GPC3和AFP聯(lián)合檢測對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值

王延峰,李南陽,任雅玲,薛秀斌,李林臣,曹蕾春,賈儒淵,于小平

(張家口市第一醫(yī)院,河北 張家口075000)

GPC3和AFP聯(lián)合檢測對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值

王延峰*,李南陽,任雅玲,薛秀斌,李林臣,曹蕾春,賈儒淵,于小平

(張家口市第一醫(yī)院,河北 張家口075000)

(ChinJLabDiagn,2015,19:0366)

原發(fā)性肝癌(primary hepatic carcinoma，PHC)的發(fā)病率位居全部惡性腫瘤的第5位，在每年新增的PHC病例中有超過一半是發(fā)生在中國[1]。外科切除仍然是目前針對(duì)PHC的首選治療手段[2]，如果錯(cuò)過手術(shù)治療時(shí)機(jī)，則患者的預(yù)后情況極差，五年生存率極低。因此，提高PHC的早期診斷率是決定其治療效果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。AFP輔助診斷PHC的效率并不理想，其敏感度和特異度都難以達(dá)到臨床要求[3]，本研究通過對(duì)磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3，GPC3)和AFP聯(lián)合檢測對(duì)PHC的診斷價(jià)值進(jìn)行了觀察和分析，現(xiàn)將研究的具體情況報(bào)告如下。

1材料和方法

1.1研究材料

選取2005年6月至2013年6月在我院接受手術(shù)治療的PHC患者60例、肝硬化患者70例和其它原因致肝破裂患者50例作為研究對(duì)象，納入患者均經(jīng)B超、CT和術(shù)后病理檢查予以確診。納入的PHC患者均為初發(fā)且均未經(jīng)過化療，其中，男性患者49例，女性患者11例，年齡跨度為35至68歲，平均年齡為(50.8±7.8)歲。病理檢查顯示，51例為肝細(xì)胞癌，9例為膽管細(xì)胞癌；單發(fā)腫瘤患者為40例，多發(fā)腫瘤患者為20例。TNM分期方面：3例患者為Ⅰ期，28例患者為Ⅱ期，16例患者為Ⅲ期，13例患者為Ⅳ期；Edmondson-Steiner分級(jí)方面：6例患者為Ⅰ級(jí)，35例患者為Ⅱ級(jí)，12例患者為Ⅲ級(jí)，7例患者為Ⅳ級(jí)。在納入的肝硬化中，男性患者為58例，女性患者為12例，年齡跨度為39至58歲，平均年齡為(46.5±4.2)歲。在納入的肝破裂患者中，男性患者為41例，女性患者為9例，年齡跨度為26至45歲，平均年齡為(37.2±4.6)歲，均經(jīng)病理檢查確認(rèn)為非肝癌、非肝硬化患者。

1.2觀察指標(biāo)

應(yīng)用ELISA法對(duì)以上各類患者的血清GPC3和AFP水平進(jìn)行檢測，應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法對(duì)PHC患者切除肝組織標(biāo)本中的GPC3表達(dá)情況進(jìn)行檢測(試劑盒均購自武漢博士德生物公司)，血清標(biāo)本為各組患者的清晨空腹靜脈血，以GPC3>120 ng/ml和AFP>8.5 ng/ml為陽性，切除肝組織標(biāo)本均經(jīng)中性甲醛固定并以常規(guī)石蠟包埋，以4 μm厚連續(xù)切片，檢測操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒使用說明書操作，以平均吸光度值(A值)代表染色強(qiáng)度和觀察指標(biāo)的相對(duì)濃度。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用EXCEL建立數(shù)據(jù)庫并應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料應(yīng)用方差分析或t檢驗(yàn)進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料應(yīng)用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行處理，以P<0.05為差異有顯著性。

2結(jié)果

2.1各類患者血清GPC3水平的比較

經(jīng)檢測，肝破裂患者的血清GPC3水平顯著低于肝硬化患者(P<0.05)，肝硬化患者的血清GPC3水平顯著低于PHC患者(P<0.05)，具體結(jié)果見表1。

2.2血清GPC3和AFP聯(lián)合檢測診斷PHC分析

應(yīng)用血清GPC3和AFP聯(lián)合檢測診斷PHC的敏感度為90%，顯著高于單獨(dú)應(yīng)用血清GPC3檢測或血清AFP檢測(P<0.05)，而應(yīng)用血清GPC3和AFP聯(lián)合檢測與單獨(dú)應(yīng)用血清GPC3檢測或血清AFP檢測的特異度的差異無顯著性(P>0.05)，具體結(jié)果見表2。

