桑黃人工栽培研究

許彪，吳佳琳，孫婷婷，鄒莉

(東北林業(yè)大學(xué)，哈爾濱150040)

桑黃人工栽培研究

許彪，吳佳琳，孫婷婷，鄒莉*

(東北林業(yè)大學(xué)，哈爾濱150040)

詳細(xì)分析了桑黃在栽培過程中各種影響其生長的因素，總結(jié)了桑黃人工栽培技術(shù)的研究進展，為今后桑黃的工廠化栽培提供基礎(chǔ)信息。

桑黃；人工栽培；研究進展

桑黃(Phellinusspp.)又稱桑耳，因通常生長在桑屬植物上，子實體顏色鮮黃而得名，是多年生的珍稀藥用真菌，有“森林黃金”之美稱[1]?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》描述其為“久服輕身不老延年”[2]；《本草綱目》記載其可治血崩、血淋、經(jīng)閉等癥。近年來，國內(nèi)外學(xué)者對其藥用成分作了進一步的研究，表明桑黃具有抗癌、抗腫瘤、保肝、降血糖、免疫調(diào)節(jié)等作用[3-6]，是目前發(fā)現(xiàn)的生物抗癌領(lǐng)域有效率最高的大型真菌之一，已成為國內(nèi)外醫(yī)藥制劑與保健品行業(yè)研究與開發(fā)的熱點，具有廣闊的市場前景。然而，目前成功栽培出桑黃子實體的案例卻不多，這給桑黃人工栽培技術(shù)的改進提供了很大空間，以下簡單介紹當(dāng)前人工栽培桑黃方法的進展。

1 桑黃菌絲體培育

1.1 桑黃固體培養(yǎng)

桑黃屬于大型真菌，其子實體由桑黃孢子在合適的生長條件下萌發(fā)生長而成，經(jīng)歷由孢子到菌絲，再生成子實體的演變過程，因此培養(yǎng)菌絲是進行人工栽培的第一步。桑黃菌絲在生長時呈現(xiàn)毯狀或放線狀，年輕、健康的菌絲初長時呈米白色，中央逐漸變成淡黃色，老時會鋪滿整個培養(yǎng)基，中央黃褐色，邊緣淡黃色。桑黃菌絲生長的條件因菌種而異，劉紅錦等[7]認(rèn)為桑黃以葡萄糖作為碳源效果最好，其次是淀粉、蔗糖、乳糖、麥芽糖；氮源以蛋白胨作為氮源效果最好，其次是酵母粉、氯化銨、硫酸銨。劉紅錦[7]、駱婷[8]、呂英華[9]等采用不同地區(qū)的桑黃菌種得出不同的結(jié)論，見表1。

表1 不同來源桑黃菌株篩選到的最優(yōu)固體培養(yǎng)配方

從表1中可以看出，不同地區(qū)桑黃篩選出的最佳固體培養(yǎng)基配方有所差異。因桑黃的分類地位尚存在爭議，這給不同地區(qū)的桑黃菌種確定最佳培養(yǎng)基帶來了不便，故不能形成標(biāo)準(zhǔn)來確定最佳培養(yǎng)基，以上結(jié)論僅供參考。

1.2 桑黃液體發(fā)酵培養(yǎng)

液體培養(yǎng)由于其操作簡便、可控性好、適合工廠化等優(yōu)點，是當(dāng)前藥用真菌研究及應(yīng)用的一個重要方向。進行桑黃液體發(fā)酵時，可以通過調(diào)節(jié)pH、裝液量、接種量等環(huán)節(jié)來優(yōu)化桑黃的液體發(fā)酵培養(yǎng)。pH值的變化直接影響菌絲細(xì)胞內(nèi)酶的活性，細(xì)胞膜透性等，過高過低都會使體系酶的環(huán)境及物質(zhì)的傳遞受到影響，進而影響菌體代謝與生長。裝液量過多會使菌株因缺氧而影響菌絲生長及糖分的合成，而過少時則會出現(xiàn)后期養(yǎng)分不足而出現(xiàn)過早地衰老、自溶等現(xiàn)象，另外，接種量過多會使菌液中營養(yǎng)迅速消滅掉，桑黃菌株不能正常生長。接種量過少會影響菌絲產(chǎn)量。搖床轉(zhuǎn)速對桑黃生長供氧有決定性作用，但過快的轉(zhuǎn)速會對菌絲造成機械傷害，過慢會使瓶內(nèi)缺氧，選擇一個適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速也是必不可少的。雷萍等[10]的實驗表明液體培養(yǎng)桑黃的最優(yōu)條件為：pH6.5、裝液量100mL/300mL三角瓶，接種量10%、搖床轉(zhuǎn)速150r/min。此外，丁興紅等[11]發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液的pH值會隨著發(fā)酵進程逐步增加，在168h發(fā)酵液pH值達到最高值，之后可能是因為桑黃菌絲體自溶，發(fā)酵液的pH值開始降低。因此，可以將發(fā)酵液pH值作為判斷發(fā)酵終點的間接依據(jù)，桑黃發(fā)酵培養(yǎng)168h最適宜。

