巖藻黃素對(duì)阿霉素引起心肌細(xì)胞毒性的保護(hù)作用研究

王 飛，趙玉勤，丁國芳，羅李王，張亞茹，楊最素

（1.浙江海洋學(xué)院食品與醫(yī)藥學(xué)院，浙江省海洋生物醫(yī)用制品工程技術(shù)研究中心，浙江舟山 316022；2.浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江舟山 316022）

巖藻黃素對(duì)阿霉素引起心肌細(xì)胞毒性的保護(hù)作用研究

王 飛1，趙玉勤1，丁國芳2，羅李王1，張亞茹1，楊最素1

（1.浙江海洋學(xué)院食品與醫(yī)藥學(xué)院，浙江省海洋生物醫(yī)用制品工程技術(shù)研究中心，浙江舟山 316022；2.浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江舟山 316022）

主要探究了巖藻黃素（Fucoxanthin,FUC）對(duì)阿霉素（adriamycin，ADR）引起心肌細(xì)胞毒性的保護(hù)作用。采用DPPH法測(cè)定FUC對(duì)自由基的清除作用；通過MTT法檢測(cè)FUC對(duì)ADR引起H9C2細(xì)胞毒性的保護(hù)效果；AO/EB染色法觀察H9C2細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；經(jīng)Carboxy-DCFDA法測(cè)定H9C2細(xì)胞內(nèi)活性氧生成水平變化及Western Blotting檢測(cè)H9C2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)。結(jié)果表明：DPPH法結(jié)果顯示FUC具有較強(qiáng)的清除氧自由基能力，IC50小于Vc；FUC對(duì)ADR引起的H9C2細(xì)胞毒性有較好的保護(hù)作用；FUC可以減少ADR引起的H9C2細(xì)胞凋亡小體的增加；FUC能抑制由ADR引起的H9C2細(xì)胞內(nèi)活性氧水平升高；FUC可以抑制ADR引起的H9C2細(xì)胞內(nèi)凋亡蛋白Caspase-8水平的下調(diào)以及Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP水平的上調(diào)。結(jié)論：FUC具有保護(hù)ADR引起心肌細(xì)胞毒性的作用，其機(jī)理有可能是通過其抗氧化活性抑制ADR引起的心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激，進(jìn)而抑制由ADR引起心肌細(xì)胞Caspase-8的活化，進(jìn)一步抑制由ADR引起的Caspase-3激活及對(duì)PARP的剪切來保護(hù)心肌細(xì)胞的。

阿霉素；心肌細(xì)胞毒性；巖藻黃素

阿霉素（Adriamycin，ADR）是一種蒽環(huán)類抗腫瘤抗生素，可抑制RNA和DNA的合成，對(duì)RNA的抑制作用最強(qiáng)，抗瘤譜較廣，對(duì)多種腫瘤均有作用，屬周期非特異性藥物，對(duì)各種生長(zhǎng)周期的腫瘤細(xì)胞都有殺滅作用。阿霉素主要適用于急、慢性白血病及惡性淋巴瘤、乳腺癌等實(shí)體瘤[1]。然而，在臨床應(yīng)用過程中，其結(jié)構(gòu)中蒽環(huán)以及醌基產(chǎn)生大量的活性氧自由基（ROS），引起線粒體、微粒體脂質(zhì)過氧化，對(duì)心肌細(xì)胞產(chǎn)生強(qiáng)烈的損傷作用，產(chǎn)生阿霉素心臟毒性[2-4]，這將嚴(yán)重影響患者的身心健康。因此，找到能降低阿霉素心臟毒性的藥物對(duì)其臨床應(yīng)用非常必要。