表1　各類患者血清GPC3水平的比較

注：與肝破裂比較，①P<0.05；與肝硬化比較，②P<0.05

表2　血清GPC3和AFP聯(lián)合檢測診斷PHC的價(jià)值分析

注：與GPC3比較，①P<0.05；與AFP比較，②P<0.05

2.3GPC3在PHC患者肝組織標(biāo)本中的表達(dá)及相關(guān)因素分析

PHC患者的腫瘤組織、癌旁組織及正常組織中的GPC3表達(dá)水平(A值)分別為(0.162±0.037)、(0.126±0.025)和(0.063±0.012)，腫瘤組織的GPC3表達(dá)水平顯著高于癌旁組織(P<0.05)，癌旁組織的GPC3表達(dá)水平顯著高于正常組織(P<0.05)。PHC患者肝組織GPC3表達(dá)水平與PHC患者臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析結(jié)果顯示，具有不同Edmondson病理分級(jí)或TNM臨床分期的PHC患者的肝組織GPC3表達(dá)水平的差異有顯著性(P<0.05)，具體結(jié)果見表3。

3討論

有研究顯示，PHC是目前世界上死亡率最高的惡性腫瘤，患者在臨床確診后的五年生存率低于12%，出現(xiàn)這一現(xiàn)象的原因主要是因?yàn)榇蠖鄶?shù)患者在就診時(shí)已發(fā)病到中晚期，錯(cuò)過了最佳的手術(shù)治療時(shí)機(jī)。所以，提高PHC的早期診斷率是提升PHC治療效果、改善患者預(yù)后的重要保障[4]。研究發(fā)現(xiàn)AFP診斷PHC發(fā)病的敏感度僅為30%至60%，特異度一般不足80%，特別是對(duì)于早期PHC的檢出率更低。GPC3是一種表達(dá)于細(xì)胞膜表面的硫酸乙酰肝素糖蛋白。GPC3不在正常人的肝組織中表達(dá)，而在PHC患者的肝組織中卻呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，也被很多學(xué)者認(rèn)為是在AFP陰性肝癌患者的肝組織中表達(dá)率最高的標(biāo)志物[5]，隨著學(xué)術(shù)界對(duì)GPC3研究的不斷深入，很多研究者發(fā)現(xiàn)，GPC3不僅在肝細(xì)胞癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，而且在患者血清中的水平也出現(xiàn)了大幅度的上升，故學(xué)者們認(rèn)為GPC3在PHC的早期診斷中具有極高的臨床應(yīng)用價(jià)值[6]。很多研究證實(shí)，GPC3在小肝癌和AF陰性肝癌的早期診斷中具有較高的效率，而且當(dāng)將其與其它腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行聯(lián)合檢測時(shí)，診斷效能會(huì)得到大幅度的提升[7]。本研究結(jié)果顯示，肝破裂患者的血清GPC3水平顯著低于肝硬化患者(P<0.05)，肝硬化患者的血清GPC3水平顯著低于PHC患者(P<0.05)，說明血清GPC3水平的顯著上升可作為PHC發(fā)病的提示指標(biāo)；應(yīng)用血清GPC3和AFP聯(lián)合檢測診斷PHC的敏感度為90%，顯著高于單獨(dú)應(yīng)用血清GPC3檢測或血清AFP檢測(P<0.05)，而應(yīng)用血清GPC3和AFP聯(lián)合檢測與單獨(dú)應(yīng)用血清GPC3檢測或血清AFP檢測的特異度的差異無顯著性(P>0.05)，說明應(yīng)用血清GPC3和AFP水平聯(lián)合檢測可提高診斷PHC的敏感度，同時(shí)對(duì)診斷的特異度無顯著影響；腫瘤組織的GPC3表達(dá)水平顯著高于癌旁組織(P<0.05)，癌旁組織的GPC3表達(dá)水平顯著高于正常組織(P<0.05)，具有不同Edmondson病理分級(jí)或TNM臨床分期的PHC患者的肝組織GPC3表達(dá)水平的差異有顯著性(P<0.05)，說明GPC3在PHC患者的腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，其表達(dá)水平可能與患者病情的進(jìn)展具有相關(guān)性。

表3　GPC3在PHC患者肝組織標(biāo)本中表達(dá)相關(guān)因素分析

綜上所述，PHC患者的血清和腫瘤組織中的GPC3均呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，其在肝組織中的表達(dá)水平可能與患者病情的進(jìn)展具有相關(guān)性，應(yīng)用血清GPC3和AFP水平聯(lián)合檢測可提高診斷PHC的敏感度。

參考文獻(xiàn)：

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[3]紀(jì)鳳卿,徐振興,滕菁.甲胎蛋白異質(zhì)體L3在原發(fā)性肝癌診斷中的研究進(jìn)展[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(5):580.