2 桑黃子實體栽培

桑黃是一種白腐菌，也可以采用人工代料栽培的方法對其進行人工栽培。國外，日本和韓國對桑黃的開發(fā)較早，韓國學(xué)者采用室外蔭棚木段埋畦栽培桑黃取得成功，日本也開展了桑黃栽培產(chǎn)業(yè)，并取得了巨大的經(jīng)濟效益。國內(nèi)對桑黃的栽培研究尚處于起步階段，劉利等[12]采用新鮮楊樹木段栽培，通過兩年的時間收獲了少量的桑黃，之后相繼有一些栽培成功的例子報道[9,13-14]。

2.1 原種培養(yǎng)

接種原種前，需提前6h以上從冰箱中拿出母種進行活化，然后將母種接種于原種培養(yǎng)基中，滿瓶后可立即使用或?qū)⑵渲糜?℃冰箱保存?zhèn)溆谩３Ｓ玫脑N培養(yǎng)基有麥粒培養(yǎng)基：小麥粒98%，石灰1%，石膏1%，含水量60%；亦可用浜田氏培養(yǎng)基：酵母粉5g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，瓊脂20g，水1000 mL。

2.2 栽培種培養(yǎng)

2.2.1 培養(yǎng)基。雷萍等[15]利用秦巴山區(qū)的野生桑黃進行培養(yǎng)基的優(yōu)化實驗的得到最佳的栽培種培養(yǎng)配方為：桑樹木屑76%，稻殼2%，玉米粉18%，蔗糖 1%，石灰1%，含水量 60%～62%。

2.2.2 栽培方法。按照栽培種配方稱取培養(yǎng)料，充分?jǐn)嚢杈鶆?，調(diào)整含水量至65%，裝入材質(zhì)為聚乙烯的菌袋。滅菌120min，取出后待其冷卻至室溫，在超凈工作臺中接入桑黃原種，于28℃恒溫下進行培養(yǎng)，35d左右菌絲即可長滿。待桑黃菌絲長滿栽培袋10d左右菌絲呈現(xiàn)深黃色或者有些栽培袋內(nèi)開始出現(xiàn)突起的瘤狀原基，此時將栽培袋轉(zhuǎn)移至出菇室進行培養(yǎng)。

2.2.3 栽培條件。 ①溫度:最好控制在25～30℃。亦可進行變溫管理，實驗室中培養(yǎng)時模擬晝夜溫差變化，能達到促進子實體生長和發(fā)育的效果。②濕度：空氣相對濕度為 85%(可采用加濕器控制空氣相對濕度)。水分低會使子實體缺水而減緩生長，水分過多時則易長雜菌。③光照強度：將出菇室的光照強度控制在 200～300 lx 最有利于出菇。在黑暗條件下培養(yǎng)適宜菌絲生長，但不能形成原基。④通風(fēng)量：當(dāng)栽培袋上剛出現(xiàn)耳芽時，早晚各通風(fēng)5min；當(dāng)桑黃耳芽生長時間超過20d后加大出菇室通風(fēng)量，早晚通風(fēng)20 min，這樣能最大程度的加快桑黃耳芽的生長，同時可保證桑黃耳芽的質(zhì)量[13]。