右丙亞胺(Dexrazoxane，DEX)是美國Chiron公司開發(fā)的一個(gè)強(qiáng)效IE向心臟保護(hù)藥，是目前唯一被證實(shí)，在癌癥患者接受蒽環(huán)類藥物治療過程中有心臟保護(hù)作用的藥物。右丙亞胺與ADR聯(lián)合應(yīng)用時(shí)對(duì)后者的心臟毒性有保護(hù)作用，但其發(fā)揮心臟保護(hù)作用的機(jī)制尚不十分清楚，有關(guān)其作用機(jī)制的報(bào)道大多來自離體試驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn)[5,6]。但右丙亞胺一般比較容易耐受，近來的報(bào)道稱右丙亞胺在減弱ADR心臟毒性的同時(shí)也降低了ADR的抗腫瘤效果，同時(shí)具有引發(fā)繼發(fā)性惡性腫瘤的風(fēng)險(xiǎn)的可能，比如急性白血病[7]；且其價(jià)格昂貴。因此，探尋一種新的保護(hù)ADR引起心臟毒性同時(shí)不減弱ADR的抗腫瘤效果的保護(hù)劑成為ADR臨床應(yīng)用的迫切需要。

研究發(fā)現(xiàn)，海藻提取物中很多具有抗氧化和抗癌功能[8]。巖藻黃素（fucoxanthin，F(xiàn)UC）也稱褐藻黃素，是自可食用褐藻中，如裙帶菜Undaria pinnatifida、海帶Laminaria japonica aresch和馬尾藻Sargassum fulvellum等提取出來的天然類胡蘿卜素。目前大量文獻(xiàn)表明，F(xiàn)UC具有清除活性氧自由基的作用，抗氧化能力十分強(qiáng)[9,10]，且FUC對(duì)腫瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用[11]。由以上可推測(cè)，F(xiàn)UC可能對(duì)ADR引起的心臟毒性有保護(hù)作用，并且與ADR合用可能具有更強(qiáng)的抗腫瘤效果。本課題主要是對(duì)FUC對(duì)ADR引起的心臟毒性保護(hù)進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞株

大鼠原代心肌H9C2細(xì)胞株購于中科院上海細(xì)胞庫，由本實(shí)驗(yàn)室傳代保存。

1.2 藥物與試劑

巖藻黃素（成都普瑞法科技開發(fā)有限公司）；阿霉素（浙江海正藥業(yè)股份有限公司）；DMEM培養(yǎng)基和胎牛血清（美國Gibco公司）；MTT（美國Sigma公司）；AO/EB（吖啶橙/溴化乙錠）（杭州昊天生物技術(shù)有限公司）；Cleaved Caspase-3、PARP、Caspase-8抗體與辣根酶標(biāo)記的山羊抗小鼠辣根酶標(biāo)記抗體、山羊抗兔辣根酶標(biāo)記抗體（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）。

1.3 主要儀器

ZHJH-C1209C型超凈工作臺(tái)（上海智誠分析儀器制造有限公司）；酶標(biāo)儀（美國Bio-Rad公司）；easyCyte6 HT-2L流式細(xì)胞儀（Millipore公司）；BX2-FLB3熒光顯微鏡（OLYMPU公司）；電泳儀（美國Bio-Rad公司）；Fluor Chem FC3化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)（美國Alpha公司）。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 DPPH法測(cè)定巖藻黃素對(duì)自由基的清除作用

取2 μL FUC樣品液（50、25、12.5、6.25、3.125 μmol/L），加入25 μg/mL的DPPH甲醇溶液200 μL，混勻，室溫靜置30 min。以甲醇做空白對(duì)照，在517 nm下測(cè)吸光度值。以Vc作為陽性對(duì)照。DPPH自由基清除率按以下公式計(jì)算：

其中，As為DPPH溶液的吸光值，Ai為加入FUC或VC后的吸光值

以半數(shù)抑制率（IC50）表示清除活性。

算得樣品相應(yīng)濃度下的酶抑制百分率，用Logit法計(jì)算IC50及95%可信度。

1.4.2 MTT法測(cè)定巖藻黃素對(duì)阿霉素引起H9C2細(xì)胞毒性的保護(hù)作用

取H9C2細(xì)胞，用DMEM培養(yǎng)液吹勻成細(xì)胞懸液，用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后稀釋成濃度3×104個(gè)細(xì)胞/mL的細(xì)胞懸液，接種于96孔板，每孔常規(guī)培養(yǎng)液100 μL，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后加入FUC，每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)復(fù)孔。加FUC（0、25、50 μmol/L）后放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)24 h后加入ADR（0.016、0.08、0.4、2、10 μmol/L），ADR作用24 h后，每孔加MTT每孔加10%MTT 200 μL，培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h吸凈，加DMSO 150 μL，震蕩10 min，最后酶標(biāo)儀（λ=490 nm）下檢測(cè)吸光度（OD值），最后計(jì)算細(xì)胞抑制率：