[4]Marrero JA,Feng Z,Wang Y,et al.Alpha-fetoprotein,des-gamma carboxyprothrombin,and lectin-bound alpha-fetoprotein in early hepatocellular carcinoma[J].Gastroenterology,2009,137(1):110.

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[6]余娟平,張瓊,徐偉文,等 Glypican-3的血清檢測與原發(fā)性肝癌診斷的研究進(jìn)展[J].分子診斷與治療雜志,2013,5(3):189.

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摘要：目的觀察和分析磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)和甲胎蛋白(AFP)聯(lián)合檢測對(duì)原發(fā)性肝癌(PHC)的診斷價(jià)值。方法選取60例PHC患者、70例肝硬化患者和50例其它原因致肝破裂患者作為研究對(duì)象，對(duì)各類患者的血清GPC3和AFP水平和PHC患者的肝組織標(biāo)本中的GPC3表達(dá)水平進(jìn)行檢測。結(jié)果肝破裂患者的血清GPC3水平顯著低于肝硬化患者(P<0.05)，肝硬化患者的血清GPC3水平顯著低于PHC患者(P<0.05)；應(yīng)用血清GPC3和AFP聯(lián)合檢測診斷PHC的敏感度為90%，顯著高于單獨(dú)應(yīng)用血清GPC3檢測或血清AFP檢測(P<0.05)；腫瘤組織的GPC3表達(dá)水平顯著高于癌旁組織(P<0.05)，癌旁組織的GPC3表達(dá)水平顯著高于正常組織(P<0.05)，具有不同Edmondson病理分級(jí)或TMN臨床分期的PHC患者的肝組織GPC3表達(dá)水平的差異有顯著性(P<0.05)。結(jié)論P(yáng)HC患者的血清和腫瘤組織中的GPC3均呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，其在肝組織中的表達(dá)水平可能與患者病情的進(jìn)展具有相關(guān)性，應(yīng)用血清GPC3和AFP水平聯(lián)合檢測可提高診斷PHC的敏感度。

關(guān)鍵詞：原發(fā)性肝癌；磷脂酰肌醇蛋白聚糖；甲胎蛋白；免疫組化；腫瘤標(biāo)志物；血清學(xué)檢測

The diagnosis value of the combined GPC3 and AFP detection of primary hepatic carcinomaWANGYan-feng,LINan-yang,RENYa-ling,etal.(FirsrHospitalofZhangjiakou,Zhangjiakou075000,China)

Abstract:ObjectiveTo observe and analyze the diagnosis value of the combined glypican-3 (GPC3) and alpha-fetoprotein (AFP) detection of primary hepatic carcinoma.Methods60 patients with PHC,70 patients with liver cirrhosis and 50 patients with liver rupture caused by other reasons were selected as the research objects.The serum GPC3 and AFP levels of all kinds of patients and the GPC3 expression level of the liver tissues of the patients with PHC were detected.ResultsThe serum GPC3 level of the patients with liver rupture was significantly lower than that of the patients with liver cirrhosis (P<0.05),and the serum GPC3 level of the patients with liver cirrhosis was significantly lower than that of the patients with PHC(P<0.05);the sensitivity of the combined serum GPC3 and AFP detection in the diagnosis of PHC was 90%,which was significantly higher than that of single detection of serum GPC3 or serum AFP (P<0.05);the GPC3 expression level in the tumor tissues was significantly higher than that in the paracancerous tissues (P<0.05),and the GPC3 expression level in the paracancerous tissues was significantly higher than that in the normal liver tissue (P<0.05).There was significant difference of the GPC3 expression level in the liver tissue of the PHC patients with different Edmondson pathological grading or different TMN clinical stage (P<0.05).ConclusionThe GPC3 levels in serum and tumor tissue of the PHC patients show high expression,and the expression level in liver tissue may be associated with the progress of the diseases.The combined detection of serum GPC3 and AFP levels can improve the diagnostic sensitivity of PHC.

Key words:primary liver cancer;glypican;alpha fetoprotein;immunohistochemistry;tumor marker;serological detection

收稿日期：(2014-01-09)

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

中圖分類號(hào)：R735.7

文章編號(hào)：1007-4287(2015)03-0366-03

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