏、川芎、大黃、當(dāng)歸、菊花、地黃、冰片、桔

梗、赤芍、甘草、人工牛黃、石膏原料藥材及煉蜜均由牛黃上清系列生產(chǎn)廠家提供。

2方法與結(jié)果

2.1標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的制備取硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用去離子水稀釋成濃度分別為1、2、5、10、20、30 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

2.2供試品溶液的制備取相當(dāng)于2丸牛黃上清丸的藥粉或(制備)樣品，精密稱定，置水蒸汽蒸餾裝置的樣品瓶中，加脫氧的去離子水20 mL使其潤(rùn)濕、分散，在100 mL量瓶中加入20 mL 3%的雙氧水作為接收液，吸取濃鹽酸5 mL快速加入樣品瓶，迅速塞緊裝置，進(jìn)行蒸餾，至接收瓶中液體接近90 mL時(shí)，停止蒸餾，取下接收瓶，用去離子水洗滌尾接管將其并入量瓶中并定容至刻度，搖勻，放置1 h，作為供試品溶液[5-6]。

2.3色譜條件陰離子分析色譜柱：Metrosep A Supp 7 (250 mm×4 mm)；淋洗液：5 mmol·L-1碳酸鈉和5 mmol·L-1碳酸氫鈉混合溶液；等度淋洗；流速：0.8 mL·min-1；進(jìn)樣量：20 μL ；電導(dǎo)檢測(cè)器。

2.4線性關(guān)系將2.1項(xiàng)下各標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按上述色譜條件進(jìn)樣分析，以硫酸根的峰面積與其濃度分別任縱坐標(biāo)和橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為：Y=13.924X-4.527，r=0.999 9，結(jié)果表明，硫酸根在1～30 mg·L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5精密度試驗(yàn)取同一份標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，按照上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，得硫酸根峰面積RSD為0.62%。

2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，按上述色譜條件分別在0、2、4、8、12、24 h進(jìn)樣，測(cè)定硫酸根峰面積，其RSD為0.88% ，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7重復(fù)性試驗(yàn)取白芷藥材細(xì)粉，按“2.2” 項(xiàng)下供試品溶液制備方法平行制備6份供試液，按上述測(cè)定方法測(cè)定，其平均值為138.2 mg·kg-1，RSD為1.3%。

2.8回收率試驗(yàn)精密稱得無(wú)水亞硫酸鈉82.27 mg置100 mL量瓶中，用0.05%EDTA溶解并定容至刻度，用碘量法對(duì)其進(jìn)行標(biāo)定[7]，結(jié)果為為0.408 3 mg·L-1(以SO2計(jì))。取白芷藥材細(xì)粉適量，精密稱取9份，每份約6.0 g，將其均分為3組，每組依次精密加入上述亞硫酸鈉溶液0.8、1、1.2 mL，同供試品溶液的制備及測(cè)定操作，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

圖1　色譜圖

2.9樣品處理

2.9.1樣品制備將上述19味藥按牛黃上清丸處方量混合，粉細(xì)，過(guò)篩，混勻，分A、B、C、D、E五組試驗(yàn)，每組取樣6份，每份約10 g， A組用于測(cè)定混合藥材中二氧化硫殘留量；將B組置于90℃的烘箱加熱1 h后，用于測(cè)定其二氧化硫殘留量； 將C、D、E三組中每份樣加入13.0 g煉蜜，于90℃加熱充分混合，時(shí)間分別為30、60、90 min，再測(cè)定其二氧化硫殘留。

2.9.2樣品溶液的制備取上述相當(dāng)于2丸牛黃上清丸的量的粉末或樣品，按“2.2” 項(xiàng)下供試品溶液制備方法制備供試液并按上述測(cè)定方法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

由此可見(jiàn)：在牛黃上清丸的制劑過(guò)程中，飲片中二氧化硫殘留的損失率并不是很高，加熱過(guò)程對(duì)二氧化硫損失的影響也很有限。因此，對(duì)制劑中二氧化硫殘留量的監(jiān)測(cè)來(lái)對(duì)飲片中二氧化硫殘留作評(píng)估并沒(méi)有很強(qiáng)的相關(guān)性。

表2　二氧化硫?qū)嶒?yàn)檢測(cè)結(jié)果

3討論

通過(guò)模擬牛黃上清丸制劑工藝過(guò)程，考察飲片中二氧化硫在整個(gè)制劑過(guò)程中的變化發(fā)現(xiàn)：飲片中殘留二氧化硫在其與煉蜜加熱混合的過(guò)程并非大量減少，而是伴隨原粉轉(zhuǎn)移到原粉入藥的制劑中，但由于部分飲片在處方中所占比例較小(如牛黃上清丸中白芷、桔梗、當(dāng)歸等常用硫磺熏蒸的藥材在處方中所占比例依次為16/622、16/622、50/622)，從而致使制劑中二氧化硫的含量較小。因此符合二氧化硫殘留限度要求的制劑，其部分原藥材殘留二氧化硫嚴(yán)重超標(biāo)仍有一定的可能性，通過(guò)對(duì)制劑中二氧化硫殘留監(jiān)測(cè)來(lái)對(duì)飲片中二氧化硫殘留進(jìn)行評(píng)估并不存在很強(qiáng)的相關(guān)性。因此，加強(qiáng)對(duì)藥材及飲片中二氧化硫的監(jiān)測(cè)，規(guī)范飲片炮制，整頓飲片市場(chǎng)比控制制劑中二氧化硫殘留更有意義。

硫磺熏蒸對(duì)不同藥材的成分、藥性、藥效、歸經(jīng)等是否有影響，有多大影響，是否影響制劑的藥理作用、療效等目前尚不清楚，因此應(yīng)制定更加嚴(yán)格的二氧化硫殘留限度標(biāo)準(zhǔn)，促使企業(yè)從源頭上控制二氧化硫殘留問(wèn)題，二者相輔相成為藥品的安全性提供保障。

檢測(cè)限按3倍信噪比計(jì)算，定量限以10倍信噪比計(jì)算。

參考文獻(xiàn):

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(一部)[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：191.

[2]羅建民，王愛(ài)霞，陳俊宇．離子色譜法測(cè)定葡萄干中二氧化硫殘留量 [J].檢測(cè)分析，2014，35(4)：90-92.

[3]陳秀杰，譚倩，余濤．離子色譜法測(cè)定食品中二氧化硫與傳統(tǒng)化學(xué)法的比較 [J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2014，24(1)：38-43.

[4]袁向輝，喬蓉霞，劉海靜，等．菊花中二氧化硫殘留兩測(cè)定方法研究 [J].安徽醫(yī)藥，2011，15(1)：32-33.

[5]喬蓉霞，楊瑞瑞，劉海靜，等.離子色譜法檢測(cè)牛黃上清丸中二氧化硫殘留量 [J].藥物鑒定，2011,20(13)：18-19.

[6]施秀杰，衷明華．氧瓶燃燒-離子色譜法測(cè)定中草藥中硫含量 [J].江西化工，2014(2)：70-72.

[7]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(二部)[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄183.

(收稿日期：2014-04-13，修回日期：2014-07-08)

基金項(xiàng)目：陜西省中醫(yī)管理局科研課題(No 13-ZY021)

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2015.02.019