1.4.3 AO/EB染色法觀察H9C2細(xì)胞形態(tài)變化

于6孔培養(yǎng)板內(nèi)放入經(jīng)處理過的蓋玻片，將濃度為1×105/mL H9C2細(xì)胞懸浮接種于培養(yǎng)板中的蓋玻片上，常規(guī)條件下培養(yǎng)24 h，棄培養(yǎng)液，加50 μmol/L FUC處理24 h后聯(lián)合應(yīng)用2 μmol/L ADR處理H9C2細(xì)胞24 h及設(shè)立ADR和FUC單用組，并設(shè)立空白對(duì)照組。24 h后，取出蓋玻片，用95%乙醇固定30 min。（取AO和EB各1 mg分別溶解于10 mL pH7.2的PBS緩沖液中，搖勻混合，現(xiàn)配現(xiàn)用，避光保存。）觀察前于載玻片上滴加40 μL PBS和10 μL AO/EB混合液，有細(xì)胞的一面朝下，熒光顯微鏡下觀察并拍照。

1.4.4 Carboxy-DCFDA法測(cè)定H9C2細(xì)胞內(nèi)活性氧生成水平變化

細(xì)胞接種與實(shí)驗(yàn)分組同“1.4.3”。24 h后，除去培養(yǎng)液后用消化液消化，并用PBS洗兩遍，加入終濃度為15 μmol/L的Carboxy-DCFDA在37℃水浴中孵育30 min。將細(xì)胞用PBS洗兩次，最后流式細(xì)胞儀在FL-1通道來測(cè)定綠色熒光強(qiáng)度，計(jì)算ROS含量變化。染色操作過程需在黑暗條件下進(jìn)行。

1.4.5 Western Blotting檢測(cè)H9C2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)

設(shè)立FUC（50 μmol/L）、ADR（2 μmol/L）、FUC與ADR合用及空白對(duì)照組，加入RIPA(250 μL/50 mm2) +PMSF(10 μL/mL)后反復(fù)吹打，冰上細(xì)胞裂解30 min。收集細(xì)胞裂解液，離心，收集上清液。按照測(cè)定的蛋白含量取等體積的蛋白提取液，與5×SDS Loading按1:4的比例均勻混合后變性，-80℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩Ｗ冃院蟮牡鞍滋崛∫翰捎肧DS-PAGE電泳法，按照實(shí)驗(yàn)需要先后配置分離膠和濃縮膠；取蛋白樣品各25 μL經(jīng)上樣緩沖液處理后上樣，電壓60 v電泳25 min后轉(zhuǎn)換電壓100 v，電泳90 min；采用濕法將蛋白轉(zhuǎn)印至PVDF膜上，將PVDF膜至于5%脫脂奶粉中4℃封閉2 h；用TBST 10 mL溶液洗3次，TBS 10 mL溶液洗膜1次，將膜置于1%BSA溶液稀釋后的一抗的雜交袋，4℃孵育過夜；洗膜后加入1%BSA的溶液稀釋的辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗，4℃搖床孵育2 h后，洗膜后用ECL顯影，使用Alpha化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行掃描并記錄光密度強(qiáng)度。以β-actin作為內(nèi)參對(duì)照校正并做相對(duì)量分析。

1.4.6 數(shù)據(jù)處理

所有實(shí)驗(yàn)組均進(jìn)行3次平行試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析處理，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以±s表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 DPPH法結(jié)果

物質(zhì)清除DPPH的能力反映其抗氧化活性的強(qiáng)弱。不同濃度的FUC的DPPH清除能力如圖1所示，不同濃度的FUC具有不同的DPPH清除能力，且呈現(xiàn)出濃度依賴性。FUC 12.5 μmol/L和Vc 12.5 μmol/L濃度下對(duì)DPPH的清除率分別為64.2%和33.0%，F(xiàn)UC和Vc的IC50分別為10.88 μmol/L和14.37 μmol/L。