3 研究展望

桑黃自古因《本草綱目》記載有“利五臟，宣腸胃氣，排毒氣”之功效而盛名，現(xiàn)代研究表明，桑黃還具有抗癌、抑癌、護肝、降血脂、抗過敏等作用，在日韓地區(qū)早已作為靈丹妙藥來使用，韓國利用桑黃粉末制成的膠囊甚至賣到了每瓶3萬元的價格[9]，這也招致了日韓野生桑黃被洗劫的厄運，日韓在人工培養(yǎng)技術(shù)上受市場驅(qū)動而取得較大成功。而在中國，雖古已盛名，然現(xiàn)今，受制于人工栽培技術(shù)的薄弱，再加上野生桑黃匱乏的現(xiàn)狀，大量獲取桑黃子實體成了一個瓶頸。因此，加強人工栽培技術(shù)研究是開拓市場的關(guān)鍵因素。

[1]潘學(xué)仁, 鄒利, 戶巖巖, 等. 東亞地區(qū)“桑黃”物種問題討論[J].中國食用菌, 2008(1): 63-64.

[2]江蘇醫(yī)學(xué)院. 中藥大辭典 [M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社, 1995.

[3]Shihata S, Nishikawa Y, Mai CF, et a1. Anti-tumor studies on some extracts of Basidiomycetes [J]. Gann,968,59:159-l61.

[4]Kong DH, Hong ND, Han SB. Stimulation of humoral and cell mediat-ed immunity by polysaccharide from mushroom Phellinus linteus[J].Intern J Immunopharmacol, 1996, 18： 295-303.

[5]Shon YH, Nam KS. Antimutagenicity and induction of anticarcinogenie phase II enzymes by Basidiomycetes[J]. Journal of Ethnopharma-cology, 2001, 77:103-109.

[6]Jang BS, Kim JC. Extracts of Phellinus gilvus and Phellinus baumii inhibit pulmonary inflammation induced by lipopolysaccharide in rats[J]. Biotechnology Letters, 2004, 26： 31-33.

[7]劉紅錦, 張?zhí)K珍, 蔣寧,等. 桑黃菌絲固體培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件研究[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報,2012，24(11) :123-124.

[8]駱婷. 桑黃的生物學(xué)特性及其發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化[D].合肥: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009．

[9]呂英華. 桑黃菌固體和液體培養(yǎng)基優(yōu)化及人工栽培研究[D].西安：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2010.

[10]雷萍, 張文雋, 吳亞召,等. 桑黃菌液體發(fā)酵工藝研究[J].食用菌, 2010(3):10-11.

[11]丁興紅,溫成平,丁志山,等. 桑黃液體發(fā)酵生產(chǎn)多糖工藝研究[J].中草藥2012,43(5) :906-909.

[12]劉利, 劉冰,劉明才,等.長白山野生桑黃菌人工栽培初探[J]. 食用菌,2005(3):32.

[13]杜萍，張春鳳，崔寶凱，等．藥用真菌桑黃的人工栽培技術(shù)研究[J].中國食用菌，2009，28(3) : 35- 37．

[14]葉嵐. 野生桑黃人工馴化栽培技術(shù)研究[J]. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué), 2012(4): 100,107.

[15]雷萍, 張文雋, 吳亞召,等.秦巴山區(qū)野生桑黃人工馴化栽培技術(shù)研究初報[J].西北大學(xué)學(xué)報( 自然科學(xué)版),2014,44 (1) :71-74.

Research on Artificial Cultivation ofPhellinusspp.

Xu Biao,Wu Jialin,Sun Tingting,Zou Li

(Northeast Fotestry University，Habin 150040)

This paper analysed various possible factors influencing the growth ofPhellinusduring the period of its artificial cultivation, and summarized the research advance of artificial cultivation techniques ofPhellinus，which provided a basic foundation for the industrialized production of the fruiting body ofPhellinus.

Phellinusspp.; Artificial cultivation; Research advance

2015-01-24

東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院本科創(chuàng)新實驗

許彪(1994-)，男，學(xué)生，E-mail：494797934@qq.com；*通訊作者：鄒莉(1966-)，女，教授，研究方向為食藥用菌，E-mail：13903650896@163.com。

S567.3

A

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2015.02.042