圖1 DPPH法測(cè)定巖藻黃素自由基清除作用結(jié)果Fig.1 Determination of free radical scavenging effect of fucoxanthin by DPPH

2.2 MTT結(jié)果

不同濃度的ADR合用不同濃度FUC對(duì)H9C2細(xì)胞的抑制率如表1所示，ADR合用FUC后對(duì)H9C2細(xì)胞的抑制率明顯降低。當(dāng)ADR的濃度為2 μmol/L，F(xiàn)UC的濃度為0 μmol/L時(shí)，H9C2細(xì)胞的抑制率為52.75±4.98%。當(dāng)ADR的濃度為2 μmol/L，F(xiàn)UC的濃度為25 μmol/L時(shí)，H9C2細(xì)胞的抑制率為41.88±6.67%（P<0.05）。當(dāng)ADR的濃度為2 μmol/L，F(xiàn)UC的濃度為50 μmol/L時(shí)，H9C2細(xì)胞的抑制率為39.80±2.57%（P<0.05）。FUC與ADR合用組相比ADR單用組H9C2細(xì)胞的抑制率明顯降低，且FUC對(duì)ADR引起H9C2細(xì)胞毒性的保護(hù)作用呈濃度依賴性。

表1 MTT法測(cè)定巖藻黃素對(duì)H9C2細(xì)胞的保護(hù)作用結(jié)果Tab.1 Protective effect of fucoxanthin on H9C2 cells was determined by MTT method

2.3 AO/EB染色法結(jié)果

空白對(duì)照組、FUC單用組、ADR單用組及FUC與ADR合用組中H9C2細(xì)經(jīng)AO、EB雙重染色,熒光顯微鏡下觀察,結(jié)果如圖2所示?？瞻讓?duì)照組和FUC單用組無明顯凋亡細(xì)胞。ADR單用組出現(xiàn)大量H9C2早期凋亡細(xì)胞，表現(xiàn)為細(xì)胞核為AO染色呈黃綠色熒光,濃聚成新月形或顆粒狀,位于細(xì)胞的一側(cè)。另外，還有少量晚期凋亡細(xì)胞并有凋亡小體出現(xiàn)，表現(xiàn)為細(xì)胞核為EB染色呈桔紅色，濃聚和偏向。而FUC與ADR合用組中H9C2細(xì)胞凋亡數(shù)明顯低于ADR單用組。

圖2 AO/EB對(duì)H9C2細(xì)胞染色結(jié)果（200）A：空白對(duì)照組B：巖藻黃素50 μmol/L；C：阿霉素2 μmol/L；D：巖藻黃素50 μmol/L+阿霉素2 μmol/LFig.2 AO/EB staining results of H9C2 cells（200）A:Control B.FUC 50 μmol/L;C:ADR 2 μmol/L;D:ADR 2 μmol/L+FUC 50μmol/L

2.4 Carboxy-DCFDA法結(jié)果

生理情況下，活性氧自由基的產(chǎn)生和清除處于動(dòng)態(tài)平衡，任何原因致自由基產(chǎn)生過多和/或自由基清除不力均可致自由基凈水平的增加，進(jìn)而引發(fā)脂質(zhì)過氧化損傷，且脂質(zhì)過氧化的多種降解產(chǎn)物如MDA可致染色體斷裂、DNA交聯(lián)損傷等。從圖3中可以看出空白組與FUC單用組的H9C2細(xì)胞ROS水平較低，ADR單用組H9C2細(xì)胞ROS水平明顯高于正常組與FUC單用組，而FUC與ADR合用組H9C2細(xì)胞ROS水平較ADR單用組明顯下降(P<0.05)。

2.5 Western Blotting結(jié)果

空白對(duì)照組、FUC單用組、ADR單用組及FUC與ADR合用組中H9C2細(xì)胞內(nèi)Caspase-8、Cleaved Caspase-3、PARP的蛋白電泳條帶如圖4所示。圖4中，F(xiàn)UC單用組的Caspase-8、Cleaved Caspase-3、PARP的水平較空白對(duì)照組未有明顯變化；ADR單用組Caspase-8的水平明顯下降，Cleaved Caspase-3、PARP裂解片段（Cleaved PARP）的水平明顯升高；FUC與ADR合用組中Caspase-8的水平較ADR單用組明顯上調(diào)，Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP的水平明顯低于ADR單用組。從結(jié)果中可以看出，F(xiàn)UC對(duì)ADR引起的H9C2細(xì)胞內(nèi)的Caspase-8水平下降有明顯的上調(diào)作用，對(duì)ADR引起的Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP水平升高具有顯著的下調(diào)作用。

圖4 Caspase-8、PARP、Cleaved Caspase-3蛋白表達(dá)電泳圖Fig.4 Caspase-8,PARP,Caspase-3 Cleaved protein electrophoresis bands

3 結(jié)論與討論

本課題對(duì)巖藻黃素對(duì)阿霉素引起心肌細(xì)胞毒性的保護(hù)作用進(jìn)行了探究。首先，我們通過DPPH法測(cè)定了巖藻黃素對(duì)自由基的清除能力，結(jié)果顯示其IC50為10.88 μmol/L，對(duì)自由基的清除能力強(qiáng)于Vc，說明巖藻黃素具有較強(qiáng)的抗氧化能力。其次，我們通過MTT法檢測(cè)巖藻黃素對(duì)阿霉素引起H9C2細(xì)胞毒性的保護(hù)作用，結(jié)果顯示巖藻黃素與阿霉素合用后H9C2細(xì)胞的抑制率明顯下降，且?guī)r藻黃素對(duì)阿霉素引起H9C2細(xì)胞毒性的保護(hù)作用呈濃度依賴性。通過AO/EB染色法觀察H9C2細(xì)胞形態(tài)變化，結(jié)果顯示阿霉素合用巖藻黃素后H9C2細(xì)胞凋亡小體明顯減少，表明巖藻黃素可以顯著抑制由阿霉素引起的心肌細(xì)胞凋亡，對(duì)心肌細(xì)胞毒性具有較強(qiáng)的保護(hù)作用。

研究發(fā)現(xiàn)，阿霉素是通過降低心肌細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶活性，造成自由基清除功能障礙，從而引起心肌細(xì)胞氧化損傷的[12]?；钚匝醮豏OS是細(xì)胞代謝的副產(chǎn)物，少量的ROS有助于促進(jìn)細(xì)胞的增殖和分化，然而過量的ROS能對(duì)細(xì)胞內(nèi)的脂類、蛋白質(zhì)和DNA造成氧化損傷[13,14]。從DPPH的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，我們已經(jīng)得知巖藻黃素具有較強(qiáng)的抗氧化能力。進(jìn)一步，我們通過Carboxy-DCFDA法測(cè)定了H9C2細(xì)胞內(nèi)活性氧生成水平變化，得出阿霉素與巖藻黃素合用后能夠顯著抑制由阿霉素誘導(dǎo)的H9C2細(xì)胞內(nèi)活性氧水平升高，表明巖藻黃素有可能是通過減少H9C2細(xì)胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生，抑制心肌細(xì)胞的氧化應(yīng)激對(duì)心肌細(xì)胞毒性產(chǎn)生保護(hù)作用。

另有研究表明，細(xì)胞凋亡的死亡受體途徑依賴于ROS[15]。所以，我們進(jìn)一步推測(cè)巖藻黃素對(duì)H9C2心肌細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制有可能與阻斷死亡受體途徑有關(guān)。為驗(yàn)證我們的推測(cè)，本研究通過Western Blotting對(duì)H9C2細(xì)胞死亡受體途徑相關(guān)凋亡蛋白的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)。在死亡受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑中,Caspase-8是關(guān)鍵的啟動(dòng)型Caspase。從我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可以看出，巖藻黃素與阿霉素合用組中Caspase-8的水平明顯高于阿霉素單用組，說明巖藻黃素有可能通過抑制阿霉素誘導(dǎo)的Caspase-8活化，從死亡受體途徑上游抑制H9C2細(xì)胞的凋亡，對(duì)阿霉素引起的心肌細(xì)胞毒性產(chǎn)生保護(hù)作用。

在死亡受體途徑中后期，活化后的Caspase-8能夠引發(fā)Caspase蛋白酶解級(jí)聯(lián)反應(yīng)，并進(jìn)一步鏈?zhǔn)剿饧せ钇湎掠蔚耐疵?，如Caspase-6、Caspase-7等，最后激活其效應(yīng)物Caspase-3發(fā)生凋亡效應(yīng)。Caspase-3是細(xì)胞凋亡下游的關(guān)鍵執(zhí)行者?；罨腃aspase-3可以降解ADP-核糖多聚合成酶(PARP)，激活核內(nèi)核酸內(nèi)切酶，使核小體間DNA鏈水解斷裂，產(chǎn)生凋亡所特有的DNA節(jié)段化。在我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可以看出巖藻黃素與阿霉素合用組中Cleaved Caspase-3與Cleaved PARP的水平明顯低于阿霉素單用組，說明巖藻黃素有可能通過抑制由阿霉素引起死亡受體抑制下游關(guān)鍵Caspase的活化從而對(duì)H9C2細(xì)胞毒性進(jìn)行保護(hù)。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)得出巖藻黃素對(duì)阿霉素引起心肌細(xì)胞毒性具有保護(hù)作用，其保護(hù)機(jī)理有可能是通過其抗氧化活性抑制阿霉素引起的心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激，進(jìn)而抑制由阿霉素引起心肌細(xì)胞Caspase-8的活化，進(jìn)一步抑制由阿霉素引起的Caspase-3激活及對(duì)PARP的剪切來保護(hù)心肌細(xì)胞的。而巖藻黃素是否具有對(duì)阿霉素引起心臟毒性的保護(hù)作用還需要進(jìn)一步的體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探究。

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The Protective Effect of Fucoxanthin on Adriamycin-induced Cytotoxicity in Cardiac Muscle Cells

WANG Fei1,ZHAO Yu-qin1,DING Guo-fang2,et al
(1.School of Food Science and Pharmacy of Zhe Jiang Ocean University/Zhe Jiang Provincial Engineering Technology Research Center of Marine Biomedical Products,Zhoushan 316022;2.Zhejiang Marine Fisheries Research Institution,Zhoushan 316022,China)

This paper mainly explored the protective effect of fucoxanthin (FUC)on adriamycin-induced cytotoxicity in cardiac muscle cells.The DPPH method used to determinate the free radical scavenging effect of FUC and MTT assay for detecting the protective effect of FUC on adriamycin-induced cytotoxicity in H9C2 cells.AO/EB staining to observe the morphological changes of H9C2 cells,H9C2 cells in ac－tive oxygen generation level changes determined by the Carboxy-DCFDA method and Western blotting detected the expression of apoptosis protein in H9C2 cells.It showed that FUC has strong scavenging oxygen free radical ability in DPPH experiment,with IC50less than VC;FUC against ADR induced H9C2 cells toxicity effect has a good protection effect;FUC can reduce H9C2 cells apoptotic body increased which induced by ADR;FUC can inhibit the elevated levels of reactive oxygen species in the cells induced by ADR;FUC can inhibit the regulation of ADR induced cardiomyocyte apoptosis protein Caspase-8 up and Cleaved Caspase-3，Cleaved PARP down in H9C2 cells.FUC has the protective effect to cardiac cells toxicity induced by ADR,and its protective effect is possibly achieved by inhibiting ADR induced oxidative stress in cardiomyocytes by its antioxidant activity,And then inhibited the activation of Caspase-8 induced by ADR,and further inhibited the activation of Caspase-3 induced by ADR and the shear of PARP to protect cardiomyocytes.

adriamycin；cardiac cells toxicity；fucoxanthin

R966

A

1008－830X(2015)06－0582－06

2015-07-10

浙江省教育廳項(xiàng)目(Y201225031)；浙江海洋學(xué)院校級(jí)重大項(xiàng)目(X12ZD09)；浙江海洋學(xué)院科研啟動(dòng)經(jīng)費(fèi)資助項(xiàng)目（巖藻黃素對(duì)阿霉素藥物心臟毒性的保護(hù)作用及機(jī)理研究）

王飛（1991-），男，碩士研究生，研究方向：海洋藥物.E-mail:wishwangfei@163.com

丁國芳（1958-），教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：海洋藥物.E-mail:dinggf2007@163.com